目的探究C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白6(C1q/tumor necrosis factor related protein 6,CTRP6)在槲皮素(quercetin,Que)抑制急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)后大鼠心肌细胞焦亡中的作用及机制。方法采用冠状动脉左前降支结...目的探究C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白6(C1q/tumor necrosis factor related protein 6,CTRP6)在槲皮素(quercetin,Que)抑制急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)后大鼠心肌细胞焦亡中的作用及机制。方法采用冠状动脉左前降支结扎法建立AMI大鼠模型。首先,将实验分为假手术组(Sham)、AMI组、槲皮素低剂量组(Que-L,25 mg·kg^(-1))、槲皮素高剂量组(Que-H,100 mg·kg^(-1))、福辛普利钠片组(fosinopril,4 mg·kg^(-1)),每组各10只。各组大鼠按照对应的药物剂量或是生理盐水灌胃,1次/d,连续14 d。多普勒超声检测心功能变化,观察大鼠心肌组织病理学变化,Western blot检测焦亡相关蛋白和CTRP6表达。通过以上实验指标检测筛选得出Que最佳给药剂量。随后,将实验分为Sham、AMI、Que(100 mg·kg^(-1))、Que+si-NC组、Que+si-CTRP6,每组各10只。干预14 d后,检测心肌梗死、心肌损伤指标、细胞焦亡、CTRP6及PI3K/Akt通路蛋白表达。结果与Sham组相比,AMI组大鼠LVEDV、LVESV明显增加,EF、FS明显降低(P<0.05),心肌组织出现明显病理损伤,纤维化程度增加,心肌梗死面积增加,LDH、CK-MB、cTnI水平,TUNEL阳性细胞比率升高,NLRP3、cleaved caspase-1、GSDMD-N、IL-1β、IL-18表达增加,CTRP6表达,p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt比值降低(均P<0.05)。与AMI组相比,Que-L和Que-H大鼠心功能指标以及心肌组织病理损伤程度减轻,心肌梗死面积降低,LDH、CK-MB、cTnI水平,TUNEL阳性率降低( P <0.05),细胞焦亡相关蛋白表达降低,CTRP6及PI3K/Akt通路蛋白表达增加( P <0.05),且呈剂量相关性。与Que组相比,Que+si-CTRP6组大鼠上述指标变化均得到明显逆转。 结论 Que能够抑制心肌细胞焦亡,改善AMI大鼠心肌梗死,其机制与上调CTRP6表达,促进PI3K/Akt信号通路活化相关。展开更多
文摘目的探讨C1q和肿瘤坏死因子相关蛋白4(CTRP4)对子痫前期大鼠胎盘滋养层细胞的影响。方法构建子痫前期大鼠模型,采集正常孕鼠和模型大鼠胎盘滋养层组织,运用实时定量PCR和Western blot法检测CTRP4、白细胞介素1β(IL-1β)和caspase-1 mRNA和蛋白表达水平;分离培养正常孕鼠和模型鼠滋养层细胞,在不同时间点,运用流式细胞术检测碘化丙啶和caspase-1双阳性(PI+caspase-1+)细胞(pyroptosis),运用实时定量PCR和Western blot法检测IL-1β和caspase-1表达水平;在模型大鼠滋养层细胞培养基中分别加入(0.5、5、15、25、50)ng/m L CTRP4重组蛋白或(10、20)ng/m L CTRP4蛋白中和抗体,处理72 h后检测pyroptosis细胞数目和caspase-1、IL-1β水平。结果子痫前期大鼠胎盘滋养层组织caspase-1、IL-1β表达增强,CTRP4表达水平下调;CTRP4重组蛋白处理体外培养的大鼠滋养层细胞可显著减少PI+caspase-1+细胞数量并降低caspase-1、IL-1β水平,而CTRP4蛋白中和抗体处理显著增加PI+caspase-1+细胞数量并增强炎症反应。结论 CTRP4可显著抑制caspase-1/IL-1β炎症调节通路的活性,并抑制子娴前期大鼠胎盘滋养层细胞的pyroptosis。
