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融合表达RHDV1 P2亚域和兔源C5a的重组早熟大型艾美耳球虫的构建与鉴定
1
作者 陈文轩 索静霞 +6 位作者 孔嘉华 葛晓敏 裘鑫珠 汤新明 余芳 索勋 刘贤勇 《中国兽医杂志》 北大核心 2025年第10期9-17,共9页
补体成分C5a作为免疫调节分子,近年已被证实可作为分子佐剂应用于新型疫苗开发。为了探索C5a作为球虫活载体疫苗分子佐剂的可行性,本试验通过同源序列比对和逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增兔补体C5a基因,并通过生物信息学方法对兔C5... 补体成分C5a作为免疫调节分子,近年已被证实可作为分子佐剂应用于新型疫苗开发。为了探索C5a作为球虫活载体疫苗分子佐剂的可行性,本试验通过同源序列比对和逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增兔补体C5a基因,并通过生物信息学方法对兔C5a序列和C5a蛋白质二、三级结构进行预测和分析;构建包含兔出血症病毒1型(RHDV1)的VP60蛋白P2亚域基因和C5a基因的质粒,通过子孢子核转染和在家兔体内连续传代获得转基因早熟大型艾美耳球虫,采用聚合酶链式反应(PCR)、蛋白质免疫印迹(Western blot)和间接免疫荧光试验(IFA)对该转基因虫株进行鉴定。结果显示,兔C5a基因大小为222 bp,与人、猪和牛的C5a核苷酸序列同源性为71.2%~77.0%,与小鼠和大鼠的C5a核苷酸系列同源性为68.5%。预测结果显示,C5a是主要由4个α螺旋构成的单体蛋白,含有过敏毒素同源结构域。本试验获得了第1代发荧光的卵囊并连续传代至第15代,其中第9代转基因虫株的发光率最高(39.5%,满足鉴定阈值),对其鉴定结果显示,P2-C5a基因已成功插入并在虫株中表达,表达的P2-C5a融合蛋白主要定位于子孢子胞浆中。结果表明,转基因早熟大型艾美耳球虫初步构建成功,为后续进行C5a在转基因早熟大型艾美耳球虫中的佐剂效应研究提供了材料。 展开更多
关键词 早熟大型艾美耳球虫 兔出血症病毒1型(RHDV1) P2亚域 补体c5a
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C5a受体拮抗剂对小鼠脊髓损伤后后肢功能的影响及作用机制 被引量：5
2
作者 李兰 赵天智 +6 位作者 夏永智 储卫华 邹明明 朱海涛 薛兴森 冯华 林江凯 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期763-766,共4页
目的观察补体裂解因子C5a受体拮抗剂(C5a receptor antagonist,C5aRA)对小鼠脊髓损伤后炎症反应及功能变化的干预效果,探讨C5a在脊髓损伤后的作用机制。方法利用成年雌性C57BL/6J小鼠建立脊髓夹伤模型,在术前45 min经腹腔注入C5aRA AcF-... 目的观察补体裂解因子C5a受体拮抗剂(C5a receptor antagonist,C5aRA)对小鼠脊髓损伤后炎症反应及功能变化的干预效果,探讨C5a在脊髓损伤后的作用机制。方法利用成年雌性C57BL/6J小鼠建立脊髓夹伤模型,在术前45 min经腹腔注入C5aRA AcF-[OP(D-Cha)WR](PMX53),同时建立甲基强的松龙(methylprednisolone,MP)注射组、生理盐水注射组和假手术组对照。应用ELISA、RT-PCR观察炎症因子TNF-α及IL-1β表达的变化,通过流式细胞方法检测小胶质细胞百分比的变化,并进行小鼠后肢的行为学评分(mouse scale for locomotion,BMS)。结果生理盐水组小鼠脊髓于伤后1 h即出现炎症因子的明显升高,TNF-α在1 h达峰值,IL-1β在12 h达峰值,后下降,到72 h两者均已接近基线值;小胶质细胞百分比在SCI后1 d即出现升高,3 d较明显,7 d达峰,14 d已下降,但仍高于正常水平。与生理盐水组相较,应用C5aRA特异性抑制C5a后,损伤早期的炎症因子表达水平及炎症细胞增殖均明显被抑制,BMS评分显著优于生理盐水组(P<0.05),但其对炎症反应的抑制作用略弱于MP组(P<0.05)。结论应用C5aRA特异性拮抗C5a可以抑制脊髓损伤后早期炎症因子TNF-α、IL-1β表达及炎症细胞小胶质细胞活化增殖,改善后肢的行为学评分,提示C5a通过增强脊髓损伤后早期炎症反应参与了脊髓损伤后的继发性损伤。 展开更多
