左归丸靶向C-X-C趋化因子受体4对人脐带间充质干细胞体外迁移的影响 被引量：2

1

作者 焦存 杨丽晓 +3 位作者 张艳 王哲 李亦晗 芦现杰 《世界中医药》 CAS 2023年第19期2746-2751,共6页

目的:探讨左归丸通过靶向调控C-X-C趋化因子受体4(CXCR4)表达对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)体外迁移的影响。方法:采用组织块法分离培养hUC-MSCs并进行流式鉴定。利用CCK-8检测不同浓度左归丸对hUC-MSCs增殖的影响,细胞划痕和Transwel... 目的:探讨左归丸通过靶向调控C-X-C趋化因子受体4(CXCR4)表达对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)体外迁移的影响。方法:采用组织块法分离培养hUC-MSCs并进行流式鉴定。利用CCK-8检测不同浓度左归丸对hUC-MSCs增殖的影响,细胞划痕和Transwell实验分析左归丸对hUC-MSCs体外迁移的影响,实时聚合酶链反应(PCR)、蛋白印迹法和流式细胞术分析hUC-MSCs中CXCR4表达变化。结果:流式细胞术结果显示,hUC-MSCs表面高表达CD73和CD90,极低表达CD34和CD45。CCK-8结果显示,0.1、0.2 mg/mL左归丸均能明显促进hUC-MSCs增殖(P<0.05)。细胞划痕和Transwell实验结果显示,0.1、0.2 mg/mL左归丸能明显促进hUC-MSCs迁移,最佳浓度为0.2 mg/mL,CXCR4拮抗剂普乐沙福则能抑制其促迁移作用(P<0.05)。实时PCR、蛋白印迹法和流式细胞术结果显示,左归丸能上调hUC-MSCs中CXCR4 mRNA和蛋白表达水平,并促进CXCR4蛋白在细胞膜表达(P<0.05)。结论:左归丸通过上调CXCR4表达促进hUC-MSCs的体外迁移。 展开更多

关键词 左归丸 人脐带间充质干细胞 体外迁移 c-x-c趋化因子受体4 基质细胞衍生因子-1/c-x-c趋化因子受体4 普乐沙福 增殖 卵巢早衰

在线阅读 下载PDF 职称材料

RON蛋白与CXC趋化因子受体4蛋白的表达与去势抵抗型前列腺癌患者阿比特龙耐药的相关性 被引量：3

2

作者 魏松长 杨红琪 +2 位作者 张宏娟 施晓丽 任凯文 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2021年第4期414-422,共9页

目的:研究受体酪氨酸激酶(RON)蛋白与CXC趋化因子受体4(CXCR4)蛋白的表达与去势抵抗型前列腺癌(CRPC)患者阿比特龙耐药的相关性。方法:选取2017年1月至2020年2月我院收治的127例接受阿比特龙治疗的CRPC患者,根据是否耐药分为观察组(n=32... 目的:研究受体酪氨酸激酶(RON)蛋白与CXC趋化因子受体4(CXCR4)蛋白的表达与去势抵抗型前列腺癌(CRPC)患者阿比特龙耐药的相关性。方法:选取2017年1月至2020年2月我院收治的127例接受阿比特龙治疗的CRPC患者,根据是否耐药分为观察组(n=32,阿比特龙耐药患者)、对照组(n=95,缓解患者)。采用免疫组化与蛋白免疫印迹检测比较两组RON、CXCR4蛋白表达,采用Logistic回归分析进行RON、CXCR4蛋白与耐药的单因素、多因素分析,采用受试者工作特征曲线(ROC)及ROC下面积(AUC)分析RON、CXCR4蛋白预测耐药的价值,并在阿比特龙耐药细胞株中加入RON、CXCR4抑制剂,观察两者对阿比特龙耐药细胞凋亡指标[半胱氨酸蛋白酶(caspase)-3、caspase-9、细胞凋亡率]的影响。结果:免疫组化显示,观察组RON阳性表达率(71.88%,23/32)较对照组(27.37%,26/95)高;观察组CXCR4阳性表达率(65.63%,21/32)较对照组(12.63%,12/95)高;蛋白免疫印迹检测显示,观察组RON、CXCR4蛋白较对照组高(P<0.05);RON、CXCR4蛋白与耐药均呈正相关(P<0.05);加入RON、CXCR4抑制剂后,RON、CXCR4表达被成功抑制,且caspase-3、caspase-9、细胞凋亡率均高于阿比特龙耐药细胞株(P<0.05);Transwell实验检测细胞迁移及侵袭显示,抑制RON、CXCR4表达,细胞迁移及侵袭细胞数目均显著降低(P<0.05);RON蛋白预测阿比特龙耐药的AUC为0.789,截断值>4.11,敏感度为84.37%,特异度为61.05%(P<0.05);CXCR4蛋白预测阿比特龙耐药的AUC为0.825,截断值>3.42,敏感度为75.00%,特异度为80.00%(P<0.05);RON+CXCR4蛋白预测阿比特龙耐药的AUC为0.884(95%CI:0.815~0.934),敏感度为87.50%,特异度为83.16%(P<0.05)。结论:CRPC患者RON、CXCR4蛋白表达显著增加,与患者阿比特龙耐药密切相关,有望成为预测耐药的标志物,抑制RON、CXCR4蛋白表达,可促进CRPC阿比特龙耐药细胞的凋亡。 展开更多

