枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BJ3-2发酵薏米高产川芎嗪和溶纤酶体系优化 被引量：1

1

作者 文安燕 秦礼康 +1 位作者 曾海英 朱怡 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期178-184,191,共8页

前期初探发现枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BJ3-2发酵精薏米可高产川芎嗪[2.97 mg/g干基(dry weight,DW)]和纤溶酶(720.84 U/g)。该研究以糙薏米、精薏米和碎薏米为原料,以B.subtilis BJ3-2为发酵菌株,通过单因素及Box-Behnken试验... 前期初探发现枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BJ3-2发酵精薏米可高产川芎嗪[2.97 mg/g干基(dry weight,DW)]和纤溶酶(720.84 U/g)。该研究以糙薏米、精薏米和碎薏米为原料,以B.subtilis BJ3-2为发酵菌株,通过单因素及Box-Behnken试验构建高产川芎嗪和溶纤酶的薏米发酵体系。结果表明,接种量为9.0%、发酵温度为40℃和发酵时间为93 h时,B.subtilis BJ3-2发酵糙薏米中川芎嗪产量为6.15 mg/g DW、溶纤酶酶活为2236.47 U/g,而以接种量为8.1%、发酵温度为38℃和发酵时间为96 h时,发酵精薏米中川芎嗪产量为6.94 mg/g DW、溶纤酶酶活为2142.18 U/g,但碎薏米中川芎嗪产量和溶纤酶酶活均明显偏低。此外,B.subtilis BJ3-2分别发酵的3种薏米,其川芎嗪含量均高于B.subtilis BJ3-2发酵黄豆和CICC 20637发酵薏米。因此,综合考虑加工成本,B.subtilis BJ3-2发酵糙薏米可作为高产川芎嗪和溶纤酶的最佳发酵体系。 展开更多

关键词 薏米 枯草芽孢杆菌 川芎嗪 溶纤酶 Box-Behnken试验

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3种渗透剂对转基因烟草根系枯草芽孢杆菌纤溶酶(BSFE)分泌的调节 被引量：6

2

作者 王瑞刚 张艳春 +2 位作者 张子义 吴自荣 王水平 《植物资源与环境学报》 CAS CSCD 2005年第2期1-5,共5页

用0.05%～8.00%的甘露醇、山梨醇和聚乙二醇6000等3种渗透调节剂可提高转枯草芽孢杆菌纤溶酶(Bacillussubtilisfibrinolyticenzyme,BSFE)转基因烟草(NicotianatabacumL.)根系BSFE的分泌表达水平,其水培液BSFE活性在15d内基本呈抛物线型... 用0.05%～8.00%的甘露醇、山梨醇和聚乙二醇6000等3种渗透调节剂可提高转枯草芽孢杆菌纤溶酶(Bacillussubtilisfibrinolyticenzyme,BSFE)转基因烟草(NicotianatabacumL.)根系BSFE的分泌表达水平,其水培液BSFE活性在15d内基本呈抛物线型变化趋势。经3种渗透剂处理后转BSFE基因烟草水培液的BSFE活性峰值明显高于对照,且出现时间比对照相对延迟1-2d。甘露醇、山梨醇和聚乙二醇6000可作为该转基因烟草根系BSFE分泌表达的有效化学调节剂。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌 烟草根系 纤溶酶 渗透剂 聚乙二醇6000 分泌表达 渗透调节剂 转基因烟草 化学调节剂 变化趋势 抛物线型 时间比对 甘露醇 山梨醇 E基因 活性 水培

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紫外线诱变选育高产豆豉纤溶酶菌株及其产酶条件优化

3

作者 张文勇 张恒慧 王晓丽 《中国酿造》 CAS 北大核心 2024年第3期177-181,共5页

该研究以分离自豆豉样品中产豆豉纤溶酶的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)DC-1为出发菌株,采用紫外线诱变选育高产豆豉纤溶酶且稳定遗传的菌株,并以豆豉纤溶酶活力为评价指标,通过单因素试验及正交试验对其发酵条件进行优化。结果表明... 该研究以分离自豆豉样品中产豆豉纤溶酶的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)DC-1为出发菌株,采用紫外线诱变选育高产豆豉纤溶酶且稳定遗传的菌株,并以豆豉纤溶酶活力为评价指标,通过单因素试验及正交试验对其发酵条件进行优化。结果表明,筛选出一株高产豆豉纤溶酶活力且稳定遗传的诱变菌株DC-V5,其最优发酵条件为:接种量3%、装液量70 mL/250 mL、发酵温度34℃、初始pH 6.5。在此优化发酵条件下,诱变菌株DC-V5产豆豉纤溶酶活力最高达到(451.26±11.09)IU/mL,是优化前出发菌株DC-1的1.74倍。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌 豆豉纤溶酶 紫外线诱变 产酶条件优化

