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大口黑鲈CASPASE-1和CASPASE-3的原核表达、多克隆抗体制备及水体氨氮胁迫对其表达的影响
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作者 江藕 陈振威 +7 位作者 王庆超 王欢 唐伟俊 姜明旭 王怀池 简宇清 黄兴政 高坚 《渔业科学进展》 北大核心 2026年第1期184-198,共15页
半胱氨酸蛋白酶家族(CASPASEs)由N端结构域以及大、小催化亚基共同组成,可在特定的天冬氨酸残基上水解底物,从而在病原感染和环境胁迫等诱导的多种程序性细胞死亡中发挥功能。为深入探究高密度养殖水体中氨氮积累背景下,CASPASEs调控大... 半胱氨酸蛋白酶家族(CASPASEs)由N端结构域以及大、小催化亚基共同组成,可在特定的天冬氨酸残基上水解底物,从而在病原感染和环境胁迫等诱导的多种程序性细胞死亡中发挥功能。为深入探究高密度养殖水体中氨氮积累背景下,CASPASEs调控大口黑鲈(Micropterus salmoides)程序性细胞死亡的作用机制,本研究针对大口黑鲈CASPASE-1和CASPASE-3的序列进行分析,筛选合适的表达区段设计引物后PCR扩增获得目的片段,随后以pET-32a为载体构建原核重组质粒,将其转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,分别以1.0 mmol/L和0.6 mmol/L的IPTG于16℃过夜诱导表达重组蛋白;通过Ni-NTA Beads 6FF重力柱对获得的上清液蛋白进行纯化,并以SDS-PAGE分析获得Ms-CASPASE-1和Ms-CASPASE-3重组蛋白,从而确认重组蛋白表达和纯化成功。之后,将纯化的CASPASE-1和CASPASE-3重组蛋白分别与弗氏佐剂乳化后各免疫1只日本大耳兔和3只Balb/C小鼠制备多克隆抗体,通过酶联免疫法和蛋白印迹法检测效价和特异性。结果表明,免疫后获得的抗血清均能特异性识别大口黑鲈CASPASE-1和CASPASE-3重组蛋白和内源性蛋白,有单一且与预期分子量大小一致的目的条带;同时,CASPASE-1和CASPASE-3的兔源/鼠源抗血清效价均分别为1∶1.024×10^(7)/1∶1.024×10^(6)和1∶1.024×10^(7)/1∶1.024×10^(3)。随后,使用氨氮对大口黑鲈进行胁迫,通过组织病理学检测可发现其肾脏组织出现明显病变,表现为肾小体细胞增生、肾小囊腔扩大,远曲小管和近曲小管上皮细胞肿胀和细胞死亡。以本研究制备的CASPASE-1和CASPASE-3多克隆抗体进行蛋白质印迹实验,检测到肾脏中CASPASE-1和CASPASE-3蛋白的表达水平显著增加,这2个蛋白可能介导了后续的程序性细胞死亡,这与组织病理学的结果一致。本研究成功制备了可特异性识别大口黑鲈CASPASE-1和CASPASE-3的兔源和鼠源多克隆抗体,并探究了水体氨氮胁迫对其表达的影响,为深入研究氨氮胁迫下大口黑鲈的程序性细胞死亡机制提供了重要的基础。 展开更多
关键词 大口黑鲈 caspase-1 caspase-3 原核表达 多克隆抗体 氨氮胁迫
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肺不藏魄不寐模型大鼠相关脏器Bcl-2、Bax、Caspase-3表达水平研究
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作者 王慧 张星平 +3 位作者 闫德祺 陈旭 吴金鸿 贾宏林 《辽宁中医杂志》 北大核心 2026年第4期215-219,I0009,I0010,共7页
目的探讨肺不藏魄不寐大鼠相关脏器中Bcl-2、Bax、Caspase-3表达水平,为中医不寐五神分型提供基础实验依据。方法按照随机数字表法将16只SPF级雄性SD大鼠分为大平台对照组及肺不藏魄不寐组,每组8只。大平台对照组采用水环境大平台法,肺... 目的探讨肺不藏魄不寐大鼠相关脏器中Bcl-2、Bax、Caspase-3表达水平,为中医不寐五神分型提供基础实验依据。方法按照随机数字表法将16只SPF级雄性SD大鼠分为大平台对照组及肺不藏魄不寐组,每组8只。大平台对照组采用水环境大平台法,肺不藏魄不寐组采用水环境小平台法建立模型。监测两组大鼠一般情况并进行水迷宫实验。采用HE观察两组大鼠肺组织病理变化,采用IHC及WB检测两组大鼠脑组织及肺组织中Caspase-3、Bcl-2、Bax表达水平。结果与大平台对照组相比,一般情况显示:肺不藏魄不寐组大鼠造模后精神逐渐萎靡,毛发暗淡、时有脱毛,饮食逐渐变差;水迷宫结果示:肺不藏魄不寐组第二目标象限滞留时间、进入次数、目标象限运动距离及找到目标靶平台运动轨迹增加(P<0.05);HE染色:肺不藏魄不寐组肺组织显示肺泡结构排列紊乱,肺泡上皮细胞水肿,肺泡间隔增宽,见较多淋巴细胞和浆细胞浸润;IHC显示:肺不藏魄不寐组脑组织及肺组织Bcl-2表达减少(P<0.05),Bax和Caspase-3表达增加(P<0.05);WB结果示:肺不藏魄不寐组脑组织及肺组织Bcl-2表达显著减少(P<0.01),Bax及Caspase-3表达增加(P<0.05)。结论脑组织及肺组织凋亡水平的改变与肺不藏魄不寐的发生有关。 展开更多
关键词 中医不寐五神分型 肺不藏魄 BCL-2 BAX caspase-3
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基于Cyt-C/Caspase-3信号通路探讨生腺布液汤对干燥综合征小鼠颌下腺细胞凋亡的影响
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作者 刘龙霞 张寒 +5 位作者 王金娥 张正国 侯小双 罗亚萍 靳可心 张莹 《中成药》 北大核心 2026年第2期424-430,共7页