关键词 RON蛋白 CXC趋化因子受体4蛋白 去势抵抗型前列腺癌 阿比特龙 耐药 caspase-3 caspase-9 凋亡率

在线阅读 下载PDF 职称材料

布比他丁促进大鼠骨髓间充质干细胞CXC型趋化因子受体4膜向分布及迁移能力的研究

3

作者 叶舒 麦宇芸 +2 位作者 权晶晶 胡晓莉 张晓磊 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2018年第7期707-711,共5页

目的:研究药物布比他丁(Blebbistatin)能否调节大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)表面CXC型趋化因子受体4(CXC chemokine receptor type 4,CXCR4)向胞膜分布,从而促进大鼠BMSCs的迁移。方法:分离培养SD大... 目的:研究药物布比他丁(Blebbistatin)能否调节大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)表面CXC型趋化因子受体4(CXC chemokine receptor type 4,CXCR4)向胞膜分布,从而促进大鼠BMSCs的迁移。方法:分离培养SD大鼠BMSCs,Blebbistatin处理细胞15、30、45、60min,设置对照组;流式细胞术测定细胞表面CXCR4表达;Transwell迁移实验检测细胞迁移能力;测定成骨诱导前期培养基碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,待诱导完成进行茜素红染色。结果:处理组细胞表面CXCR4表达率明显升高(P<0.01),且呈时间依赖性;15、30和60min组细胞迁移效率升高(P<0.01)。成骨诱导期间各组间ALP活性比较差异无统计学意义,诱导至21d时各组均形成大量钙化结节。结论:Blebbistatin能促进BMSCs表面CXCR4向胞膜分布,并能提高BMSCs的迁移效率。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 布比他丁 CXC型趋化因子受体4 基质细胞衍生因子-1