关键词 脊髓损伤 c5a c5a受体拮抗剂 肿瘤坏死因子Α 白介素-1Β 小胶质细胞 炎症
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人C5a过敏毒素拮抗剂的分子设计及其活性检测 被引量：3
3
作者 吕凤林 朱锡华 +1 位作者 郑萍 胡承香 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期125-129,共5页
目的 :从蛋白质结构与功能的关系出发 ,探讨C5aR与其配体的C5a的结合位。方法 :按分子设计理论 ,采用亲水性方案寻找C5aR胞外区高亲水性区域 ,Fmoc方案人工合成C5aR第 9～ 30位氨基酸基序 (P2 2肽 ) ,经高效液相色谱纯化 ,毛细管电泳鉴... 目的 :从蛋白质结构与功能的关系出发 ,探讨C5aR与其配体的C5a的结合位。方法 :按分子设计理论 ,采用亲水性方案寻找C5aR胞外区高亲水性区域 ,Fmoc方案人工合成C5aR第 9～ 30位氨基酸基序 (P2 2肽 ) ,经高效液相色谱纯化 ,毛细管电泳鉴定。结果 :合成多肽 (P2 2 )的纯度为 95 19% ,每次缩合的平均效率为 99 78% ;能与anti C5aRMcAb(S5 1,Serotic公司 )有效地结合 ,酶联OD490极显著高于同浓度对照多肽C2 0 ;还可被配体rh C5a( 10ng ml)明显抑制而降低其酶联OD值 (P <0 0 5 ) ,此外 10ng mlP2 2还可抑制rhC5a所致U937细胞胞浆Ca2 + 升高 (P <0 0 1)。结论 :从C5aR分子中寻找C5a结合位基序 ,可拮抗C5a的过敏毒素作用 。 展开更多
关键词 分子设计 c5a c5a受体 CD88 过敏毒素拮抗剂
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补体C5a新型抑制剂研究进展 被引量：6
4
作者 陈月 吕凤林 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期180-184,共5页
关键词 补体c5a 抑制剂 过敏毒素c5a 风湿性关节炎 病理发生过程 临床应用价值 急性肺损伤 肾小球肾炎
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人过敏毒素C5a反义cDNA的克隆、表达和拮抗作用 被引量：2
5
作者 徐祥 吕凤林 +1 位作者 胡承香 李磊 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期53-59,共7页
采用引物二聚体配对搭桥法成功扩增了人过敏毒素C5a全长的反义cNDA ,将扩增的反义cNDA克隆到原核表达载体pPROEXTM HTc上 ,与 6×His头形成融合基因 ,转化E .coliDH5α ,30℃下经IPTG诱导 ,该融合蛋白在大肠杆菌中以可溶性形式表达 ... 采用引物二聚体配对搭桥法成功扩增了人过敏毒素C5a全长的反义cNDA ,将扩增的反义cNDA克隆到原核表达载体pPROEXTM HTc上 ,与 6×His头形成融合基因 ,转化E .coliDH5α ,30℃下经IPTG诱导 ,该融合蛋白在大肠杆菌中以可溶性形式表达 ,表达量达 10 % ;利用金属螯合亲和层析一步法纯化 ,得到纯度 80 %的融合蛋白 ;烟草蚀刻病毒蛋白酶酶切超滤浓缩后 ,得到高浓度高纯度人过敏毒素C5a反义肽 ,经N端蛋白测序鉴定 ,其氨基酸序列正确 .髓过氧化物酶 (myeloperoxi dase ,MPO)为单核细胞PMN所特有 ,其活性可以间接反映C5a趋化白细胞的能力 ,C5a刺激血管内皮细胞表达胞间粘附分子 (ICAM 1)、血管间粘附分子 (PCAM 1)等 ,后者能增加对PMN的粘附 ,检测MPO活性可间接反映出C5a的功能 .还观察了纯化的C5a反义肽对C5a刺激内皮细胞胞浆[Ca2 + ]浓度变化的影响 .高浓度高纯度的C5a反义肽对C5a过敏毒素存在拮抗作用 ,说明反义肽在补体系统C5a分子中是存在的 . 展开更多
