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利用CRISPR/Cas9技术构建ST细胞Beclin1基因敲除稳定细胞株
1
作者 俞晖 陈海恩 +3 位作者 苏绮玲 黄怡丹 吴江 康恺 《现代畜牧兽医》 2025年第6期18-22,共5页
试验旨在利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除猪睾丸(swine testis,ST)细胞系Beclin1基因,构建自噬基因敲除细胞株,为后续研究自噬在ST细胞增殖过程中与其他生理功能之间的关系奠定基础。根据CRISPR/Cas9靶点设计规则,设计特异性靶向Beclin... 试验旨在利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除猪睾丸(swine testis,ST)细胞系Beclin1基因,构建自噬基因敲除细胞株,为后续研究自噬在ST细胞增殖过程中与其他生理功能之间的关系奠定基础。根据CRISPR/Cas9靶点设计规则,设计特异性靶向Beclin1基因第1个外显子相关序列的sgRNA,构建pLV3-U6-MCS-sgRNA重组质粒。测序鉴定后将重组质粒转染至ST细胞中,使用嘌呤霉素筛选及有限稀释法获得单克隆细胞株,采用Western blot法鉴定细胞Beclin1敲除效果。结果显示,经过CRISPR/Cas9系统处理后,筛选获得了ST敲除Beclin1稳定细胞株。与原始ST细胞株相比,B组敲除Beclin1稳定细胞株中未检出Beclin1蛋白质的表达。研究表明,试验成功构建了Beclin1敲除的ST细胞株,为Beclin1功能研究提供了有力工具。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 beclin1 ST细胞 基因敲除
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Beclin1与自噬及肿瘤的关系 被引量：39
2
作者 付俊 尚海旭 +1 位作者 贾弘禔 倪菊华 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期155-158,共4页
细胞自噬控制着细胞内蛋白质和细胞器的降解,对于细胞生长及维持稳态发挥着重要作用。自噬的调节是一个复杂过程,这其中涉及到许多分子的调控。Beclin1是酵母自噬基因Atg6/Vps30的同系物,也是哺乳动物参与自噬的特异性基因,它通过对自... 细胞自噬控制着细胞内蛋白质和细胞器的降解,对于细胞生长及维持稳态发挥着重要作用。自噬的调节是一个复杂过程,这其中涉及到许多分子的调控。Beclin1是酵母自噬基因Atg6/Vps30的同系物,也是哺乳动物参与自噬的特异性基因,它通过对自噬的调节,在肿瘤的发生、发展中起着重要作用。Beclin1对自噬和肿瘤的调节不是孤立的,相反,它能与多种分子相互作用,形成不同复合体而发挥作用。越来越多的研究不断揭示出Beclin1新的作用机制,本文将对Beclin1的研究进展做一综述。 展开更多
关键词 beclin1 自噬 肿瘤
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Beclin1表达在胃癌发生和演进中的临床病理意义及作用机制 被引量：8
3
作者 郑华川 申道福 +4 位作者 杨雪峰 时帅 高阳 赵爽 张文陆 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1061-1065,共5页
目的阐明胃癌发生和演进过程中Beclin 1表达的临床病理意义和分子作用机制。方法胃癌细胞MKN28转染Beclin 1表达质粒,利用CCK-8试剂盒和碘化丙啶染色检测细胞增殖和周期。利用原位杂交和免疫组化检测组织芯片上胃癌、癌旁黏膜和淋巴结... 目的阐明胃癌发生和演进过程中Beclin 1表达的临床病理意义和分子作用机制。方法胃癌细胞MKN28转染Beclin 1表达质粒,利用CCK-8试剂盒和碘化丙啶染色检测细胞增殖和周期。利用原位杂交和免疫组化检测组织芯片上胃癌、癌旁黏膜和淋巴结转移灶中Beclin 1 m RNA和蛋白的表达,比较其与胃癌发生、临床病理特征和预后的关系。结果 Beclin 1过表达可以抑制胃癌细胞MKN28增殖并导致细胞周期G2期阻滞,胃癌中Beclin 1 m RNA表达高于癌旁黏膜(P<0.05),Beclin 1蛋白表达与胃癌远处转移呈负相关(P<0.05),Beclin 1表达病例多见于老年男性(P<0.05),弥漫型胃癌中Beclin 1表达低于肠型和混合型(P<0.05)。Kaplan-Meier分析显示,Beclin 1表达与胃癌良好预后呈正相关(P<0.05)。结论 Beclin 1表达与胃癌发生、转移和分化关系密切,可以作为胃癌患者的预后因素和基因治疗的靶标。 展开更多
关键词 胃癌 beclin1 疾病发生 演进 预后
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大肠癌中Beclin1、LC3和mTOR的表达及意义 被引量：15
4
作者 吴淑华 胡金龙 +3 位作者 何双 温菲菲 孙晨博 田东 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1333-1338,共6页