在线阅读 下载PDF 职称材料

白皮杉醇通过抑制CXCR4/BTK通路改善小胶质细胞极化介导的糖尿病视网膜病变

4

作者 孙海燕 翟宇 +4 位作者 张元卿 张家璇 张泽鹏 闫志鹏 张筠 《眼科新进展》 北大核心 2025年第12期930-937,共8页

目的探讨白皮杉醇(PIC)能否改善小胶质细胞极化介导的糖尿病视网膜病变(DR)及其具体的分子机制。方法网络药理学与生物信息学方法用于分析DR、PIC与小胶质细胞相关靶点的交集。体外培养人视网膜血管内皮细胞(HRVECs),随机分为NG-HRVECs... 目的探讨白皮杉醇(PIC)能否改善小胶质细胞极化介导的糖尿病视网膜病变(DR)及其具体的分子机制。方法网络药理学与生物信息学方法用于分析DR、PIC与小胶质细胞相关靶点的交集。体外培养人视网膜血管内皮细胞(HRVECs),随机分为NG-HRVECs组、HG-HRVECs组、HG+PIC-HRVECs组。CCK-8法检测细胞活力、TUNEL法检测细胞凋亡,ELISA试剂盒测定肿瘤坏死因子α(TNF-α)与白细胞介素6(IL-6)浓度。体外培养BV-2细胞,随机分为NG-BV-2组、HG-BV-2组、HG+PIC-BV-2组、HG+Si-NC-BV-2组、HG+Si-CXCR4-BV-2组、HG+依鲁替尼(lbrutinib)-BV-2组,ELISA试剂盒测定精氨酸酶(Arg-1)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)水平。进一步取各组BV-2细胞条件培养基(CM)干预HRVECs,同时测定HRVECs细胞活力、凋亡率及TNF-α、IL-6浓度。构建DR大鼠模型并以PIC干预,探究PIC对大鼠视网膜病变的改善作用。结果生物信息学分析将CXCR4作为本研究的关键靶点。与NG-HRVECs组相比,HG-HRVECs组HRVECs细胞凋亡率及TNF-α、IL-6浓度均增加,而与HG-HRVECs组相比,HG+PIC-HRVECs组HRVECs细胞凋亡率及TNF-α、IL-6浓度均降低(均为P<0.05)。与NG-BV-2组相比,HG-BV-2组BV-2细胞Arg-1水平降低、iNOS水平升高,而与HG-BV-2组相比,HG+PIC-BV-2组、HG+Si-CXCR4-BV-2组、HG+lbrutinib-BV-2组BV-2细胞Arg-1水平均增加、iNOS水平均降低(均为P<0.05)。与NG-BV-2-CM组相比,HG-BV-2-CM组HRVECs细胞活力降低、凋亡率增加,TNF-α、IL-6浓度增加,而HG+PIC-BV-2-CM组、HG+Si-CXCR4-BV-2-CM组、HG+lbrutinib-BV-2-CM组则逆转了HG-BV-2-CM对HRVECs的影响(均为P<0.05)。动物实验结果显示,与DR大鼠相比,不同剂量PIC治疗大鼠视网膜组织病理损伤明显改善,Arg-1、iNOS、CXCR4、p-BTK蛋白表达被逆转。结论PIC通过抑制CXCR4/BTK通路改善小胶质细胞极化介导的DR进展。 展开更多

关键词 白皮杉醇 糖尿病视网膜病变 小胶质细胞 c-x-c型趋化因子受体4 布鲁顿酪氨酸激酶

在线阅读 下载PDF 职称材料

齐墩果酸调节SDF-1/CXCR4信号轴对脂多糖致大鼠胰腺腺泡细胞炎症损伤的影响

5

作者 滕晓丽 周晓黎 +3 位作者 孟庆彬 汪念 廖艳 万莹 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第6期1365-1370,共6页

目的:探讨齐墩果酸(OA)调节基质细胞衍生因子-1(SDF-1)/CXC型趋化因子受体4(CXCR4)信号轴对脂多糖(LPS)致大鼠胰腺腺泡细胞炎症损伤的影响。方法:以5、10、20、40μmol/L OA处理大鼠胰腺腺泡细胞AR42J,采用CCK-8法检测细胞活力,确定后... 目的:探讨齐墩果酸(OA)调节基质细胞衍生因子-1(SDF-1)/CXC型趋化因子受体4(CXCR4)信号轴对脂多糖(LPS)致大鼠胰腺腺泡细胞炎症损伤的影响。方法:以5、10、20、40μmol/L OA处理大鼠胰腺腺泡细胞AR42J,采用CCK-8法检测细胞活力,确定后续实验OA处理的最佳剂量;将AR42J细胞随机分为对照组(NC)、LPS组(10 mg/L LPS)、OA低剂量组(OA-L组,10 mg/L LPS+5μmol/L OA)、OA中剂量组(OA-M组,10 mg/L LPS+10μmol/L OA)、OA高剂量组(OA-H组,10 mg/L LPS+20μmol/L OA)、Rr-SDF-1激活剂(SDF-1)组(10 mg/L LPS+20 ng/ml Rr-SDF-1)、OA-H+Rr-SDF-1组(10 mg/L LPS+20μmol/L OA+20 ng/ml Rr-SDF-1)。CCK-8法、Ed U染色检测AR42J细胞增殖;流式细胞术检测AR42J细胞凋亡;分光光度法检测细胞上清中超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量;ELISA检测细胞上清中IL-6、TNF-α水平;Western blot检测细胞中细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、SDF-1、CXCR4蛋白表达。结果:选择5、10、20μmol/L OA作为后续处理AR42J细胞的低、中、高剂量;与NC组比较,LPS组A_(450)值、Ed U阳性细胞率、SOD活性、Cyclin D1蛋白表达降低,细胞凋亡率、MDA含量、IL-6、TNF-α水平、Bax、SDF-1、CXCR4蛋白表达升高(P<0.05);与LPS组比较,OA-L组、OA-M组、OA-H组A_(450)值、Ed U阳性细胞率、SOD活性、Cyclin D1蛋白表达升高,细胞凋亡率、MDA含量、IL-6、TNF-α水平、Bax、SDF-1、CXCR4蛋白表达降低,Rr-SDF-1组对应指标变化趋势与上述相反(P<0.05);与OA-H组比较,OA-H+Rr-SDF-1组A_(450)值、Ed U阳性细胞率、SOD活性、Cyclin D1蛋白表达降低,细胞凋亡率、MDA含量、IL-6、TNF-α水平、Bax、SDF-1、CXCR4蛋白表达升高(P<0.05)。结论:OA可能通过抑制SDF-1/CXCR4通路减轻LPS致大鼠胰腺腺泡细胞的炎症损伤。 展开更多

