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C型产气荚膜梭菌α、β_1、β_2毒素基因融合及免疫原性研究 被引量:6
1
作者 许崇波 陈向东 +2 位作者 许崇利 逄越 高凤山 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期379-384,共6页
为了构建具有良好免疫原性的α-β1-β2融合蛋白,利用PCR技术,从含C型产气荚膜梭菌α毒素基因的克隆质粒pETXA1中扩增出0.95 kbα毒素基因,将其连接到经NcoⅠ单酶切并用碱性磷酸酶处理的含1.65 kbβ1-β2融合基因的重组质粒pETXB1B2上,... 为了构建具有良好免疫原性的α-β1-β2融合蛋白,利用PCR技术,从含C型产气荚膜梭菌α毒素基因的克隆质粒pETXA1中扩增出0.95 kbα毒素基因,将其连接到经NcoⅠ单酶切并用碱性磷酸酶处理的含1.65 kbβ1-β2融合基因的重组质粒pETXB1B2上,构建含2.6 kbα-β1-β2融合基因的表达质粒重组菌株BL21(DE3)(pETXAB1B2).经酶切鉴定和序列测定证实,构建的重组质粒pETXAB1B2含有α-β1-β2融合基因,且基因序列和阅读框架正确.经ELISA检测,重组菌株表达的α-β1-β2融合蛋白能够被α、β1和β2毒素抗体识别.表达优化结果表明,以IPTG为诱导剂诱导α-β1-β2融合基因表达的优化条件是:培养基pH 7.5,培养温度37℃,IPTG浓度0.4 mmol?L-1,菌体生长密度OD600达到1.0时加入IPTG,诱导时间5 h,此时α-β1-β2融合蛋白表达量为31.2%.免疫试验结果表明,α-β1-β2融合蛋白免疫的小鼠可以抵抗1MLD(最小致死量,minimum lethal dose)C型产气荚膜梭菌标准株C59-44毒素攻击,表明构建的重组菌株可以作为预防仔猪红痢基因工程亚单位苗的候选菌株. 展开更多
关键词 c型产气荚膜梭菌 Α毒素基因 β1毒素基因 β2毒素基因 融合蛋白 免疫原性
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羊源C型产气荚膜梭菌的分离鉴定、药敏试验及免疫治疗 被引量:11
2
作者 叶宝宏 冯平 +1 位作者 许信刚 付明哲 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期960-965,共6页
从陕北某绵羊养殖场猝死绵羊的肝脏和脾脏中分离得到1株细菌,通过细菌培养特性、菌体形态、菌落特征、染色特性、生化试验、外毒素测定、毒素类型的PCR检测和药敏试验等鉴定,结果表明,该分离菌为革兰氏阳性大杆菌,生长特性和生化试验结... 从陕北某绵羊养殖场猝死绵羊的肝脏和脾脏中分离得到1株细菌,通过细菌培养特性、菌体形态、菌落特征、染色特性、生化试验、外毒素测定、毒素类型的PCR检测和药敏试验等鉴定,结果表明,该分离菌为革兰氏阳性大杆菌,生长特性和生化试验结果符合产气荚膜梭菌的所有特点;该菌可产生致小白鼠死亡的外毒素,PCR检测结果证实外毒素为α毒素和β毒素;药敏试验结果表明,该菌对环丙沙星、诺氟沙星等抗生素高度敏感,对庆大霉素、卡那霉素等抗生素不敏感。表明该菌为引起绵羊猝狙的C型产气荚膜梭菌,用羊梭菌疫苗紧急免疫羊群并配合应用抗生素治疗能有效控制该病的流行。 展开更多
关键词 绵羊 c型产气荚膜梭菌 分离鉴定 毒素 药敏试验
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C型产气荚膜梭菌致麋鹿死亡病例 被引量:8
3
作者 刘燕 李伟杰 +5 位作者 普天春 赵京 阎鹤 杨明海 原蕾 张成林 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2012年第4期81-82,共2页
