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枯草芽孢杆菌S44抑菌化合物合成关键基因ituD的功能分析被引量：4: 1; 作者张慧杜娟赵思峰《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第10期2281-2285,共5页; 【目的】通过对突变体及相关基因表达分析来研究ituD基因在菌株S44中的功能。【方法】采用qRT-PCR分析ituD的表达量,通过盆栽实验分析菌株对棉苗生长、病害防治、发病率的影响;测定土壤中菌含量,采用HPLC对土壤中的iturin A进行检测。... 展开更多; 关键词 bacillus subtilis S44 itud基因 iturin a; 在线阅读下载PDF 职称材料

枯草芽孢杆菌S44菌株ituD基因的克隆及原核表达被引量：6: 2; 作者任娟孙佰平 +2 位作者杜娟张慧赵思峰《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2012年第5期577-581,共5页; 为了进一步明确枯草芽孢杆菌S44菌株的防病机理,克隆其Iturin A合成关键基因ituD,对该基因进行了原核表达。通过PCR技术克隆了枯草芽孢杆菌S44菌株ituD基因,序列分析结果表明,该序列全长为1203bp,编码400个氨基酸,与已报道的ituD氨基酸... 展开更多; 关键词枯草芽孢杆菌伊枯草菌素 itud基因原核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

枯草芽胞杆菌DarA蛋白的鉴定及其原核表达被引量：1: 3; 作者于秀菊孙铮 +3 位作者韩小涛李钰钰于淼董常生《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期1378-1385,共8页; 目前,我国全面禁止饲料中添加抗生素,寻找新型的抗生素替代物是当前研究的热点之一。本研究旨在分离枯草芽胞杆菌SXAU18所产具有抗菌活性的蛋白物质,并通过原核表达系统获得其具有抗菌活性的重组蛋白。试验选用硫酸铵沉淀、氯仿抽提、... 展开更多; 关键词羊驼枯草芽胞杆菌细菌素分离纯化原核表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

角蛋白酶产生菌的分离鉴定及其kerC的克隆表达被引量：4: 4; 作者侯晟琦王丽华 +3 位作者赖欣陈惠吴琦韩学易《中国环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1845-1852,共8页; 以四川农业大学养鸡场堆砌废弃羽毛处土壤为样品,筛选出一株具有较强降解羽毛能力的细菌B-3菌株.经形态学、生理生化特性和16S rRNA基因序列分析,鉴定其为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),命名为枯草芽孢杆菌B-3.并成功克隆到该菌株的... 展开更多; 关键词角蛋白酶枯草芽孢杆菌B-3 基因克隆 kerC基因原核表达 HIS-TaG; 在线阅读下载PDF 职称材料

富含蛋氨酸玉米醇溶蛋白在枯草芽胞杆菌中的表达被引量：5: 5; 作者娄丽高学军敖金霞《微生物学杂志》 CAS CSCD 2011年第5期31-34,共4页; 蛋氨酸是畜禽饲料中的第一限制性氨基酸,也是饲料产品进行质量控制与质量评价最为关注的指标之一。利用基因工程方法,从玉米胚乳中克隆高蛋氨酸蛋白基因(10 kuδzein),与pHT43构建重组表达质粒,将其转入枯草芽胞杆菌中,IPTG诱导其表达,... 展开更多; 关键词蛋氨酸枯草芽胞杆菌原核表达 10 kuδ玉米醇溶蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