目的探讨生腺布液汤对干燥综合征(SS)小鼠颌下腺细胞凋亡的影响。方法40只非肥胖糖尿病(NOD)小鼠随机分为模型组(蒸馏水灌胃)、羟氯喹组(0.052 g/kg)及生腺布液汤低、中、高剂量组(4.98、9.88、19.76 g/kg),每组8只,另取8只BALB/c小鼠... 目的探讨生腺布液汤对干燥综合征(SS)小鼠颌下腺细胞凋亡的影响。方法40只非肥胖糖尿病(NOD)小鼠随机分为模型组(蒸馏水灌胃)、羟氯喹组(0.052 g/kg)及生腺布液汤低、中、高剂量组(4.98、9.88、19.76 g/kg),每组8只,另取8只BALB/c小鼠为正常组(蒸馏水灌胃),连续给药8周。记录小鼠一般状态及饮水量;HE染色观察颌下腺组织损伤情况;TUNEL染色检测颌下腺细胞凋亡情况;免疫组化法检测颌下腺组织细胞色素C(Cyt-C)、凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)蛋白表达;Western blot法检测颌下腺组织Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤-2蛋白(Bcl-2)、Cyt-C、Apaf-1、Caspase-3蛋白表达。结果与正常组比较,模型组小鼠饮水量增多(P<0.05),颌下腺淋巴细胞浸润加重,凋亡率及Bax、Cyt-C、Apaf-1、Caspase-3蛋白表达升高(P<0.05),Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05);与模型组比较,除生腺布液汤低剂量组颌下腺细胞凋亡率无明显变化外(P>0.05),羟氯喹组及生腺布液汤各剂量组小鼠饮水量减少(P<0.05),颌下腺病理损伤减轻,凋亡率及Bax、Cyt-C、Apaf-1、Caspase-3蛋白表达降低(P<0.05),Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05)。结论生腺布液汤可有效减轻SS小鼠颌下腺组织病理损伤,改善腺体分泌功能,其机制可能与调控Cyt-C/Caspase-3信号通路,抑制细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 生腺布液汤 干燥综合征 细胞凋亡 Cyt-C/caspase-3信号通路
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电针通过Bcl-2/Bax/caspase-3信号通路修复海马线粒体损伤改善创伤后应激障碍大鼠的焦虑症状
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作者 马丹丹 程洁 +2 位作者 张虹 刘广 宋凯 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第11期2375-2384,共10页
目的观察电针治疗对创伤后应激障碍(PTSD)大鼠海马线粒体超微结构及Bcl-2、Bax、caspase-3基因和蛋白表达的影响,探讨其治疗作用及机制。方法40只SPF级SD雄性大鼠随机分为空白对照组、模型组、假针刺组、帕罗西汀组、电针组,8只/组。采... 目的观察电针治疗对创伤后应激障碍(PTSD)大鼠海马线粒体超微结构及Bcl-2、Bax、caspase-3基因和蛋白表达的影响,探讨其治疗作用及机制。方法40只SPF级SD雄性大鼠随机分为空白对照组、模型组、假针刺组、帕罗西汀组、电针组,8只/组。采用连续单一应激联合足底电刺激建立PTSD模型,空白组和模型组不予以治疗,电针组针刺“百会”“神庭”及双侧“肝俞”“肾俞”,假针刺组大鼠浅刺腧穴旁开5 mm处,不连接电针仪,15 min/次,5次/周,持续3周。帕罗西汀组给予帕罗西汀混悬液(10 mg/kg)灌胃,5次/周,持续3周。治疗后通过旷场实验和高架十字迷宫实验评估行为学变化,HE染色和尼式染色观察海马病理及神经细胞变化,电镜观察线粒体超微结构,实时荧光定量PCR和免疫荧光检测Bcl-2、Bax、caspase-3的mRNA及蛋白表达。结果与空白组相比,模型组大鼠旷场活动总距离、高架十字迷宫开臂区域活动路程及时间明显减少(P<0.05);海马神经细胞数量减少,细胞皱缩、空泡增多、血管周围水肿,线粒体肿胀、膜破损、嵴减少;海马神经细胞数量明显减少(P<0.0001);Bcl-2表达下降,Bax、caspase-3表达上升(P<0.0001);与模型组相比,帕罗西汀组和电针组旷场活动总距离、高架十字迷宫开臂区域路程明显增加(P<0.01);尼氏染色神经细胞数量增加(P<0.05);海马神经元皱缩减少,细胞形态更规则、排列更整齐,且神经元结构染色较均匀;线粒体结构较为完整;Bcl-2表达上升,Bax、caspase-3表达下降(P<0.001);帕罗西汀组高架十字迷宫开臂区域活动时间增加,电针组仅呈上升趋势(P>0.05);假针刺组无明显改善。结论电针可能通过上调Bcl-2、下调Bax和caspase-3,改善海马线粒体损伤,发挥对PTSD大鼠的治疗作用。 展开更多
关键词 创伤后应激障碍 电针 线粒体 神经细胞 caspase-3 焦虑障碍
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血清焦亡凋控因子Caspase-3、Survivin、Bax、Bcl-2表达参与宫颈癌浸润转移的研究
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作者 卢东方 穆彦敏 陈晓琳 《医学研究与战创伤救治》 北大核心 2025年第10期1061-1066,共6页
目的探讨血清焦亡凋控因子Caspase-3、Survivin、Bax、Bcl-2表达参与宫颈癌浸润转移的机制。方法将2022年1月至2023年6月邢台市中心医院进行治疗的宫颈癌患者158例作为研究对象,临床分期:Ⅰ、Ⅱ期患者101例,Ⅲ期患者57例,组织学分级:高... 目的探讨血清焦亡凋控因子Caspase-3、Survivin、Bax、Bcl-2表达参与宫颈癌浸润转移的机制。方法将2022年1月至2023年6月邢台市中心医院进行治疗的宫颈癌患者158例作为研究对象,临床分期:Ⅰ、Ⅱ期患者101例,Ⅲ期患者57例,组织学分级:高分化组79例,中低分化组79例;浸润组66例,非浸润组92例;淋巴结转移组69例,非淋巴结转移组89例;HPV感染组74例,非HPV感染组84例。另选取同期进行健康体检的志愿者158例作为对照组,研究宫颈癌患者浸润、淋巴结转移的单因素影响指标,采用logistics多因素分析研究影响宫颈癌患者浸润、淋巴结转移的危险因素。研究宫颈癌患者浸润、淋巴结转移与Caspase-3、Survivin、Bax、Bcl-2的相关性。