2011年初,本园饲养于十三陵繁育基地的多只麋鹿出现猝死,剖检后发现多处脏器出血严重。心血涂片见到革兰阳性呈短链大杆菌。肠内容物涂片也见到大量可形成芽孢的革兰阳性菌,厌氧环境下培养出大量产气荚膜梭菌,经PCR鉴定其血清型为C型。... 2011年初,本园饲养于十三陵繁育基地的多只麋鹿出现猝死,剖检后发现多处脏器出血严重。心血涂片见到革兰阳性呈短链大杆菌。肠内容物涂片也见到大量可形成芽孢的革兰阳性菌,厌氧环境下培养出大量产气荚膜梭菌,经PCR鉴定其血清型为C型。报告如下。1发病及剖检情况本园饲养于十三陵的麋鹿处于半散养状态,这些麋鹿死前膘情都比较好。本次麋鹿发病非常急,几乎可以说死前没有观察到任何症状,并且3d内该群的麋鹿死亡数量过半。剖检发现各脏器出血严重。整个肠道黏膜充血,特别是小肠充血、出血,黏膜脱落,肠系膜血管努张,肠系膜淋巴结肿胀、充血,出现血灌肠现象。 展开更多
关键词 c型产气荚膜梭菌 麋鹿 死亡病例 肠系淋巴结 肠道黏 PcR鉴定 繁育基地 肠内容物
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仔猪大肠杆菌病、C型产气荚膜梭菌病二联灭活疫苗的研制与应用 被引量:11
4
作者 刘泽文 袁芳艳 +6 位作者 刘威 周丹娜 段正赢 郭锐 杨克礼 田永祥 阮征 《动物医学进展》 北大核心 2018年第6期24-28,共5页
为了研制仔猪大肠杆菌病、C型产气荚膜梭菌病二联灭活疫苗,将大肠埃希菌C83549(K88)、C83644(K99)、C83710(987P)菌株和C型产气荚膜梭菌C59-2菌株分别接种适宜培养基,提取大肠埃希菌纤毛和C型产气荚膜梭菌外毒素,灭活和脱毒后加入冻干... 为了研制仔猪大肠杆菌病、C型产气荚膜梭菌病二联灭活疫苗,将大肠埃希菌C83549(K88)、C83644(K99)、C83710(987P)菌株和C型产气荚膜梭菌C59-2菌株分别接种适宜培养基,提取大肠埃希菌纤毛和C型产气荚膜梭菌外毒素,灭活和脱毒后加入冻干保护剂,冷冻干燥制成冻干灭活疫苗。该疫苗性状为类白色海绵状疏松团块,无菌检验合格,疫苗对仔猪和怀孕母猪安全,怀孕母猪免疫该疫苗后所产仔猪对大肠埃希菌和C型产气荚膜梭菌的攻毒保护率均在80%以上。临床应用结果表明,该疫苗能明显提高免疫母猪的窝平仔猪成活数。 展开更多
关键词 大肠埃希 c型产气荚膜梭菌 二联灭活疫苗 研制与应用
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仔猪大肠埃希氏菌、C型产气荚膜梭菌的灭活及脱毒方法研究 被引量:2
5
作者 刘泽文 邓均华 +6 位作者 杨克礼 梁望旺 伍锐 段正赢 周丹娜 田永祥 徐涤平 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第20期10702-10703,10728,共3页
[目的]研究仔猪大肠埃希氏菌病、C型产气荚膜梭菌病二联灭活疫苗的质量及产品的安全性。[方法]对大肠埃希氏菌和C型产气荚膜梭菌浓缩菌液,用不同浓度甲醛溶液经不同灭活时间、灭活温度进行了灭活和脱毒试验。[结果]大肠埃希氏菌培养物... [目的]研究仔猪大肠埃希氏菌病、C型产气荚膜梭菌病二联灭活疫苗的质量及产品的安全性。[方法]对大肠埃希氏菌和C型产气荚膜梭菌浓缩菌液,用不同浓度甲醛溶液经不同灭活时间、灭活温度进行了灭活和脱毒试验。[结果]大肠埃希氏菌培养物在37~38℃条件下用0.4%的甲醛溶液灭活48h,可以使细菌全部灭活;C型产气荚膜梭菌培养物在37~38℃,采用0.5%~0.8%的甲醛溶液进行灭活和脱毒7~14d,或者采用2次灭活和脱毒方法,7d可以达到完全灭活和脱毒。[结论]在37~38℃条件下,用0.4%的甲醛溶液对大肠埃希氏菌培养物灭活和采用0.5%~0.8%的甲醛溶液对C型产气荚膜梭菌进行灭活和脱毒,可以达到理想效果。 展开更多
