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题名枯草芽孢杆菌感受态细胞的制备及质粒转化方法研究
被引量：43
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作者
李瑞芳
薛雯雯
黄亮
熊前程
王彬
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机构
河南工业大学生物工程学院
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出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第5期227-230,共4页
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基金
国家自然科学基金项目(31071922)
河南省重点科技攻关项目(0623030300)
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文摘
为便于枯草芽孢杆菌工业化生产应用,对Spizizen创立的枯草芽孢杆菌DNA转化方法进行改进。用GMI和GMII溶液处理枯草芽孢杆菌野生型菌株BS501a、营养缺陷型突变株DB1342和非营养缺陷型突变株WB800,用改进的方法制备感受态细胞,用7.5 kb质粒pSBPTQ进行转化,并研究RNA、酵母粉、水解酪蛋白、培养方法对枯草芽孢杆菌质粒转化的影响。结果表明,该方法适用于不同基因型枯草芽孢杆菌的质粒转化,营养缺陷型突变株DB1342的转化率为750 CFU/μgDNA,非营养缺陷型突变株WB800转化率为1 070 CFU/μg DNA,野生型菌株BS501a转化率为270 CFU/μg DNA。根据影响转化效率的因素,推测在该方法中,枯草芽孢杆菌质粒转化原理:一定生物量的枯草芽孢杆菌在外界营养条件和钙、镁离子作用下,细胞壁和细胞膜形成缺陷,使外源DNA转入枯草芽孢杆菌细胞内。
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关键词
枯草芽孢杆菌
感受态细胞
质粒转化方法
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Keywords
bacillus subtilis competent cell plasmid transformation method
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分类号
Q782
[生物学—分子生物学]
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