目的探讨Beclin1、LC3和m TOR在大肠癌中的表达及意义。方法采用免疫组化En Vision法、Western blot和RT-PCR技术检测Beclin1、LC3和m TOR在大肠癌中的表达,并结合临床病理因素进行分析。结果 Beclin1、LC3和m TOR在大肠癌中的阳性率分... 目的探讨Beclin1、LC3和m TOR在大肠癌中的表达及意义。方法采用免疫组化En Vision法、Western blot和RT-PCR技术检测Beclin1、LC3和m TOR在大肠癌中的表达,并结合临床病理因素进行分析。结果 Beclin1、LC3和m TOR在大肠癌中的阳性率分别为90.50%、87.19%和46.28%,均明显高于癌旁组织(P<0.05),且LC3蛋白在中+低分化大肠癌中的表达(91.34%、89.58%)高于高分化大肠癌(77.61%),在有淋巴结转移组的表达(95.41%)高于无淋巴结转移组(80.45%),m TOR在有淋巴结转移组的表达(57.80%)高于无淋巴结转移组(35.33%)(P<0.05),Beclin1过表达与大肠癌分化程度和淋巴结转移均无关(P>0.05)。LC3与Beclin1在大肠癌中表达呈正相关(rs=0.593,P<0.01),与m TOR表达呈负相关(rs=-0.165,P<0.01),Beclin1和m TOR表达之间无明显相关性(P>0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,Beclin1和LC3均阳性、m TOR阴性、无淋巴结转移的大肠癌患者5年生存率高于Beclin1和LC3均阴性、m TOR阳性及有淋巴结转移的患者。多因素分析显示,LC3、m TOR和淋巴结转移是影响大肠癌预后的独立因素。RT-PCR和Western blot检测结果显示:Beclin1、LC3和m TOR mRNA和蛋白表达水平均明显高于癌旁组织(P<0.05)。结论自噬相关基因Beclin1、LC3和m TOR的异常表达可能与大肠癌的发生、发展及预后相关;联合检测Beclin1、LC3和m TOR在大肠癌中的表达有助于评估进展程度和预后判断。 展开更多
关键词 大肠肿瘤 beclin1 LC3 预后
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α-硫辛酸对糖尿病肾病自噬相关因子LC3、Rab7和Beclin1表达的影响 被引量：12
5
作者 黄显元 刘建红 朱彦儒 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第17期2073-2078,共6页
目的:研究α-硫辛酸对糖尿病肾病(DN)自噬相关因子LC3、Rab7和Beclin1表达的影响。方法:2型糖尿病肾病Ⅲ期患者110例,其中55例常规治疗为对照组,55例患者在常规治疗的基础上加用硫辛酸治疗为研究组;建立DN模型大鼠,对比硫辛酸治疗的DN... 目的:研究α-硫辛酸对糖尿病肾病(DN)自噬相关因子LC3、Rab7和Beclin1表达的影响。方法:2型糖尿病肾病Ⅲ期患者110例,其中55例常规治疗为对照组,55例患者在常规治疗的基础上加用硫辛酸治疗为研究组;建立DN模型大鼠,对比硫辛酸治疗的DN患者和DN模型组大鼠Scr、BUN水平和肾脏组织中LC3、Rab7和Beclin1的表达的影响。结果:治疗后两组患者Scr和BUN均显著降低(P<0.05),且研究组患者治疗后Scr和BUN均显著低于对照组患者(P<0.05),肾脏组织中LC3、Rab7和Beclin1蛋白表达均显著高于对照组(P<0.05);DN模型大鼠经硫辛酸治疗后,Scr和BUN均显著降低(P<0.05),肾脏组织中LC3、Rab7和Beclin1基因表达显著升高(P<0.05)。结论:α-硫辛酸对糖尿病肾病肾脏的保护作用可能通过促进肾脏中自噬相关因子LC3、Rab7和Beclin1的表达有关。 展开更多
关键词 Α-硫辛酸 糖尿病肾病 LC3 Rab7 beclin1
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长期耐力训练对大鼠心肌细胞自噬相关因子Beclin1和LC3的影响 被引量：22
6
作者 马晓雯 常芸 王世强 《体育科学》 CSSCI 北大核心 2016年第2期66-71,共6页
目的:通过实验研究自噬相关因子Beclin1和LC3的表达变化,探讨长期耐力训练对大鼠心肌细胞自噬发生程度的影响,为长期耐力训练诱导自噬的发生机制提供实验依据。方法:选取24只健康雄性SD大鼠,随机分为安静对照组、中等强度训练组和大强... 目的:通过实验研究自噬相关因子Beclin1和LC3的表达变化,探讨长期耐力训练对大鼠心肌细胞自噬发生程度的影响,为长期耐力训练诱导自噬的发生机制提供实验依据。方法:选取24只健康雄性SD大鼠,随机分为安静对照组、中等强度训练组和大强度训练组,每组8只。分别以15.2m/min速度5°坡度和28m/min速度10°坡度进行16周跑台训练,每周训练5天,每次训练1h。训练16周后,进行超声心动图检测。取左心室壁用于HE染色,观察心肌组织形态,制备超薄切片进行透射电镜观察,检测自噬发生程度。RT-PCR、Western Blot技术检测大鼠心肌细胞自噬相关基因Beclin1和LC3的mRNA及蛋白表达。数据应用SPSS 19.0统计软件处理,以P<0.05具有显著性差异。