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灰葡萄孢致病蛋白BcPDR1的功能区域鉴定
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作者 刘晓颖 魏雅迪 +5 位作者 张天雨 曹宏哲 张康 董金皋 藏金萍 邢继红 《河北农业大学学报》 北大核心 2025年第2期62-69,共8页
灰葡萄孢(Botrytis cinerea)是一种典型的死体营养型植物病原真菌,能够危害上千种植物并引起灰霉病。本实验室的前期研究发现了1个新的灰葡萄孢致病基因BcPDR1(Pathogenicity Deficient Related 1),明确了该基因正调控病菌的生长发育和... 灰葡萄孢(Botrytis cinerea)是一种典型的死体营养型植物病原真菌,能够危害上千种植物并引起灰霉病。本实验室的前期研究发现了1个新的灰葡萄孢致病基因BcPDR1(Pathogenicity Deficient Related 1),明确了该基因正调控病菌的生长发育和致病力。然而,生物信息学分析未发现该基因的同源基因及其保守结构域。为了探明该基因的作用机制,本研究对灰葡萄孢BcPDR1的重要功能区域进行了分析,将BcPDR1蛋白分为3个区域:BcPDR1-1(1~80 aa)、BcPDR1-2(81~121 aa)和BcPDR1-3(122~199 aa)。利用基因互补回复技术,在BcPDR1基因敲除突变体ΔBcpdr1的基础上构建了3个区域的回复突变体。对3个区域回复突变体的表型和致病力进行分析,结果显示,3个区域回复突变体的菌落形态、菌丝形态、生长速率和侵染结构均与突变体ΔBcpdr1基本一致,在番茄果实和烟草叶片上均能产生明显的病斑,其中回复突变体BcPDR1-3的病斑最为显著,表明BcPDR1-3(122~199 aa)是BcPDR1蛋白的重要功能区域。研究结果为阐明灰葡萄孢致病蛋白BcPDR1调控病菌生长发育及致病分子机制以及灰霉病防治靶标药物的研发奠定了基础。 展开更多
关键词 灰葡萄孢 bcpdr1 功能区域 生长发育 致病力
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灰葡萄孢BcPDR1基因差异表达基因的筛选和鉴定 被引量:4
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作者 刘晓颖 吴艳丽 +5 位作者 李白 袁雪梅 曹宏哲 张康 邢继红 董金皋 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期69-75,共7页
灰葡萄孢BcPDR1基因在病菌生长发育和致病过程中发挥重要作用,但其具体的分子机制尚未明确。本研究利用数字基因表达谱技术(Digital Gene Expression Profiling, DGE),获得了933个受BcPDR1基因影响的差异表达基因,GO富集分析发现差异表... 灰葡萄孢BcPDR1基因在病菌生长发育和致病过程中发挥重要作用,但其具体的分子机制尚未明确。本研究利用数字基因表达谱技术(Digital Gene Expression Profiling, DGE),获得了933个受BcPDR1基因影响的差异表达基因,GO富集分析发现差异表达基因主要集中在细胞过程、新陈代谢过程、细胞组分和催化作用等方面。利用数字基因表达谱数据,获得了14个差异表达的胞壁降解酶基因;热图分析和Real-time PCR分析发现,14个胞壁降解酶基因在突变体BCt89和ΔBcPDR1中的表达水平被明显上调或下调,确定了BcPDR1基因对胞壁降解酶基因的正负调控作用。试验结果为进一步阐明BcPDR1调控灰葡萄孢致病力的分子机制奠定了基础。 展开更多
关键词 灰葡萄孢 bcpdr1 数字基因表达谱 细胞壁降解酶 REAL-TIME PCR
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灰葡萄孢BcPDR1与MAPK途径基因BcBMP1和BcBMP3的关系 被引量:2