关键词 齐墩果酸 基质细胞衍生因子-1/CXC型趋化因子受体4通路 脂多糖 胰腺腺泡细胞 炎症

在线阅读 下载PDF 职称材料

基于SDF-1/CXCR4轴探讨雷公藤多糖诱导胰腺干细胞分化的机制研究

6

作者 贾微 宁志莹 +5 位作者 岑妍慧 刘鑫 杨瑞 李博佳 李森 张宸康 《中华中医药学刊》 北大核心 2025年第2期25-28,I0003-I0006,共8页

目的探究雷公藤多糖通过基质细胞衍生因子-1(SDF-1)/CXC型趋化因子受体4(CXCR4)轴诱导胰腺干细胞分化的机制。方法取新生第4天昆明小鼠的胰腺组织制备原代胰腺干细胞,使用免疫组化法鉴定胰腺干细胞;使用双硫腙(DTZ)染色法鉴定胰岛β细胞... 目的探究雷公藤多糖通过基质细胞衍生因子-1(SDF-1)/CXC型趋化因子受体4(CXCR4)轴诱导胰腺干细胞分化的机制。方法取新生第4天昆明小鼠的胰腺组织制备原代胰腺干细胞,使用免疫组化法鉴定胰腺干细胞;使用双硫腙(DTZ)染色法鉴定胰岛β细胞;使用倒置荧光显微镜对各培养时间点细胞进行拍照记录;使用酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞各给药时间点SDF-1释放量;使用实时荧光定量PCR(qPCR)技术检测各组细胞SDF-1和CXCR4的相对mRNA表达量;使用蛋白免疫印迹试验(WB)检测各组细胞SDF-1和CXCR4蛋白表达量。结果使用免疫组化法鉴定所取细胞Nestin阳性、呈棕黄色;双硫腙(DTZ)染色呈阳性,且给药组细胞阳性染色细胞数量明显高于对照组细胞(P<0.05);对照组细胞SDF-1释放量相对持平,实验组细胞SDF-1释放量随着时间的迁移逐步上升,在第26天达到峰值,随后SDF-1释放量随着时间的迁移逐步下降;qPCR技术检测显示实验组细胞SDF-1和CXCR4的相对mRNA表达量显著高于对照组细胞(P<0.05);WB检测结果显示实验组细胞SDF-1和CXCR4蛋白表达量显著高于对照组细胞(P<0.05)。结论雷公藤多糖可以通过SDF-1/CXCR4轴诱导胰腺干细胞分化。 展开更多

关键词 雷公藤多糖 胰腺干细胞 基质细胞衍生因子-1 CXC型趋化因子受体4

在线阅读 下载PDF 职称材料

T140体外阻断SDF-1/CXCR4信号通路阻止人关节软骨Ⅱ型胶原蛋白降解的研究 被引量：8

7

作者 马珂 李晓林 +2 位作者 李彦林 朱晓松 赵沣凯 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第12期1879-1882,共4页