结果:1)超声心动图显示,大鼠经过16周跑台训练后,大强度组EF值显著低于对照组(P<0.05)。2)HE染色结果显示,大强度组心肌细胞损伤严重。3)透射电镜检测提示,长时间大强度耐力训练使自噬小体增多,自噬程度增加。4)16周跑台训练后RT-PCR结果提示,自噬相关基因Beclin1和LC3表达水平上调(P<0.05)。5)Western Blot结果表明,与对照组相比,中等强度训练组和大强度训练组Beclin1表达水平及LC3-II/LC3-I比值均显著升高(P<0.05),且大强度训练组显著高于中等强度训练组(P<0.05)。结论:1)中等强度耐力训练可引起心肌组织细胞良好的适应性重塑,促进心肌细胞适当自噬水平及活性,从而有效上调Beclin1和LC3的表达,提高LC3-II/LC3-I比值,增强心肌细胞代谢能力,有利于心肌能量代谢和收缩功能。2)大强度长时间耐力训练会导致心肌纤维受损,自噬体异常增多,Beclin1和LC3出现过表达的现象,构成心肌细胞损伤的结构与分子病理基础。 展开更多
关键词 心肌细胞 运动强度 beclin1 LC3
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自噬基因Beclin1对上皮性卵巢癌细胞SKOV3生长的抑制作用 被引量：14
7
作者 段振玲 彭芝兰 王赞宏 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期672-676,680,共6页
目的观察自噬基因Beclin1在人卵巢癌细胞株SKOV3中过表达对肿瘤细胞在体内、体外生长活性的影响。方法脂质体法将重组质粒pcDNA3.1/Beclin1转染人卵巢癌细胞株SKOV3,MTT法分析外源性Beclin1过表达对SKOV3增殖的影响,流式细胞仪检测转染... 目的观察自噬基因Beclin1在人卵巢癌细胞株SKOV3中过表达对肿瘤细胞在体内、体外生长活性的影响。方法脂质体法将重组质粒pcDNA3.1/Beclin1转染人卵巢癌细胞株SKOV3,MTT法分析外源性Beclin1过表达对SKOV3增殖的影响,流式细胞仪检测转染后肿瘤细胞的凋亡及自噬情况。将重组质粒pcDNA3.1/Beclin1转染SKOV3细胞后,接种到裸鼠皮下,观察体内致瘤活性及生长情况;免疫组化检测瘤组织Beclin1蛋白的表达。结果Beclin1在SKOV3中的过表达后抑制肿瘤细胞在体外的生长,抑制率为58.68%;pcDNA3.1/Beclin1转染后SKOV3的凋亡率为(21.26±3.89)%,高于空质粒pcDNA3.1转染组和未转染组,差异有显著性(P<0.05);流式细胞仪检测pcDNA3.1/Beclin1转染后SKOV3细胞MDC平均荧光强度高于pcDNA3.1转染组和未转染组。重组质粒pcDNA3.1/Beclin1使SKOV3细胞在裸鼠体内成瘤时间延长,瘤体体积及质量明显小于空质粒组和空白对照组,抑瘤率为50.27%。结论自噬基因Beclin1在人卵巢癌细胞SKOV3中过表达可抑制SKOV3在体内、体外的增殖,针对自噬基因Beclin1的卵巢癌基因治疗可能具有可行性。 展开更多
关键词 beclin1 凋亡 自噬 卵巢癌 SKOV3细胞
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自噬相关基因Beclin1和LC3在卵巢浆液性癌中的表达及临床意义 被引量：12
8
作者 晋龙 眭玉霞 +5 位作者 孙阳 陈小岩 陈志忠 陈灵锋 李艳辉 王丽萍 《临床与实验病理学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第11期1219-1224,共6页
目的检测Beclin1和LC3在卵巢浆液性癌(ovarian serous carcinoma,OSC)中的表达,探讨两者与OSC临床病理特征及预后的关系。方法采用免疫组化Max Vision两步法检测63例OSC和20卵巢浆液性囊腺瘤组织中Beclin1和LC3蛋白的表达,分析两者与OS... 目的检测Beclin1和LC3在卵巢浆液性癌(ovarian serous carcinoma,OSC)中的表达,探讨两者与OSC临床病理特征及预后的关系。方法采用免疫组化Max Vision两步法检测63例OSC和20卵巢浆液性囊腺瘤组织中Beclin1和LC3蛋白的表达,分析两者与OSC临床病理特征及预后的关系。应用RT-PCR和Western blot法检测10例新鲜OSC组织和相应癌旁组织中Beclin1和LC3 mRNA和蛋白的表达。结果在OSC组织中Beclin1和LC3蛋白阳性率(36.51%、33.33%)均低于卵巢浆液性囊腺瘤组织(65.00%、60.00%),差异有统计学意义(P=0.025,P=0.034)。Beclin1蛋白表达与临床FIGO分期和病理分级有关(P=0.001,P=0.001),与患者年龄、发病部位、肿瘤大小及有无盆腔淋巴结转移无关(P>0.05)。LC3蛋白表达与临床FIGO分期和盆腔淋巴结转移有关(P=0.013,P=0.041),与患者年龄、发病部位、肿瘤大小和病理分级均无关(P>0.05)。Beclin1和LC3在OSC中的表达呈显著正相关(r_s=0.373,P=0.03)。10例新鲜OSC组织中Beclin1和LC3 mRNA的相对表达量(0.581±0.091、0.650±0.090)低于癌旁组织,两者比较差异有统计学意义(t=8.083,t=6.614;P=0.016,P=0.022)。新鲜OSC组织中Beclin1和LC3蛋白的相对表达量明显低于癌旁组织,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析表明,Beclin1和LC3表达与OSC患者预后相关(P=0.028 3,P=0.018 5)。结论自噬相关基因Beclin1和LC3在OSC组织中的表达下降,导致自噬功能减弱,可能与OSC的发生、发展和预后不良相关。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 卵巢浆液性癌 beclin1 LC3 自噬 预后
