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重组Bowman-Birk型大豆胰蛋白酶抑制剂的性质及抑制机理 被引量:1
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作者 刘利 杨帆 +3 位作者 李素霞 郭奥 刘晓 王之可 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期292-299,共8页
利用大肠杆菌表达系统,成功表达并纯化获得了重组Bowman-Birk型大豆胰蛋白酶抑制剂(rBBTI)。对比研究了天然Bowman-Birk型胰蛋白酶抑制剂(BBTI)和rBBTI的酶学性质和稳定性,以及分别抑制胰蛋白酶和糜蛋白酶的抑制动力学。结果表明:rBBTI... 利用大肠杆菌表达系统,成功表达并纯化获得了重组Bowman-Birk型大豆胰蛋白酶抑制剂(rBBTI)。对比研究了天然Bowman-Birk型胰蛋白酶抑制剂(BBTI)和rBBTI的酶学性质和稳定性,以及分别抑制胰蛋白酶和糜蛋白酶的抑制动力学。结果表明:rBBTI和BBTI都有较好的热稳定性,pH对rBBTI的活性影响较大;rBBTI和BBTI抑制胰蛋白酶和糜蛋白酶的最适条件分别为pH 8、25℃和pH 9、16℃;二者的抑制机理相同,抑制胰蛋白酶时表现为典型的反竞争性抑制作用,而抑制糜蛋白酶时表现为典型的非竞争性抑制作用;rBBTI和BBTI对胰蛋白酶的抑制效率均高于对糜蛋白酶的抑制效率,但rBBTI抑制胰蛋白酶和糜蛋白酶的效率略低于BBTI。 展开更多
关键词 bowman-birk型大豆胰蛋白酶抑制剂 重组表达 抑制动力学 酶学性质
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Bowman-Birk型大豆胰蛋白酶抑制剂研究进展 被引量:15
2
作者 王长良 张永忠 孙志刚 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期757-761,共5页
阐述Bowman-Birk型大豆胰蛋白酶抑制剂(BBI)的分子结构、作用机制,并对其在医药领域、饲料工业及植物抗虫害等方面的研究进展进行了综述和展望。
关键词 大豆胰蛋白酶抑制 分子结构 作用机制
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草鱼丝氨酸蛋白粗酶的提取、酶学特性及大豆胰蛋白酶抑制剂对其活性的影响
3
作者 周佳怡 洪惠 +1 位作者 罗永康 谭雨青 《广东海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期112-118,共7页
【目的】探究草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶(MBSP)粗酶的提取方法、酶学特性,以及大豆胰蛋白酶抑制剂(STI)对草鱼鱼糜凝胶品质的影响,为改善传统草鱼鱼糜制品品质提供理论基础。【方法】从草鱼背肌中提取M... 【目的】探究草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶(MBSP)粗酶的提取方法、酶学特性,以及大豆胰蛋白酶抑制剂(STI)对草鱼鱼糜凝胶品质的影响,为改善传统草鱼鱼糜制品品质提供理论基础。【方法】从草鱼背肌中提取MBSP粗酶液,探究提取过程中漂洗次数(1~5次)、热处理温度(35、40、45、50、55℃)、酸洗脱pH值(pH 4.0、pH 5.5)对提取液酶活性的影响,获得最佳提取条件;设置梯度实验探究所得酶的最适温度、pH、稳定性等酶学特性,最后探究大豆胰蛋白酶抑制剂对粗酶酶活性的影响及其对草鱼鱼糜凝胶性能的调控。【结果及结论】经3次漂洗、45℃热处理、pH 4.0酸洗脱后得到的草鱼MBSP粗酶液酶活性最高(P<0.05);所得MBSP最适pH值在9.0附近,最适温度为45℃,具有较好的温度稳定性(P<0.05),其活性可被Na^(+)在一定程度上抑制且被K+、Ca^(2+)激活(P<0.05);STI添加可以显著改善草鱼鱼糜质构,其对草鱼肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶有可逆竞争性抑制作用,半抑制质量浓度为10.85μg/mL,抑制常数Ki=0.24μmol/L。 展开更多
关键词 草鱼 肌原纤维结合丝氨酸蛋白酶 分离提取 酶学特性 大豆胰蛋白酶抑制