结果研究组患者Caspase-3(t=43.70,P<0.01)、Bax(t=34.90,P<0.01)低于对照组,Bcl-2(t=37.33,P<0.01)、Survivin(t=26.63,P<0.01)高于对照组,浸润组的Caspase-3(t=5.44,P<0.01)、Bax(t=27.74,P<0.01)低于非浸润组,Bcl-2(t=11.80,P<0.01)、Survivin(t=3.07,P=0.00)、临床分期(Ⅲ期)(χ^(2)=71.60,P<0.01)、分化程度(中低分化)(χ^(2)=134.89,P<0.01)、淋巴结转移(χ^(2)=90.05,P<0.01)、HPV感染(χ^(2)=60.64,P<0.01)高于非浸润组,宫颈癌淋巴结转移患者的Caspase-3(t=9.28,P<0.01)、Bax(t=15.95,P<0.01)低于非淋巴结转移组,Bcl-2(t=8.06,P<0.01)、Survivin(t=3.45,P=0.001)、临床分期(Ⅲ期)(χ^(2)=45.11,P<0.01)、分化程度(中低分化)(χ^(2)=11.35,P<0.01)、浸润(χ^(2)=90.05,P<0.01)、HPV感染(χ^(2)=53.17,P<0.01)高于非淋巴结转移组,通过多因素分析,Caspase-3[OR=0.301,95%CI(0.205~0.443)]、Survivin[OR=3.212,95%CI(2.635~3.916)]、Bax[OR=0.361,95%CI(0.290~0.450)]、Bcl-2[OR=3.022,95%CI(2.384~3.831)]、临床分期(Ⅲ期)[OR=2.743,95%CI(1.920~3.919)]、分化程度(中低分化)[OR=2.971,95%CI(2.047~4.312)]、淋巴结转移[OR=3.281,95%CI(2.365~4.551)]、HPV感染[OR=2.801,95%CI(2.171~3.614)]均是造成宫颈癌患者浸润的危险因素,Caspase-3[OR=0.317,95%CI(0.224~0.449)]、Survivin[OR=2.762,95%CI(2.108~3.620)]、Bax[OR=0.316,95%CI(0.232~0.430)]、Bcl-2[OR=3.222,95%CI(2.522~4.116)]、临床分期(Ⅲ期)[OR=3.146,95%CI(2.576~3.842)]、分化程度(中低分化)[OR=2.812,95%CI(2.240~3.530)]均是造成宫颈癌淋巴结转移的危险因素。结论在宫颈癌患者的疾病进展中,通过对血清焦亡凋控因子Caspase-3、Bax的下调作用,通过提升Survivin、Bcl-2表达水平,进一步加剧宫颈癌浸润以及淋巴结转移的风险。 展开更多
关键词 caspase-3 BAX SURVIVIN Bcl-2 宫颈癌 浸润 淋巴结转移
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胡黄连苷Ⅱ对大鼠脑缺血/再灌注损伤Caspase-3和PARP表达的影响 被引量:62
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作者 李琴 郭云良 +1 位作者 李震 徐新颖 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期342-345,共4页
目的探讨胡黄连苷Ⅱ(picrodideⅡ)对大鼠脑缺血/再灌注损伤脑组织半胱天冬酶-3(Caspase-3)和多聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶(PARP)表达的影响。方法线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞/再灌注模型;经尾静脉注射胡黄连苷Ⅱ(10mg·kg-1)和丹... 目的探讨胡黄连苷Ⅱ(picrodideⅡ)对大鼠脑缺血/再灌注损伤脑组织半胱天冬酶-3(Caspase-3)和多聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶(PARP)表达的影响。方法线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞/再灌注模型;经尾静脉注射胡黄连苷Ⅱ(10mg·kg-1)和丹参素钠(10mg·kg-1)干预治疗,Bed-erson法评价动物神经行为功能,氯化三苯基四氮唑(TTC)染色观察脑梗死体积,苏木精伊红(HE)染色观察脑组织结构,原位末端标记(TUNEL)法检测神经细胞凋亡,免疫组化和酶联免疫法检测Caspase-3和PARP表达。结果脑缺血2h/再灌注22h后,大鼠出现神经行为功能障碍,缺血侧半球出现梗死病灶,脑组织Caspase-3和PARP表达增强,细胞凋亡数较假手术组明显增多(P<0.05)。胡黄连苷组和丹参素钠组大鼠Bederson′s评分和脑梗死体积,Caspase-3和PARP表达以及细胞凋亡数量较阴性对照组均降低(P<0.05)。但胡黄连苷组与丹参素钠组比较,各项指标均差异无显著性(P>0.05)。结论胡黄连苷Ⅱ可能通过下调Caspase-3和PARP表达,抑制脑缺血/再灌注损伤诱导的细胞凋亡,从而改善动物的神经行为功能。 展开更多
关键词 胡黄连苷Ⅱ 脑缺血 再灌注损伤 caspase-3 PARP 细胞凋亡 大鼠
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芹菜素对大鼠缺血/再灌注心肌细胞凋亡及相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3表达的影响 被引量:77
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作者 史婷婷 白建平 +3 位作者 梁月琴 张慧芝 于肯明 李超鹏 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期666-671,共6页