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自噬相关基因Beclin1和MAPLC3在急性白血病骨髓单个核细胞中的表达及其意义 被引量：7
9
作者 胡晓燕 白海 +6 位作者 潘耀柱 王存邦 吴冰 赵强 艾昊 陈哲 韩夏 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2011年第3期598-601,共4页
本研究旨在检测人急性白血病(AL)骨髓单个核细胞中自噬相关基因Beclin1和微管相关蛋白质轻链3(MAPLC3)的表达,并探讨其意义。采用透射电子显微镜(TEM)和RT-PCR方法检测初治、复发难治、完全缓解(CR)的急性白血病患者和正常人骨髓单个核... 本研究旨在检测人急性白血病(AL)骨髓单个核细胞中自噬相关基因Beclin1和微管相关蛋白质轻链3(MAPLC3)的表达,并探讨其意义。采用透射电子显微镜(TEM)和RT-PCR方法检测初治、复发难治、完全缓解(CR)的急性白血病患者和正常人骨髓单个核细胞(BMMNC)中的自噬活性以及Beclin1、MAPLC3mRNA的表达。结果表明:急性白血病初治组骨髓单个核细胞自噬活性、Beclin1和MAPLC3mRNA表达分别为80%、0.68±0.18、0.24±0.06;在难治复发组分别为100%、0.79±0.09、0.30±0.07;在完全缓解组分别为40%、0.52±0.15、0.16±0.04;在正常对照组分别为20%、0.57±0.13、0.16±0.05。初治组和难治复发组自噬活性和Beclin1、MAPLC3mRNA的相对表达量均高于正常对照组,差异有统计学意义(p<0.05)。完全缓解组和正常对照组之间比较差异无统计学意义(p>0.05)。结论:初治组急性白血病骨髓单个核细胞中自噬活性和自噬相关基因Beclin1、MAPLC3mRNA的表达均上调,在难治复发组自噬活性和自噬相关基因Beclin1、MAPLC3mRNA的表达上调尤为明显,这可能与急性白血病的发生、发展及其耐药相关。 展开更多
关键词 急性白血病 自噬相关基因 beclin1基因 MAPLC3基因 骨髓单个核细胞
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骨肉瘤组织中抑癌基因TAp73和自噬基因Beclin1的表达及其与肿瘤恶性程度的相关性 被引量：4
10
作者 李云华 刘春磊 +1 位作者 朱江 谭小波 《海南医学院学报》 CAS 2017年第7期1001-1004,1008,共5页
目的:研究骨肉瘤组织中抑癌基因TAp73和自噬基因Beclin1表达量与肿瘤恶性程度的相关性。方法:收集在我院手术切除的56例骨肉瘤组织和肉瘤旁组织、37例骨巨细胞瘤组织,采用免疫组化试剂盒测定TAp73、Beclin1的阳性表达率;采用酶联免疫吸... 目的:研究骨肉瘤组织中抑癌基因TAp73和自噬基因Beclin1表达量与肿瘤恶性程度的相关性。方法:收集在我院手术切除的56例骨肉瘤组织和肉瘤旁组织、37例骨巨细胞瘤组织,采用免疫组化试剂盒测定TAp73、Beclin1的阳性表达率;采用酶联免疫吸附试剂盒测定TAp73、Beclin1以及增殖、侵袭基因的蛋白表达量。结果:骨肉瘤组织中TAp73、Beclin1的蛋白表达量及阳性表达率均显著低于肉瘤旁组织、骨巨细胞瘤组织,IRX2、JAK3、STAT5、CTGF、Wnt、β-catenin的蛋白表达量均显著高于肉瘤旁组织、骨巨细胞瘤组织;TAp73、Beclin1(+)、(++)、(+++)骨肉瘤组织中IRX2、JAK3、STAT5、CTGF、Wnt、β-catenin的蛋白表达量均显著低于TAp73、Beclin1(-)骨肉瘤组织,TAp73、Beclin1(++)、(+++)骨肉瘤组织中IRX2、JAK3、STAT5、CTGF、Wnt、β-catenin的蛋白表达量均显著低于TAp73、Beclin1(+)骨肉瘤组织,TAp73、Beclin1(+++)骨肉瘤组织中IRX2、JAK3、STAT5、CTGF、Wnt、β-catenin的蛋白表达量均显著低于TAp73、Beclin1(++)骨肉瘤组织。结论:骨肉瘤组织中抑癌基因TAp73和自噬基因Beclin1的低表达能够通过激活IRX2/JAK3/STAT5和CTGF/Wnt/β-catenin信号通路来促进细胞增殖和侵袭。 展开更多
关键词 骨肉瘤 TAp73 beclin1 增殖 侵袭
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Beclin1在非小细胞肺癌的表达及其与EGFR突变的关系 被引量：5
11