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大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂基因的克隆及其转基因烟草抗虫性初探 被引量:19
4
作者 高越峰 朱祯 +2 位作者 朱玉 肖桂芳 李向辉 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1997年第9期5-9,共5页
从未成熟的大豆子叶中提取总RNA,利用RT-PCR方法扩增出大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂基因单一目的片段,克隆到pBluescriptKS(+)SmaI位点上。序列分析表明,该基因与报导的序列高度同源:其核苷酸序列及推论的编码氨基酸序列的同源... 从未成熟的大豆子叶中提取总RNA,利用RT-PCR方法扩增出大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂基因单一目的片段,克隆到pBluescriptKS(+)SmaI位点上。序列分析表明,该基因与报导的序列高度同源:其核苷酸序列及推论的编码氨基酸序列的同源率分别为99.5%和98.2%。由此,构建了大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂基因的植物高效表达载体pBinSKTI。并采用农杆菌介导的叶盘法转化了烟草,获得的转基因烟草再生植株经抗虫测试表明:与对照烟草相比,具有明显的抗棉铃虫能力。 展开更多
关键词 大豆胰蛋白酶 抑制 抗虫基因 转基因烟草
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大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂(SKTI)研究进展 被引量:8
5
作者 赵洪锟 李启云 +1 位作者 王玉民 庄炳昌 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期218-222,共5页
大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂 (SKTI)是一种典型的丝氨酸蛋白酶抑制剂 ,主要集中在大豆的子叶中。近 60年来 ,对其生化特性及结构已有较多研究 ,通常认为这种蛋白酶抑制剂具有贮藏、调节内源蛋白酶活性及植物防御等作用。研究表明 ,这种... 大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂 (SKTI)是一种典型的丝氨酸蛋白酶抑制剂 ,主要集中在大豆的子叶中。近 60年来 ,对其生化特性及结构已有较多研究 ,通常认为这种蛋白酶抑制剂具有贮藏、调节内源蛋白酶活性及植物防御等作用。研究表明 ,这种蛋白酶抑制剂抗虫谱广 ,能显著抑制幼虫的生长发育不易产生抗性 ,对人畜无害 ,因此对其进行研究及开发利用具有重要的经济和社会效益。迄今为止 ,至少已有 4种基因被克隆 ,通过转基因技术在烟草、水稻、小麦等作物获得了抗性植株 .本文从SKTI的类型、基因克隆及生理功能等方面作一简单综述。 展开更多
关键词 基因克隆 生理功能 分布频率 大豆 Kunitz胰蛋白酶抑制 SKTI
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大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂新类型Tid的全序列分析 被引量:7
6
作者 忻骅 曹凯鸣 +1 位作者 谢可方 顾其敏 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第4期671-673,共3页
It was widely thought that 3 variants of Kunitz type trypsin inhibitor(SBTi A 2) existed in soybean seed storage protein.Three of codominant alleles Ti a,Ti b and Ti c were identified to decode these SBTi A 2 inhibito... It was widely thought that 3 variants of Kunitz type trypsin inhibitor(SBTi A 