目的通过研究天麻(普通粉、破壁粉、冻干粉)对戊四唑诱导癫痫大鼠海马组织B细胞白血病-淋巴瘤-2基因(B-cell leukemia-iymphoma-2,Bcl-2),B细胞白血病淋巴瘤相关蛋白基因(Bcl-2-associated X protein gene,Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶...目的通过研究天麻(普通粉、破壁粉、冻干粉)对戊四唑诱导癫痫大鼠海马组织B细胞白血病-淋巴瘤-2基因(B-cell leukemia-iymphoma-2,Bcl-2),B细胞白血病淋巴瘤相关蛋白基因(Bcl-2-associated X protein gene,Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和γ-氨基丁酸转运体1(GAT-1)基因和蛋白的表达影响对天麻神经保护作用机制进行初步探讨,并对三种加工方式的天麻效应差异性进行对比研究。方法以SD大鼠为研究对象,建立戊四唑癫痫模型。随机分为12组,正常组,戊四唑组,丙戊酸钠组,天麻(普通粉、破壁粉、冻干粉)分别对应的低、中、高剂量组(0.5、1.0、2.0 g·kg-1)连续灌胃10 d。用荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR)检测三种加工方式的天麻对戊四唑诱导癫痫海马组织Bcl-2、Bax、Caspase-3和GAT-1基因表达的情况;用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测天麻对戊四唑诱导癫痫海马组织Bax、Bcl-2、Caspase-3和GAT-1蛋白表达情况。结果模型组癫痫发作强度均为Ⅵ级,表明造模成功。与模型组比较,丙戊酸钠组及天麻普通粉、破壁粉、冻干粉各剂量组癫痫潜伏时间显著延长(P<0.05),癫痫持续时间显著缩短(P<0.05)。与丙戊酸钠组比较,天麻普通粉高剂量组、天麻破壁粉高剂量组癫痫潜伏时间无显著差异(P<0.05),而天麻冻干粉高剂量组癫痫潜伏时间显著延长(P<0.05),且持续时间与之无显著性差异(P<0.05)。与正常组比较,模型组Bax、Caspase3和GAT-1mRNA及蛋白相对表达量显著升高(P<0.05),Bcl-2 mRNA及蛋白相对表达量显著下降(P<0.05);与模型组比较,丙戊酸钠组和天麻各组可显著降低Bax、Caspase3和GAT-1 mRNA及蛋白相对表达量(P<0.05),显著升高Bcl-2 mRNA及蛋白相对表达量(P<0.05)。结论天麻冻干粉高剂量组效果最佳,天麻破壁粉高剂量组次之,最后天麻普通粉高剂量组。天麻对神经的保护具有剂量依赖性,并与天麻不同加工方式相关,其作用机制与调节Bcl-2、Bax、Caspase-3和GAT-1mRNA及蛋白表达水平有关。展开更多
文摘目的探讨黄酮类化合物芹菜素对大鼠实验性心肌缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)时心肌细胞凋亡与Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达的影响,并分析心肌组织病理学损伤程度。方法采用结扎左冠状动脉前降支,心肌缺血45 min,再灌注2 h制作缺血/再灌注模型。将大鼠随机分为8组,即正常组(normal group,Normal)、假手术组(sham oper-ation group,Sham)、生理盐水缺血/再灌注组(saline ischemi-a-reperfusion group,NS)、溶剂对照组(solvent control group,Sol)、美托洛尔对照组(metoprolol control group,Meto)、芹菜素低、中、高剂量(1、2、4 mg.kg-1)用药组(apigenin low,medium and high dose treatment group,Api1,Api2,Api4)。再灌注2 h后迅速取出心脏,TUNEL法原位标记凋亡的心肌细胞;免疫组化法测Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达;做病理组织切片检查心肌损伤情况。结果芹菜素各剂量组心肌细胞凋亡率明显低于NS组(P<0.05),Api1,Api2,Api4能剂量依赖性地降低大鼠缺血/再灌注心肌细胞凋亡率;芹菜素各剂量组剂量依赖性地提高大鼠心肌缺血/再灌注的Bcl-2蛋白表达量(P<0.05)、降低大鼠心肌缺血/再灌注的Bax、Caspase-3蛋白表达量(P<0.05);芹菜素各剂量组与NS组比较,心肌组织损伤的病理学变化明显减轻(P<0.05)。结论芹菜素对缺血/再灌注心肌的保护效应可能与其抑制缺血/再灌注心肌细胞凋亡有关;芹菜素抗心肌凋亡作用的机制可能与其上调Bcl-2蛋白表达和下调Bax、Caspase-3蛋白表达有关;芹菜素能明显减轻心肌组织损伤。