作者 孙雪丽 苗欣 +1 位作者 赵家义 韩一平 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期378-381,共4页
目的:观察Beclin1在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达情况,探讨其与EGFR突变的相关性。方法:分别采用DNA直接测序法、免疫组化法检测42例NSCLC患者EGFR突变情况及Beclin1表达情况,分析二者之间关系及临床意义。... 目的:观察Beclin1在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达情况,探讨其与EGFR突变的相关性。方法:分别采用DNA直接测序法、免疫组化法检测42例NSCLC患者EGFR突变情况及Beclin1表达情况,分析二者之间关系及临床意义。结果:与癌旁组织比较,NSCLC组织中Beclin1高表达(71.4%vs 30.9%,P<0.01),Beclin1的表达与吸烟史、病理类型有关(P=0.005,P=0.025)。EGFR突变14例,其中高表达Beclin1 11例,低表达Beclin1 2例,突变率为57.9%(11/19)vs 16.7%(2/12),Beclin1的表达与EGFR突变具有显著正相关性(r=0.416,P=0.009)。结论:NSCLC患者EGFR突变与Beclin1的表达具有正相关性,Beclin1表达情况在一定程度上有助于判断NSCLC的EGFR突变状况,可能为判断EGFR突变提供有意义的线索。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 表皮生长因子受体(EGFR)突变 beclin1
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三七总皂苷对顺铂诱导肾损伤大鼠模型自噬蛋白LC3和Beclin1的影响 被引量：4
12
作者 刘新文 邹小琴 +2 位作者 黄振光 张文宇 杨玉芳 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期48-51,共4页
目的研究三七总皂苷(PNS)对顺铂诱导肾损伤大鼠肾组织中自噬相关蛋白LC3、Beclin1表达的影响。方法将36只雄性SD大鼠随机分为空白对照组,顺铂模型组,顺铂+PNS组,在给药24h后处理动物,检测血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)和-N-乙酰胺基葡萄糖... 目的研究三七总皂苷(PNS)对顺铂诱导肾损伤大鼠肾组织中自噬相关蛋白LC3、Beclin1表达的影响。方法将36只雄性SD大鼠随机分为空白对照组,顺铂模型组,顺铂+PNS组,在给药24h后处理动物,检测血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)和-N-乙酰胺基葡萄糖苷酶(NAG)水平,利用透射电镜观察大鼠肾小管上皮细胞粒体形态及自噬体,通过Western blot检测自噬蛋白LC3和Beclin1蛋白的表达。结果大鼠暴露于顺铂24h后,与空白对照组比较,顺铂模型组血清Cr、BUN显著升高(P<0.05),尿NAG水平没有明显变化,电镜观察到自噬体出现,肾组织LC3和Beclin1蛋白表达显著升高(P<0.01)。与顺铂模型组比较,顺铂+PNS组血清Cr明显降低(P<0.05),LC3和Beclin1蛋白表达显著升高(P<0.01)。结论 PNS可能通过提高Beclin1的表达,增强肾组织的自噬而降低顺铂诱导的大鼠肾损害。 展开更多
关键词 顺铂肾损害 三七总皂苷 自噬 LC3 beclin1
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FoxO1及自噬相关基因Beclin1和MAPLC3在胃癌组织的表达及意义 被引量：5
13
作者 霍小蕾 王金胜 +2 位作者 张毅强 韩玲娜 曹文君 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期773-776,共4页
目的探讨叉头转录因子O亚家族1(FoxO1)及自噬相关基因Beclin1和微管相关蛋白轻链3(MAPLC3)在胃癌组织的表达及意义。方法收集本院2015年1月至2016年6月收治的82例手术切除的胃癌组织(胃癌组)及67例癌旁正常组织(对照组),采用荧光实时定... 目的探讨叉头转录因子O亚家族1(FoxO1)及自噬相关基因Beclin1和微管相关蛋白轻链3(MAPLC3)在胃癌组织的表达及意义。方法收集本院2015年1月至2016年6月收治的82例手术切除的胃癌组织(胃癌组)及67例癌旁正常组织(对照组),采用荧光实时定量PCR(qPCR)法检测FoxO1、Beclin1及MAPLC3水平,比较组间的水平变化并分析胃癌组中FoxO1、Beclin1及MAPLC3表达变化的相关性,分析组织FoxO1、Beclin1及MAPLC3水平变化与胃癌临床病理参数[性别、年龄、TNM分期、分化程度、部位、淋巴结转移及癌胚抗原(CEA)水平]的关系。结果qPCR检测结果显示,胃癌组的FoxO1、Beclin1及MAPLC3水平依次为(0.489±0.032)、(0.148±0.012)和(0.581±0.038),均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);胃癌组的FoxO1水平与Beclin1水平呈正相关(r=0.270,P=0.014),Beclin1水平与MAPLC3水平呈正相关(r=0.351,P=0.001),但FoxO1水平与MAPLC3水平无关(r=0.208,P=0.061);FoxO1表达与TNM分期、分化程度及淋巴结转移均有关,Beclin1表达与TNM分期、淋巴结转移及CEA水平均有关,且MAPLC3表达与TNM分期、分化程度及CEA水平均有关。结论FoxO1、Beclin1及MAPLC3在胃癌组织中表达降低,且均与TNM分期有关,对胃癌诊断及病情评估有一定价值。 展开更多