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枯草芽孢杆菌纤溶酶基因在转基因烟草组织中的分泌表达 被引量：5

4

作者 王瑞刚 徐萍 +4 位作者 李高 张子义 王彦 吴自荣 王水平 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期1383-1388,共6页

克隆枯草芽孢杆菌纤溶酶(Bacillussubtilisfibrinolyticenzyme,BSFE)基因及其前导肽序列。通过农杆菌EHA105介导转化,获得转基因烟草植株。其BSFE的表达水平为叶片42.97±28.59U·g-1FW、茎15.14±10.57U·g-1FW和根25.... 克隆枯草芽孢杆菌纤溶酶(Bacillussubtilisfibrinolyticenzyme,BSFE)基因及其前导肽序列。通过农杆菌EHA105介导转化,获得转基因烟草植株。其BSFE的表达水平为叶片42.97±28.59U·g-1FW、茎15.14±10.57U·g-1FW和根25.55±14.71U·g-1FW。其内源BSFE信号肽可在转基因烟草中行使蛋白转运功能,使BSFE具有分泌表达特性。这一系统可用于建立利用植物组织分泌表达外源蛋白的系统模型。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌纤溶酶 转基因 烟草 分泌表达

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豆豉纤溶酶产生菌的筛选及菌种鉴定 被引量：16

5

作者 向梅 吴思方 +1 位作者 王伟平 杨荆树 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2005年第1期21-24,共4页

在收集的全国 2 1个豆豉产品中分离到 36 9株革兰氏阳性芽孢杆菌 ,对其进行产纤溶酶活性筛选 ,得到 1株高产纤溶酶菌株HGD10 7。对菌株HGD10 7进行形态、生理、生化鉴定 ,初步鉴定为枯草芽孢杆菌。

关键词 枯草杆菌 豆豉 纤溶酶 筛选 菌种鉴定

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产纤溶酶海洋枯草芽孢杆菌的发酵工艺研究 被引量：5

6

作者 陈桂光 李文杰 +3 位作者 黄梅华 田苗 张云开 梁智群 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第24期249-252,共4页

对一株产纤溶酶的海洋枯草芽孢杆菌LJ-22的固、液体发酵条件分别进行了优化,确定该菌株的最佳液体发酵条件为温度31℃,初始pH7.0,转速180r/min,接种量4%,培养时间72h,最佳固体发酵条件为温度34℃,初始pH7.0,接种量10%,装样量10g,静置培... 对一株产纤溶酶的海洋枯草芽孢杆菌LJ-22的固、液体发酵条件分别进行了优化,确定该菌株的最佳液体发酵条件为温度31℃,初始pH7.0,转速180r/min,接种量4%,培养时间72h,最佳固体发酵条件为温度34℃,初始pH7.0,接种量10%,装样量10g,静置培养时间72h。在上述条件下,菌株LJ-22的液体发酵产纤溶酶酶活为(830±12.5)IU/mL,是优化前的1.69倍,固体发酵产纤溶酶酶活为(4300±12.8)IU/g,是优化前的1.56倍。通过比较固、液体发酵条件及产酶酶活,得出该菌株更适合液体发酵,便于大规模工业生产。 展开更多

关键词 纤溶酶 海洋枯草芽孢杆菌 液体发酵 固体发酵

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枯草杆菌纤溶酶基因的克隆及表达 被引量：8

7

作者 罗文华 郭勇 韩双艳 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第11期115-119,共5页