2) existed in soybean seed storage protein.Three of codominant alleles Ti a,Ti b and Ti c were identified to decode these SBTi A 2 inhibitors and the amino acid sequences of them were determined,of which one or more different amino acid were found.Ti d was a new variant allele of SBTi A 2 discovered after analyzing more than 15 000 samples of soybean seed in China.In order to study the structure features of Ti d protein,the amino acid sequence of this protein was deduced from its coding region which was amplified by PCR from soybean genomic DNA and sequenced.By comparison with Ti a protein,two different amino acid residue were found between Ti a and Ti d proteins.One was an extra Ala inserted in the signal peptide of Ti d,with 8 residues from N terminal,and the other existed in the mature protein,with Glu 69 in Ti a protein turned into Lys 69 in Ti d protein.The amino acid sequence of Ti d mature protein was also different from those of Ti a and Ti b. 展开更多
关键词 大豆 Kunitz 胰蛋白酶抑制 TID 序列分析
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多年生野生大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂基因的克隆及分析 被引量:4
7
作者 赵洪锟 李启云 +3 位作者 王玉民 李玉秋 庄炳昌 董英山 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期191-194,共4页
利用RT-PCR方法,从对蚜虫高抗的多年生野生大豆短绒野大豆(G.tomentella)(2n=78)未成熟子叶中扩增到了大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂同源基因单一目的片段,该基因和蛋白分别被命名为KTiPW54和KTiPW54。序列分析表明:该片段为654 bp的完整... 利用RT-PCR方法,从对蚜虫高抗的多年生野生大豆短绒野大豆(G.tomentella)(2n=78)未成熟子叶中扩增到了大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂同源基因单一目的片段,该基因和蛋白分别被命名为KTiPW54和KTiPW54。序列分析表明:该片段为654 bp的完整编码序列,编码218个氨基酸残基,编码的蛋白与栽培大豆(G.max)、野生大豆(G.soja)、短绒野大豆(G.tomentella)的Kunitz型胰蛋白酶抑制剂基因编码蛋白高度保守的区域一致。将KTiPW54编码区克隆到表达载体pTWIN1,在宿主菌BL21(DE3)中经IPTG诱导获得高效表达。 展开更多
关键词 多年生野生大豆 Kunitz胰蛋白酶抑制 原核表达
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大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂基因RNAi载体的构建 被引量:4
8
作者 周海涛 付永平 王丕武 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期742-746,共5页