关键词 胃癌 叉头转录因子O亚家族(FoxO1) beclin1 微管相关蛋白轻链3(MAPLC3)
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龟羚帕安丸对帕金森病大鼠中脑黑质病理、Beclin1、P62及LC3Ⅱ影响的研究 被引量：10
14
作者 常学辉 张良芝 李天佛 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2021年第1期5-7,I0015,I0016,I0017,I0018,共7页
目的观察龟羚帕安丸对帕金森病(Parkinson’s disease,PD)大鼠模型中脑黑质神经细胞病理及自噬相关蛋白Beclin1、P62、LC3Ⅱ表达的影响。方法采用6-羟基多巴(6-OHDA)注射法建立PD大鼠模型,造模成功大鼠随机分为模型对照组、美多芭组、... 目的观察龟羚帕安丸对帕金森病(Parkinson’s disease,PD)大鼠模型中脑黑质神经细胞病理及自噬相关蛋白Beclin1、P62、LC3Ⅱ表达的影响。方法采用6-羟基多巴(6-OHDA)注射法建立PD大鼠模型,造模成功大鼠随机分为模型对照组、美多芭组、龟羚帕安丸高、中、低剂量组及假手术对照组,每组10只。对照组、模型组给予等容积生理盐水,其余组给予相应药物灌胃,连续给药30 d。观察各组大鼠中脑黑质病理改变;免疫组化法检测大鼠中脑黑质Beclin1、P62及LC3Ⅱ蛋白的表达变化情况。结果模型组神经元细胞出现较为明显的损伤;模型组中脑黑质Beclin1及LC3Ⅱ表达降低,P62表达明显升高;各治疗组大鼠神经元损伤情况较模型组有所改善,中脑黑质Beclin1及LC3Ⅱ表达明显升高,P62表达明显降低。结论龟羚帕安丸可明显改善神经细胞损伤,作用机制与提高Beclin1及LC3Ⅱ表达,降低P62的蓄积,疏通自噬-溶酶体降解途径,提高细胞自噬活性,改善细胞自身稳态有关。 展开更多
关键词 帕金森病 龟羚帕安丸 自噬 beclin1 P62 LC3Ⅱ
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Beclin1与凋亡相关蛋白在口腔鳞癌中的表达及意义 被引量：3
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作者 孙维克 王培源 +1 位作者 刘伟 王霞 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2019年第10期979-983,共5页
目的:探讨Beclin1及凋亡相关蛋白bcl-2、survivin及bax在口腔鳞癌中的表达及临床意义。方法:采用免疫组化SP法检测口腔黏膜癌变组织中(包括鳞癌60例,异常增生48例,癌旁正常口腔黏膜60例)Beclin1、bcl-2、survivin及bax的表达,分析其相... 目的:探讨Beclin1及凋亡相关蛋白bcl-2、survivin及bax在口腔鳞癌中的表达及临床意义。方法:采用免疫组化SP法检测口腔黏膜癌变组织中(包括鳞癌60例,异常增生48例,癌旁正常口腔黏膜60例)Beclin1、bcl-2、survivin及bax的表达,分析其相关性及临床意义。结果:Beclin1在鳞癌和正常黏膜呈高水平表达(表达阳性率分别为65%,75%),在异常增生组的表达显著性降低(54.2%,P<0.05);bcl-2及survivin在鳞癌组织中表达水平(70%,73.33%)显著高于异常增生和正常黏膜(P<0.05),bax则在异常增生组表达显著高于鳞癌和正常黏膜(P<0.05)。口腔癌组织Beclin1的表达与bcl-2、survivin、bax的表达均密切相关(P<0.05;相关系数分别为r=0.421,r=0.367,r=0.542),四者均与肿瘤大小及颈部淋巴结转移密切相关。结论:Beclin1与凋亡相关蛋白在口腔鳞癌的癌变过程中密切相关,自噬与凋亡可能协同参与口腔癌的进展。 展开更多
关键词 beclin1 自噬 凋亡 口腔癌
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大鼠皮肤挫伤后Beclin1和LC3的表达 被引量：5
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作者 颜峰平 陈忆九 黄晓华 《法医学杂志》 CAS CSCD 2007年第1期11-13,F0004,共4页
