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C57-ras转基因小鼠模型杂交1代CB6F1的生长发育特性 被引量:2
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作者 刘甦苏 吴曦 +6 位作者 周舒雅 王辰飞 彭泽旭 左琴 李保文 贺争鸣 范昌发 《中国比较医学杂志》 北大核心 2015年第4期18-22,共5页
目的测定自主建立的转基因致癌性模型C57-ras小鼠与BALB/c小鼠杂交1代的生长发育特性参数,为该模型的商业化供应提供基础数据。方法将雄性转基因阳性C57-ras小鼠与野生型雌性BALB/c小鼠交配,获得杂交1代(CB6F1 c-Ha-ras+/-)并测定平均... 目的测定自主建立的转基因致癌性模型C57-ras小鼠与BALB/c小鼠杂交1代的生长发育特性参数,为该模型的商业化供应提供基础数据。方法将雄性转基因阳性C57-ras小鼠与野生型雌性BALB/c小鼠交配,获得杂交1代(CB6F1 c-Ha-ras+/-)并测定平均产仔数、离乳率、阳性鼠生长发育情况、转基因阳性率等参数。结果在生长发育方面,雌鼠平均每窝产子数为8只,离乳率为90%,雄雌性别比符合预期。CB6F1的平均出生重为(1.73±0.05)g,10周龄时阳性鼠平均体重雌性(24.38±1.74)g,雄性(29.42±1.72)g。雄性鼠体重明显高于雌性,差异存在极显著性(P<0.01);基因型检测阳性率为46.9%,符合遗传规律。结论转基因致癌性模型C57-ras小鼠与BALB/c小鼠杂交1代的生长发育特性正常,可实现规模化商业供应。 展开更多
关键词 c57-ras转基因小鼠 人原癌基因c-Ha-ras cB6F1 生长发育特性
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C57-ras致癌性转基因小鼠模型的脏器及血液学参数 被引量:6
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作者 左琴 李波 +1 位作者 岳秉飞 范昌发 《中国比较医学杂志》 CAS 2010年第9期22-25,共4页
目的测定自主建立的致癌性转基因动物模型C57-ras小鼠的血液生理生化值和主要脏器重量,计算脏器系数并作统计学分析。方法选取同窝C57-ras转基因阳性和阴性小鼠,雌雄各半,采血,测量血液生理指标和血清生化指标,并称主要脏器重量。结果 C... 目的测定自主建立的致癌性转基因动物模型C57-ras小鼠的血液生理生化值和主要脏器重量,计算脏器系数并作统计学分析。方法选取同窝C57-ras转基因阳性和阴性小鼠,雌雄各半,采血,测量血液生理指标和血清生化指标,并称主要脏器重量。结果 C57-ras转基因阳性雌鼠和阴性雌鼠间比较,NEUT、NEUT%存在显著性差异(P<0.05),PCT存在极显著性差异(P<0.01)。C57-ras转基因阳性雄鼠和阴性雄鼠间比较,RBC、HCT、PLT、PCT存在显著性差异(P<0.05),MON%存在极显著性差异(P<0.01)。血清生化指标中,ALT和TG存在显著性差异(P<0.05)。主要脏器重量和脏器系数比较结果显示,除C57-ras转基因阳性雌鼠和阴性雌鼠在肺重量存在极显著性差异(P<0.01)外,其余均无显著性差异(P>0.05)。结论新建C57-ras致癌性转基因小鼠模型和正常C57BL/6小鼠的主要生物学特性基本一致,利于该模型在致癌性安全性评价等领域的实际应用。 展开更多
关键词 c57-ras转基因小鼠 致癌性安全性评价 生理生化参数 脏器重量 脏器系数
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C57-ras癌症转基因小鼠模型胚胎冷冻保种技术研究 被引量:2
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作者 左琴 刘甦苏 +3 位作者 周舒雅 刘佐民 王金恒 范昌发 《中国比较医学杂志》 CAS 2013年第5期34-37,共4页
目的建立C57-ras癌症转基因小鼠模型胚胎的冷冻保种技术。方法通过直接收集体内发育的2-细胞胚或者通过体外受精方法获得2-细胞胚,采用玻璃化冷冻法冷冻、复苏、移植,后代经PCR检测。结果体内发育至2细胞期胚胎90枚,解冻后的平均复苏率... 目的建立C57-ras癌症转基因小鼠模型胚胎的冷冻保种技术。方法通过直接收集体内发育的2-细胞胚或者通过体外受精方法获得2-细胞胚,采用玻璃化冷冻法冷冻、复苏、移植,后代经PCR检测。结果体内发育至2细胞期胚胎90枚,解冻后的平均复苏率是67.78%,移植产仔率是21.31%,后代的阳性率是23.08%;体外受精的2细胞期胚胎203枚,解冻复苏60枚,平均复苏率是63.33%,移植产仔率是15.78%,后代的阳性率是33.33%。结论两种胚胎冷冻途径均获得了C57-ras癌症转基因动物模型阳性小鼠,建立了该模型动物的低温保存方法。 展开更多
关键词 c57-ras转基因小鼠 体外受精 胚胎冷冻 2细胞期胚胎
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C57-ras致癌性转基因模型杂交1代的脏器及血液学参数测定 被引量:2
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作者 左琴 李波 +5 位作者 岳秉飞 王金恒 王洪 马丽颖 魏杰 范昌发 《中国比较医学杂志》 CAS 2011年第5期5-9,共5页