采用PCR技术扩增得到胰蛋白酶抑制剂KTi基因正义和反义片段、大豆种子特异性启动子7αP和作为内含子的GUS基因片段,将其分别连入克隆载体pMD18-TVector中。然后以植物表达载体pCAMBIA1301为基础,通过AHLG作为中间载体,根据RNAi原理将组... 采用PCR技术扩增得到胰蛋白酶抑制剂KTi基因正义和反义片段、大豆种子特异性启动子7αP和作为内含子的GUS基因片段,将其分别连入克隆载体pMD18-TVector中。然后以植物表达载体pCAMBIA1301为基础,通过AHLG作为中间载体,根据RNAi原理将组成RNAi结构的4个目的片段分别连入其中,成功构建了种子特异性RNAi表达载体p1301-KTiRi。研究结果为RNAi技术在大豆品质改良中的应用提供了基础。 展开更多
关键词 大豆 Kunitz胰蛋白酶抑制 RNA干扰
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Kunitz型胰蛋白酶抑制剂缺失大豆新品系培育及其饲草价值分析 被引量:2
9
作者 姜妍 薛恩玉 +4 位作者 鹿文成 崔国文 李远明 韩天富 王绍东 《草业学报》 CSCD 北大核心 2020年第10期91-98,共8页
大豆作为饲料蛋白质的重要来源,既含有丰富的营养成分,也有影响蛋白质消化吸收的胰蛋白酶抑制剂等抗营养因子。本研究以合丰50为母本,中黄16为父本,通过常规杂交育种及非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的分子辅助育种技术,经过多年选育,获得适... 大豆作为饲料蛋白质的重要来源,既含有丰富的营养成分,也有影响蛋白质消化吸收的胰蛋白酶抑制剂等抗营养因子。本研究以合丰50为母本,中黄16为父本,通过常规杂交育种及非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的分子辅助育种技术,经过多年选育,获得适合黑龙江省栽培的Kunitz型胰蛋白酶抑制剂缺失稳定遗传的大豆新品系“HZ8009”。该品系生育期120 d,植株高大茎叶繁茂,无限结荚习性,籽粒蛋白质含量42%,脂肪含量20%。利用饲草质量检测技术对高代品系“HZ7009”植株饲草营养价值分析表明,与牡丹江秣食豆相比,“HZ7009”干草产量高21.39%,干物质中粗蛋白质含量高3.92%,且最佳刈割时期为花期至结荚期。大豆新品系“HZ8009”具有高蛋白、高生物量的特性,可作饲草资源品种加以广泛利用。 展开更多
关键词 大豆 Kunitz胰蛋白酶抑制 营养价值
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日本野生大豆中的一个Kunitz型胰蛋白酶抑制剂变异的纯化与活性测定(英文) 被引量:2
10
作者 王克晶 海妻矩彦 +2 位作者 高畑義人 山下哲朗 平秀晴 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期663-669,共7页
大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂现已报告有6个电冰形态,Tia、Tib、Tic、Tia-s、Tib-f和一个最慢的电泳移动度形态。Tia、Tib、Tic的活性已被报道。Tia和Tic有相似的活性,Tib的活性低于前两者。本文使用DEAE-cellulose层析纯化了Tia和Tia-s... 大豆Kunitz型胰蛋白酶抑制剂现已报告有6个电冰形态,Tia、Tib、Tic、Tia-s、Tib-f和一个最慢的电泳移动度形态。Tia、Tib、Tic的活性已被报道。Tia和Tic有相似的活性,Tib的活性低于前两者。本文使用DEAE-cellulose层析纯化了Tia和Tia-s蛋白和测定比较了这两个形态的活性。测定结果表明,Tia-s形态比Tia有较高的活性,即使在尿素存在的条件下,Tia-s也表现较高的活性。 展开更多
关键词 胰蛋白酶 抑制活性 野生大豆 大豆蛋白 抑制
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大豆胰蛋白酶抑制剂对肉鸡生长和肠道健康的影响
11
作者 许楠楠 《家禽科学》 2024年第6期89-92,共4页