关键词 c5a反义肽 过敏毒素c5a 融合表达 拮抗作用
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C5a对中性粒细胞和肾小球内皮细胞粘附行为的影响 被引量：1
6
作者 齐洁 朱锡华 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期10-12,共3页
目的：为揭示Ｃ５ａ和Ｃ５ａＲ对肾小球内皮细胞（ＧＶＥＣ）中性粒细胞（ＰＭＮ）粘附的影响及其影响程度。方法：采用免疫组化胶体金银染色检测Ｃ５ａＲ在人ＧＶＥＣ上的表达，并用微管吸吮技术定量测定了经Ｃ５ａ诱导后，ＧＶＥＣ... 目的：为揭示Ｃ５ａ和Ｃ５ａＲ对肾小球内皮细胞（ＧＶＥＣ）中性粒细胞（ＰＭＮ）粘附的影响及其影响程度。方法：采用免疫组化胶体金银染色检测Ｃ５ａＲ在人ＧＶＥＣ上的表达，并用微管吸吮技术定量测定了经Ｃ５ａ诱导后，ＧＶＥＣ和ＰＭＮ细胞对间的粘附力，同时通过测定粘附的ＰＭＮ中髓过氧化物酶（ＭＰＯ）含量变化，观察不同剂量Ｃ５ａ对粘附的影响。结果：发现ＧＶＥＣ上分布Ｃ５ａＲ，经２０００ｎｇ／ｍｌＣ５ａ刺激，ＧＶＥＣＰＭＮ间粘附力（Ｆａ）达００１４ｄｙｎ，相对粘附应力（Ｓ１）为１７２００ｄｙｎ／ｃｍ２，与对照组Ｆａ（０００１ｄｙｎ）和Ｓ１（３３９９ｄｙｎ／ｃｍ２）均有非常显著差异（Ｐ＜００１）。ＭＰＯ测定结果表明ＧＶＥＣＰＭＮ粘附的发生依赖于Ｃ５ａ剂量。结论：从生物力学角度直接定量阐明了Ｃ５ａＣ５ａＲ对ＧＶＥＣＰＭＮ粘附行为的重要影响。 展开更多
关键词 c5a c5a受体 肾小球 内皮细胞 细胞粘附
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C5a受体颉颃剂及其在动物疾病模型治疗中的研究进展 被引量：1
7
作者 张泽英 刘东旭 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第2期158-163,共6页
C5a受体是人和动物体内补体系统的重要组成部分,与C5a结合后介导了众多生物学效应,参与了许多疾病的发生、发展,并在多种病变中起重要作用,如器官缺血再灌注损伤、急性肺损伤、脓毒血症、类风湿性关节炎、肾小球肾炎等疾病。如何抑制C5... C5a受体是人和动物体内补体系统的重要组成部分,与C5a结合后介导了众多生物学效应,参与了许多疾病的发生、发展,并在多种病变中起重要作用,如器官缺血再灌注损伤、急性肺损伤、脓毒血症、类风湿性关节炎、肾小球肾炎等疾病。如何抑制C5a受体的生物活性,从而减轻炎症反应一直是免疫学研究的热点问题。文章着重介绍了C5a受体颉颃剂及其在动物疾病模型治疗中的研究进展。 展开更多
关键词 c5a c5a受体 颉颃剂 补体 治疗
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C5a受体(C5aR,CD88) 被引量：4
8
作者 赵修竹 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1997年第3期60-64,共5页
Ｃ５ａ是一个重要的炎症介质，但其作用的机制是在对其受体Ｃ５ａＲ（ＣＤ８８）近年来有了较明确的认识后才得以阐明的。本文就Ｃ５ａＲ的结构、作用的分子机理、作用后的信号转导机制、Ｃ５ａＲ的脱敏与内移，以及Ｃ５ａＲ的基因结构... Ｃ５ａ是一个重要的炎症介质，但其作用的机制是在对其受体Ｃ５ａＲ（ＣＤ８８）近年来有了较明确的认识后才得以阐明的。本文就Ｃ５ａＲ的结构、作用的分子机理、作用后的信号转导机制、Ｃ５ａＲ的脱敏与内移，以及Ｃ５ａＲ的基因结构及其表达调控等的一些新进展加以介绍。 展开更多
关键词 c5a GPCR 信号转导 c5a受体
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C5a受体与肾脏疾病关系的研究进展 被引量：1
9
作者 张泽英 刘东旭 《动物医学进展》 北大核心 2015年第7期78-81,共4页