关键词 大肠埃希氏 c型产气荚膜梭菌 灭活 脱毒
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C型产气荚膜梭菌实验感染仔猪肠道circRNA的表达特征 被引量:2
6
作者 黄晓宇 杨巧丽 +3 位作者 闫尊强 王鹏飞 石海仁 滚双宝 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期4058-4070,共13页
circRNAs在病原菌感染宿主的肠道疾病发展中具有重要的调控作用。C型产气荚膜梭菌(C.perfringens type C)是引起仔猪腹泻及相关肠道炎症的主要细菌之一,对产业造成了严重的经济损失。然而,目前有关circRNAs如何调控仔猪C型产气荚膜梭菌... circRNAs在病原菌感染宿主的肠道疾病发展中具有重要的调控作用。C型产气荚膜梭菌(C.perfringens type C)是引起仔猪腹泻及相关肠道炎症的主要细菌之一,对产业造成了严重的经济损失。然而,目前有关circRNAs如何调控仔猪C型产气荚膜梭菌性腹泻的全面且系统的研究未见报道。本研究通过RNA高通量测序研究分析了C型产气荚膜梭菌感染的7日龄仔猪回肠组织circRNAs的表达谱,筛选差异表达circRNAs,并进行差异表达基因GO和KEGG功能富集分析,利用miRanda等软件预测circRNA的microRNA靶点,构建circRNA-miRNA-mRNA的互作网络,并进行qPCR验证。结果显示,在C型产气荚膜梭菌感染的处理组(TI组)和对照组(CI组)中共鉴定出3162个circRNAs,其中差异表达circRNAs有694个,上调表达circRNAs有404个,下调表达circRNAs有290个。功能富集分析结果表明,差异表达circRNAs的亲本基因主要富集在细胞周期、TGF-β信号通路、赖氨酸降解、Wnt信号通路、T细胞受体信号通路、MAPK信号通路等,调节仔猪对产气荚膜梭菌感染的抗性反应。此外,本研究构建了与C型产气荚膜梭菌感染致仔猪腹泻相关的circRNA-miRNA-mRNA互作网络,发现8 circRNAs-5 miRNAs-12 mRNAs组成的ceRNA网络与产气荚膜梭菌感染性疾病密切相关。本试验可为深入研究circRNA调控仔猪C型产气荚膜梭菌性腹泻疾病及猪抗腹泻病品系培育提供参考。 展开更多
关键词 仔猪腹泻 c型产气荚膜梭菌 circRNA 炎性反应 抗性
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仔猪大肠杆菌·C型产气荚膜梭菌菌液的培养工艺 被引量:2
7
作者 刘泽文 袁芳艳 +5 位作者 周丹娜 梁望旺 段正赢 杨克礼 徐涤平 田永祥 《安徽农业科学》 CAS 2012年第17期9276-9277,9279,共3页
[目的]研究仔猪大肠杆菌、C型产气荚膜梭菌菌液的培养工艺。[方法]分别试验不同的培养时间、培养温度和接种剂量对大肠杆菌纤毛表达量和C型产气荚膜梭菌产生毒素的影响。[结果]大肠杆菌在接种剂量为3%~5%,在36~37℃条件下培养7 h,可... [目的]研究仔猪大肠杆菌、C型产气荚膜梭菌菌液的培养工艺。[方法]分别试验不同的培养时间、培养温度和接种剂量对大肠杆菌纤毛表达量和C型产气荚膜梭菌产生毒素的影响。[结果]大肠杆菌在接种剂量为3%~5%,在36~37℃条件下培养7 h,可产生较高含量的纤毛抗原;当接种剂量为1%~2%,C型产气荚膜梭菌C59-2菌株在35℃条件下培养16~20 h,可产生大量致死性毒素。[结论]该研究为研制具有较好效果的仔猪红痢、黄痢预防疫苗提供了依据。 展开更多
关键词 大肠杆 c型产气荚膜梭菌 培养工艺 抗原含量 仔猪红痢 仔猪黄痢