目的:探讨T140体外阻断基质细胞衍生因子1(stromal cell derived factor 1,SDF-1)/趋化因子受体4(chemokine receptor 4,CXCR4)信号通路对人关节软骨细胞降解Ⅱ型胶原蛋白的影响,明确T140的作用机制。方法:取144块膝关节置换OA患者软骨... 目的:探讨T140体外阻断基质细胞衍生因子1(stromal cell derived factor 1,SDF-1)/趋化因子受体4(chemokine receptor 4,CXCR4)信号通路对人关节软骨细胞降解Ⅱ型胶原蛋白的影响,明确T140的作用机制。方法:取144块膝关节置换OA患者软骨(OA软骨组)和144块创伤性截肢患者正常软骨(正常软骨组)组织,Mankin评分均为0或1,加入SDF-1(100 ng/mL)。每组再分为A、B、C三个亚组,分别加入浓度为1 000 nmol/L的T140、MAB310和SDF-1,分别于体外培养2、4 d后,采用RT-PCR检测软骨组织Ⅱ型胶原蛋白mRNA表达。结果:相同软骨组在相同时间点,A组Ⅱ型胶原蛋白mRNA表达均显著高于B组和C组(P<0.05)。相同时间点,OA软骨组同一亚组Ⅱ型胶原蛋白mRNA表达均显著低于正常软骨组(P<0.05)。结论:SDF-1通过SDF-1/CXCR4信号通路诱导人关节软骨降解Ⅱ型胶原蛋白;T140阻断SDF-1/CXCR4信号通路,缓解软骨细胞降解Ⅱ型胶原蛋白。 展开更多

关键词 基质细胞衍生因子1 趋化因子受体4 Ⅱ型胶原蛋白 骨性关节炎 T140

在线阅读 下载PDF 职称材料

EGFR通过调控CXCR4/CXCL12信号通路对恶性外周神经鞘膜瘤细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响 被引量：4

8

作者 秦德芳 李丽 +5 位作者 张泽舜 展洪星 霍泳林 赵敏清 马丁 刘军 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期127-134,共8页

目的:探讨表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的表达对恶性外周神经鞘膜瘤(malignant peripheral nerve sheath tumors,MPNST)细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响,以及对C-X-C型趋化因子受体4/C-X-C型趋化因子配体12... 目的:探讨表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的表达对恶性外周神经鞘膜瘤(malignant peripheral nerve sheath tumors,MPNST)细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响,以及对C-X-C型趋化因子受体4/C-X-C型趋化因子配体12(C-X-C motif chemokine receptor 4/C-X-C motif chemokine ligand 12,CXCR4/CXCL12)信号通路的调节机制。方法:收集2017年6月至2019年6月在广州中医药大学第二临床医学院进行手术切除病灶的50例MPNST患者肿瘤组织作为观察组,50例皮肤型神经纤维瘤组织(dermal neurofibroma,DNF)作为对照组,免疫组化检测组织样本中的EGFR表达。细胞实验分为正常组(Normal组):不加任何药物,常规培养;对照组(Control组):细胞转染150 nmol/L EGFR-siRNA-NC后,常规培养;实验组(EGFR-siRNA组):细胞转染150 nmol/L EGFR-siRNA后,常规培养;5-乙炔基-2-脱氧尿嘧啶核苷(5-ethynyl-2’-deoxyuridine,EdU)标记实验检测各组细胞的增殖能力;Transwell小室实验检测各组细胞的迁移和侵袭能力;裸鼠皮下种植瘤模型检测各组细胞的体内生长与转移能力;基因芯片技术与实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)分析确定沉默EGFR基因后作用的靶基因;Western blot检测各组细胞中EGFR、CXCR4、CXCL12的表达。结果:免疫组化结果显示,对照组的EGFR阳性表达率为(2.35±0.32)%,MPNST患者肿瘤组织中的EGFR阳性表达率为(78.94±12.25)%,差异具有统计意义(t=123.573,均P=0.000);与Normal组相比,EGFR-siRNA组细胞的增殖能力(t=53.147,P=0.000)、侵袭与转移能力(t=26.947、34.638,P=0.000),体内生长与转移能力(t=15.683、22.197,均P=0.000)明显降低。基因芯片和RT-qPCR分析确定CXCR4、CXCL12是EGFR作用的靶基因。与Normal组相比,EGFR-siRNA组细胞中EGFR、CXCR4、CXCL12的表达明显下降(t=2.579、2.673、2.945,均P=0.000)。结论:在MPNST中,EGFR能调控CXCR4/CXCL12信号表达,调控肿瘤的生物学恶性行为,沉默EGFR表达,癌细胞的增殖、侵袭、迁移能力明显下降。 展开更多

关键词 表皮生长因子受体 恶性外周神经鞘膜瘤 增殖 侵袭 迁移 c-x-c型趋化因子受体4/c-x-c型趋化因子配体12信号通路

在线阅读 下载PDF 职称材料

慢病毒载体介导的CXCR4基因过表达对骨髓间充质干细胞归巢影响 被引量：5

9

作者 陈伟 周典 +4 位作者 李亚茹 刘俊秀 王祥民 朱峰 徐开林 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期1543-1547,共5页