补体活化产物C5a是炎症反应趋化因子,具有过敏毒素样作用和强趋化作用,在炎症反应过程中起着重要的作用。C5a的作用主要通过与C5a受体的结合来实现。研究表明在多种肾脏疾病中均可引肾脏细胞中C5a受体的表达增加,从不同层面阻断C5a与C5... 补体活化产物C5a是炎症反应趋化因子,具有过敏毒素样作用和强趋化作用,在炎症反应过程中起着重要的作用。C5a的作用主要通过与C5a受体的结合来实现。研究表明在多种肾脏疾病中均可引肾脏细胞中C5a受体的表达增加,从不同层面阻断C5a与C5a受体的相互作用可降低肾脏损伤。随着C5a受体功能、信号传递途径及与肾脏疾病关系的不断深入研究,C5a受体有望成为一个有效的治疗靶点,在炎症性疾病治疗过程中发挥作用。论文综述了C5a受体的结构、信号传导途径及与肾脏炎症性疾病的关系,有助于为肾脏炎症性疾病的治疗提供参考。 展开更多
关键词 c5a c5a受体 信号传导 肾脏疾病
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基于STC12C5A60S2的智能循迹小车 被引量：71
10
作者 余炽业 宋跃 雷瑞庭 《实验室研究与探索》 CAS 北大核心 2014年第11期46-49,121,共5页
设计了一种智能循迹小车,介绍了系统总体,STC12C5A60S2单片机为智能小车控制核心、电源模块、电机驱动电路、循迹传感器模块及相应软件设计方案。通过红外反射式传感器TCRT5000检测路面信息,单片机内部程序控制L298N全桥驱动芯片结合单... 设计了一种智能循迹小车,介绍了系统总体,STC12C5A60S2单片机为智能小车控制核心、电源模块、电机驱动电路、循迹传感器模块及相应软件设计方案。通过红外反射式传感器TCRT5000检测路面信息,单片机内部程序控制L298N全桥驱动芯片结合单片机输出的PWM信号控制小车左、右轮电机的运动速度,从而使小车能够沿着引导轨迹自动行驶,实现小车自动循迹的目的。试验结果表明,整个系统的电路结构简单,可靠性高,实现了预期的智能循迹小车功能。 展开更多
关键词 智能循迹小车 STC12c5a60S2 红外传感器 引导线识别 PWM控制
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C3a、C5a及其受体在IgA肾病发病中的作用 被引量：10
11
作者 段喜梅 张颖 +3 位作者 刘璐 周雅丽 权松霞 邢国兰 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2013年第3期313-318,共6页
目的:探讨C3a、C5a及其受体C3aR、C5aR在IgA肾病(IgAN)发病中的作用。方法:选取病理分级Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级(n=30、30、23)IgAN患者的肾组织标本83例作为病例组,同时选取肾脏肿瘤患者手术切除的正常肾组织10例作为对照,采用免疫组化方法分别检... 目的:探讨C3a、C5a及其受体C3aR、C5aR在IgA肾病(IgAN)发病中的作用。方法:选取病理分级Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级(n=30、30、23)IgAN患者的肾组织标本83例作为病例组,同时选取肾脏肿瘤患者手术切除的正常肾组织10例作为对照,采用免疫组化方法分别检测C3a、C5a、C3aR及C5aR在肾组织中的表达;收集83例IgAN患者血清、尿液标本作为病例组,同时收集10例健康成人血清、尿液标本作为阴性对照,10例脓毒血症患者血清、尿液标本作为阳性对照,采用ELISA法检测各组血清、尿液中C3a、C5a水平。结果:C3a、C3aR在Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级IgAN患者肾组织中阳性细胞百分比分别为(16.0±5.7)%、(12.3±3.5)%,(19.9±6.3)%、(20.9±3.7)%,(38.3±17.3)%、(30.6±4.3)%,高于正常对照组的(3.4±1.6)%、(1.7±1.6)%(F=32.606和190.792,P均<0.001)。C5a、C5aR在Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级IgAN患者肾组织中阳性细胞百分比分别为(14.4±2.6)%、(14.8±3.6)%,(22.0±3.9)%、(20.2±5.0)%,(31.1±4.3)%、(41.4±8.5)%,高于正常对照组的(7.8±2.8)%、(6.1±1.6)%(F=143.992和140.237,P均<0.001)。