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猪C型产气荚膜梭菌的分离与鉴定 被引量:4
8
作者 刘泽文 袁芳艳 +5 位作者 刘威 田永祥 周丹娜 杨克礼 段正赢 郭锐 《湖北农业科学》 2016年第23期6190-6191,6280,共3页
为了摸清引起湖北某猪场3日龄内仔猪以出血性下痢、死亡率高的疾病病因,经病料涂片镜检、培养基接种、生化试验和血清型鉴定,诊断为C型产气荚膜梭菌感染,该菌厌气肉肝汤培养物上清0.001 m L可引起小鼠全部死亡,具有较强的毒力。
关键词 仔猪 c型产气荚膜梭菌 分离与鉴定
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C型产气荚膜梭菌类毒素疫苗的制备及抗体效价研究 被引量:4
9
作者 樊金 刘雪慧 +2 位作者 郭梦娇 刘萌萌 柴同杰 《山东农业科学》 2015年第10期95-98,101,共5页
为制备具有高效保护力的C型产气荚膜梭菌类毒素疫苗,利用C型产气荚膜梭菌标准菌株(NCTC 3180)所产外毒素经甲醛灭活并加入佐剂乳化后制备该疫苗。参照《中华人民共和国兽用生物制品质量标准》分别对疫苗进行了安全性检验、无菌检验和免... 为制备具有高效保护力的C型产气荚膜梭菌类毒素疫苗,利用C型产气荚膜梭菌标准菌株(NCTC 3180)所产外毒素经甲醛灭活并加入佐剂乳化后制备该疫苗。参照《中华人民共和国兽用生物制品质量标准》分别对疫苗进行了安全性检验、无菌检验和免疫效力检验。分别在分娩前30天和15天免疫接种怀孕母猪,通过间接ELISA和毒素中和试验评估母猪初乳和14日龄仔猪血液中抗体效价水平。结果显示,母猪初乳和仔猪血清中抗毒素效价分别为1∶3200和1∶1600,母猪初乳和仔猪血清中的中和效价均为1∶6。表明制备的类毒素疫苗效价高并安全可靠,免疫实验动物后能对母体和其所产幼畜起到一定的保护作用。 展开更多
关键词 c型产气荚膜梭菌类毒素疫苗 怀孕母猪 仔猪 抗体效价
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C型产气荚膜梭菌不同菌株交叉免疫保护力研究 被引量:2
10
作者 刘泽文 曹宏云 +8 位作者 杨前平 邓均华 杨克礼 梁望旺 伍锐 段正赢 周丹娜 田永祥 徐涤平 《湖北农业科学》 北大核心 2010年第9期2184-2185,2201,共3页
将C型产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)C59-2、C59-37和C59-383种菌株分别制备成灭活疫苗,分别免疫小白鼠和家兔,2周后分别用不同菌株的致死性毒素进行攻击。结果表明,C型产气荚膜梭菌不同菌株制备的灭活疫苗免疫小白鼠和家兔后,... 将C型产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)C59-2、C59-37和C59-383种菌株分别制备成灭活疫苗,分别免疫小白鼠和家兔,2周后分别用不同菌株的致死性毒素进行攻击。结果表明,C型产气荚膜梭菌不同菌株制备的灭活疫苗免疫小白鼠和家兔后,可使小白鼠和家兔能抵抗其他菌株致死性毒素的攻击,小白鼠保护数在7/8以上,家兔保护数也均在3/4以上。说明C型产气荚膜梭菌不同菌株之间具有较好的交叉免疫保护作用。 展开更多
关键词 c型产气荚膜梭菌 不同 交叉保护
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C型产气荚膜梭菌β毒素蛋白结构及抗原表位预测 被引量:2
11
作者 冶贵生 韩志辉 +1 位作者 马玉花 贾跃宁 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期12-16,共5页
