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枯草芽孢杆菌A30菌株产生的拮抗肽的分离纯化与理化性质研究 被引量：34
1
作者 何青芳 陈卫良 马志超 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期361-365,共5页
平皿测试表明 Bacillussubtilis A30菌株对多种植物病原真菌 ,例如水稻纹枯病菌 (Rhizoctonia solani)、稻瘟病菌 (Magnaporthegrisea)等有强烈抑制作用。在小区试验中 A30菌液对水稻纹枯病也表现出了较好的防治效果。 A30菌株培养液经... 平皿测试表明 Bacillussubtilis A30菌株对多种植物病原真菌 ,例如水稻纹枯病菌 (Rhizoctonia solani)、稻瘟病菌 (Magnaporthegrisea)等有强烈抑制作用。在小区试验中 A30菌液对水稻纹枯病也表现出了较好的防治效果。 A30菌株培养液经硫酸铵沉淀、FPL C疏水色谱、HPLC反相色谱后 ,纯化得到一种拮抗活性物质 ,命名为 P1。 P1对热稳定 ,对蛋白酶不敏感 ;茚三酮反应呈阴性 ,用酸水解后茚三酮反应和双缩脲反应呈阳性。经 L C- ESI- MS分析初步判断 P1的分子量为14 76 . 展开更多
关键词 分离 纯化 理化性质 枯草芽孢杆菌 拮抗肽 水稻 纹枯病菌 拮抗菌 纹枯病
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枯草芽孢杆菌C-36纤维素酶的纯化及酶学性质 被引量：13
2
作者 胥兵 陈惠 +2 位作者 韩学易 官兴颖 吴琦 《四川农业大学学报》 CSCD 2006年第4期398-401,共4页
枯草芽孢杆菌C-36纤维素酶经硫酸铵、SephadexG-75、SephadexG-100分离纯化后,得到一个电泳纯的葡聚糖内切酶。SDS-PAGE结果表明,该酶分子量约为35kD。最适反应温度和pH分别为65℃和pH6.8,Zn2+、Pb2+、Fe3+对酶有抑制作用,Ba2+、Fe2+对... 枯草芽孢杆菌C-36纤维素酶经硫酸铵、SephadexG-75、SephadexG-100分离纯化后,得到一个电泳纯的葡聚糖内切酶。SDS-PAGE结果表明,该酶分子量约为35kD。最适反应温度和pH分别为65℃和pH6.8,Zn2+、Pb2+、Fe3+对酶有抑制作用,Ba2+、Fe2+对酶有激活作用,在50℃,pH6.8条件下,酶对CMC-Na的米氏常数Km为0.34g/L,最大反应速度Vmax为0.17mg/(min.mL)。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 纤维素酶 纯化 性质
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枯草芽孢杆菌弹性蛋白酶的纯化及酶学性质研究 被引量：5
3
作者 刘书亮 吴琦 +1 位作者 詹莉 赖文 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期26-30,共5页
对枯草芽孢杆菌BEM01菌株发酵液中的弹性蛋白酶进行了分离纯化,并研究了酶学性质。先后采用了硫酸铵分级沉淀、离子交换层析和分子筛层析等方法,弹性蛋白酶的回收率为7.88%,纯化倍数为13.79,结合SDS-PAGE和分子筛层析确定该弹性蛋白酶... 对枯草芽孢杆菌BEM01菌株发酵液中的弹性蛋白酶进行了分离纯化,并研究了酶学性质。先后采用了硫酸铵分级沉淀、离子交换层析和分子筛层析等方法,弹性蛋白酶的回收率为7.88%,纯化倍数为13.79,结合SDS-PAGE和分子筛层析确定该弹性蛋白酶是一单链蛋白,分子量约为31ku。对酶学性质的研究表明,该弹性蛋白酶属于含有Ca2+的金属蛋白酶类;其最适作用温度为50℃,具有良好的热稳定性;在硼砂-硼酸缓冲体系、Tris-HCl缓冲体系中酶最适反应pH分别为7.4和8.6,在pH8.0～11.0酶活力趋于稳定;10mmol/L的Ca2+有激活和稳定酶活作用,SDS和吐温-80也有激活酶活作用,而Li+、Na+、Zn+、K+、Ba2+、Mg2+、Mn2+和EDTA对酶活均有不同程度的抑制作用;其催化动力学方程为:y=0.186x+32.493;V=0.0308U/mL,K=0.0057g/mL。 展开更多
关键词 弹性蛋白酶 枯草芽孢杆菌 纯化 酶学性质
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一种枯草芽孢杆菌氨肽酶的纯化及酶学性质 被引量：15
4
作者 田亚平 须瑛敏 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期7-10,共4页
利用乙醇分级沉淀(37.5%～60%)、SephadexG75凝胶过滤、Phenylsepharose6FF疏水色谱三步分离使一种枯草芽孢杆菌氨肽酶得到纯化,比活1.5567×106U/mg;SDSPAGE鉴定为纯酶,分子质量75ku,全酶含2个亚基。纯酶最适温度60℃,温度稳定范... 利用乙醇分级沉淀(37.5%～60%)、SephadexG75凝胶过滤、Phenylsepharose6FF疏水色谱三步分离使一种枯草芽孢杆菌氨肽酶得到纯化,比活1.5567×106U/mg;SDSPAGE鉴定为纯酶,分子质量75ku,全酶含2个亚基。纯酶最适温度60℃,温度稳定范围20～70℃。最适pH8.5,pH稳定范围8.0～10.0。Zn2+、Ni2+有较大的抑制作用,Co2+则对酶活有较强的激活作用。酶活性中心可能结合了2个Zn2+,米氏常数Km为1μmol/L,最大反应速度Vmax为5000μmol/(L·min)。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 氨肽酶 纯化 特性