近年来,随着我国畜禽养殖业向“限抗”“禁抗”“替抗”的转变,肉鸡的肠道因失去抗生素的保护而变得非常脆弱,肠道健康问题成为当前肉鸡养殖户关注的热点问题。豆粕作为肉鸡饲粮中主要的蛋白质来源,豆粕中同样含有抗营养因子—大豆胰蛋... 近年来,随着我国畜禽养殖业向“限抗”“禁抗”“替抗”的转变,肉鸡的肠道因失去抗生素的保护而变得非常脆弱,肠道健康问题成为当前肉鸡养殖户关注的热点问题。豆粕作为肉鸡饲粮中主要的蛋白质来源,豆粕中同样含有抗营养因子—大豆胰蛋白酶抑制剂,可损害肉鸡肠道健康。因此,通过总结胰蛋白酶抑制剂的概念及其对肉鸡生长和肠道健康的影响,以期为合理利用豆粕及改善肉鸡肠道健康提供参考。 展开更多
关键词 大豆胰蛋白酶抑制 肉鸡 生长 肠道健康
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大豆胰蛋白酶抑制剂对棉铃虫幼虫消化生理和生长发育的影响 被引量:41
12
作者 王琛柱 项秀芬 +1 位作者 张书芳 钦俊德 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第3期272-277,共6页
本研究根据棉铃虫Helicoverpaarmigera(Hubner)幼虫中肠蛋白酶在离体条件下对蛋白酶抑制剂的反应,选择具有较强抑制作用的大豆胰蛋白酶抑制剂,以0.21—4.2%(干重)的浓度配入幼虫人工饲料,测定... 本研究根据棉铃虫Helicoverpaarmigera(Hubner)幼虫中肠蛋白酶在离体条件下对蛋白酶抑制剂的反应,选择具有较强抑制作用的大豆胰蛋白酶抑制剂,以0.21—4.2%(干重)的浓度配入幼虫人工饲料,测定了幼虫短期和长期取食这些饲料引起的中肠类胰蛋白酶、类胰凝乳蛋白酶和总蛋白酶活力的变化和生长抑制效应。短期取食抑制剂的幼虫,中肠弱碱性类胰蛋白酶活力显著增高,在4.2%浓度下比对照高出21%强碱性类胰蛋白酶、类胰凝乳蛋白酶和总蛋白酶活力显著降低,生长发育受到明显抑制。长期取食低浓度(0.84%)抑制剂的幼虫,弱碱性类胰蛋白酶和类胰凝乳蛋白酶活力显著增高,强碱性类胰蛋白酶活力显著降低.总蛋白酶活力变化不显著;长期取食高浓度(4.2%)抑制剂的幼虫,强碱性类胰蛋白酶和总蛋白酶活力显著降低,其它酶活力变化不显著。抑制剂随浓度的增高对幼虫生长的抑制作用加强,但浓度高于0.84%后,抑制强度的变化减小。据此作者认为,蛋白酶抑制剂对昆虫抗营养效应在于它对蛋白酶的激活和抑制作用,从而导致各种蛋白酶间的协调性破坏,昆虫消化过程受阻,影响生长发育。 展开更多
关键词 大豆胰蛋白酶 抑制 棉铃虫 蛋白酶 鳞翅目
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大豆中植酸和胰蛋白酶抑制剂的抗营养和抗癌效应 被引量:10
13
作者 黄凯 郑田要 +2 位作者 李聚海 滕紫 袁德保 《中国油脂》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期28-31,共4页
大豆是重要的油料作物和植物蛋白来源,富含植物化学物质,如植酸和胰蛋白酶抑制剂等。传统营养理论认为这些植物化学物质是抗营养因子,然而近来研究显示这些化学成分具有天然抗癌作用。以植酸和STI为例主要介绍了它们的结构、分布、生理... 大豆是重要的油料作物和植物蛋白来源,富含植物化学物质,如植酸和胰蛋白酶抑制剂等。传统营养理论认为这些植物化学物质是抗营养因子,然而近来研究显示这些化学成分具有天然抗癌作用。以植酸和STI为例主要介绍了它们的结构、分布、生理活性、抗营养效应及抗癌效应。 展开更多
关键词 大豆 植酸 胰蛋白酶抑制 抗营养 抗癌
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大豆胰蛋白酶抑制剂的研究进展 被引量:10
14
作者 黄凯 郑田要 +3 位作者 朱建华 宋国胜 韩忠 袁德保 《江西农业学报》 CAS 2008年第8期95-98,共4页
从结构、毒理学分析和灭活方法3个方面对国内外近年来对大豆胰蛋白酶抑制剂的研究进展进行了综述。
关键词 大豆 胰蛋白酶 抑制 结构 毒理学 失活
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Alcalase蛋白酶降解大豆胰蛋白酶抑制剂的研究 被引量:16
15
作者 杨晓泉 陈中 黄纪昆 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期18-22,共5页