目的:研究小鼠CXCR4基因过表达对小鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell, MSC)体内归巢特性的影响。方法:利用慢病毒载体介导小鼠MSC过表达CXCR4基因,建立过表达CXCR4的MSC。将BALB/c小鼠分为单纯照射组(TBI组):受鼠接受全身照射(... 目的:研究小鼠CXCR4基因过表达对小鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell, MSC)体内归巢特性的影响。方法:利用慢病毒载体介导小鼠MSC过表达CXCR4基因,建立过表达CXCR4的MSC。将BALB/c小鼠分为单纯照射组(TBI组):受鼠接受全身照射(total body irradiation, TBI)后输注生理盐水;受鼠TBI后经鼠尾静脉输注EGFP空载体转导的MSC 5×10~5空载体对照组(EGFP-MSC)和受鼠TBI后经鼠尾静脉输注同时携带EGFP和CXCR 4基因的MSC 5×10~5过表达CXCR4组(CXCR4-MSC)3组,每组动物10只。冰冻切片观察MSC在受鼠体内重要脏器的分布,应用流式细胞术检测MSC归巢至受鼠体内骨髓及脾脏效率,酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测受鼠外周血和骨髓中基质细胞衍生因子1(stromal cell derived factor-1, SDF-1)水平。结果:冰冻切片结果显示,过表达CXCR 4可明显提高MSC归巢至肺脏、肝脏和脾脏的效率;流式细胞术测定过表达CXCR4的MSC归巢至脾脏和骨髓数量明显高于EGFP对照组(P <0.05);ELISA结果显示照射24小时后小鼠外周血及骨髓中SDF-1水平明显升高,并且SDF-升高水平与过表达CXCR4的MSC归巢效率存在相关性。结论:利用慢病毒载体介导的过表达CXCR4基因可促进小鼠骨髓间充质干细胞归巢。 展开更多

关键词 c-x-c型趋化因子受体4 间充质干细胞 慢病毒载体 归巢

在线阅读 下载PDF 职称材料

阿托伐他汀对急性ST段抬高型心肌梗死患者外周血内皮祖细胞表面标志物表达的影响 被引量：7

10

作者 刘洁 陈祖平 +2 位作者 陈见红 银剑斌 储成顶 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期851-856,共6页

目的:比较不同剂量的阿托伐他汀对急性ST段抬高型心肌梗死(ST-segment elevation myocardial infarction,STEMI)患者中内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)功能变化的影响。方法:选择确诊为STEMI的患者共40例,根据服用阿托... 目的:比较不同剂量的阿托伐他汀对急性ST段抬高型心肌梗死(ST-segment elevation myocardial infarction,STEMI)患者中内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)功能变化的影响。方法:选择确诊为STEMI的患者共40例,根据服用阿托伐他汀钙片的剂量不同,随机分为20 mg组及40 mg组。采用流式细胞术,在不同时点(服药前及服药后第5、10、15、20、30、60、90、120天)对STEMI患者的循环EPCs进行识别及量化分析,检测EPCs表面标志物CXC趋化因子受体(CXCR)4、血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、沉默信息调节因子1(SIRT1)的表达。结果:第5天40 mg组细胞增殖力及CXCR4、VEGF、bFGF的表达高于20 mg组(P<0.05);第10~120天20 mg组细胞增殖力及CXCR4、VEGF、bFGF的表达高于40 mg组(P<0.05)。SIRT1在第30天前2组的表达差异无统计学显著性;在第30天后出现明显变化,第60天达高峰,随后呈下降趋势,各时点均可见20 mg组大于40 mg组(P<0.05)。结论:在STEMI急性期,40 mg阿托伐他汀提升机体修复功能优于20mg。然而,长期低浓度的他汀治疗在改善血管内膜功能和促进血管新生作用方面优于高剂量。 展开更多

关键词 ST段抬高型心肌梗死 内皮祖细胞 阿托伐他汀 CXC趋化因子受体4 血管内皮生长因子 碱性成纤维细胞生长因子 沉默信息调节因子1

在线阅读 下载PDF 职称材料

小鼠CXCR4基因慢病毒载体构建与真核表达 被引量：3

11

作者 李淼 陈伟 +5 位作者 安新江 曹军华 范从海 尹力扬 张春霞 孙浩淼 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期198-202,共5页