枯草芽孢杆菌硫氧还蛋白还原酶的原核表达及活性分析: 6; 作者陈洪娜李建文 +1 位作者江翱孙文秀《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2016年第12期2054-2059,共6页; 硫氧还蛋白还原酶(TrxR)是一种NADPH依赖的、含硒的黄素蛋白,在细胞增殖和分化、维持细胞内外氧化还原平衡中起重要作用。通过基因特异性引物从枯草芽孢杆菌BS04菌株中扩增TrxR编码基因,亚克隆至p ET-28a(+)原核表达载体并转化大肠埃希... 展开更多; 关键词枯草芽孢杆菌硫氧还蛋白还原酶原核表达活性分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名枯草芽孢杆菌S44抑菌化合物合成关键基因ituD的功能分析被引量：4: 1; 作者张慧杜娟赵思峰; 机构新疆绿洲农业病虫害治理与植保资源利用自治区高校重点实验室重庆市农业科学院农业资源与环境研究所; 出处《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第10期2281-2285,共5页; 基金国家自然科学基金项目“滴灌条件下枯草芽孢杆菌S44防治加工番茄根腐病防病机理研究”(30800733) 重庆市农发资金基础科研项目(NKY-2019AC001,NKY-2020AC010)。; 文摘【目的】通过对突变体及相关基因表达分析来研究ituD基因在菌株S44中的功能。【方法】采用qRT-PCR分析ituD的表达量,通过盆栽实验分析菌株对棉苗生长、病害防治、发病率的影响;测定土壤中菌含量,采用HPLC对土壤中的iturin A进行检测。【结果】qRT-PCR结果表明,S1株的ituD基因几乎没有表达,其抑菌活性丧失。在盆栽实验中,S44-A菌株能在土壤中定殖,14 d后在土壤中检测到iturin A;与S44-A相比S1存活量较少,并且在14 d后未检测到iturin A。【结论】ituD基因是S44菌株抑菌活性、植物根际定殖与调控的关键因子。; 关键词 bacillus subtilis S44 itud基因 iturin a; Keywords bacillus subtilis S44 itud gene iturin a; 分类号 S476 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名枯草芽孢杆菌S44菌株ituD基因的克隆及原核表达被引量：6: 2; 作者任娟孙佰平杜娟张慧赵思峰; 机构石河子大学绿洲农作物病害防控重点实验室; 出处《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2012年第5期577-581,共5页; 基金国家自然科学基金(30800733) 新疆兵团重点科技攻关计划(2010GG21) 石河子大学重大科技攻关计划项目(GXJS2010-ZDGG04); 文摘为了进一步明确枯草芽孢杆菌S44菌株的防病机理,克隆其Iturin A合成关键基因ituD,对该基因进行了原核表达。通过PCR技术克隆了枯草芽孢杆菌S44菌株ituD基因,序列分析结果表明,该序列全长为1203bp,编码400个氨基酸,与已报道的ituD氨基酸序列同源性为85%。构建了原核生物表达载体pET28a(+)-ituD,对不同的IPTG诱导浓度和诱导时间等条件的优化结果表明,37℃6h能诱导ituD融合蛋白的最大量表达,在0.5mmol/LIPTG浓度下可以成功表达出ituD蛋白。; 关键词枯草芽孢杆菌伊枯草菌素 itud基因原核表达; Keywords bacillus subtilis iturin a itud prokaryotic expression; 分类号 S476 [农业科学—农业昆虫与害虫防治] Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名枯草芽胞杆菌DarA蛋白的鉴定及其原核表达被引量：1: 3; 作者于秀菊孙铮韩小涛李钰钰于淼董常生; 机构山西农业大学动物医学学院辽宁省疾病预防控制中心; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期1378-1385,共8页; 基金山西省青年科学基金项目(201801D221301) 山西农业大学创新团队项目(CXTD201201)。; 文摘目前,我国全面禁止饲料中添加抗生素,寻找新型的抗生素替代物是当前研究的热点之一。本研究旨在分离枯草芽胞杆菌SXAU18所产具有抗菌活性的蛋白物质,并通过原核表达系统获得其具有抗菌活性的重组蛋白。试验选用硫酸铵沉淀、氯仿抽提、分子截留等蛋白提取技术,对枯草芽胞杆菌SXAU18产生的抗菌蛋白进行分离纯化;通过SDS-PAGE技术和牛津杯扩散法检测分离到的蛋白物质的抑菌活性;通过质谱、生物信息学技术分析预测目的蛋白的基因序列;利用大肠杆菌表达系统和AKTA蛋白纯化系统对目的蛋白进行表达和纯化;借助牛津杯扩散法鉴定重组蛋白的抑菌活性。结果表明,枯草芽胞杆菌SXAU18所产的抗菌物质为相对分子质量15 ku左右的蛋白质,含有共同的特定氨基酸序列—GSSIFGLAPGK,对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、藤黄微球菌和单增李斯特菌有较好的抑菌活性;通过质谱分析和生物信息学推测SXAU18所产的(主要)抑菌蛋白为DarA;经诱导表达的重组蛋白DarA主要以可溶性上清蛋白形式存在,纯化后的DarA蛋白为单一条带,并具有良好的抑菌活性。结果提示,分离自枯草芽胞杆菌SXAU18的抗菌蛋白DarA具有抑制金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、藤黄微球菌和单增李斯特菌生长的活性,且可以通过体外表达获取该蛋白。