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细胞内外GRP78/Bip在类风湿性关节炎病情活动和病程进展中的表达及意义
1
作者 刘国印 吕德珍 +4 位作者 陈建民 徐院生 黄伟谦 吴宇 汪勇 《医学研究与战创伤救治》 北大核心 2025年第3期245-252,共8页
目的探讨不同病情活动和进展期类风湿性关节炎(RA)患者葡萄糖调节蛋白78/免疫球蛋白重链结合蛋白(GRP78/Bip)在病变细胞内(滑膜组织)和细胞外(关节液和血液)中的表达,并分析细胞内和细胞外GRP78/Bip在RA病情活动和进展中的作用。方法选... 目的探讨不同病情活动和进展期类风湿性关节炎(RA)患者葡萄糖调节蛋白78/免疫球蛋白重链结合蛋白(GRP78/Bip)在病变细胞内(滑膜组织)和细胞外(关节液和血液)中的表达,并分析细胞内和细胞外GRP78/Bip在RA病情活动和进展中的作用。方法选取2020年6月至2023年6月在东部战区总医院门诊就诊的128例膝关节半月板损伤、骨性关节炎(OA)和RA患者。其中16例半月板损伤患者(非OA非RA,即对照组)、16例OA患者(OA组)和96例RA患者(RA组)。RA组患者根据DAS28活动度分为RA缓解期组(n=48)和RA活动期组(n=48)。RA缓解期和活动期根据疾病进展严重程度又分为早期、中期和晚期。采用Elisa方法检测所有患者血清GRP78/Bip的表达情况。依据血清中位GRP78/Bip水平对患者进行筛选,最终纳入了24例患者参与后续研究,其中,对照组3例,OA组3例,RA缓解组和RA活动组各9例(早期、中期和晚期各3例)。采用Elisa方法检测血清、病变滑膜组织和关节液中TNF-α、IL-10和GRP78/Bip的表达,采用蛋白质免疫印迹(WB)方法检测病变滑膜组织中GRP78/Bip和Caspase-3的表达、关节液中GRP78/Bip的表达。结果GRP78/Bip在RA血液和病变滑膜组织中的表达:RA活动组大于RA缓解组,且早期、中期、晚期逐渐升高(P<0.05)。GRP78/Bip在RA关节液中的表达:RA缓解组大于RA活动组,且早期、中期、晚期逐渐降低(P<0.05)。Caspase-3在RA滑膜组织中的表达:RA活动组大于RA缓解组,且晚期和中期大于早期(P<0.05)。TNF-α在RA血清、滑膜组织和关节液中的表达:RA活动组大于RA缓解组,且早期、中期、晚期逐渐升高(P<0.05)。IL-10在RA血清和滑膜组织的表达:RA活动组大于缓解组,且早期、中期、晚期逐渐升高(P<0.05)。IL-10在RA关节液中的表达:RA缓解组大于RA活动组,且早期、中期、晚期逐渐升高(P<0.05)。结论细胞内和细胞外GRP78/Bip在RA病情活动和进展中发挥不同的作用,其可作为一种新的治疗靶点,为临床缓解或治疗RA提供新的思路和方法。 展开更多
关键词 葡萄糖调节蛋白78/免疫球蛋白重链结合蛋白 细胞内GRP78/bip 细胞外GRP78/bip 类风湿性关节炎 病情活动 病程进展
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丹蒌片对同型半胱氨酸诱导的兔主动脉内皮细胞CHOP、BIP蛋白表达和凋亡的影响 被引量：5
2
作者 张妍 史占江 +1 位作者 牛春玲 沈晓君 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2016年第4期463-466,共4页
目的:观察丹蒌片对同型半胱氨酸(HCY)诱导的兔主动脉内皮细胞凋亡及内质网应激相关蛋白C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)、免疫球蛋白重链结合蛋白(BIP)表达的影响。方法:以HCY诱导建立兔主动脉内皮细胞损伤模型,分... 目的:观察丹蒌片对同型半胱氨酸(HCY)诱导的兔主动脉内皮细胞凋亡及内质网应激相关蛋白C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)、免疫球蛋白重链结合蛋白(BIP)表达的影响。方法:以HCY诱导建立兔主动脉内皮细胞损伤模型,分别用瑞舒伐他汀(他汀)、丹蒌片含药血清或二者联合共同培养48 h后,Annexin V-PI法检测细胞凋亡率,Western blot法检测CHOP、BIP蛋白表达情况。以未诱导细胞作空白对照。结果:模型细胞凋亡率及BIP、CHOP蛋白表达水平均高于空白对照(P<0.05)。丹蒌片和他汀可明显降低模型细胞的凋亡率,二者具有协同作用(F丹蒌片=475.288,F他汀=235.248,F交互=121.377,P<0.05);丹蒌片可显著下调模型细胞BIP、CHOP蛋白的表达水平,与他汀无协同作用(F丹蒌片=7.017,8.147,P均<0.05;F交互=0.590,1.406,P均>0.05)。结论:丹蒌片可通过下调CHOP、BIP的表达抑制血管内皮细胞凋亡。 展开更多