目的探讨黄酮类化合物芹菜素对大鼠实验性心肌缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)时心肌细胞凋亡与Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达的影响,并分析心肌组织病理学损伤程度。方法采用结扎左冠状动脉前降支,心肌缺血45 min,再灌注2 h制... 目的探讨黄酮类化合物芹菜素对大鼠实验性心肌缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)时心肌细胞凋亡与Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达的影响,并分析心肌组织病理学损伤程度。方法采用结扎左冠状动脉前降支,心肌缺血45 min,再灌注2 h制作缺血/再灌注模型。将大鼠随机分为8组,即正常组(normal group,Normal)、假手术组(sham oper-ation group,Sham)、生理盐水缺血/再灌注组(saline ischemi-a-reperfusion group,NS)、溶剂对照组(solvent control group,Sol)、美托洛尔对照组(metoprolol control group,Meto)、芹菜素低、中、高剂量(1、2、4 mg.kg-1)用药组(apigenin low,medium and high dose treatment group,Api1,Api2,Api4)。再灌注2 h后迅速取出心脏,TUNEL法原位标记凋亡的心肌细胞;免疫组化法测Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达;做病理组织切片检查心肌损伤情况。结果芹菜素各剂量组心肌细胞凋亡率明显低于NS组(P<0.05),Api1,Api2,Api4能剂量依赖性地降低大鼠缺血/再灌注心肌细胞凋亡率;芹菜素各剂量组剂量依赖性地提高大鼠心肌缺血/再灌注的Bcl-2蛋白表达量(P<0.05)、降低大鼠心肌缺血/再灌注的Bax、Caspase-3蛋白表达量(P<0.05);芹菜素各剂量组与NS组比较,心肌组织损伤的病理学变化明显减轻(P<0.05)。结论芹菜素对缺血/再灌注心肌的保护效应可能与其抑制缺血/再灌注心肌细胞凋亡有关;芹菜素抗心肌凋亡作用的机制可能与其上调Bcl-2蛋白表达和下调Bax、Caspase-3蛋白表达有关;芹菜素能明显减轻心肌组织损伤。 展开更多
关键词 心肌缺血/再灌注损伤 心肌细胞凋亡 芹菜素 BCL-2蛋白 BAX蛋白 caspase-3蛋白 TUNEL
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郁金水煎剂对四氯化碳致急性肝损伤小鼠肝细胞p53和caspase-3表达的影响及其对肝损伤的保护作用 被引量:26
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作者 张婉娴 朱彤彤 +3 位作者 鲁育铭 赵丽晶 刘鹏 赵丽娟 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期82-86,I0003,共6页
目的:探讨单味郁金水煎剂对四氯化碳(CCl4)致急性肝损伤小鼠肝细胞凋亡基因p53和caspase-3蛋白表达的影响,阐明郁金对肝损伤保护作用的机制。方法:ICR小鼠60只,随机分为空白对照组(等体积生理盐水)、模型组(等体积生理盐水)、郁金低剂量... 目的:探讨单味郁金水煎剂对四氯化碳(CCl4)致急性肝损伤小鼠肝细胞凋亡基因p53和caspase-3蛋白表达的影响,阐明郁金对肝损伤保护作用的机制。方法:ICR小鼠60只,随机分为空白对照组(等体积生理盐水)、模型组(等体积生理盐水)、郁金低剂量组(2.5g·kg-1)、郁金中剂量组(5.0g·kg-1)、郁金高剂量组(10.0g·kg-1)和阳性药组(甘利欣22.5mg·kg-1);连续给药7d后,除空白对照组外各组小鼠均通过CCl4复制小鼠急性肝损伤模型。计算肝指数,测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性,HE染色观察肝组织形态学变化;RT-PCR法检测肝细胞p53基因转录情况;免疫组织化学法检测肝细胞caspase-3蛋白表达。结果:与空白对照组比较,模型组小鼠肝指数明显增加(P<0.05);与模型组比较,各给药组小鼠肝指数明显降低(P<0.05)。与空白对照组比较,模型组小鼠血清ALT增高(P<0.01);与模型组比较,阳性药组及郁金高、中剂量组小鼠血清ALT明显降低(P<0.05)。肝脏形态学变化,肉眼观察,空白对照组小鼠肝脏呈现粉红色,质软而富有弹性,模型组小鼠肝脏明显肿大、呈微黄色,表面可见散在点状及片状黄褐色斑点,质脆,各给药组小鼠肝脏大小、颜色及质地均界于空白对照组与模型组之间,且表面无明显黄褐色斑点;镜下观察,空白对照组小鼠肝脏结构正常,模型组小鼠细胞呈明显局灶性气球样变、水样变性和死亡,而阳性药组和郁金中、高剂量组小鼠与模型组比较肝组织上述病灶数量减少。与空白对照组比较,模型组小鼠肝细胞p53基因转录明显增强(P<0.05);与模型组比较,郁金高剂量组小鼠肝细胞p53基因转录显著减弱(P<0.05)。与模型组比较,郁金给药组小鼠肝细胞caspase-3蛋白表达减弱。结论:郁金对CCl4致小鼠急性肝损伤有一定的拮抗作用,其机制之一可能与下调凋亡基因p53和caspase-3蛋白的表达、阻碍肝细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 郁金 急性肝损伤 四氯化碳 p53基因 caspase-3
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survivin和caspase-3在非小细胞肺癌中的表达及其与肿瘤细胞凋亡的关系 被引量:22
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作者 王靖华 陈龙邦 +4 位作者 黄文斌 李桂圆 孟奎 管晓翔 王晨 《中国肺癌杂志》 CAS 2005年第5期435-439,共5页