利用DNASTAR、I-Tasser软件对C型产气荚膜梭菌β毒素的蛋白结构、抗原表位进行预测与分析.综合β毒素蛋白亲水性、表面可能性、抗原指数、二级结构预测结果显示,B细胞抗原表位可能位于肽链2-4、7-16、23-26、36-40、55-58、72-75、172-... 利用DNASTAR、I-Tasser软件对C型产气荚膜梭菌β毒素的蛋白结构、抗原表位进行预测与分析.综合β毒素蛋白亲水性、表面可能性、抗原指数、二级结构预测结果显示,B细胞抗原表位可能位于肽链2-4、7-16、23-26、36-40、55-58、72-75、172-179、190-193、196-203、211-214、246-249位氨基酸区域;结合三级结构预测结果显示,190-193、211-214成为表位的可能性较大. 展开更多
关键词 c型产气荚膜梭菌 Β毒素 表位 蛋白结构
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表面展示C型产气荚膜梭菌α,β毒素蛋白重组乳酸菌的构建及反应原性分析 被引量:2
12
作者 李超 刘孟宇 +2 位作者 刘琼 王春凤 倪宏波 《黑龙江八一农垦大学学报》 2019年第6期23-28,共6页
构建表达C型产气荚膜梭菌α,β1和β2毒素蛋白的重组乳酸菌,并对表达蛋白反应原性进行鉴定。通过PCR构建pSIP409-pgsA’-α,pSIP409-pgsA’-β1以及pSIP409-pgsA’-β2质粒,并将三种质粒电转入植物乳杆菌NC8后诱导表达,通过Western-blo... 构建表达C型产气荚膜梭菌α,β1和β2毒素蛋白的重组乳酸菌,并对表达蛋白反应原性进行鉴定。通过PCR构建pSIP409-pgsA’-α,pSIP409-pgsA’-β1以及pSIP409-pgsA’-β2质粒,并将三种质粒电转入植物乳杆菌NC8后诱导表达,通过Western-blot和间接免疫荧光检测目的蛋白的表达情况。构建的NC8-pSIP409-pgsA’-α,NC8-pSIP409-pgsA’-β1以及NC8-p SIP 409-pgsA’-β2三种重组乳酸菌能成功表达C型产气荚膜梭菌α,β1和β2毒素蛋白,三种表达的融合蛋白大小分别为61 kDa、52 kDa以及46 kDa。三种重组乳酸菌表达了C型产气荚膜梭菌α,β1和β2毒素蛋白且与制备的多抗具有良好的反应原性,为C型产气荚膜梭菌口服疫苗的研制奠定基础。 展开更多
关键词 pSIP409-pgsA’ c型产气荚膜梭菌 重组乳酸 反应原性
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不同诱导剂及培养条件对C型产气荚膜梭菌β_2毒素基因表达的影响 被引量:1
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作者 许崇利 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第10期1822-1827,共6页
对产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)β2毒素基因的表达载体p ETXB2进行限制性核酸内切酶酶切鉴定,并用SDS-PAGE检测了不同培养条件下,该毒素基因在埃希氏大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)工程菌株中的表达情况。结果表明,p ET... 对产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)β2毒素基因的表达载体p ETXB2进行限制性核酸内切酶酶切鉴定,并用SDS-PAGE检测了不同培养条件下,该毒素基因在埃希氏大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)工程菌株中的表达情况。结果表明,p ETXB2重组质粒中的β2毒素基因位于p ET-28c(+)表达盒中,且阅读框架和基因序列正确。以IPTG为诱导剂时,重组菌株BL21(DE3)(p ETXB2)的最佳培养条件为37℃,p H7.0,IPTG终浓度0.8 mmol·L-1,诱导4 h;以乳糖为诱导剂时,其最佳培养条件为37℃,p H 7.0,乳糖终浓度0.5 g·L-1,诱导5 h。 展开更多