关键词 丹蒌片 C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白 免疫球蛋白重链结合蛋白 血管内皮细胞 凋亡 兔
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BiP表达下调改善双载体转断裂FⅧ基因的功效
3
作者 朱甫祥 刘泽隆 +2 位作者 缪静 屈慧鸽 迟晓艳 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1161-1166,共6页
双载体转凝血Ⅷ因子(FⅧ)基因可作为一种转基因策略克服腺相关病毒(AAV)载体容量限制,但重链分泌的低效性影响转基因功效.为提高重链分泌,本文用RNA干扰技术下调内质网内蛋白伴侣分子免疫球蛋白重链结合蛋白(BiP)的表达,观察对HEK293细... 双载体转凝血Ⅷ因子(FⅧ)基因可作为一种转基因策略克服腺相关病毒(AAV)载体容量限制,但重链分泌的低效性影响转基因功效.为提高重链分泌,本文用RNA干扰技术下调内质网内蛋白伴侣分子免疫球蛋白重链结合蛋白(BiP)的表达,观察对HEK293细胞双载体共转FⅧ基因分泌重链和生物活性的影响.结果显示,RNA干扰可明显下调BiP表达,但不影响细胞生长;ELISA检测BiP下调细胞单独转重链基因时的重链分泌量为98±38 ng/mL,与轻链共转基因时显著升高到157±32 ng/mL,明显高于对照细胞单独转重链基因和共转重链和轻链基因的重链分泌量(分别为29±8 ng/mL和79±19 ng/mL);Cotest法检测显示,BiP下调细胞共转重链和轻链基因细胞分泌的凝血生物活性为0.73±0.23 IU/mL,明显高于对照细胞共转重链和轻链基因(0.39±0.07 IU/mL).结果表明,BiP表达下调通过促进重链分泌,可提高双载体共转FⅧ基因的功效,为进一步动物体内双AAV载体转FⅧ基因的甲型血友病基因治疗研究提供了实验依据. 展开更多
关键词 凝血Ⅷ因子 双载体转基因 免疫球蛋白重链结合蛋白 重链分泌
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人内质网分子伴侣BiP抗原表位筛选及其在RA血清学诊断中的作用研究
4
作者 邹新乐 李想 +1 位作者 陈巧林 曾令文 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期544-547,共4页
目的:筛选鉴定人内质网分子伴侣BiP抗原表位多肽,探讨其在类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)血清学诊断中的价值。方法:运用计算机软件分析BiP蛋白的结构特点及抗原决定簇分布,根据结果设计合成系列多肽。比较合成多肽与RA患者血... 目的:筛选鉴定人内质网分子伴侣BiP抗原表位多肽,探讨其在类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)血清学诊断中的价值。方法:运用计算机软件分析BiP蛋白的结构特点及抗原决定簇分布,根据结果设计合成系列多肽。比较合成多肽与RA患者血清(BiP抗体阳性)IgG的反应强弱,鉴定抗原抗体反应最强的抗原表位多肽。进一步以获得的BiP抗原表位多肽作为包被抗原,检测79例RA患者、34例系统性红斑狼疮(SLE)患者、66例干燥综合征(SS)患者和173例正常人血清中抗BiP抗原表位多肽IgG抗体水平。结果:筛选到一条与RA患者血清反应最强的多肽(N403),抗N403多肽IgG抗体在RA患者中的阳性率(67%),明显高于SS患者(29%)、SLE患者(0%)、和正常人(0%)(P<0.01)。抗N403多肽IgG抗体在RA血清学诊断中的敏感性为67%,特异性为93%。而且该抗体的检测对于RF、CCP、HRF、RA33、AKA、APF等抗体阴性的RA患者的诊断具有重要意义。结论:筛选获得的BiP抗原表位多肽N403,其检测抗体在RA临床血清诊断中具有很好的应用价值。 展开更多
关键词 人内质网分子伴侣bip蛋白 抗原表位 类风湿性关节炎 多肽抗体
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GRP78/Bip在类风湿性关节炎中的研究进展 被引量：3