背景与目的survivin是新近发现的凋亡抑制因子,在肿瘤的发生中起重要作用。survivin可直接抑制caspase3和caspase7的活性。本研究旨在探讨survivin和caspase3在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达情况及其与肿瘤细胞凋亡的关系。方法采用免疫... 背景与目的survivin是新近发现的凋亡抑制因子,在肿瘤的发生中起重要作用。survivin可直接抑制caspase3和caspase7的活性。本研究旨在探讨survivin和caspase3在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达情况及其与肿瘤细胞凋亡的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测88例NSCLC患者手术标本和29例正常肺组织标本中survivin和caspase3的表达,分析其与NSCLC临床病理参数之间的关系,同时用原位末端标记法(TUNEL)标记肺癌组织中的凋亡细胞。结果88例NSCLC患者标本中survivin的阳性表达率为61.4%(54/88),明显高于正常肺组织(13.8%,4/29)(P<0.01);survivin在NSCLC中的表达与肿瘤的组织学分型、病理分级和淋巴结转移均无明显相关性(P>0.05),但与TNM分期有相关性(P<0.05)。caspase3在正常肺组织和NSCLC中阳性表达率分别为89.7%(26/29)和73.9%(65/88),但二者差异无显著性(P>0.05);caspase3在NSCLC中的阳性表达率随肿瘤的病理分级增高而降低,差异有显著性(P<0.05)。survivin蛋白阳性表达的肺癌组织中平均细胞凋亡指数(1.63±0.58)明显低于阴性表达组(3.29±0.76)(P<0.05),caspase3阳性组平均细胞凋亡指数(2.42±0.59)明显高于阴性组(1.28±0.65)(P<0.05);survivin和caspase3呈负相关(P<0.05)。结论凋亡抑制蛋白survivin在NSCLC组织中高表达,caspase3与survivin的表达呈负相关,survivin可能通过抑制caspase3的激活来发挥其抑制细胞凋亡的作用。 展开更多
关键词 肺肿瘤 SURVIVIN caspase-3 细胞凋亡 免疫组织化学
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PCNA和Caspase-3在肺癌组织中的表达及意义 被引量:16
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作者 赵阳 李晓军 +3 位作者 隋昕 汤小江 秦宏 任宏 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期154-156,共3页
目的:探讨增殖细胞核抗原(PCNA)和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)在肺癌中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组化SP法对80例肺癌病例和相对应的80例正常肺组织进行PCNA蛋白和Caspase-3蛋白半定量分析。结果:PCNA蛋白在肺... 目的:探讨增殖细胞核抗原(PCNA)和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)在肺癌中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组化SP法对80例肺癌病例和相对应的80例正常肺组织进行PCNA蛋白和Caspase-3蛋白半定量分析。结果:PCNA蛋白在肺癌组织中阳性表达率为65.0%,Caspase-3在肺癌组织中阳性表达率为32.5%,与相应正常肺组织中的阳性表达率有显著差异(P<0.05)。PCNA蛋白的表达与淋巴结转移、分期和分化程度明显相关(P<0.05),Caspase-3蛋白表达与肺癌的组织病理学类型、淋巴结转移以及分化程度明显相关(P<0.05),与病理分期却未表现出相关性(P>0.05),PCNA蛋白与Caspase-3蛋白的表达呈负相关,这其中PCNA(+)Caspase-3(-)的肺癌群体低/未分化危险性是非PCNA(+)Caspase-3(-)的27倍(OR=27.0,P<0.05)。结论:肺癌组织PCNA蛋白表达增强和Caspase-3蛋白表达减弱,两者的表达与肺癌的病理类型,淋巴结转移,分期和分化程度具有一定关系,关于这两种蛋白的研究对临床工作有一定指导意义。 展开更多
关键词 肺癌 PCNA caspase-3 免疫组化染色 相关性
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舒肝解郁胶囊对抑郁模型大鼠海马神经元凋亡及脑组织caspase-3蛋白表达的影响 被引量:32
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作者 傅锦华 刘勇 +1 位作者 王清勇 赵靖平 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1198-1204,共7页
目的:研究舒肝解郁胶囊对抑郁模型大鼠海马神经元凋亡及脑组织caspase-3蛋白表达的影响,探讨其治疗抑郁症的作用机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、舒肝解郁组和氟西汀组四组;采用慢性轻度不可预见性应激(CUMS)结合... 目的:研究舒肝解郁胶囊对抑郁模型大鼠海马神经元凋亡及脑组织caspase-3蛋白表达的影响,探讨其治疗抑郁症的作用机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、舒肝解郁组和氟西汀组四组;采用慢性轻度不可预见性应激(CUMS)结合孤养建立抑郁大鼠模型,并用旷场、糖水消耗和强迫游泳试验评价大鼠的行为学改变,观察海马CA3区神经元的形态结构及凋亡,应用蛋白印记分析检测脑组织caspase-3蛋白的表达。结果:与模型组比较,舒肝解郁组大鼠自发活动显著增加;糖水消耗量、糖水偏爱率显著升高;强迫游泳不动时间显著缩短;大鼠海马CA3区细胞结构破坏显著改善,凋亡细胞数及脑组织caspase-3蛋白表达显著减少(P<0.05或0.01);氟西汀组与舒肝解郁组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:舒肝解郁胶囊能显著改善抑郁模型大鼠的抑郁症状,促进抑郁大鼠海马CA3区神经细胞损伤的修复和/或新生;减少大鼠脑组织caspase-3蛋白表达,阻止脑神经细胞的凋亡;疗效与氟西汀相当。 展开更多