为了提高豆豉纤溶酶(DFE)的表达产量,采用PCR方法从高纤溶活性的枯草芽孢杆菌DC12的基因组中扩增获得DFE基因,将含有启动子至3非翻译区的全长1400 bp基因插入大肠杆菌-枯草杆菌穿梭载体pBE3,构建了DFE基因的表达质粒,化学转化枯草杆菌WB... 为了提高豆豉纤溶酶(DFE)的表达产量,采用PCR方法从高纤溶活性的枯草芽孢杆菌DC12的基因组中扩增获得DFE基因,将含有启动子至3非翻译区的全长1400 bp基因插入大肠杆菌-枯草杆菌穿梭载体pBE3,构建了DFE基因的表达质粒,化学转化枯草杆菌WB800获得了DFE的重组表达菌.试验结果表明:DFE基因在自身启动子驱动下,在蛋白酶缺陷型的枯草杆菌中获得了高活性的分泌表达;重组表达菌株培养30 h后,培养物上清液中的纤溶酶活性最高可达690U/mL. 展开更多

关键词 豆豉纤溶酶 枯草杆菌 基因克隆 表达

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产纤溶酶枯草芽孢杆菌发酵条件的研究 被引量：6

8

作者 陈志文 徐尔尼 肖美燕 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期23-24,26,共3页

本实验室筛选到一株产纤溶酶较强的枯草芽孢杆菌,通过研究发现,其最适产酶的发酵条件为:葡萄糖2%、豆渣6%、pH7.0、温度37℃、种龄24h、接种量10%。发酵第4d产酶最高,最大产酶量可达713.11IU/mL。

关键词 纤溶酶 枯草芽孢杆菌 产酶量 发酵条件 尿激酶

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一株高活性豆豉纤溶酶产生菌的筛选及其酶活的测定 被引量：7

9

作者 韩秋霞 邹玉红 崔志芳 《中国酿造》 CAS 北大核心 2008年第5X期28-31,共4页

在收集的全国14个豆豉产品中分离到36株革兰氏阳性芽孢杆菌,利用人工血纤维蛋白平板对其进行产纤溶酶活性筛选,得到一株高产纤溶酶菌株GZ-A1,经形态鉴定初步鉴定为枯草芽孢杆菌。筛选的菌种通过8h种子液的培养,接入发酵液中发酵72h后,... 在收集的全国14个豆豉产品中分离到36株革兰氏阳性芽孢杆菌,利用人工血纤维蛋白平板对其进行产纤溶酶活性筛选,得到一株高产纤溶酶菌株GZ-A1,经形态鉴定初步鉴定为枯草芽孢杆菌。筛选的菌种通过8h种子液的培养,接入发酵液中发酵72h后,发酵液经4℃、9000r/min离心15min,取上清液加到人工制备的纤维蛋白平板上,37℃恒温培养18h^36h以后,通过测定纤维蛋白平板上透明溶解圈的直径大小来确定所产纤溶酶的酶活大小,进一步确定高活性纤溶酶的产生菌株。 展开更多

关键词 枯草杆菌 豆豉 纤溶酶 筛选

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豆豉纤溶酶基因的克隆及其在枯草杆菌中的表达 被引量：4

10

作者 齐海萍 冮洁 +2 位作者 胡文忠 姜爱丽 田密霞 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期159-161,共3页

以实验室筛选的UD8豆豉芽孢杆菌的总DNA为模板,应用PCR技术根据豆豉纤溶酶基因DNA序列(GeneBank AY720895.2)设计并合成1对引物,扩增出了豆豉纤溶酶基因,将该基因克隆到大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭质粒EC-BS8上,构建成表达质粒EC-BS8,再... 以实验室筛选的UD8豆豉芽孢杆菌的总DNA为模板,应用PCR技术根据豆豉纤溶酶基因DNA序列(GeneBank AY720895.2)设计并合成1对引物,扩增出了豆豉纤溶酶基因,将该基因克隆到大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭质粒EC-BS8上,构建成表达质粒EC-BS8,再将其转化到枯草芽孢杆菌Bs6中。筛选表达菌株,实现了豆豉纤溶酶基因在枯草杆菌中高效表达。获得重组菌纤溶酶活力高达9 830 IU.mL-1,是出发菌株活力的2.9倍。经纯化SDS-PAGE鉴定重组豆豉纤溶酶相对分子质量为31.0 kDa。 展开更多

关键词 豆豉纤溶酶 基因克隆 高效表达 枯草芽孢杆菌

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豆豉纤溶酶的定向进化 被引量：4

11

作者 张少平 崔堂兵 +1 位作者 陈亮 郭勇 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第9期138-141,146,共5页