关键词 c型产气荚膜梭菌 β2毒素 IPTG 乳糖
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C型产气荚膜梭菌α毒素基因核苷酸序列的测定与分析 被引量:1
14
作者 冶贵生 张龙刚 康耀鹏 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第32期19681-19683,共3页
[目的]研究C型产气荚膜梭菌α毒素基因核苷酸序列的遗传变异特点。[方法]设计产气荚膜梭菌α毒素基因特异性引物进行PCR扩增,扩增产物纯化后测定核苷酸序列并与NCBI登录的参考序列通过DNAStar软件进行同源比对。[结果]序列分析表明,所... [目的]研究C型产气荚膜梭菌α毒素基因核苷酸序列的遗传变异特点。[方法]设计产气荚膜梭菌α毒素基因特异性引物进行PCR扩增,扩增产物纯化后测定核苷酸序列并与NCBI登录的参考序列通过DNAStar软件进行同源比对。[结果]序列分析表明,所测菌株α毒素基因核苷酸组成中腺苷酸含量较高,胞苷酸含量较低。所测菌株与13、C57-1、CER 89L43、S01、S08、T01以及T16菌株的核苷酸序列同源性分别为98.7%、98.7%、98.6%、98.8%、98.7%、97.0%、98.6%,推导的氨基酸序列同源性分别为98.6%、98.6%、98.9%、98.9%、98.9%、98.6%、98.6%。[结论]所测C型产气荚膜梭菌α毒素基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列与参考序列同源性均较高。 展开更多
关键词 c型产气荚膜梭菌 Α毒素 同源性
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C型产气荚膜梭菌产α毒素能力分析及免疫原性试验研究 被引量:1
15
作者 李生庆 张西云 +7 位作者 胡国元 阿宝地 刘怀新 韩生义 李长云 祁果 李淑萍 石田 《青海畜牧兽医杂志》 2021年第6期5-10,共6页
利用16S rRNA分子鉴定技术对病死羊体内分离的19株野毒株产气荚膜梭菌进行了分子生物学鉴定,从中筛选出产毒素稳定的一株C型产气荚膜梭菌(海C1株),并通过优化培养基配方及培养方式提高其产毒素能力,最终利用该菌株研制了羊猝疽灭活疫苗... 利用16S rRNA分子鉴定技术对病死羊体内分离的19株野毒株产气荚膜梭菌进行了分子生物学鉴定,从中筛选出产毒素稳定的一株C型产气荚膜梭菌(海C1株),并通过优化培养基配方及培养方式提高其产毒素能力,最终利用该菌株研制了羊猝疽灭活疫苗,完成了疫苗对家兔及羊的效力试验。结果显示,该菌株与现用羊瘁狙疫苗生产株分子系统发育树亲缘关系较近;该菌株(海C1株)在含1.0%葡萄糖,pH 8.4~8.6的VF培养基中36℃3~6h产毒最高可达7000 MLD/mL;利用该菌株研制的灭活菌苗对家兔的免疫保护力是1~1.5 MLD/mL(家兔静注),对绵羊的免疫保护力是4~16 MLD/mL(绵羊静注)。免疫羊血清抗体效价达8~12 MLD/mL(小鼠静注)。该菌株具有较强的产毒稳定性和较好的免疫原性,可作为羊猝疽疫苗生产备选菌株。 展开更多
关键词 c型产气荚膜梭菌 分子鉴定 毒试验 免疫原性
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仔猪大肠杆菌和C型产气荚膜梭菌的毒力研究 被引量:1