5
作者 陈建民 徐院生 +1 位作者 付丹妹(综述) 刘国印(审校) 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2022年第11期1207-1212,共6页
GRP78/Bip参与体内绝大多数应激反应,可从细胞内转至细胞外。细胞内GRP78/Bip具有抗凋亡和促细胞增殖作用,细胞外GRP78/Bip具有强大的免疫调节、抗炎和抑制破骨细胞分化和吸收的作用。RA的发生和发展必须克服几个瓶颈,其中病变细胞容易... GRP78/Bip参与体内绝大多数应激反应,可从细胞内转至细胞外。细胞内GRP78/Bip具有抗凋亡和促细胞增殖作用,细胞外GRP78/Bip具有强大的免疫调节、抗炎和抑制破骨细胞分化和吸收的作用。RA的发生和发展必须克服几个瓶颈,其中病变细胞容易增殖并能同时避免免疫破坏和细胞凋亡是至关重要的一环。因此,针对RA病变细胞内和细胞外GRP78/Bip的研究无疑是理想治疗思路。但目前关于GRP78/Bip在RA中的研究存在较大争议,部分认为可通过抑制体内GRP78/Bip表达,促进病变细胞凋亡,进而达到治疗作用;而另一部分认为可通过增加体内GRP78/Bip,抑制炎症反应,进而达到治疗目的。文章就细胞内外GRP78/Bip在RA中的靶向治疗、抗炎和抗破骨细胞活性及其作用机制假说进行综述。 展开更多
关键词 葡萄糖调节蛋白78/免疫球蛋白重链结合蛋白 类风湿性关节炎 细胞凋亡 炎症 破骨细胞分化
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油茶皂苷通过内质网应激途径诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的研究 被引量：13
6
作者 马丽媛 李林 +4 位作者 江玉 史丽颖 冯宝民 王永奇 唐玲 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1523-1527,共5页
目的探讨油茶皂苷诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的作用及其作用机制。方法采用MTT法考察了油茶皂苷对肿瘤细胞增殖的影响;用Western blot方法分析油茶皂苷对caspase-3、PARP、Bip、ATF6、IRE1、Perk、eIF2a和eEF2蛋白质表达的影响。结果油茶... 目的探讨油茶皂苷诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的作用及其作用机制。方法采用MTT法考察了油茶皂苷对肿瘤细胞增殖的影响;用Western blot方法分析油茶皂苷对caspase-3、PARP、Bip、ATF6、IRE1、Perk、eIF2a和eEF2蛋白质表达的影响。结果油茶皂苷(10～30 mg.L-1)明显抑制HepG2细胞的增殖。同时可激活Caspase信号通路,诱发PARP底物的断裂;进一步上调IRE1表达量及活化Perk、eIF2a和eEF2蛋白。结论油茶皂苷通过内质网应激途径诱导人肝癌细胞HepG2发生凋亡。 展开更多
关键词 油茶皂苷 抗肿瘤 人肝癌细胞株(HepG2) 内质网应激 人免疫球蛋白重链结合蛋白(bip) RNA激活蛋白激酶的内质网类似激酶(Perk)
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卡维地洛改善腹主动脉缩窄术后大鼠左室肥厚的实验研究 被引量：1
7
作者 胡琴 李隆贵 李莲群 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期227-229,共3页
目的　对照观察卡维地洛 (CAR)等药物干预对压力负荷性左室心肌胶原结合蛋白 (Acollagen bindingprotein ,Colligin)和肌凝蛋白同工酶 (α β MHC)表达的影响 ,探讨卡维地洛改善左室重塑的机制。 方法　将腹主动脉缩窄术 (CAB)后 4周的... 目的　对照观察卡维地洛 (CAR)等药物干预对压力负荷性左室心肌胶原结合蛋白 (Acollagen bindingprotein ,Colligin)和肌凝蛋白同工酶 (α β MHC)表达的影响 ,探讨卡维地洛改善左室重塑的机制。 方法　将腹主动脉缩窄术 (CAB)后 4周的雄性Wistar大鼠分为CAR、美托洛尔 (MET)、和特拉唑嗪 (TER)干预组与CAB组 ,12周后对有关指标进行检测。结果　术后 16周大鼠左室明显肥厚 ,α MHC β MHCmRNA的比值下降 ,ColliginmRNA表达及CollagenⅠ和Colligin蛋白含量增加 (P <0 .0 5 ) ;卡维地洛能够明显改善左室肥厚 ,美托洛尔次之 ,而特拉唑嗪作用不明显 ;CAR组大鼠左室心肌CollagenⅠ和Colligin蛋白的表达下降 ,α MHC β MHCmRNA表达比值增加 ,ColliginmRNA表达下调 (P <0 .0 5 ) ,但MET组和TER组无显著变化 (P >0 0 5 )。结论　卡维地洛下调心肌细胞外基质蛋白和逆转肌凝蛋白同工酶转换的作用可能与其肾上腺素受体阻滞无关 ,可能部分地与其抗增殖作用可能有关 。 展开更多