; 关键词羊驼枯草芽胞杆菌细菌素分离纯化原核表达; Keywords alpaca bacillus subtilis bacteriocin isolation and purification prokaryotic expression; 分类号 Q939.92 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名角蛋白酶产生菌的分离鉴定及其kerC的克隆表达被引量：4: 4; 作者侯晟琦王丽华赖欣陈惠吴琦韩学易; 机构四川农业大学生命科学与理学院; 出处《中国环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1845-1852,共8页; 文摘以四川农业大学养鸡场堆砌废弃羽毛处土壤为样品,筛选出一株具有较强降解羽毛能力的细菌B-3菌株.经形态学、生理生化特性和16S rRNA基因序列分析,鉴定其为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),命名为枯草芽孢杆菌B-3.并成功克隆到该菌株的角蛋白酶基因kerC(GenBank No.:JN021789),在大肠杆菌BL21(Escherichia coli BL21)中获得了高效表达.该基因全长1146bp,GC含量46.5%,编码381个氨基酸,与已报道的枯草芽孢杆菌YYW-1的kerC基因(GenBank No.:EU362730)同源性达到100%.重组菌株经IPTG诱导后角蛋白酶酶活力达14.8U/mL,经His-Tag纯化和SDS-PAGE分析表明,重组角蛋白酶分子量约为60kDa(融合了硫氧还蛋白,Trx).重组角蛋白酶最适反应温度和pH值分别为65℃与7.0.; 关键词角蛋白酶枯草芽孢杆菌B-3 基因克隆 kerC基因原核表达 HIS-TaG; Keywords keratinase bacillus subtilis B-3 gene cloning kerC gene prokaryotic expression His-Tag; 分类号 X172 [环境科学与工程—环境科学] Q89 [生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名富含蛋氨酸玉米醇溶蛋白在枯草芽胞杆菌中的表达被引量：5: 5; 作者娄丽高学军敖金霞; 机构东北农业大学乳品科学教育部重点实验室; 出处《微生物学杂志》 CAS CSCD 2011年第5期31-34,共4页; 基金黑龙江省农业生物功能基因重点实验室开放课题(NXGJ2009-001)资助项目; 文摘蛋氨酸是畜禽饲料中的第一限制性氨基酸,也是饲料产品进行质量控制与质量评价最为关注的指标之一。利用基因工程方法,从玉米胚乳中克隆高蛋氨酸蛋白基因(10 kuδzein),与pHT43构建重组表达质粒,将其转入枯草芽胞杆菌中,IPTG诱导其表达,发现重组菌在26 ku处出现了1条明显条带。HPLC检测蛋氨酸含量,重组菌的蛋氨酸含量比野生型菌株提高了20.51%。该重组菌为以后将其做为饲料添加剂进一步应用提供了技术基础。; 关键词蛋氨酸枯草芽胞杆菌原核表达 10 kuδ玉米醇溶蛋白; Keywords methionine bacillus subtilis prokaryotic expression 10 kuδ zein; 分类号 Q939.124 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名枯草芽孢杆菌硫氧还蛋白还原酶的原核表达及活性分析: 6; 作者陈洪娜李建文江翱孙文秀; 机构长江大学生命科学学院长江大学根系生物研究所; 出处《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2016年第12期2054-2059,共6页; 基金长江大学长江青年人才基金项目(2015cqr18) 湿地生态与农业利用教育部工程研究中心开放基金项目(KF201410); 文摘硫氧还蛋白还原酶(TrxR)是一种NADPH依赖的、含硒的黄素蛋白,在细胞增殖和分化、维持细胞内外氧化还原平衡中起重要作用。通过基因特异性引物从枯草芽孢杆菌BS04菌株中扩增TrxR编码基因,亚克隆至p ET-28a(+)原核表达载体并转化大肠埃希菌BL21(DE3),经过IPTG诱导表达后采用Ni离子亲和层析进行重组蛋白纯化及活性分析。结果表明,枯草芽孢杆菌BS04菌株的TrxR基因全长1 011 bp,编码336个氨基酸,与已知枯草芽孢杆菌TrxR氨基酸同源性达99%。SDS-PAGE电泳和Western-blotting分析发现,重组蛋白分子量约37 ku,与预期相符。DTNB还原法测定TrxR活性及酶动力学常数结果表明,其对DTNB具有较高的还原活性,其Km和Kcat值分别为3.06 mmol·L-1和324.71 min-1。该研究结果为进一步了解TrxR的功能提供了参考依据。; 关键词枯草芽孢杆菌硫氧还蛋白还原酶原核表达活性分析; Keywords bacillus subtilis thioredoxin reductase prokaryotic expression activity analysis; 分类号 Q939.9 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	枯草芽孢杆菌S44抑菌化合物合成关键基因ituD的功能分析	张慧杜娟赵思峰	《西南农业学报》 CSCD 北大核心	2020	4	在线阅读下载PDF 职称材料
2	枯草芽孢杆菌S44菌株ituD基因的克隆及原核表达	任娟孙佰平杜娟张慧赵思峰	《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS	2012	6	在线阅读下载PDF 职称材料
3	枯草芽胞杆菌DarA蛋白的鉴定及其原核表达	于秀菊孙铮韩小涛李钰钰于淼董常生	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2021	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	角蛋白酶产生菌的分离鉴定及其kerC的克隆表达	侯晟琦王丽华赖欣陈惠吴琦韩学易	《中国环境科学》 EI CAS CSCD 北大核心	2012	4	在线阅读下载PDF 职称材料
5	富含蛋氨酸玉米醇溶蛋白在枯草芽胞杆菌中的表达	娄丽高学军敖金霞	《微生物学杂志》 CAS CSCD	2011	5	在线阅读下载PDF 职称材料
6	枯草芽孢杆菌硫氧还蛋白还原酶的原核表达及活性分析	陈洪娜李建文江翱孙文秀	《浙江农业学报》 CSCD 北大核心	2016	0	在线阅读下载PDF 职称材料