研究了不同酶解条件下 (pH值、温度、时间、加酶量和添加巯基还原剂 ) ,碱性内切蛋白酶Alcalase对大豆蛋白和大豆胰蛋白酶抑制剂的降解作用。研究结果表明 ,Alcalase可同时降解大豆蛋白和胰蛋白酶抑制剂。该酶解反应的最适条件为 :pH 8 ... 研究了不同酶解条件下 (pH值、温度、时间、加酶量和添加巯基还原剂 ) ,碱性内切蛋白酶Alcalase对大豆蛋白和大豆胰蛋白酶抑制剂的降解作用。研究结果表明 ,Alcalase可同时降解大豆蛋白和胰蛋白酶抑制剂。该酶解反应的最适条件为 :pH 8 0、温度 6 0℃、最适加酶量 10 μL/g蛋白 (约 0 0 2 832AU/ g蛋白 ) ,添加Na2 SO3为ω(Na2 SO3) =0 3% ,水解时间 4h。在此条件下 ,残留胰蛋白酶抑制活性为对照的 2 0 % ,可溶性蛋白含量可达 2 7mg/mL ,游离氨基酸含量为 7 1mg/mL ,大豆蛋白的水解度为 8 9%。 展开更多
关键词 大豆蛋白 胰蛋白酶抑制 ALCALASE 酶解 降解作用
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大豆发芽过程中异黄酮、维生素C、胰蛋白酶抑制剂含量变化的研究 被引量:9
16
作者 孙冰 郑留学 +4 位作者 朱思齐 秦阳 杨洋 李新 崔素萍 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第24期147-149,共3页
为了研究大豆在发芽过程中异黄酮、维生素C、胰蛋白酶抑制剂的变化,选用高脂肪、高蛋白和普通大豆品种为实验材料,分别采用紫外分光光度法、2、6-二氯酚靛酚法进行测定。结果表明,大豆发芽期间,异黄酮和维生素C的含量均有所上升,胰蛋白... 为了研究大豆在发芽过程中异黄酮、维生素C、胰蛋白酶抑制剂的变化,选用高脂肪、高蛋白和普通大豆品种为实验材料,分别采用紫外分光光度法、2、6-二氯酚靛酚法进行测定。结果表明,大豆发芽期间,异黄酮和维生素C的含量均有所上升,胰蛋白酶抑制剂含量则有所下降。其中高脂肪(垦农29)、高蛋白(垦农30)和普通大豆(黑农53)在发芽96h左右时异黄酮含量最高,分别上升至未发芽大豆的3倍、3倍、5倍;而维生素C则由干大豆中的0mg/100g分别上升到120h的12.572、12.753、12.361mg/100g;而胰蛋白酶抑制剂的含量则分别降至0.36、0.44、0.39mg/g。由此得出,大豆发芽的最佳发芽时间为96h。 展开更多
关键词 发芽大豆 异黄酮 维生素C 胰蛋白酶抑制
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山东产野生大豆胰蛋白酶抑制剂的初步研究 被引量:5
17
作者 杨志宏 周三 +4 位作者 关崎春雄 岳旺 国永史郎 淵瀨友祥 浅津なをみ 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1562-1567,共6页
该实验建立了HPLC测定大豆胰蛋白酶抑制剂(STI)活性的方法,并对山东产野生大豆(G.soja)与同地区产的黑豆和黄豆(G.max)的胰蛋白酶抑制活性差异进行了比较。用耦合了胰蛋白酶的亲合色谱柱对野生大豆的STI进行分离纯化,紫外分光光度法比较... 该实验建立了HPLC测定大豆胰蛋白酶抑制剂(STI)活性的方法,并对山东产野生大豆(G.soja)与同地区产的黑豆和黄豆(G.max)的胰蛋白酶抑制活性差异进行了比较。用耦合了胰蛋白酶的亲合色谱柱对野生大豆的STI进行分离纯化,紫外分光光度法比较3种大豆的STI含量;PCR结合TA克隆技术对野生大豆STI中的Kunitz型(KSTI)蛋白基因编码区的氨基酸顺序进行初步测定。结果发现,山东产野生大豆的STI活性和含量均高于同地区产的黑豆和黄豆;山东产野生大豆的KSTI蛋白基因编码区的氨基酸顺序与已知的Tia型基本一致,仅第59位氨基酸由于单核苷酸的置换发生了Ser→Thr的转变,此位置位于活性中心附近。研究表明,山东产野生大豆胰蛋白酶抑制活性较强,且含量高。 展开更多
关键词 野生大豆 大豆胰蛋白酶抑制 Kunitz胰蛋白酶抑制 HPLC PCR
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绿豆胰蛋白酶抑制剂的含量、多型性及稳定性 被引量:8
18
作者 江均平 李春红 +2 位作者 张涛 云冬梅 杨雪丰 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第11期32-35,共4页
