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问号钩端螺旋体感染对C3H/HeJ小鼠自噬相关蛋白Beclin-1、LC3B、P62表达的影响
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作者 杜诚 谭燕 +3 位作者 谢玲 谷媛媛 唐东 陈旭 《中国人兽共患病学报》 北大核心 2025年第8期832-837,共6页
目的了解问号钩端螺旋体(简称问号钩体)感染对自噬相关蛋白肌球蛋白样BCL2结合蛋白(Beclin-1)、微管相关蛋白轻链3B(LC3B)和泛素结合蛋白62(P62)表达的影响及差异。方法采用问号钩体赖株感染C3H/HeJ小鼠构建钩体病动物模型,并运用组织... 目的了解问号钩端螺旋体(简称问号钩体)感染对自噬相关蛋白肌球蛋白样BCL2结合蛋白(Beclin-1)、微管相关蛋白轻链3B(LC3B)和泛素结合蛋白62(P62)表达的影响及差异。方法采用问号钩体赖株感染C3H/HeJ小鼠构建钩体病动物模型,并运用组织镀银染色法检测小鼠肺、肝、肾组织内问号钩体侵袭情况。采用HE染色法检测小鼠肺、肝、肾组织病理变化。采用透射电镜法检测小鼠肺、肝、肾组织内自噬小体及钩体形态。采用免疫组化法检测问号钩体感染小鼠肺、肝、肾组织中自噬相关蛋白Beclin-1、LC3B和P62表达水平。结果组织镀银染色检测结果显示在感染的C3H/HeJ小鼠肺、肝、肾组织内均观察到入侵的问号钩体。病理检测结果显示,问号钩体感染小鼠后肺、肝、肾组织均出现典型的钩体病病理变化,如肺出血、肝细胞坏死、肾小球和肾小管坏死、炎性细胞浸润等。透射电镜检测结果显示小鼠肺、肝、肾组织内出现包裹有钩体的自噬小体。免疫组化检测结果显示,问号钩体感染C3H/HeJ小鼠后,肺、肝、肾组织内Beclin-1和LC3B蛋白表达水平增加(P<0.05),P62蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论问号钩体感染可诱导小鼠肺、肝、肾组织内Beclin-1、LC3B和P62自噬相关蛋白表达水平发生变化,激活自噬的发生。 展开更多
关键词 问号钩端螺旋体 感染 自噬 beclin-1 LC3B P62
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EPO对糖尿病肾病大鼠NK细胞活化性受体及HMGB1/Beclin-1信号通路的影响 被引量:2
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作者 赵力敏 李雅婧 +1 位作者 张勇刚 张颖玮 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1392-1398,共7页
目的:基于HMGB1/Beclin-1信号通路探究EPO对糖尿病肾病大鼠NK细胞活化性受体的作用机制。方法:40只SPF级SD雄性大鼠随机分为正常(A)组、模型(B)组、二甲双胍(C)组、EPO(D)组,每组10只,对B、C、D组采用高脂饲料及链脲佐菌素进行糖尿病肾... 目的:基于HMGB1/Beclin-1信号通路探究EPO对糖尿病肾病大鼠NK细胞活化性受体的作用机制。方法:40只SPF级SD雄性大鼠随机分为正常(A)组、模型(B)组、二甲双胍(C)组、EPO(D)组,每组10只,对B、C、D组采用高脂饲料及链脲佐菌素进行糖尿病肾病建模。建模成功后,对C组灌胃100 mg/kg二甲双胍,对D组腹腔内注射100 U/kg EPO,A组、B组同期灌胃等体积生理盐水;另取20只大鼠建模,建模成功后,随机分为E组、F组,E组灌胃给予30 mg/kg HMGB1抑制剂,F组灌胃给予30 mg/kg HMGB1抑制剂和腹腔内注射100 U/kg EPO;取HK-2细胞,分为高糖+HK-2细胞(HH)组、EPO+高糖+HK-2细胞(EH)组、甘草酸苷L+高糖+HK-2细胞(LH)组,葡萄糖培养后进行细胞实验。血糖仪检测大鼠血糖,全自动生化分析仪检测大鼠生化指标,PAS染色法检测大鼠肾组织病理形态,免疫印迹法检测HMGB1/Beclin-1蛋白表达,RT-PCR及免疫组化法检测NK细胞活化性受体表达。