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草鱼肠道一菌株产纤维素酶的分离纯化及性质研究 被引量：4
5
作者 贺刚 何力 +1 位作者 谢从新 郝勃 《水生态学杂志》 北大核心 2008年第6期107-110,共4页
从草鱼肠道分离出1株枯草芽孢杆菌,有较强的活性。该菌产生的纤维素酶粗酶液,经盐析、透析,并通过葡聚糖凝胶层析柱SephadexG-75分离纯化,经SDS-PAGE后表明第2峰已纯化,得到一种相对分子质量约为62.43kD纤维素酶。分离纯化后该酶的比活... 从草鱼肠道分离出1株枯草芽孢杆菌,有较强的活性。该菌产生的纤维素酶粗酶液,经盐析、透析,并通过葡聚糖凝胶层析柱SephadexG-75分离纯化,经SDS-PAGE后表明第2峰已纯化,得到一种相对分子质量约为62.43kD纤维素酶。分离纯化后该酶的比活力提高了2.924倍,回收率为6.38%。酶学试验研究表明:该酶的最适反应温度为55℃,最适pH值为7.0;Lineweaver-Burk法求得动力学参数,Km和Vmax分别为1.02×10-3g/mL、2.727×10-2mg/(mL·min)。 展开更多
关键词 草鱼 枯草芽孢杆菌 纤维素酶 分离纯化 酶学性质 动力学
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重组磷脂酰丝氨酸合成酶的分离纯化及酶学性质研究 被引量：1
6
作者 张业尼 路福平 +1 位作者 李玉 王建玲 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期106-110,共5页
利对重组枯草芽孢杆菌（pBES-pss）表达的磷脂酰丝氨酸合成酶进行分离纯化及酶学性质研究。pBES-pss发酵后的粗酶液经硫酸铵盐析、中空纤维膜除盐浓缩、SP—SepharoseHP离子交换层析和Sephadex G-75凝胶层析。基本获得电泳纯的重组磷脂... 利对重组枯草芽孢杆菌（pBES-pss）表达的磷脂酰丝氨酸合成酶进行分离纯化及酶学性质研究。pBES-pss发酵后的粗酶液经硫酸铵盐析、中空纤维膜除盐浓缩、SP—SepharoseHP离子交换层析和Sephadex G-75凝胶层析。基本获得电泳纯的重组磷脂酰丝氨酸合成酶，比活力可达13．62U／mg，分子量约为53kD。酶学性质研究表明，该酶催化卵磷脂水解反应的最适pH8．0，最适温度为35℃。稳定性研究表明：该酶在pH6．5～9．5区间和低于45℃温度下稳定。表面活性剂及金属离子对该酶水解活性的影响结果表明，SDS、Tween20、Tween80对该酶有抑制作用，Triton X-100对该酶有增强作用；Mg^2＋、Zn^2＋、K^＋对该酶有抑制作用，Ca^2＋、Mn^2＋和EDTA对该酶有增强作用。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 磷脂酰丝氨酸合成酶 纯化 性质
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枯草芽孢杆菌HS18碱性蛋白酶分离纯化及其性质研究 被引量：3
7
作者 李玉环 张岩 时威 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第19期187-190,共4页
从合浦珠母贝肠道中分离鉴定到酶菌株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)HS18,将枯草芽孢杆菌HS18的发酵液,经过硫酸铵盐析、DEAE-Sephadex A-50柱层析、Sephadex G-100柱层析3步纯化后得到了单一的酶蛋白,回收率为11.4%;经SDS-聚丙烯酰... 从合浦珠母贝肠道中分离鉴定到酶菌株枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)HS18,将枯草芽孢杆菌HS18的发酵液,经过硫酸铵盐析、DEAE-Sephadex A-50柱层析、Sephadex G-100柱层析3步纯化后得到了单一的酶蛋白,回收率为11.4%;经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得酶蛋白分子量约为31ku;该蛋白酶最适反应温度为50℃,最适pH10.0;K+及Na+对酶有明显激活作用;丝氨酸蛋白酶特异性抑制剂(PMSF)能强烈抑制酶活性。表明所纯化到的蛋白酶为丝氨酸碱性蛋白酶。 展开更多
关键词 合浦珠母贝 枯草芽孢杆菌HS18 碱性蛋白酶 分离纯化 酶学性质
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枯草芽孢杆菌WHNB02植酸酶的酶学性质研究 被引量：1
8
作者 胡勇 王红宁 +3 位作者 吴琦 邹立扣 于新芬 赵海霞 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2005年第4期16-20,共5页