目的研究大鼠皮肤损伤后Beclin1、LC3的表达,观察皮肤损伤中的自噬现象,并探讨其在损伤诊断及损伤经历时间推断的意义。方法运用免疫组化及图像分析技术研究大鼠皮肤挫伤后、损伤不同时间段后Beclin1、LC3表达的变化。结果大鼠正常皮肤... 目的研究大鼠皮肤损伤后Beclin1、LC3的表达,观察皮肤损伤中的自噬现象,并探讨其在损伤诊断及损伤经历时间推断的意义。方法运用免疫组化及图像分析技术研究大鼠皮肤挫伤后、损伤不同时间段后Beclin1、LC3表达的变化。结果大鼠正常皮肤表皮细胞Beclin1、LC3低表达,大鼠皮肤挫伤6h后局部表皮细胞Beclin1、LC3表达开始增多,挫伤3、5和7d呈强表达。结论皮肤损伤后局部细胞Beclin1、LC3表达增多;其表达与损伤经历时间具有相关性;细胞自噬增强是对损伤的反应。 展开更多
关键词 挫伤 自噬 beclin1 LC3 免疫组化
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川芎嗪干预顺铂致聋大鼠中对Beclin1及LC3影响的实验研究 被引量：2
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作者 冷辉 潘玉真 +2 位作者 石磊 王爱平 张琦 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2022年第12期13-16,I0027,共5页
目的通过构建川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)干预治疗顺铂(cis-Dichlorodiammine platinum,DDP)所诱导的药物性聋大鼠的实验研究,探讨实验中自噬蛋白Beclin1及LC3的变化情况。方法随机将110只SD大鼠分成为空白组45只和模型组65只,分... 目的通过构建川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)干预治疗顺铂(cis-Dichlorodiammine platinum,DDP)所诱导的药物性聋大鼠的实验研究,探讨实验中自噬蛋白Beclin1及LC3的变化情况。方法随机将110只SD大鼠分成为空白组45只和模型组65只,分别采用腹腔注射盐水和顺铂塑造模型,各组随机选取5只进行模型评定,将余下的100只大鼠等分成为盐水组、盐水+TMP组、顺铂组、顺铂+TMP组和抑制剂组,盐水组大鼠腹腔注射盐水;盐水+TMP组大鼠腹腔注射盐水和TMP;顺铂组大鼠腹腔注射DDP;顺铂+TMP组大鼠腹腔注射DDP和TMP;抑制剂组大鼠腹腔注射DDP和自噬抑制剂3-MA。末次给药后,采集耳蜗样本,通过免疫组化和Western blot法检测各组大鼠耳蜗组织中Beclin1及LC3蛋白表达水平。结果在免疫组化的检测川芎嗪对顺铂所致药物性聋大鼠耳蜗组织中Beclin1及LC3的结果中显示,与盐水组比较,除抑制机组外,其余各组Beclin1及LC3蛋白表达量增强(P<0.01);与顺铂组比较,顺铂+TMP组蛋白表达量增强(P<0.01)而抑制剂组蛋白表达量则降低(P<0.01)。在Western blot检测结果川芎嗪对顺铂所致药物性聋大鼠耳蜗组织中Beclin1及LC3的结果中显示:与盐水组和盐水+TMP组比较,顺铂组和顺铂+TMP组Beclin1及LC3蛋白表达量增强(P<0.01);与顺铂组比较,顺铂+TMP组蛋白表达量增强(P<0.01)而抑制剂组蛋白表达量则降低(P<0.01)。结论在川芎嗪干预顺铂致聋大鼠中,川芎嗪可调控自噬蛋白Beclin1表达下降,自噬蛋白LC3表达上升。川芎嗪能够治疗顺铂诱导的药物性聋的作用机制可能与川芎嗪能促进自噬有关。 展开更多
关键词 川芎嗪 顺铂 自噬 beclin1 LC3
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下调Beclin1抑制卵巢癌A2780/DDP细胞对顺铂的耐药性 被引量：2
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作者 郭云鸿 田晓予 +1 位作者 邓巧子 张克群 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期615-621,共7页
目的:探究敲减Beclin1表达对卵巢癌细胞A2780对顺铂耐药的影响及其相关机制。方法:以Western blotting及qPCR检测卵巢癌细胞株A2780及耐药细胞株A2780/DDP中Beclin1的表达情况;A2780/DDP细胞转染Beclin1 siRNA后,用MTT法检测细胞对顺铂... 目的:探究敲减Beclin1表达对卵巢癌细胞A2780对顺铂耐药的影响及其相关机制。方法:以Western blotting及qPCR检测卵巢癌细胞株A2780及耐药细胞株A2780/DDP中Beclin1的表达情况;A2780/DDP细胞转染Beclin1 siRNA后,用MTT法检测细胞对顺铂敏感性的变化,克隆形成实验检测各组细胞的克隆形成情况,流式细胞术检测各组细胞的凋亡,MDC荧光染色检测细胞的自噬情况,Western blotting检测自噬相关蛋白、溶酶体相关膜蛋白Lamp-2以及组织蛋白酶Cathepsin B的表达情况。结果:顺铂耐药细胞株A2780/DDP中Beclin1 mRNA及蛋白的表达水平均明显高于A2780细胞株(均P<0.05),在A2780细胞中加入顺铂刺激后Beclin1蛋白的表达水平显著升高(P<0.05)。敲减Beclin1表达可促进顺铂诱导的A2780/DDP细胞的凋亡(P<0.05)、抑制细胞自噬的发生(P<0.05)、减少细胞克隆形成(P<0.05)和增加细胞对顺铂的敏感性(P<0.05);Western blotting结果显示,敲减Beclin1可上调A2780/DDP细胞中cleaved-caspase 3和Cathepsin B的蛋白水平,下调Atg3、Atg7、LC3Ⅱ/Ⅰ、Lamp-2的表达水平(均P<0.05)。结论:敲减Beclin1表达可提高A2780/DDP细胞对顺铂的敏感性,其机制可能与调节自噬相关蛋白表达抑制细胞保护性自噬和影响溶酶体功能,从而促进顺铂诱导耐药细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 beclin1 卵巢癌 A2780细胞 顺铂 耐药 细胞自噬 凋亡