16
作者 刘泽文 袁芳艳 +5 位作者 田永祥 周丹娜 杨克礼 段正赢 郭锐 罗碧毅 《湖北畜牧兽医》 2013年第3期29-31,共3页
为了确定不同纤毛抗原的猪大肠杆菌和C型产气荚膜梭菌引起试验动物发病的最小菌(毒)含量,用不同菌数的E.coliC83549(K88)、C83644(K99)和C83710(987P)菌株培养物对出生18~24h的仔猪进行攻毒,用不同毒素含量的C型产气荚膜梭菌毒素分别... 为了确定不同纤毛抗原的猪大肠杆菌和C型产气荚膜梭菌引起试验动物发病的最小菌(毒)含量,用不同菌数的E.coliC83549(K88)、C83644(K99)和C83710(987P)菌株培养物对出生18~24h的仔猪进行攻毒,用不同毒素含量的C型产气荚膜梭菌毒素分别对出生18~24h的仔猪和家兔进行攻毒。结果表明,引起仔猪发病的大肠杆菌三种菌株的最低含量均为150×108CFU,C型产气荚膜梭菌引起1日龄仔猪和家兔发病的最低毒素含量分别75和80小鼠MLD。 展开更多
关键词 大肠杆 c型产气荚膜梭菌 毒力试验
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IPTG诱导剂对C型产气荚膜梭菌β_2毒素基因表达的影响 被引量:1
17
作者 许崇利 《湖北农业科学》 2016年第3期749-753,共5页
对已构建的含β2毒素基因重组质粒p ETXB2进行限制性核酸内切酶酶切鉴定,并用SDS-PAGE检测不同培养条件下β2毒素基因的表达情况。经酶切鉴定证实,p ETXB2重组质粒含有β2毒素基因而且阅读框架和基因序列正确。同时采用IPTG诱导剂在改... 对已构建的含β2毒素基因重组质粒p ETXB2进行限制性核酸内切酶酶切鉴定,并用SDS-PAGE检测不同培养条件下β2毒素基因的表达情况。经酶切鉴定证实,p ETXB2重组质粒含有β2毒素基因而且阅读框架和基因序列正确。同时采用IPTG诱导剂在改变培养基的p H、培养温度、诱导剂的加入量及诱导时间4个方面对β2毒素基因表达进行调控,其最佳的表达条件是37℃,p H 7.0的培养基中,用终浓度为0.8 mmol/L IPTG诱导4 h,β2毒素蛋白的表达效果最好。 展开更多
关键词 c型产气荚膜梭菌 β2毒素基因 优化表达
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仔猪大肠埃希氏菌病、C型产气荚膜梭菌病二联灭活疫苗的效力和安全试验
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作者 邓均华 刘泽文 +7 位作者 杨克礼 梁望旺 伍锐 段正赢 周丹娜 郭锐 徐涤平 田永祥 《湖北农业科学》 北大核心 2010年第12期3133-3136,共4页
将带有K88、K99和987P纤毛抗原的大肠埃希氏菌(Escherichia coli)菌株(C83549、C83644和C83710)和免疫原性良好的C型产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens type C)菌株(C59-2、C59-37和C59-38)第10代基础种子制备的原液进行浓缩、甲醛... 将带有K88、K99和987P纤毛抗原的大肠埃希氏菌(Escherichia coli)菌株(C83549、C83644和C83710)和免疫原性良好的C型产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens type C)菌株(C59-2、C59-37和C59-38)第10代基础种子制备的原液进行浓缩、甲醛溶液灭活和脱毒后,按抗原含量,加氢氧化铝胶制成3批二联灭活疫苗。经过对免疫怀孕母猪所产仔猪的攻毒测定,得到疫苗最小的免疫剂量为每头2mL,确定使用剂量为每头4mL。疫苗的免疫攻毒试验结果表明,疫苗在怀孕母猪中采用颈部肌肉注射进行免疫,二次免疫才能使仔猪通过吮吸初乳获得80%以上的被动免疫保护能力,与单苗具有相似的免疫保护力;单剂量、单剂量重复和超剂量的安全性试验结果显示,3批二联灭活疫苗不会引起母猪的全身不良反应和明显的局部反应,无流产,胎儿发育完全正常。 展开更多