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级IgAN、脓毒血症患者和健康人血清中C3a、C5a水平分别为(2.20±0.30)、(3.60±0.70),(1.90±0.50)、(3.80±0.70),(1.90±0.80)、(3.40±0.70),(2.30±0.50)、(3.20±1.10),(0.90±0.50)、(0.06±0.04)μg/L(F=6.033和27.383,P均<0.05);尿液中C3a、C5a水平分别为(1.80±0.80)、(2.60±1.30),(4.80±2.00)、(4.80±1.50),(7.00±3.00)、(7.00±4.90),(3.30±1.90)、(3.00±0.90),(0.03±0.01)、(0.07±0.07)μg/L(F=20.913和11.892,P均<0.001)。结论:C3a、C5a参与IgAN的发生与发展,在IgAN病理损伤过程中起重要作用。 展开更多
关键词 IgA肾病 补体 C3A c5a
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C5a反义肽对肺血管内皮细胞与中性粒细胞粘附的影响 被引量：6
12
作者 巫振洪 吕凤林 +1 位作者 胡承香 吴玉章 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第10期672-676,共5页
目的 :探讨补体C5a反义肽在C5a过敏毒素介导的肺血管内皮细胞与中性粒细胞粘附中的阻断作用。方法 :采用流式细胞术 ,检测C5a与其反义肽相互作用后再刺激人肺血管内皮细胞 (PVEC) ,对细胞表面粘附分子P选择素 (P Selec tin)表达的影响 ... 目的 :探讨补体C5a反义肽在C5a过敏毒素介导的肺血管内皮细胞与中性粒细胞粘附中的阻断作用。方法 :采用流式细胞术 ,检测C5a与其反义肽相互作用后再刺激人肺血管内皮细胞 (PVEC) ,对细胞表面粘附分子P选择素 (P Selec tin)表达的影响 ;同时通过测定粘附于血管内皮细胞表面的PMN中髓过氧化物酶 (MPO)活性 ,间接反映血管内皮细胞表面粘附的PMN数量的变化。结果 :发现反义肽R4可以剂量依赖关系抑制C5a介导的PVEC上粘附分子P Selectin的表达 ,当R4浓度为 5 0 0 0ng ml时 ,可使P Selectin的表达量下降 2 0 %左右 ,进一步增加R4的浓度 ,P Selectin表达量无显著性改变 ;另外 ,反义肽R4对PVEC与PMN的粘附也有明显抑制作用 ,表现为PVEC上粘附的PMN中MPO活性的降低 ,当R4的浓度增加到 5 0 0 0ng ml,MPO的活性可降低近 4 0 %左右。结论 :C5a反义肽对C5a过敏毒素的生物学活性具有一定的拮抗作用。 展开更多
关键词 反义肽 c5a 粘附分子 血管内皮细胞 髓过氧化物酶
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罗非鱼无乳链球菌C5a肽酶的克隆及原核表达质粒构建 被引量：4
13
作者 李庆勇 可小丽 +2 位作者 卢迈新 朱华平 高风英 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期92-99,共8页
为进一步了解无乳链球菌表面蛋白C5a肽酶scpB基因免疫表位及毒力作用基团的相关信息,通过提取罗非鱼无乳链球菌基因组DNA,利用特异性引物PCR扩增出scpB基因的全长开放阅读框(ORF)。结果表明,该基因包括3 405 bp的ORF,可编码1 134个氨基... 为进一步了解无乳链球菌表面蛋白C5a肽酶scpB基因免疫表位及毒力作用基团的相关信息,通过提取罗非鱼无乳链球菌基因组DNA,利用特异性引物PCR扩增出scpB基因的全长开放阅读框(ORF)。结果表明,该基因包括3 405 bp的ORF,可编码1 134个氨基酸,与已报道的人源无乳链球菌ScpB的氨基酸同源性达99.74%。