为提高豆豉纤溶酶的药用价值,通过易错PCR方法对来源于Bacillus subtilis DC-12的豆豉纤溶酶DFE基因进行突变并构建突变体文库,利用底物H-D-Val-Leu-Lys-pNA对突变体文库进行筛选.通过3轮易错PCR最终获得催化效率提高的突变酶mDFE3.序... 为提高豆豉纤溶酶的药用价值,通过易错PCR方法对来源于Bacillus subtilis DC-12的豆豉纤溶酶DFE基因进行突变并构建突变体文库,利用底物H-D-Val-Leu-Lys-pNA对突变体文库进行筛选.通过3轮易错PCR最终获得催化效率提高的突变酶mDFE3.序列分析表明突变酶mDFE3基因发生了6处碱基突变,其中4处突变发生氨基酸取代,2处为同义突变;通过swiss-model repository模拟突变酶mDFE3的结构,显示3个突变氨基酸位于回环结构上,1个位于α螺旋上;酶动力学测定结果表明突变酶mDFE3的Km值由0.58mmol/L降低至0.45mmol/L,突变酶mDFE3的催化效率(kcat)是野生型的2.57倍. 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌 豆豉纤溶酶 易错PCR 定向进化 筛选

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两步固态发酵法酿造功能性豆豉 被引量：3

12

作者 龚福明 宋园亮 +3 位作者 张忠华 李晓然 罗义勇 柳陈坚 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期127-133,共7页

运用分离自云南传统发酵豆豉的Bacillus subtilis SP-8-5与Lactobacillus plantarum YM-5-2菌株对大豆进行两步固态混合发酵。首先,将菌株B.subtilis SP-8-5接种至经室温浸泡10 h(20℃,质量比为1∶3),110℃(20min)蒸煮处理并冷却至30℃... 运用分离自云南传统发酵豆豉的Bacillus subtilis SP-8-5与Lactobacillus plantarum YM-5-2菌株对大豆进行两步固态混合发酵。首先,将菌株B.subtilis SP-8-5接种至经室温浸泡10 h(20℃,质量比为1∶3),110℃(20min)蒸煮处理并冷却至30℃的大豆中,于26℃进行初步发酵42 h;随后再接种L.plantarum YM-5-2,并于30℃发酵2 d,最后置于4℃进行后发酵。经两步固态混合发酵处理后,得到一种纤溶活性较强,生产周期短,保质期相对较长,风味独特且易于被大众接受的新型功能性发酵豆豉。当后发酵时间为21 d时,样品豆豉中B.subtilisSP-8-5活菌数为(5.88±0.53)×108 CFU/g,而L.plantarum YM-5-2活菌数则高达(3.50±0.35)×1011 CFU/g,此时检测豆豉纤溶酶的纤溶圈直径高达(2.99±0.06)cm(37℃,静置培养48 h)。 展开更多

关键词 bacillus subtilis SP-8-5 LACTObacillus PLANTARUM YM-5-2 纤溶酶 两步固态发酵法 功能性发酵豆豉

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纳豆激酶的研究进展 被引量：8

13

作者 王乐 王君高 《中国酿造》 CAS 北大核心 2008年第5X期1-4,共4页

纳豆激酶是由纳豆菌代谢产生的具有高效溶栓效果的纤维蛋白。它具有溶栓作用强、体内半衰期长、安全性好和口味易接受等优点。该文对纳豆激酶的溶栓效果同传统溶栓类药物进行了对比,并对纳豆激酶的作用机理、理化性质、稳定性、检测方... 纳豆激酶是由纳豆菌代谢产生的具有高效溶栓效果的纤维蛋白。它具有溶栓作用强、体内半衰期长、安全性好和口味易接受等优点。该文对纳豆激酶的溶栓效果同传统溶栓类药物进行了对比,并对纳豆激酶的作用机理、理化性质、稳定性、检测方法、相关产品生产现状以及新型含有纳豆激酶的发酵食品的研发进行了综述。 展开更多

关键词 纳豆激酶 纳豆菌 血栓溶性 溶栓酶

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豆豉中5株产纤溶酶菌的筛选与鉴定 被引量：5

14

作者 吕美云 刘紫英 《大豆科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期165-170,180,共7页