关键词 大肠埃希氏 c型产气荚膜梭菌 二联灭活疫苗 效力试验
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C型产气荚膜梭菌生产用菌种种子批的建立与鉴定
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作者 刘泽文 袁芳艳 +6 位作者 刘威 高婷 周丹娜 杨克礼 郭锐 李畅 田永祥 《湖北农业科学》 2022年第22期115-118,共4页
为建立C型产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)生产用菌种种子批,以C型产气荚膜梭菌C59-2株第2代基础种子作为原始种子,对原始种子通过接种改良厌气肉肝汤和肉肝胃酶消化汤连续传代至第13代,分别对基础种子1代(F1)、第5代(F5)、第10... 为建立C型产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)生产用菌种种子批,以C型产气荚膜梭菌C59-2株第2代基础种子作为原始种子,对原始种子通过接种改良厌气肉肝汤和肉肝胃酶消化汤连续传代至第13代,分别对基础种子1代(F1)、第5代(F5)、第10代(F10)和第13代(F13)基础种子进行纯粹检验、培养特性鉴定、生化特性鉴定、产毒素能力的测定、血清型鉴定、免疫原性鉴定。结果表明,各项指标均合格,可作为仔猪大肠杆菌病、C型产气荚膜梭菌病二联灭活疫苗的生产用菌种用于疫苗的生产,基础种子批定为F1~F10代。 展开更多
关键词 c型产气荚膜梭菌(clostridium perfringens) 种子批 建立 鉴定
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C型产气荚膜梭菌致病机理研究进展 被引量:7
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作者 李凡飞 张云 +3 位作者 李强 赵泽慧 何小丽 许立华 《动物医学进展》 北大核心 2016年第12期82-85,共4页
C型产气荚膜梭菌能够引起人类和一些动物的坏死性肠炎。该菌能产生α外毒素和β外毒素,大部分该菌菌株也能分泌出产气梭菌细胞溶素O(PFO)和TpeL。试验证明β外毒素是C型产气荚膜梭菌的主要致病毒素。在兔子肠襻和小鼠模型试验中发现,通... C型产气荚膜梭菌能够引起人类和一些动物的坏死性肠炎。该菌能产生α外毒素和β外毒素,大部分该菌菌株也能分泌出产气梭菌细胞溶素O(PFO)和TpeL。试验证明β外毒素是C型产气荚膜梭菌的主要致病毒素。在兔子肠襻和小鼠模型试验中发现,通过细胞中同源基因C型产气荚膜梭菌β毒素敲除基因突变株而导致该菌株失去毒力。当野生型β毒素基因补充这些突变体时毒素的活力将会复活。大多数C型产气荚膜梭菌产生的所有毒素(除TpeL外)都易与肠癌(Caco-2)细胞紧密结合并发生反应,比它在体外生长更加迅速。VirS/virR双组分调节系统(TCRS)被证明是在Coca-2细胞中导致β毒素和PFO产生快速上调。当virR基因被抑制时,pfoA和β毒素基因的表达也会受阻,这种系统是可逆的,virR表达时会恢复。通过β毒素作用于动物模型的试验研究,来寻找有效的预防措施。 展开更多
关键词 c型产气荚膜梭菌 Β毒素 致病机制 坏死性肠炎
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