本研究旨在克隆小鼠CXC型趋化因子受体4(CXCR4)基因,构建携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的CXCR4重组慢病毒载体并在真核细胞中表达。采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)以C57BL/6小鼠骨髓细胞为模板克隆全长型CXCR4基因,连接至克隆载体pC... 本研究旨在克隆小鼠CXC型趋化因子受体4(CXCR4)基因,构建携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的CXCR4重组慢病毒载体并在真核细胞中表达。采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)以C57BL/6小鼠骨髓细胞为模板克隆全长型CXCR4基因,连接至克隆载体pCR-Blunt,经限制性内切酶酶切后亚克隆至慢病毒转移载体,构建携带EGFP及CXCR4双顺反子结构的自身失活型重组慢病毒表达质粒;同时构建LV-IRES-EGFP作为对照质粒;通过脂质体转染法与包装质粒及包膜蛋白质粒共转染包装细胞293FT,超速离心浓缩病毒颗粒后转染293FT细胞,采用荧光显微镜和流式细胞术(FCM)检测EGFP的表达,Western blot鉴定CXCR4蛋白表达。结果表明,成功克隆小鼠CXCR4基因,构建重组慢病毒转移质粒LV-IRES-EGFP-CXCR4及对照质粒LV-IRES-EGFP,三质粒系统共转染293FT细胞后获得病毒滴度可达到108TU/ml。以重组慢病毒颗粒感染293FT细胞后第3天,在荧光显微镜下观察到较强绿色荧光表达,FCM检测显示感染效率可达95%,FCM及Western blot结果显示感染后293FT细胞表达CXCR4蛋白。结论:成功构建自身失活型慢病毒载体LV-IRES-EGFP-CXCR4,并在真核细胞中获得表达。 展开更多

关键词 CXC型趋化因子受体4 慢病毒载体 基因表达 293FT细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

XCR1与CXCR4形成异源二聚体并调控其内化(英文)

12

作者 叶鑫 张蕾 +6 位作者 成璐 贾岩 任杉 刘冰 宋露瑶 王思懿 李京敬 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期1390-1402,共13页

趋化因子及其受体信号通路是肿瘤细胞转移的主要调控因素之一,趋化因子受体CXCR4和XCR1都被证明参与了乳腺癌的进展。本文基于膜蛋白酵母双杂交发现了XCR1-CXCR4这一尚未报道过的相互作用对,进一步通过生物发光共振能量转移技术(biolumi... 趋化因子及其受体信号通路是肿瘤细胞转移的主要调控因素之一,趋化因子受体CXCR4和XCR1都被证明参与了乳腺癌的进展。本文基于膜蛋白酵母双杂交发现了XCR1-CXCR4这一尚未报道过的相互作用对,进一步通过生物发光共振能量转移技术(bioluminescence resonance energy transfer,BRET)验证并发现XCR1可以竞争性地结合CXCR4受体(P<0.01),形成异源二聚体。在功能方面,首先通过XCR1和CXCR4瞬时转染HEK293细胞进行划痕实验,加入30 nmol/L SDF-1β后,共转组41.55%的伤口愈合率低于单转CXCR4组的58.75%,说明XCR1的共表达抑制了基质细胞衍生因子-1β(SDF-1β)/CXC趋化因子受体4型(CXCR4)信号通路介导的细胞运动性(P<0.05);其次,利用CXCR4-EGFP转基因HEK293细胞系,共表达XCR1后,流式细胞术检测细胞表面CXCR4受体荧光。结果显示,在30 nmol/L SDF-1β的诱导下,XCR1能够加速异源二聚体中CXCR4的内化(P<0.05),使得内化率从14.38%上升到64.10%;最后,分别检测了控制细胞增殖的Akt和控制细胞迁移的ERK信号通路的变化。结果发现,在SDF-1β刺激10 min后,单转CXCR4组的ERK磷酸化为3.59倍,而共转染XCR1/CXCR4组ERK的磷酸化水平仅为2.08倍,二聚化使得ERK磷酸化水平下降,且激活时间缩短;而Akt的磷酸化水平几乎不受影响。本研究揭示了CXCR4和XCR1二聚化现象,以及该二聚体对CXCR4介导的细胞运动性、受体内化和ERK磷酸化的影响。提示靶向XCR1的药物可以成为CXCR4交叉脱敏的候选药物,对于抑制乳腺癌转移提供了一个可供选择的思路。 展开更多