采用酪蛋白平板初筛的方法,从全国14种纳豆和豆豉中分离到39株具有蛋白酶活力的菌株;又以猪血粉平板进行复筛,并采用纤维蛋白平板法测定纤溶酶活力,得到5株产纤溶酶能力较强菌株,分别命名为CQDC-03、CWND-03、NCDC-02、YJND-01和FJDC-0... 采用酪蛋白平板初筛的方法,从全国14种纳豆和豆豉中分离到39株具有蛋白酶活力的菌株;又以猪血粉平板进行复筛,并采用纤维蛋白平板法测定纤溶酶活力,得到5株产纤溶酶能力较强菌株,分别命名为CQDC-03、CWND-03、NCDC-02、YJND-01和FJDC-02。对其进行16S r DNA序列分析,结果表明:CWND-03、CQDC-03和Bacillus subtilis相似性为99%,NCDC-02和Bacillus subtilis相似性为98%。因而CQDC-02、CWND-03和NCDC-02认定为Bacillus subtilis,YJND-01和FJDC-02是否为Bacillus subtilis的新种还有待进一步鉴定,但确定其为Bacillus属。 展开更多

关键词 纤溶酶 筛选 16S RDNA 鉴定 枯草芽孢杆菌

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豆豉纤溶酶基因在枯草杆菌中表达的研究进展 被引量：1

15

作者 齐海萍 胡文忠 +1 位作者 姜爱丽 田密霞 《安徽农业科学》 CAS 2012年第7期3881-3883,共3页

文中介绍了豆豉纤溶酶的分子生物学特性及其基因在宿主表达菌——枯草杆菌中表达的研究进展。

关键词 豆豉纤溶酶 基因表达 枯草杆菌

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枯草芽孢杆菌纤溶酶的生物分析方法及其在猕猴体内的药动学研究

16

作者 蔡永明 陈拯民 +1 位作者 孙超渊 刘昌孝 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2010年第1期27-31,共5页

目的:研究猕猴单次静脉滴注注射用枯草芽孢杆菌纤溶酶(BSFE)的药动学。方法:6只猕猴静脉滴注BSFE2.5mg/kg,采用ELISA法测定动物的血药浓度,实验数据用DAS2.0药动程序拟合并计算药动参数。结果:6只猕猴静脉滴注2.5mg/kg的BSFE,浓度-时间... 目的:研究猕猴单次静脉滴注注射用枯草芽孢杆菌纤溶酶(BSFE)的药动学。方法:6只猕猴静脉滴注BSFE2.5mg/kg,采用ELISA法测定动物的血药浓度,实验数据用DAS2.0药动程序拟合并计算药动参数。结果:6只猕猴静脉滴注2.5mg/kg的BSFE,浓度-时间数据经药代动力学参数计算,表明药物消除符合二房室模型。6只猕猴的达峰时间(tmax)均为0.5h,峰浓度(Cmax)均值为(592.3±150.9)μg/L;平均消除t1/2β为(5.78±1.19)h;平均清除率(CL)为(4.42±1.19)L.h-1.kg-1;药时AUC0-24.5h均值为(557.1±211.1)μg.L-1.h。结论:本试验所建立的双抗体夹心ELISA法,灵敏度高、特异性强、操作简便,适于BFSE的药代动力学研究。 展开更多

关键词 注射用枯草芽孢杆菌纤溶酶 ELISA 药动学 猕猴

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海洋纤溶酶高产菌株的选育及产酶条件优化 被引量：5

17

作者 黎艳 张兆峰 +3 位作者 田苗 张云开 陈桂光 梁智群 《中国酿造》 CAS 2012年第2期33-37,共5页

以海洋枯草芽孢杆菌FA-7为出发菌株,经紫外诱变获得一株遗传稳定性良好的高产纤溶酶菌株Y-22,并对该菌株的发酵培养基和发酵条件进行优化,确定菌株Y-22的最佳产酶条件为可溶性淀粉4%,黄豆粕粉2.5%,CaCl20.025%,MgSO4.7H2O 0.35%,吐温-80... 以海洋枯草芽孢杆菌FA-7为出发菌株,经紫外诱变获得一株遗传稳定性良好的高产纤溶酶菌株Y-22,并对该菌株的发酵培养基和发酵条件进行优化,确定菌株Y-22的最佳产酶条件为可溶性淀粉4%,黄豆粕粉2.5%,CaCl20.025%,MgSO4.7H2O 0.35%,吐温-80 0.15%;接种量4%,装液量50mL/250mL,初始pH值为5.5,发酵温度30℃,180r/min振荡培养96h。在此条件下,菌株Y-22的发酵液粗酶酶活为(910±11.3)IU/mL,是出发菌株的3.05倍。 展开更多