利用生物信息学软件DNAstar、Clustal X 2.0和MEGA 5.05及在线分析工具ExPASy ProtParam、NCBIProten blast及Conserved Domain等对推导的氨基酸序列进行分析,结果显示罗非鱼无乳链球菌scpB基因编码的氨基酸序列含有3个催化三联体(catalytic triad)位点、7个假定活性位点(putative active site)、2个特异位点(spe-cific hits),以及4个超家族结构(2个肽酶超家族结构Peptidases-S8-S53 superfamily、1个类纤连蛋白超家族结构DUF1034 superfamily和1个鞭毛钩蛋白超家族结构FlgD-lg superfamily);并且该氨基酸序列有多个抗原表位,推测ScpB蛋白应具有较强的免疫原性,可作为候选的蛋白疫苗成分。将该片段插入原核表达载体pET32a(+),转入大肠杆菌BL21(DE3),挑取阳性克隆,经PCR、酶切及测序鉴定表明成功构建原核表达载体pET32a(+)/scpB。 展开更多
关键词 罗非鱼 无乳链球菌 c5a肽酶 克隆 原核表达质粒
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C3a及C5a在45例儿童紫癜性肾炎诊断中的应用价值 被引量：3
14
作者 徐闪闪 王龙 +3 位作者 李雪军 高敏 张霞 丁樱 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期1231-1235,共5页
目的:探讨C3a及C5a在紫癜性肾炎诊断中的应用价值。方法:选择2018年5月至2018年12月河南中医药大学第一附属医院儿科肾脏病区45例HSPN患儿、15例HSP患儿及同期体检15例健康儿童为研究对象。留取健康儿童、HSP及HSPN患儿急性期及恢复期... 目的:探讨C3a及C5a在紫癜性肾炎诊断中的应用价值。方法:选择2018年5月至2018年12月河南中医药大学第一附属医院儿科肾脏病区45例HSPN患儿、15例HSP患儿及同期体检15例健康儿童为研究对象。留取健康儿童、HSP及HSPN患儿急性期及恢复期的外周血,采用ELISA检测血清中C3a及C5a的水平,并采集HSPN患儿24 h尿蛋白定量、肌酐及肾脏病理分级的临床数据。结果:HSPN患儿急性期血清中C3a及C5a水平高于健康儿童及HSP患儿(P<0.05),且恢复期出现下降(P<0.001);HSPN患儿急性期血清中C3a与24 h尿蛋白相关,但与肌酐不相关,血清中C5a与尿蛋白及肌酐均不相关,肾穿患儿血清中C3a及C5a与肾脏病理分级呈正相关;血清中C3a在HSPN诊断中的敏感性为0.822,特异性为0.722,截点为7 621.94 ng/ml,C5a在诊断HSPN的敏感性为0.756,特异性为0.611,截点为73 423 pg/ml,C3a联合C5a在诊断HSPN的敏感性为0.822,特异性为0.867。结论:C3a及C5a可能参与HSP发病,且与肾脏损伤及病情活动相关。 展开更多
关键词 C3A c5a 紫癜性肾炎 儿童
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过敏毒素C5a在痛风性关节炎患者中的表达及意义 被引量：5
15
作者 刘静 罗釆南 +3 位作者 王丹 陈勇 袁佳利 罗雄燕 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第19期2396-2399,共4页
目的:探讨C5a在痛风性关节炎患者中的表达及意义。方法:纳入37例痛风性关节炎(GA)及28例膝骨关节炎(OA)患者,收集所有患者的相关临床资料,另纳入30例健康体检者作为正常对照组(HC)。采用ELISA法检测GA组、OA组及HC组血清C5a浓度,GA组、O... 目的:探讨C5a在痛风性关节炎患者中的表达及意义。方法:纳入37例痛风性关节炎(GA)及28例膝骨关节炎(OA)患者,收集所有患者的相关临床资料,另纳入30例健康体检者作为正常对照组(HC)。采用ELISA法检测GA组、OA组及HC组血清C5a浓度,GA组、OA组关节液C5a浓度以及尿酸单钠晶体体外诱导健康人血清生成C5a的浓度。结果:血清C5a浓度在GA组明显高于HC组和OA组,GA组关节液中C5a浓度显著高于配对血清中的C5a浓度和OA组关节液中的C5a浓度;血清C5a浓度与患者受累关节的压痛和肿胀程度呈显著正相关,血清C5a浓度与CRP浓度呈正相关,关节液中C5a浓度与关节液白细胞计数呈现显著相关性,关节液中尿酸盐晶体负荷与关节液C5a浓度密切相关;③尿酸单钠晶体以剂量依赖性方式促进C5a生成。结论:尿酸盐晶体可诱发C5a的生成,血清C5a浓度可以作为判断GA炎症程度的指标。 展开更多