目的测定自主建立的致癌性转基因动物模型C57-ras小鼠杂交F1代的血液生理生化值和主要脏器重量,计算脏器系数并作统计学分析。方法选取同窝C57-ras转基因阳性鼠和BALB/cJ小鼠交配后的杂交1代CB6F1-Tg小鼠,雌雄各半,采血,测量血液生理指... 目的测定自主建立的致癌性转基因动物模型C57-ras小鼠杂交F1代的血液生理生化值和主要脏器重量,计算脏器系数并作统计学分析。方法选取同窝C57-ras转基因阳性鼠和BALB/cJ小鼠交配后的杂交1代CB6F1-Tg小鼠,雌雄各半,采血,测量血液生理指标和血清生化指标,并称主要脏器重量。结果血液生理指标中,CB6F1-Tg转基因阳性(+/-)雌鼠和阴性(-/-)雌鼠间比较,MCHC存在极显著性差异(P<0.01);CB6F1-Tg转基因阳性(+/-)雄鼠和阴性(-/-)雄鼠间比较,PLT、PCT、EOS%、NEUT、NEUT%、LYM%存在显著性差异(P<0.05),NEUT%、LYM%存在极显著性差异(P<0.01)。血清生化指标中,CB6F1-Tg阳性(+/-)雌鼠和阴性(-/-)雌鼠比较,ALT、TP、ALB存在显著性差异(P<0.05),TG存在极显著性差异(P<0.01)。主要脏器重量和脏器系数均无显著性差异(P>0.05)。结论测定了新建C57-ras致癌性转基因小鼠模型F1代阳性小鼠和阴性小鼠的主要生物学特性,为该模型在致癌性安全性评价等领域的实际应用中提供参考。 展开更多
关键词 c57-ras转基因小鼠 杂交1代 致癌性安全性评价 生理生化参数 脏器重量 脏器系数
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采用CRISPR/Cas9技术构建新品系HBeAg转基因小鼠
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作者 郭睿 田怡 +6 位作者 金雪媛 陈海燕 王贵虎 黄小钟 李步荣 李宗芳 杨军 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1017-1022,共6页
目的培育一种HBeAg转基因小鼠新品系。方法克隆乙型肝炎病毒HBeAg基因;采用CRISPR/Cas9技术,通过同源重组的方式分别在Rosa26基因位点定点插入pliver-HBeAg表达框,获得含有HBeAg基因的表达载体pliver-HBeAg,经酶切得到含有HBeAg基因的线... 目的培育一种HBeAg转基因小鼠新品系。方法克隆乙型肝炎病毒HBeAg基因;采用CRISPR/Cas9技术,通过同源重组的方式分别在Rosa26基因位点定点插入pliver-HBeAg表达框,获得含有HBeAg基因的表达载体pliver-HBeAg,经酶切得到含有HBeAg基因的线性DNA片段,将Cas9mRNA、gRNA和donor vector显微注射到C57BL/6J小鼠的受精卵中,再将其移植入C57BL/6J雌性代孕小鼠子宫,获得F0代建系小鼠;采用长片段PCR对出生小鼠进行鉴定,共获得HBeAg基因正确同源重组的F0代建系小鼠;F0代阳性小鼠与野生型C57BL/6J小鼠交配,繁育获得F1代小鼠,经PCR鉴定及测序确认阳性F1代小鼠;将携带HBeAg基因的F1代转基因小鼠再次回交,对子代小鼠进行PCR基因型鉴定,直至获得纯合子子代转基因小鼠;采用全自动化学发光免疫分析仪、胶体金法和免疫组织化学方法分别检测HBeAg转基因鼠血浆和肝组织中HBeAg和HBeAb的表达。结果采用CRISPR/Cas9技术共获得56只F0代小鼠,其中2只为正确同源重组的F0代小鼠;F1代小鼠中6只阳性F1代小鼠。截至目前,共获得22只F2代纯合子和29只杂合子HBeAg转基因小鼠。所有HBeAg转基因小鼠外周血中均可检出高浓度的HBeAg蛋白,但未检出HBeAb的表达。而且免疫组化结果显示HBeAg转基因小鼠肝脏肝细胞中可特异性表达HBeAg蛋白。结论采用CRISPR/Cas9技术成功构建了能在肝脏肝细胞中稳定表达HBeAg蛋白且对HBeAg免疫耐受的新品系HBeAg转基因小鼠,为HBV的研究提供了新的实验动物模型。 展开更多
关键词 转基因小鼠 乙肝病毒 HBEAG cRISPR/cas9 c57BL/6J小鼠
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MITF与Waardenburg综合征 被引量:6
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作者 任丽丽 郭维维 杨仕明 《中华耳科学杂志》 CSCD 北大核心 2013年第1期145-150,共6页
在生物学上,许多具有重要意义的发现是从研究小鼠开始的,MITF也不例外。1992年,第一例Mitf插入突变转基因小鼠被报导,它是建立在C57BL/6xC3H杂交背景上的VGA-9鼠系,具有特定的表型:白色皮毛,小眼畸形,纯合子VGA-9小鼠在出生2... 在生物学上,许多具有重要意义的发现是从研究小鼠开始的,MITF也不例外。1992年,第一例Mitf插入突变转基因小鼠被报导,它是建立在C57BL/6xC3H杂交背景上的VGA-9鼠系,具有特定的表型:白色皮毛,小眼畸形,纯合子VGA-9小鼠在出生2个月时丧失对声音的反应;电镜观察可见VGA-9小鼠耳蜗血管纹中间细胞即黑色素细胞缺失。 展开更多
关键词 WAARDENBURG综合征 转基因小鼠 c57BL 黑色素细胞 耳蜗血管纹 插入突变 小眼畸形 中间细胞
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