关键词 舒肝解郁胶囊 抑郁 caspase-3 细胞凋亡 蛋白印迹
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丹参酮ⅡA对鼠脑缺血再灌注损伤Bcl-2和caspase-3表达的影响 被引量:23
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作者 李浩 刘开祥 +3 位作者 俸军林 唐永刚 蒋静子 林小慧 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期691-693,I0002,共4页
目的:探讨丹参酮ⅡA(Tan ⅡA)对缺血再灌注损伤大鼠Bcl-2及caspase-3蛋白表达的影响。方法:将大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、Tan ⅡA低剂量治疗组和Tan ⅡA高剂量治疗组,线栓法建立局灶性脑缺血再灌注模型。Tan ⅡA高、低剂量治... 目的:探讨丹参酮ⅡA(Tan ⅡA)对缺血再灌注损伤大鼠Bcl-2及caspase-3蛋白表达的影响。方法:将大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、Tan ⅡA低剂量治疗组和Tan ⅡA高剂量治疗组,线栓法建立局灶性脑缺血再灌注模型。Tan ⅡA高、低剂量治疗组于术前连续灌胃给予高、低剂量Tan ⅡA3d,每天1次。用免疫组化法观察缺血90min再灌注24h大鼠额顶部皮质Bcl-2和caspase-3蛋白表达,并进行2,3,5-三苯基氯化四氮唑染色和HE染色观察脑梗死体积及病理形态学变化。结果:脑缺血再灌注24h,缺血再灌注组Bcl-2和caspase-3表达增加,与假手术组比较,差异具有显著性意义(P<0.05);与缺血再灌注组比较,Tan ⅡA高、低剂量治疗组均显著增加Bcl-2表达,减少caspase-3表达,高、低剂量组之间差异亦具有显著性意义(P<0.05)。Tan ⅡA高、低剂量治疗组脑梗死体积较缺血再灌注组减小,高、低剂量组之间差异具有显著性意义(P<0.05)。Tan ⅡA高、低剂量治疗组脑组织缺血损伤病理学改变明显轻于缺血再灌注组,TanⅡA高剂量治疗组缺血改变亦轻于低剂量治疗组。结论:Tan ⅡA对缺血再灌注脑损伤具有保护作用,其机制可能与增加Bcl-2蛋白表达同时降低caspase-3蛋白表达有关。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注 BCL-2 caspase-3 丹参酮
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槲皮素对肺腺癌细胞株A549细胞中凋亡相关因子caspase-3表达的影响 被引量:23
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作者 闻春生 应斌武 +2 位作者 张永刚 张杰 范红 《中国肺癌杂志》 CAS 2008年第2期194-197,共4页
背景和目的探讨槲皮素是否有诱导肺肿瘤细胞的凋亡作用,以及对肺腺癌细胞系A549细胞中重要凋亡相关因子caspase-3表达的影响。方法采用RT-PCR与Western Blot技术检测在槲皮素不同时间、不同浓度作用A549细胞后的caspase-3mRNA和蛋白表... 背景和目的探讨槲皮素是否有诱导肺肿瘤细胞的凋亡作用,以及对肺腺癌细胞系A549细胞中重要凋亡相关因子caspase-3表达的影响。方法采用RT-PCR与Western Blot技术检测在槲皮素不同时间、不同浓度作用A549细胞后的caspase-3mRNA和蛋白表达的变化。结果槲皮素作用A549细胞后,A549细胞的caspase-3mRNA和蛋白表达水平逐渐增高,在12小时时达到了高峰,呈现出一定的时间和浓度依赖性。结论槲皮素诱导A549细胞调亡可能通过诱导caspase-3的表达而起作用。 展开更多
关键词 槲皮素 肺肿瘤 caspase-3 凋亡
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桃红四物汤对大鼠脑缺血再灌注损伤后大脑皮质神经元Caspase-3与p53表达的影响 被引量:18
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作者 范瑞娟 罗亚非 +3 位作者 陈永顺 何光志 唐中生 陆莹 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期739-745,共7页
目的:探讨桃红四物汤对脑缺血再灌注损伤大鼠大脑皮质神经元Caspase-3与p53表达的影响。方法:120只雄性SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、桃红四物汤低、中、高剂量组(0.7 g/kg、1.4 g/kg、2.1g/kg)共6组。采用改良后的Longa线... 目的:探讨桃红四物汤对脑缺血再灌注损伤大鼠大脑皮质神经元Caspase-3与p53表达的影响。方法:120只雄性SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、桃红四物汤低、中、高剂量组(0.7 g/kg、1.4 g/kg、2.1g/kg)共6组。采用改良后的Longa线栓法制备大脑中动脉阻塞再灌注模型,缺血90分钟再灌注24小时后,桃红四物汤各剂量组分别以桃红四物汤低、中、高剂量灌胃绐药量为1 ml/100 g,正常组和假手术组以等容量生理盐水灌胃。至第8天时将各组大鼠处死并取脑。通过2,3,5-氯化三苯四氮唑(TTC)染色法观察各组大鼠脑梗死体积及梗死体积率;TUNEL染色法显示大脑皮质凋亡神经元的形态和数量,免疫组织化学染色法观察半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)与p53的表达情况。结果:与模型组比较,桃红四物汤各剂量组均能降低大鼠脑梗死体积与梗死体积率(P<0.01);减少大脑皮质顶叶区凋亡神经元(P<0.01),降低大脑皮质顶叶区神经元Caspase-3与p53的表达(P<0.01);并且其治疗效果随桃红四物汤给药剂量的增加而增强(P<0.01)。结论:桃红四物汤能够抑制脑缺血再灌注损伤后大鼠大脑皮质神经元Caspase-3与p53的表达。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注 桃红四物汤 大脑皮质 caspase-3 p53 大鼠