关键词 过敏毒素c5a 关节炎 痛风性 关节炎 骨性
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shRNA沉默C5aR对LPS诱导的大鼠肾小管上皮细胞损伤的影响 被引量：3
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作者 张泽英 张辉 +2 位作者 赵昕 黄爱妮 蒋思婧 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2017年第6期1327-1332,共6页
为观察短发夹状RNA(Short hairpin RNA,shRNA)阻断大鼠C5a受体(C5a receptor,C5aR)基因表达对抑制脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导的大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E细胞)损伤的影响,将构建好的针对大鼠C5aR基因的shRNA表达质粒转染NRK-... 为观察短发夹状RNA(Short hairpin RNA,shRNA)阻断大鼠C5a受体(C5a receptor,C5aR)基因表达对抑制脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导的大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E细胞)损伤的影响,将构建好的针对大鼠C5aR基因的shRNA表达质粒转染NRK-52E细胞系,经G418筛选后,形成稳定的表达C5aR shRNA的细胞系。设置空白对照组(NC组)、正常对照组(LPS组)、阴性对照组(LPS+shRNAc组)和处理组(LPS+C5aR-shRNA组)。采用荧光定量反转录PCR(RT-PCR)检测细胞中白介素-6(Interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)mRNA的表达,酶联免疫吸附方法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞上清液中TNF-α、IL-6和髓过氧化物酶(MPO)活性,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率。结果显示,与正常对照组和阴性对照组相比,试验组中C5aR shRNA能有效抑制炎症因子TNF-α、IL-6的释放,降低细胞凋亡率和细胞中MPO活性(P<0.05)。可见,C5aR shRNA能显著抑制由LPS诱导的TNF-α、IL-6等炎症因子的释放,改善大鼠肾脏功能,对LPS诱导的肾脓毒症损伤有明显保护作用。 展开更多
关键词 c5a受体 脂多糖 基因沉默 脓毒症
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C5a反义肽对实验性脓毒症小鼠肺损伤的作用研究 被引量：3
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作者 李保胜 崔社怀 +4 位作者 吕凤林 陈月 李元朝 胡承香 陈彩宇 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期932-935,共4页