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Beclin1诱导自噬在胃癌发生发展过程的机制研究 被引量：4
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作者 刘畅 张涛 +2 位作者 马媛萍 方健松 陈远能 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2016年第4期888-889,共2页
自噬是一种高度保守的细胞行为,是体内多余的长寿命蛋白质、细胞器和部分细胞质依赖溶酶体降解的复杂的催化过程。在肿瘤发展过程中,自噬活性的改变犹如一把"双刃剑",既能够使肿瘤细胞耐受应激条件获得生存,又可以减轻各种应... 自噬是一种高度保守的细胞行为,是体内多余的长寿命蛋白质、细胞器和部分细胞质依赖溶酶体降解的复杂的催化过程。在肿瘤发展过程中,自噬活性的改变犹如一把"双刃剑",既能够使肿瘤细胞耐受应激条件获得生存,又可以减轻各种应激条件下的细胞损伤而减少肿瘤发生。而Beclin1是自噬体形成过程中的一个必需分子,可以介导其他自噬蛋白定位于前自噬小体的关键因子调控自噬体形成与成熟。目前研究发现,自噬的激活和诱导与胃癌的发生发展均有着密切的联系。文章从胃癌细胞中自噬相关基因Beclin1的表达情况及其与胃癌关系的角度进行概述。 展开更多
关键词 beclin1 自噬 胃癌
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自噬相关基因Beclin1、LC3与大肠癌多药耐药性的相关性 被引量：3
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作者 胡金龙 何双 +1 位作者 孙晨博 吴淑华 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期135-139,共5页
目的检测自噬相关基因Beclin1、LC3和多药耐药基因LRP、GST-π、TopoⅡ在大肠癌中的表达,探讨自噬对大肠癌多药耐药性(multidrug resistance,MDR)的影响。方法应用免疫组化EnVision法检测202例大肠癌中Beclin1、LC3、LRP、GST-π和Topo... 目的检测自噬相关基因Beclin1、LC3和多药耐药基因LRP、GST-π、TopoⅡ在大肠癌中的表达,探讨自噬对大肠癌多药耐药性(multidrug resistance,MDR)的影响。方法应用免疫组化EnVision法检测202例大肠癌中Beclin1、LC3、LRP、GST-π和TopoⅡ的表达,并结合临床病理参数进行分析。结果 Beclin1和LC3蛋白在大肠癌中的阳性率(90.10%、86.63%)均明显高于正常大肠黏膜(48.0%、40.0%),差异具有统计学意义(P<0.05),且LC3蛋白在中+低分化大肠癌中的表达(92.52%、90.00%)高于高分化大肠癌(72.73%),在淋巴结转移组的表达(94.31%)高于无淋巴结转移组(80.70%),差异具有统计学意义(P<0.05)。LRP、GST-π和TopoⅡ在大肠癌中的阳性率分别为94.55%、71.78%和97.03%,且TopoⅡ在大肠癌男性患者中的表达(100%)略高于女性患者(93.88%),差异具有统计学意义(P<0.05)。经Spearman相关性分析,在大肠癌中,Beclin1蛋白表达与LC3、LRP及GST-π蛋白表达均呈正相关,相关系数分别为0.552、0.140和0.160(P<0.05);LC3蛋白表达与LRP、GST-π蛋白表达均呈正相关,相关系数分别为0.162和0.142(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析显示,Beclin1阳性、LC3阳性、GST-π阴性、无淋巴结转移者5年生存率高于Beclin1阴性、LC3阴性、GST-π阳性及淋巴结转移者,多因素分析显示,LC3、GST-π和淋巴结转移是影响大肠癌患者术后生存的独立因素。结论 Beclin1、LC3在大肠癌组织中表达增加,可能与大肠癌的发生、发展及MDR有关;检测Beclin1、LC3蛋白表达对判断大肠癌的预后以及合理筛选有效的化疗药物具有重要参考价值。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 beclin1 LC3 MDR 免疫组织化学
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