测得我国26份绿豆栽培品种胰蛋白酶抑制剂(TI)含量范围为29.0~53.3TIU/g,平均值38.9TIU/g,其中冀绿7号、中绿5号、淮绿5号含量最高,分别为53.5、51.3、49.6TIU/g。明胶-PAGE活性染色结果表明:绿豆含有M1~M44种TI,M2为主要组分;冀绿7... 测得我国26份绿豆栽培品种胰蛋白酶抑制剂(TI)含量范围为29.0~53.3TIU/g,平均值38.9TIU/g,其中冀绿7号、中绿5号、淮绿5号含量最高,分别为53.5、51.3、49.6TIU/g。明胶-PAGE活性染色结果表明:绿豆含有M1~M44种TI,M2为主要组分;冀绿7号品种的M4以结合态形式存在,经100℃或pH1.5处理后消失,同时出现5条新带。绿豆TI性质稳定,水煮30min可保存66.4%~83.1%活性,pH1.5处理8h活性为原来的86.3%~110.0%;提取液放置时间对酶谱有影响。 展开更多
关键词 绿豆 胰蛋白酶抑制 热稳定性 酸稳定性
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大豆胰蛋白酶抑制剂和脂肪氧化酶基因双价RNAi表达载体的改造及转化 被引量:7
19
作者 王丹 付永平 +1 位作者 王丕武 马建 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2012年第12期85-89,105,共6页
【目的】应用RNA干扰技术同时抑制大豆脂肪氧化酶(Lox)和胰蛋白酶抑制剂(KTi)基因的表达,改良大豆品质,培育缺失Lox和KTi的大豆新材料。【方法】应用RNAi原理,以双价RNAi植物表达载体pCAM-BIA1301-KtiRi-LoxRi为基础,以植物表达载体pCAM... 【目的】应用RNA干扰技术同时抑制大豆脂肪氧化酶(Lox)和胰蛋白酶抑制剂(KTi)基因的表达,改良大豆品质,培育缺失Lox和KTi的大豆新材料。【方法】应用RNAi原理,以双价RNAi植物表达载体pCAM-BIA1301-KtiRi-LoxRi为基础,以植物表达载体pCAMBIA3301的质粒DNA为模板,利用CaMV35S启动子的上游引物和CaMV35S终止子的下游引物,PCR扩增含有除草剂抗性基因bar的整个表达原件,然后将其插入到pCAM-BIA1301-KtiRi-LoxRi中,构建以除草剂为筛选标记的双价RNAi表达载体,并通过花粉管通道法转化至大豆吉农18、吉农28和吉农27 3个品种中,对转基因植株进行PCR、Southern杂交、RT-PCR分子水平检测和除草剂抗性检测。【结果】质粒PCR和酶切鉴定以及测序结果表明,双价RNAi植物表达载体pCAMBIA1301-KtiRi-LoxRi-bar构建成功。将其转入到大豆中,分别获得吉农18、吉农28、吉农27T1代籽粒47,25和86粒,以及T2代转基因植株50株。RT-PCR结果表明,转基因株系中脂肪氧化酶和胰蛋白酶抑制剂mRNA积累受到明显抑制。【结论】获得了转pCAMBIA1301-KtiRi-LoxRi-bar的T2代转基因大豆。 展开更多
关键词 大豆 胰蛋白酶抑制 脂肪氧化酶 花粉管通道法 除草
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缺失Kunitz胰蛋白酶抑制剂和脂肪氧化酶2的大豆新品种中黄31的选育 被引量:5
20
作者 韩粉霞 孙君明 +2 位作者 丁安林 闫淑荣 杨华 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期210-213,共4页
大豆新品种中黄31是中国农业科学院作物科学研究所利用缺失Kun itz胰蛋白酶抑制剂的高产、优质、抗花叶病毒病(SMV)的高代材料ti15176作母本,美国引进优良品种Century近等基因系、脂肪氧化酶缺失的优质材料Century-2.3作父本进行有性杂... 大豆新品种中黄31是中国农业科学院作物科学研究所利用缺失Kun itz胰蛋白酶抑制剂的高产、优质、抗花叶病毒病(SMV)的高代材料ti15176作母本,美国引进优良品种Century近等基因系、脂肪氧化酶缺失的优质材料Century-2.3作父本进行有性杂交,采用未变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(Native-PAGE)技术及等电聚焦聚丙烯酰胺凝胶电泳(IEF-PAGE)技术,对杂种后代胰蛋白酶抑制剂(Ti)、脂肪氧化酶(Lox)进行缺失检测及多年辅助选择育成。该品种于2005年通过北京市品种审定委员会审定。其突出特点是高产、稳产、优质(蛋白质品质优异?缺失Ti和Lox2)、抗病、抗倒、综合性状优良。 展开更多
关键词 大豆 新品种 胰蛋白酶抑制 脂肪氧化酶
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