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Fas,Fas-L和Caspase-3在增生性瘢痕中表达特征及其对瘢痕形成的影响 被引量:20
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作者 陈伟 付小兵 +3 位作者 孙同柱 赵志力 王振辉 盛志勇 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第7期580-581,I001,共3页
探讨Fas、Fas L和Caspase 3在增生性瘢痕和正常皮肤组织内的表达特征及其对瘢痕形成的影响。用免疫组化方法和常规病理技术检测这三种蛋白在 8例增生性瘢痕和 8例正常皮肤中的表达变化规律。结果发现 ,在正常皮肤中 ,Fas和Fas L主要分... 探讨Fas、Fas L和Caspase 3在增生性瘢痕和正常皮肤组织内的表达特征及其对瘢痕形成的影响。用免疫组化方法和常规病理技术检测这三种蛋白在 8例增生性瘢痕和 8例正常皮肤中的表达变化规律。结果发现 ,在正常皮肤中 ,Fas和Fas L主要分布于表皮细胞、部分成纤维细胞的胞浆和胞膜内 ,Caspase 3则定位于这些细胞的胞浆中。Fas和Fas L在增生性瘢痕的表皮基底层细胞内有少量分布 ,阳性细胞率显著降低(P <0 0 5 ) ;Caspase 3的阳性细胞率也明显降低 (P <0 0 5 ) ,在表皮角质形成细胞的胞浆内有轻微表达。提示增生性瘢痕的发生可能与Fas、Fas L和Caspase 3蛋白表达降低、由这三种蛋白介导的细胞凋亡受阻相关。 展开更多
关键词 增生性瘢痕 瘢痕 免疫组织化学 CD95抗原 FAS基因 Fas-L基因 caspase-3基因 发病机制 基因表达
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Caspase-3抑制剂对大鼠短暂局灶性脑缺血模型的神经保护作用 被引量:1
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作者 王宇卉 夏春林 +1 位作者 强华 邵福源 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期334-336,共3页
目的:研究caspase 3抑制剂ⅢAc DEVD CMK干预治疗对大鼠短暂局灶性脑缺血模型的神经保护作用。方法:大鼠或不进行预处理(MCAO组),或分别经左侧侧脑室注射Ac DEVD CMK(DEVD组)、溶剂二甲亚砜(DMSO组)后,用线拴法制作大鼠左侧大脑中动脉(M... 目的:研究caspase 3抑制剂ⅢAc DEVD CMK干预治疗对大鼠短暂局灶性脑缺血模型的神经保护作用。方法:大鼠或不进行预处理(MCAO组),或分别经左侧侧脑室注射Ac DEVD CMK(DEVD组)、溶剂二甲亚砜(DMSO组)后,用线拴法制作大鼠左侧大脑中动脉(MCA)缺血/再灌注模型;通过Klenow标记及TUNEL染色技术检测鼠脑中单、双链DNA断裂;分别用原位杂交及免疫组化技术检测鼠脑中caspase 3和calpain mRNA及活性形式蛋白质的表达。结果:与MCAO组相比,DMSO组鼠脑缺血侧DNA单、双链断裂,caspase 3和calpain mRNA及活性蛋白质的表达均无明显差异;DEVD组缺血侧脑中Klenow及TUNEL阳性细胞数均明显减少,caspase 3及calpain的表达也明显减少。结论:Caspase 3 抑制剂干预治疗短暂局灶性脑缺血具有潜在的临床应用价值。 展开更多
关键词 脑缺血发作 短暂性 caspase-3 CALPAIN caspase-3抑制剂
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轻中度亚低温对大鼠心肺复苏后脑细胞caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表达的影响 被引量:14
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作者 何青春 刘婷 +2 位作者 周利平 王爱民 李湘民 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1489-1493,共5页
目的研究不同程度亚低温对大鼠心肺复苏(CPR)后脑组织凋亡的影响。方法利用窒息法制作心肺复苏模型,SD大鼠15只,随机分为对照组(正常体温)、34℃低温组、32℃低温组,每组各5只。对照组在CPR后置于室温25℃下常规治疗;34℃低温组(34+/-0.... 目的研究不同程度亚低温对大鼠心肺复苏(CPR)后脑组织凋亡的影响。方法利用窒息法制作心肺复苏模型,SD大鼠15只,随机分为对照组(正常体温)、34℃低温组、32℃低温组,每组各5只。对照组在CPR后置于室温25℃下常规治疗;34℃低温组(34+/-0.2℃)和32℃低温组(32+/-0.2℃)在CPR 0.5 h后分别给予亚低温治疗。各组大鼠均于CPR后12 h取脑组织,免疫组化法测定大脑皮层caspase-3蛋白表达,Western blotting测定Bcl-2、Bax表达,同时观察各组脑组织病理变化。结果与常温组相比,低温组神经元caspase-3表达均明显减弱(P<0.05),其中32℃低温组caspase-3表达减弱更加明显(P<0.05);低温组Bcl-2表达明显增强(P<0.05),32℃低温组的Bcl-2蛋白表达比34℃低温组表达更强;3组大鼠神经元凋亡蛋白bax的表达无明显差异。结论亚低温可能通过降低caspase-3蛋白的表达、增强Bcl-2的表达,从而抑制脑细胞凋亡减轻脑损伤,32℃亚低温治疗比34℃更能起到脑保护的作用。 展开更多
关键词 亚低温 心肺复苏 caspase-3 Bcl-2 BAX 凋亡
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用荧光定量法检测Caspase-3的活性 被引量:14