目的研究C5 a反义肽(NH2-EARLQRVFLYVNPS-COOH)对盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)致脓毒症小鼠发生肺损伤的保护性作用。方法实验组小鼠CLP后即经尾静脉注射反义肽R4 1、2、4、8 mg/kg,浓度0.5mg/m l),观察不同剂量R4对... 目的研究C5 a反义肽(NH2-EARLQRVFLYVNPS-COOH)对盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)致脓毒症小鼠发生肺损伤的保护性作用。方法实验组小鼠CLP后即经尾静脉注射反义肽R4 1、2、4、8 mg/kg,浓度0.5mg/m l),观察不同剂量R4对小鼠96 h生存率的影响,并对肺组织进行病理观察,检测肺髓过氧化物酶(MPO)活性,检测动脉血氧分压、肺湿干比。结果相较于对照组,治疗组小鼠在R4使用浓度2 mg/kg时96 h生存率明显提高(P<0.05),动脉氧分压升高(P<0.01)、MPO和肺湿/干比降低(P<0.01)、病理改变减轻。结论反义肽R4在小鼠体内有良好的拮抗C5 a作用,对脓毒症小鼠肺的急性损伤有保护作用。 展开更多
关键词 过敏毒素c5a 反义肽 脓毒症 肺
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免疫组化及原位杂交检测人肺组织中的C5a受体 被引量：3
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作者 吕凤林 郑萍 +2 位作者 黄云辉 胡承香 朱锡华 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第10期1206-1208,共3页
目的　检测正常人肺组织细胞上C5aR的表达和分布 ,阐明急性肺损伤、ARDS等病理发生过程中C5aR可能的作用。方法　以小鼠抗人C5aR短肽单克隆抗体作为检测抗体 ,对人肺组织细胞作免疫组织化学ABC染色 ;pUC1 9 C5aR质粒经BamHⅠ和HindⅢ双... 目的　检测正常人肺组织细胞上C5aR的表达和分布 ,阐明急性肺损伤、ARDS等病理发生过程中C5aR可能的作用。方法　以小鼠抗人C5aR短肽单克隆抗体作为检测抗体 ,对人肺组织细胞作免疫组织化学ABC染色 ;pUC1 9 C5aR质粒经BamHⅠ和HindⅢ双酶切 ,得到 91 0bp的片段 ,地高辛标记制作原位杂交的探针 ,对肺血管内皮细胞作原位杂交检测。结果　发现肺血管内皮细胞有C5aRmRNA。肺泡上皮细胞、支气管上皮细胞、肺泡平滑肌细胞、血管内皮细胞以及巨噬细胞上均有C5aR表达。结论　C5a作为前炎症因子 ,与肺组织细胞上C5aR作用后 ,可能会介导急性肺损伤、ARDS等疾病的发生 ,说明这些疾病可能与C5a有关。 展开更多
关键词 c5aR 补体 肺 CD88
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C5a在介导肺泡上皮细胞凋亡以及在ALI中所扮演的角色 被引量：6
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作者 李保胜 崔社怀 吕凤林 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第B03期80-81,84,共3页
关键词 细胞凋亡 c5a 肺泡
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基于STC12C5A60S2多功能通信开发板设计 被引量：14
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作者 黄超 刘婷 谢印庆 《现代电子技术》 2014年第5期152-155,共4页
为了帮助通信专业学生更好地掌握无线通信产品的开发,自行设计了基于STC12C5A60S2的通信开发板。主要有以下功能模块:SIM900无线网络模块、nRF905短距离无线收发模块、LCD12864显示模块、矩阵按键模块、外围扩展接口电路等。通过给定具... 为了帮助通信专业学生更好地掌握无线通信产品的开发,自行设计了基于STC12C5A60S2的通信开发板。主要有以下功能模块:SIM900无线网络模块、nRF905短距离无线收发模块、LCD12864显示模块、矩阵按键模块、外围扩展接口电路等。通过给定具体的项目实践,提高学生的硬件设计能力及软件编程能力,为就业打下良好的基础。 展开更多
关键词 多功能通信开发板 STC12c5a60S2芯片 GPRS模块 NRF905 LCD12864显示模块
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