关键词 海洋枯草芽孢杆菌 纤溶酶:诱变育种 优化

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海洋源纤溶酶高产菌株的诱变育种及液体培养基优化 被引量：2

18

作者 刘延廖 漆光辉 +3 位作者 李培玲 梁智群 陈桂光 曾伟 《中国酿造》 CAS 北大核心 2016年第12期53-58,共6页

为获得纤溶酶高产菌株及其最优发酵条件,以海洋环境来源的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)H-A-03为出发菌株,经过^(60)Co辐射诱变获得了一株遗传稳定性好的纤溶酶高产菌株F8-C,其酶活力较出发菌株提高28.78%。采用统计学优化方法获得... 为获得纤溶酶高产菌株及其最优发酵条件,以海洋环境来源的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)H-A-03为出发菌株,经过^(60)Co辐射诱变获得了一株遗传稳定性好的纤溶酶高产菌株F8-C,其酶活力较出发菌株提高28.78%。采用统计学优化方法获得了组分更简单、用量更少、更利于菌株产酶的培养基:可溶性淀粉41.6g/L、黄豆粕粉26.2g/L、CaCl_2 1.0g/L,KH_2PO_42.0g/L。在此基础上,3L摇瓶放大试验结果显示,菌株F8-C的产酶量达到(3231±21)U/mL,较出发菌株H-A-3提高44.8%。结果表明利用^(60)Co辐射诱变育种,并采用统计学方法优化培养基,对于提高枯草芽孢杆菌纤溶酶的产酶量是一种有效策略。该研究结果也将为下一步发酵罐扩大试验奠定基础。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌 纤溶酶 发酵培养基 发酵条件 优化

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两种粗提纯法对纤溶酶纯化效果的比较研究 被引量：3

19

作者 温健 潘师翰 +2 位作者 焉凯舟 郑鑫 梁智群 《中国酿造》 CAS 2014年第9期17-21,共5页

采用硫酸铵盐析法及乙醇沉淀法对海洋枯草芽孢杆菌纤溶酶的纯化效果进行比较研究,得到的最佳纯化方案为:取一定体积的纤溶酶发酵液进行预处理,再进行分段盐析及分级沉淀,在分段盐析中,30%和70%饱和度的硫酸铵分别用于去除杂蛋白和沉淀... 采用硫酸铵盐析法及乙醇沉淀法对海洋枯草芽孢杆菌纤溶酶的纯化效果进行比较研究,得到的最佳纯化方案为:取一定体积的纤溶酶发酵液进行预处理,再进行分段盐析及分级沉淀,在分段盐析中,30%和70%饱和度的硫酸铵分别用于去除杂蛋白和沉淀纤溶酶,最后进行碱处理及超滤除盐;在分级沉淀中,最佳乙醇沉淀时间为1.5 h,去除杂蛋白和沉淀纤溶酶的乙醇体积比分别为25%和165%,最后将两种方法得到的粗提液进行冷冻干燥,硫酸铵法的酶活回收率为83.52%,纯化倍数为1.42,冻干粉得率为4.812 g/L,单位酶活为76 755.82 IU/g;乙醇纯沉淀法的酶活回收率为89.7%,纯化倍数为1.72,冻干粉得率为7.611 g/L,单位酶活为137 190.57 IU/g,该结果表明乙醇沉淀法对纤溶酶的粗提效果要优于硫酸铵盐析法。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌 纤溶酶 硫酸铵盐析 乙醇沉淀 纯化

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产纤溶酶微生物的筛选鉴定及生长模型的建立 被引量：2

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作者 刘彩平 崔堂兵 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期12-15,19,共5页

使用酪蛋白平板初筛、摇瓶复筛的方法,从9种豆豉中分离到纤溶酶产生菌59株,其中DC-YJ11菌株的酶活较高。通过对其形态特征、生理生化特征结合16SrDNA序列分析,鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。并对其构建了系统发育树和基于BP... 使用酪蛋白平板初筛、摇瓶复筛的方法,从9种豆豉中分离到纤溶酶产生菌59株,其中DC-YJ11菌株的酶活较高。通过对其形态特征、生理生化特征结合16SrDNA序列分析,鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。并对其构建了系统发育树和基于BP神经网络的生长模型BP-YJ11。 展开更多

关键词 枯草芽孢杆菌 纤溶酶 鉴定 BP神经网络

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