关键词 心室重塑 β-肾上腺能受体阻滞剂 胶原结合蛋白 肌凝蛋白同工酶
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IGHG1对人急性髓系白血病THP-1细胞增殖、凋亡的影响 被引量：1
8
作者 高鑫 储李婧 陈天平 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1263-1271,共9页
目的:探讨免疫球蛋白G1重链恒定区(IGHG1)对急性髓系白血病(AML)细胞系THP-1细胞增殖、凋亡的影响及其可能的作用机制。方法:体外培养人AML THP-1细胞,分为对照(正常培养的THP-1细胞)、pcDNA3.1[转染IGHG1过表达(pcDNA3.1-IGHG1)阴性对... 目的:探讨免疫球蛋白G1重链恒定区(IGHG1)对急性髓系白血病(AML)细胞系THP-1细胞增殖、凋亡的影响及其可能的作用机制。方法:体外培养人AML THP-1细胞,分为对照(正常培养的THP-1细胞)、pcDNA3.1[转染IGHG1过表达(pcDNA3.1-IGHG1)阴性对照质粒的THP-1细胞]、pcDNA3.1-IGHG1(转染pcDNA3.1-IGHG1的THP-1细胞)、LY364947[转化生长因子-β(TGF-β)/信号转导蛋白(Smad)抑制剂LY36494720μmol/L处理THP-1细胞)]、si-NC[转染IGHG1小干扰RNA(IGHG1-siRNA)阴性对照的THP-1细胞]、si-IGHG1(转染IGHG1-siRNA的THP-1细胞)和si-IGHG1+LY364947(IGHG1-siRNA和LY364947共同处理THP-1细胞)共7组。荧光定量PCR法检测各组THP-1细胞中IGHG1和免疫球蛋白G(IgG)mRNA的表达;CCK-8法检测各组THP-1细胞增殖活力;流式细胞术检测各组THP-1细胞凋亡率和细胞周期变化;蛋白印迹法检测各组THP-1细胞增殖、凋亡及TGF-β/Smad信号通路相关蛋白的表达。结果:与对照组相比,过表达IGHG1后THP-1细胞中IGHG1和IgG mRNA表达、细胞增殖活力、S期的细胞比例、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、IgG、TGF-β1、磷酸化Smad3(p-Smad3)/Smad3蛋白表达均显著升高(P<0.05),细胞凋亡率、G_(0)/G_(1)期的细胞比例、p21、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达均显著降低(P<0.05)。抑制TGF-β/Smad信号通路或沉默IGHG1后THP-1细胞中IGHG1和IgG mRNA表达、细胞增殖活力、S期的细胞比例、Cyclin D1、Bcl-2、IgG、TGF-β1、p-Smad3/Smad3蛋白表达均显著降低(P<0.05),细胞凋亡率、G_(0)/G_(1)期的细胞比例、p21、Bax、Caspase-3蛋白表达均显著升高(P<0.05);且与沉默IGHG1相比,IGHG1基因沉默和TGF-β/Smad通路抑制共同处理的THP-1细胞中IGHG1和IgG mRNA表达、细胞增殖活力、S期的细胞比例、Cyclin D1、Bcl-2、IgG、TGF-β1、p-Smad3/Smad3蛋白表达均显著降低(P<0.05),细胞凋亡率、G_(0)/G_(1)期的细胞比例、p21、Bax、Caspase-3蛋白表达均显著升高(P<0.05)。结论:沉默IGHG1基因可下调IgG的表达,抑制人AML THP-1细胞增殖,阻滞细胞周期进程,并诱导细胞凋亡;其作用机制可能与抑制TGF-β/Smad通路的激活有关。 展开更多
关键词 免疫球蛋白G1重链恒定区 急性髓系白血病THP-1细胞 免疫球蛋白G 凋亡 增殖 转化生长因子-β/信号转导蛋白
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