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C群脑膜炎奈瑟菌外膜蛋白NhhA重组载体pASK-IBA37plus-nhhA的构建
1
作者
刘艳超
李旭红
+3 位作者
王明晓
崔萌
王海生
高玉敏
《科学技术与工程》
北大核心
2018年第11期31-36,共6页
构建C群脑膜炎奈瑟菌外膜蛋白Nhh A重组载体p ASK-IBA37plus-nhh A。以脑膜炎奈瑟菌C群菌株为实验材料,根据Gene Bank上的已知序列设计引物,通过聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增C群脑膜炎奈瑟菌外膜蛋白Nhh A基因(nhh...
构建C群脑膜炎奈瑟菌外膜蛋白Nhh A重组载体p ASK-IBA37plus-nhh A。以脑膜炎奈瑟菌C群菌株为实验材料,根据Gene Bank上的已知序列设计引物,通过聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增C群脑膜炎奈瑟菌外膜蛋白Nhh A基因(nhh A)。将nhh A与p ASK-IBA37 plus质粒用EcoRI,Xho I进行双酶切并尝试不同条件进行连接;连接产物实现在大肠杆菌TOP10感受态细胞中的转化。使用验证质粒图谱初筛和PCR与EcoRI,Xho I双酶切双重验证法复筛的方式筛选p ASKIBA37plus-nhh A阳性转化子。最后将构建好的p ASK-IBA37plus-nhh A进行基因测序。成功构建C群脑膜炎奈瑟菌外膜蛋白Nhh A重组载体p ASK-IBA37plus-nhh A,同时发现nhh A与p ASK-IBA37plus摩尔数之比为5.1、连接体系20μL、DNA终浓度为1.7 ng/μL时,获得的转化子阳性率能达到18.8%,且转化子菌落总数数量适中,方便后续筛检。同时,测序得到1 797 bp的nhh A序列信息,在Gen Bank上进行序列相似性比对,发现该基因与脑膜炎奈瑟菌NGH38的外膜蛋白GNA992(Neisseria meningitidis strain NGH38 outer membrane protein GNA992)基因的相似性为98%。
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关键词
c群脑膜炎奈瑟菌
外膜蛋白NhhA
nhhA
外源表达载体pASK-IBA37plus-nhhA
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职称材料
美国《Emerging Infectious Diseases》2015年第21卷第6期有关人兽共患病论文摘译
被引量:
1
2
作者
林丽
潘蕴蛟
陈亮
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第8期782-782,F0003,共2页
P925 1978-2013年中国ST-4821克隆群B群脑膜炎奈瑟菌的研究分析//Bingqing Zhu,Zheng Xu,Pengcheng Du,等在中国,B群脑膜炎奈瑟菌分离株数量正在逐年增加,它与2003年首次报告的高侵袭性C群脑膜炎奈瑟菌同属于ST-4821克隆群(CC4821)。...
P925 1978-2013年中国ST-4821克隆群B群脑膜炎奈瑟菌的研究分析//Bingqing Zhu,Zheng Xu,Pengcheng Du,等在中国,B群脑膜炎奈瑟菌分离株数量正在逐年增加,它与2003年首次报告的高侵袭性C群脑膜炎奈瑟菌同属于ST-4821克隆群(CC4821)。我们鉴定了CC4821中48株B群和214株C群菌株的外膜蛋白基因。
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关键词
Diseases
人兽共患病
c群脑膜炎奈瑟菌
论文摘译
美国
外膜蛋白基因
B
群
侵袭性
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职称材料
题名
C群脑膜炎奈瑟菌外膜蛋白NhhA重组载体pASK-IBA37plus-nhhA的构建
1
作者
刘艳超
李旭红
王明晓
崔萌
王海生
高玉敏
机构
内蒙古医科大学公共卫生学院
石药集团中奇制药技术(石家庄)有限公司
内蒙古医科大学基础医学院
出处
《科学技术与工程》
北大核心
2018年第11期31-36,共6页
基金
内蒙古自然基金(2015MS0828)
内蒙古医科大学"科技百万工程"资助重大项目(YKD2014KJBW004)
+1 种基金
内蒙古医科大学中青年人才团队项目(NYTD-2015009)资助
内蒙古自治区留学人员科技活动项目(1410006)
文摘
构建C群脑膜炎奈瑟菌外膜蛋白Nhh A重组载体p ASK-IBA37plus-nhh A。以脑膜炎奈瑟菌C群菌株为实验材料,根据Gene Bank上的已知序列设计引物,通过聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增C群脑膜炎奈瑟菌外膜蛋白Nhh A基因(nhh A)。将nhh A与p ASK-IBA37 plus质粒用EcoRI,Xho I进行双酶切并尝试不同条件进行连接;连接产物实现在大肠杆菌TOP10感受态细胞中的转化。使用验证质粒图谱初筛和PCR与EcoRI,Xho I双酶切双重验证法复筛的方式筛选p ASKIBA37plus-nhh A阳性转化子。最后将构建好的p ASK-IBA37plus-nhh A进行基因测序。成功构建C群脑膜炎奈瑟菌外膜蛋白Nhh A重组载体p ASK-IBA37plus-nhh A,同时发现nhh A与p ASK-IBA37plus摩尔数之比为5.1、连接体系20μL、DNA终浓度为1.7 ng/μL时,获得的转化子阳性率能达到18.8%,且转化子菌落总数数量适中,方便后续筛检。同时,测序得到1 797 bp的nhh A序列信息,在Gen Bank上进行序列相似性比对,发现该基因与脑膜炎奈瑟菌NGH38的外膜蛋白GNA992(Neisseria meningitidis strain NGH38 outer membrane protein GNA992)基因的相似性为98%。
关键词
c群脑膜炎奈瑟菌
外膜蛋白NhhA
nhhA
外源表达载体pASK-IBA37plus-nhhA
Keywords
serogroup
c
Neisseriameningitidis
outer membrane protein NhhA
nhhA re
c
ombinant plasmid pASK-IBA37plus-nhhA
分类号
Q812 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
美国《Emerging Infectious Diseases》2015年第21卷第6期有关人兽共患病论文摘译
被引量:
1
2
作者
林丽
潘蕴蛟
陈亮
机构
福建省疾病预防控制中心
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第8期782-782,F0003,共2页
文摘
P925 1978-2013年中国ST-4821克隆群B群脑膜炎奈瑟菌的研究分析//Bingqing Zhu,Zheng Xu,Pengcheng Du,等在中国,B群脑膜炎奈瑟菌分离株数量正在逐年增加,它与2003年首次报告的高侵袭性C群脑膜炎奈瑟菌同属于ST-4821克隆群(CC4821)。我们鉴定了CC4821中48株B群和214株C群菌株的外膜蛋白基因。
关键词
Diseases
人兽共患病
c群脑膜炎奈瑟菌
论文摘译
美国
外膜蛋白基因
B
群
侵袭性
分类号
R563 [医药卫生—呼吸系统]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
C群脑膜炎奈瑟菌外膜蛋白NhhA重组载体pASK-IBA37plus-nhhA的构建
刘艳超
李旭红
王明晓
崔萌
王海生
高玉敏
《科学技术与工程》
北大核心
2018
0
在线阅读
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职称材料
2
美国《Emerging Infectious Diseases》2015年第21卷第6期有关人兽共患病论文摘译
林丽
潘蕴蛟
陈亮
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2015
1
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职称材料
已选择
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