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作者 刘晓颖 魏雅迪 +5 位作者 李白 曹宏哲 藏金萍 张康 邢继红 董金皋 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2022年第S01期318-323,共6页
为了确定灰葡萄孢致病基因BcPDR1与病菌MAPK途径基因BcBMP1和BcBMP3之间的关系,利用实时荧光定量PCR技术,分析BcPDR1基因突变体中BcBMP1、BcBMP3的表达情况以及BcBMP1、BcBMP3基因RNAi突变体中BcPDR1的表达情况;在突变体ΔBcpdr1背景下... 为了确定灰葡萄孢致病基因BcPDR1与病菌MAPK途径基因BcBMP1和BcBMP3之间的关系,利用实时荧光定量PCR技术,分析BcPDR1基因突变体中BcBMP1、BcBMP3的表达情况以及BcBMP1、BcBMP3基因RNAi突变体中BcPDR1的表达情况;在突变体ΔBcpdr1背景下,构建了BcBMP1和BcBMP3过表达的菌株ΔBcpdr1/BcBMP1-OE和ΔBcpdr1/BcBMP3-OE,并对过表达菌株的表型特征和致病能力进行分析。结果发现,BcPDR1基因突变体BCt89和ΔBcpdr1中BcBMP1、BcBMP3的表达水平显著优于野生型菌株和回复菌株,BcBMP1、BcBMP3基因RNAi突变体中BcPDR1的表达水平显著低于野生型;过表达菌株ΔBcpdr1/BcBMP1-OE和ΔBcpdr1/BcBMP3-OE的菌落形态、菌丝形态、生长速率、产孢量和致病力均与突变体ΔBcpdr1表现明显的不同,而更接近野生型BC22。结果表明,灰葡萄孢BcPDR1与BcBMP1、BcBMP3的表达水平密切相关,BcPDR1负调控BcBMP1、BcBMP3的表达,而BcBMP1、BcBMP3正调控BcPDR1的表达。 展开更多
关键词 灰葡萄孢 bcpdr1 MAPK途径基因 BcBMP1 BcBMP3
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灰葡萄孢致病基因BcPDR1与Gα亚基基因的关系研究 被引量:2
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作者 魏雅迪 曹丽萍 +5 位作者 刘英姿 刘晓颖 曹宏哲 张康 邢继红 董金皋 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期93-98,104,共7页
为了探究灰葡萄孢致病基因BcPDR1与病菌G蛋白α亚基基因之间的关系,利用qRT-PCR技术分析BcPDR1基因突变对Gα亚基基因BcBCG2和BcBCG3表达的影响以及BcBCG2、BcBCG3基因突变对BcPDR1基因表达的影响;在敲除突变体ΔBcpdr1的基础上,构建BcB... 为了探究灰葡萄孢致病基因BcPDR1与病菌G蛋白α亚基基因之间的关系,利用qRT-PCR技术分析BcPDR1基因突变对Gα亚基基因BcBCG2和BcBCG3表达的影响以及BcBCG2、BcBCG3基因突变对BcPDR1基因表达的影响;在敲除突变体ΔBcpdr1的基础上,构建BcBCG2、BcBCG3基因过表达菌株ΔBcpdr1/BcBCG2-OE、ΔBcpdr1/BcBCG3-OE,对过表达菌株的表型和致病力进行分析。结果发现,BcPDR1基因的缺失突变体中BcBCG2、BcBCG3基因的表达水平显著升高,BcBCG2、BcBCG3基因沉默突变体中的BcPDR1基因的表达水平显著降低;BcBCG2、BcBCG3基因的过表达菌株的菌落形态、菌丝形态、生长速率、产孢量和致病力均与野生型BC22菌株基本一致,而与ΔBcpdr1突变体存在显著差异。结果表明,灰葡萄孢BcPDR1与Gα亚基基因BcBCG2、BcBCG3之间密切相关,BcPDR1负调控BcBCG2、BcBCG3基因的表达,BcBCG2、BcBCG3正调控BcPDR1基因的表达。研究结果为阐明灰葡萄孢致病基因BcPDR1调控病菌生长发育和致病力的机制奠定了基础。 展开更多
关键词 灰葡萄孢 bcpdr1 Gα亚基基因 BcBCG2 BcBCG3
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