关键词 趋化因子 异源二聚化 CXC趋化因子受体4型 趋化因子XC受体1 基质细胞衍生因子-1β 生物发光共振能量转移技术

在线阅读 下载PDF 职称材料

COPD患者外周血中EPCs增殖、迁移、黏附及血管形成功能研究

13

作者 刘笑然 刘杨丽 +3 位作者 林耿鹏 黄鑫炎 谭卫平 谢灿茂 《海南医学院学报》 CAS 2014年第11期1463-1468,共6页

目的:观察慢性阻塞性肺病(COPD)患者外周血中内皮祖细胞(EPCs)增殖、迁移、黏附及小管形成等功能。方法:体外培养分离COPD患者及对照组外周血中EPCs,采用MTT测定细胞不同时间段的OD值,观察EPCs增殖情况。应用Transwell测定细胞对基质细... 目的:观察慢性阻塞性肺病(COPD)患者外周血中内皮祖细胞(EPCs)增殖、迁移、黏附及小管形成等功能。方法:体外培养分离COPD患者及对照组外周血中EPCs,采用MTT测定细胞不同时间段的OD值,观察EPCs增殖情况。应用Transwell测定细胞对基质细胞衍生因子-1(SDF-1)的迁移能力。通过对细胞HUVEC的黏附及late-EPCs小管形成实验判断COPD患者外周血中EPCs对血管内皮的修复能力,并用NOS/SCID下肢股动脉内皮损伤模型观察患者EPCs修复功能。结果:COPD患者的EPCs和对照组单个集落细胞数量分别是22.0±7.0、62.0±12.9(100倍,10个随机视野),两者存在明显差异(P<0.001)。细胞迁移实验中发现,COPD患者组early-EPCs对SDF-1迁移细胞数量明显少于对照组,两组迁移的细胞数量分别是0.425×104、0.775×104(P=0.039),通过流式分析发现COPD患者组early-EPCs表达C-X-C家族趋化因子受体4(CXCR4)数量较对照组少,两者分别是(55.1±9.9)%、(91.5±6.7)%。Late-EPCs对HUVECs形成小管黏附实验中,两者有明显差异(P<0.001),分别是26.4±8.1、35.2±7.3/×10(10随机视野)。小管成形实验中,COPD患者的late-EPCs不能形成完整的小管;动物在体实验中发现,COPD患者组late-EPCs在受损血管处黏附较对照组少。结论:COPD患者外周血中EPCs增殖、迁移、黏附等功能降低,血管形成功能异常。 展开更多

关键词 慢性阻塞性肺病 心血管疾病 内皮祖细胞 c-x-c家族趋化因子受体4

在线阅读 下载PDF 职称材料

补阳还五汤促进内皮祖细胞修复损伤血管内皮 被引量：16

14

作者 张伟 贺冰 +4 位作者 李亮 李菲 曹浪 刘晓丹 邓常清 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1969-1974,共6页

目的:探讨补阳还五汤(BYHWD)促进内皮祖细胞(EPCs)修复损伤血管内皮的作用及相关机制。方法:以补阳还五汤灌胃及EPCs尾静脉输注作用于内皮损伤的模型大鼠,从血管内皮的形态、功能和EPCs归巢等方面评价内皮损伤修复情况;从血管内环境改... 目的:探讨补阳还五汤(BYHWD)促进内皮祖细胞(EPCs)修复损伤血管内皮的作用及相关机制。方法:以补阳还五汤灌胃及EPCs尾静脉输注作用于内皮损伤的模型大鼠,从血管内皮的形态、功能和EPCs归巢等方面评价内皮损伤修复情况;从血管内环境改善和基质细胞衍生因子-1(SDF-1)及其受体趋化因子受体-4相关蛋白表达了解该方促进EPCs修复受损血管的机制。结果:与单用EPCs组和单用BYHWD组比较,BYHWD联合EPCs组内膜厚度明显减少,甘油三酯、总胆固醇及血钙含量降低,高密度脂蛋白含量升高;此外,BYHWD联合EPCs组血管内皮型一氧化氮合酶(e NOS)及血管SDF-1蛋白表达均显著增加。结论:补阳还五汤能促进EPCs修复损伤的血管内皮,其作用机制可能与调控内环境以及促进EPCs的归巢有关。 展开更多

关键词 补阳还五汤 内皮祖细胞 血管内皮 内皮型一氧化氮合酶 基质细胞衍生因子-1 趋化因子受体-4

在线阅读 下载PDF 职称材料