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作者 张勇 沈佰华 +3 位作者 余奇文 马安伦 李宁丽 张冬青 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期188-190,共3页
目的通过检测Caspase3的活性反映Jurkat细胞凋亡。方法用放线菌素D诱导Jurkat细胞8h,裂解细胞,荧光分光光度计测定Caspase3的活性。同时,用Hoechst法进行检测,并进行平行的方法学比较。结果Ju-rkat细胞经不同浓度50μmol/L和100μmo... 目的通过检测Caspase3的活性反映Jurkat细胞凋亡。方法用放线菌素D诱导Jurkat细胞8h,裂解细胞,荧光分光光度计测定Caspase3的活性。同时,用Hoechst法进行检测,并进行平行的方法学比较。结果Ju-rkat细胞经不同浓度50μmol/L和100μmol/L的放线菌素D诱导后,Caspase3的活性显著增高,倍增值分别为10.091和10.818,相应的Caspase3活性单位为0.641和0.659;而未经诱导的Jurkat细胞仅为0.061。加入Cas-pase3抑制剂后,倍增值分别为0.101和0.119,Caspase3的活性单位为0.006和0.007。而用Hoechst法染色时,可见Jurkat细胞仅出现早期凋亡的形态学改变。结论荧光定量法是一种良好的定量检测Caspase3的方法,可用于检测早期的细胞凋亡。 展开更多
关键词 caspase-3 荧光定量法 细胞凋亡 检测 JURKAT细胞
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电针对骶髓损伤后神经源性膀胱大鼠尿流动力学及膀胱组织中Caspase-3表达的影响 被引量:29
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作者 艾坤 张泓 +3 位作者 张雨辰 鲍秋影 李景兴 匡静之 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2013年第12期1104-1107,共4页
目的观察电针次髎、中极、三阴交穴对骶髓损伤后神经源性膀胱(逼尿肌无反射型)大鼠尿流动力学以及膀胱组织中caspase-3表达的影响。方法雌性Sprague-Dawley大鼠40只,随机抽取10只为空白组,其余造模后随机分为模型组、穴位组和对照点组,... 目的观察电针次髎、中极、三阴交穴对骶髓损伤后神经源性膀胱(逼尿肌无反射型)大鼠尿流动力学以及膀胱组织中caspase-3表达的影响。方法雌性Sprague-Dawley大鼠40只,随机抽取10只为空白组,其余造模后随机分为模型组、穴位组和对照点组,每组10只。术后第15天起按组分别施以7次治疗。测量术后第14天及干预治疗7次后1 d的大鼠尿流动力学参数;治疗结束后取膀胱组织采用ELISA法检测在膀胱组织中caspase-3的表达。结果电针治疗后大鼠最大膀胱容量显著降低(P<0.001),膀胱顺应性显著降低(P<0.001),逼尿肌组织中caspase-3表达明显降低(P<0.01),充盈性膀胱内压升高(P<0.05),且穴位组疗效优于对照点组(P<0.05)。结论电针次髎、中极、三阴交穴可改善骶髓损伤后神经源性膀胱大鼠尿流动力学参数,降低膀胱组织中caspase-3的表达。 展开更多
关键词 脊髓损伤 逼尿肌无反射 电针 尿流动力学 caspase-3 大鼠
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葫芦茶苷对肝损伤大鼠肝组织Caspase-3与Caspase-8活性的影响及保肝作用研究 被引量:16
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作者 唐爱存 陈兆霓 +2 位作者 卢秋玉 梁霜 王明刚 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2017年第3期689-692,共4页
目的:研究葫芦茶苷对四氯化碳(CCl4)诱导急性肝损伤大鼠的保护作用及对肝组织Caspase-3与Caspase-8活性的影响。方法:将健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组,肝损伤模型组,阳性对照组(水飞蓟宾胶囊),葫芦茶苷低中高剂量组(3、6、12 mg... 目的:研究葫芦茶苷对四氯化碳(CCl4)诱导急性肝损伤大鼠的保护作用及对肝组织Caspase-3与Caspase-8活性的影响。方法:将健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组,肝损伤模型组,阳性对照组(水飞蓟宾胶囊),葫芦茶苷低中高剂量组(3、6、12 mg·kg-1),每日灌胃给药1次,连续给药14 d,正常组与模型组每天灌服等体积的生理盐水,末次灌胃给药1 h后,除空白对照组外,皮下注射CCl4原液建立急性肝损伤大鼠模型,检测大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)和γ-氨基酰转肽酶(γ-GT)、胆碱酯酶(CHE)、总胆汁酸(TBA)和总胆红素(TBIL);检测肝组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性以及还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)和肝微粒体一氧化氮(NO)的含量,并检测肝组织Caspase-3,Caspase-8活性。结果:与模型组比较,葫芦茶苷能降低血清ALT,AST,LDH,γ-GT活性及TBA和TBIL含量(P<0.05或P<0.01),升高血清CHE含量;降低肝微粒体NO含量和MDA含量,增加肝组织SOD,GSH-PX活性和GSH含量,并降低肝组织Caspase-3,Caspase-8的活性(P<0.05或P<0.01)。结论:葫芦茶苷对四氯化碳致急性肝损伤大鼠具有明显的保护作用,其机制可能与其抗氧自由基、抑制脂质过氧化作用以及下调Caspase-3和Caspase-8的活性有关。 展开更多
关键词 葫芦茶苷 肝损伤 caspase-3 caspase-8 保肝作用
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