从 118 份样品中分离到 1 株产植酸酶的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis,WHNB02),其发酵液经乙醇沉淀、硫酸铵分级沉淀及Sephadex G-100柱层析等步骤后分离纯化了该酶,纯化倍数约为 31.5 倍,回收率为13.0%.该酶为单体酶,SDS-PAGE测得的... 从 118 份样品中分离到 1 株产植酸酶的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis,WHNB02),其发酵液经乙醇沉淀、硫酸铵分级沉淀及Sephadex G-100柱层析等步骤后分离纯化了该酶,纯化倍数约为 31.5 倍,回收率为13.0%.该酶为单体酶,SDS-PAGE测得的分子量约为 43 ku,以植酸钠为底物的K-m值为 0.5 mmol/L,酶反应的最适温度为 60 ℃,80 ℃作用 10 min酶活保存61%,最适pH为 7.0,在pH 6.0～10.0 范围内稳定,酶活性及稳定性都需Ca2+存在.EDTA、Mn2+、Ba2+(5 mmol/L)对酶活具有很大的抑制作用. 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 植酸酶 纯化 性质
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苹果霉心病生防菌株抗菌蛋白的提纯与部分性质初报 被引量：4
9
作者 辛玉成 秦淑莲 +2 位作者 金静 张迎春 徐坤 《莱阳农学院学报》 1999年第1期35-38,共4页
对苹果霉心病具有优良防治效 果的枯草芽 孢杆菌（ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ （ Ｅｈｒｅｎｂｅｒｇ） Ｃｏｈｎ） Ｘ Ｍ１６ 菌株，是作者从莱阳农学院农场苹果树上分 离得到的一种拮抗菌株。 Ｘ Ｍ１６ 菌株培养液经硫... 对苹果霉心病具有优良防治效 果的枯草芽 孢杆菌（ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ （ Ｅｈｒｅｎｂｅｒｇ） Ｃｏｈｎ） Ｘ Ｍ１６ 菌株，是作者从莱阳农学院农场苹果树上分 离得到的一种拮抗菌株。 Ｘ Ｍ１６ 菌株培养液经硫酸铵分 级盐析和 Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－ １００ 及 Ｄ Ｅ３２ 柱层析后，分离纯化得到一种抗 菌蛋白。该抗 菌蛋白通过 Ｓ Ｄ Ｓ－ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ分析测定的分子 量 为６００００ ，等 电点 约为 ５ ．５ ， 偏酸 性； Ｘ Ｍ１６ 菌 株抗 菌蛋 白对 １００ ℃以 上高 温稳 定。 Ｘ Ｍ１６ 菌株抗菌蛋白对１０ 种测定的病原真菌，均具有良好的抑 制作用，表明其抗菌的广谱 性。此 抗菌蛋白对 Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ａｌｔｅｒｎａｔａ 等真菌病原的抑菌机理主要 表现为： 抑制病菌孢子萌发，使孢 子发芽异常；使菌丝畸变，细胞壁溶解，原生质泄漏。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 抗菌蛋白 苹果 霉心病 提纯
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椰果内生枯草芽孢杆菌YZ-21产β-甘露聚糖酶的纯化及酶学性质研究 被引量：3
10
作者 张建新 郭祥瑞 +2 位作者 穆广亚 冯军厂 常绪路 《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2020年第3期95-102,共8页
[目的]分离纯化来源于内生枯草芽孢杆菌YZ-21的β-甘露聚糖酶,并研究其酶学性质.[方法]采用乙醇沉淀法、硫酸铵盐析法、聚乙二醇(PEG)/硫酸铵[(NH 4)2SO 4]双水相体系进行分离与纯化,在此基础研究它的酶学性质.[结果]比较3种纯化方法,... [目的]分离纯化来源于内生枯草芽孢杆菌YZ-21的β-甘露聚糖酶,并研究其酶学性质.[方法]采用乙醇沉淀法、硫酸铵盐析法、聚乙二醇(PEG)/硫酸铵[(NH 4)2SO 4]双水相体系进行分离与纯化,在此基础研究它的酶学性质.[结果]比较3种纯化方法,最优方法为双水相萃取法,在双水相体系为16%(NH 4)2SO 4、18%PEG2000、2%NaCl条件下,纯化倍数最高可以达到3.06,酶回收率达到99.26%;酶学性质研究表明,β-甘露聚糖酶的最适反应pH为7.0,最适的反应温度是40℃,pH稳定性在3.0~7.0,热稳定范围在35~55℃之间;Ca^2+,Ba^2+,Mg^2+,K^+,Co^2+对酶都有激活作用,而Ca^2+激活作用最强,Cu^2+,Na^+,Zn^2+,Mn^2+,EDTA对酶有抑制作用.[结论]利用双水相萃取法较好纯化了β-甘露聚糖酶,酶学性质良好,可以广泛应用于饲料添加剂、纸浆漂白和食品加工等领域. 展开更多
关键词 Β-甘露聚糖酶 枯草芽孢杆菌 分离纯化 酶学性质
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