结果:与A组比较,B组血糖及血糖曲线、血液及尿液中BUN、Scr、UAlb含量、NKp30、NKp44、NKp46的mRNA及蛋白表达明显升高(P<0.05),体质量明显降低(P<0.05);与B组比较,C组、D组血糖及24 h尿量、血糖曲线、血液及尿液中BUN、Scr、UAlb含量、NKp30、NKp44、NKp46 mRNA及蛋白表达均明显降低(P<0.05),体质量明显升高(P<0.05),肾脏病理学明显改善,且D组较C组变化显著(P<0.05);与A组比较,B组大鼠肾组织中HMGB1/Beclin-1蛋白表达显著升高(P<0.05),与B组相比,C、D、E、F组大鼠肾组织中HMGB1/Beclin-1蛋白表达均显著降低(P<0.05),且D组HMGB1/Beclin-1蛋白表达与C组相比降低明显(P<0.05),E组与D组无明显差异,F组较E组降低明显;HMGB1/Beclin-1蛋白表达与NKp30、NKp44、NKp46mRNA均呈正相关(P<0.05);与HH组相比,EH、LH组细胞增殖率显著升高(P<0.05),凋亡率及HMGB1/Beclin-1蛋白表达均显著降低(P<0.05),而LH组与EH组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:EPO可有效降低糖尿病肾病大鼠NK细胞活化性受体表达,抑制HMGB1/Beclin-1信号通路,提示EPO可能通过调控NK细胞活化性受体及HMGB1/Beclin-1信号通路发挥作用,而NK细胞活化性受体表达与HMGB1/Beclin-1信号通路呈正相关。 展开更多
关键词 HMGB1/beclin-1信号通路 EPO 糖尿病肾病 NK细胞活化性受体
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蛇葡萄素通过调控Beclin-1/Bcl-2靶点对人宫颈癌SiHa细胞噬与凋亡的影响
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作者 张天旭 熊晓妹 +5 位作者 邹雪 廖思雨 许诗怡 杨晓利 桂春 张秀桥 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期3977-3985,共9页
目的 探讨蛇葡萄素诱导人宫颈癌SiHa细胞发生自噬与凋亡的影响。方法 设置对照组、 3-MA (5 mmol/L)组、 Z-VAD-FMK (50μmol/L)组、蛇葡萄素(80μmol/L)组、 3-MA+蛇葡萄素组、 Z-VAD-FMK+蛇葡萄素组,依次给药培养24 h,MTT法检测细胞... 目的 探讨蛇葡萄素诱导人宫颈癌SiHa细胞发生自噬与凋亡的影响。方法 设置对照组、 3-MA (5 mmol/L)组、 Z-VAD-FMK (50μmol/L)组、蛇葡萄素(80μmol/L)组、 3-MA+蛇葡萄素组、 Z-VAD-FMK+蛇葡萄素组,依次给药培养24 h,MTT法检测细胞增殖抑制率;设置对照组、 3-MA (5 mmol/L)组、蛇葡萄素(80μmol/L)组、 3-MA+蛇葡萄素组,依次给药培养24 h,电子显微镜下观察细胞形态变化,Hoechst33258和Annexin V-FITC/PI染色法检测细胞凋亡情况;设置对照组、 Z-VAD-FMK (50μmol/L)组、蛇葡萄素(80μmol/L)组、 Z-VAD-FMK+蛇葡萄素组,依次给药培养24 h,MDC法和透射电子显微镜观察自噬和细胞超微结构变化;设置对照组、 3-MA (5 mmol/L)组、蛇葡萄素(80μmol/L)组、 3-MA+蛇葡萄素组或对照组、 Z-VAD-FMK (50μmol/L)组、蛇葡萄素(80μmol/L)组、 Z-VAD-FMK+蛇葡萄素组,依次给药培养12 h,Western blot法检测cleaved-PARP、 cleaved-Caspase3、 Bax、 Bcl-2、Atg13、 Beclin-1、 LC3、 P62蛋白表达。结果 与对照组比较,蛇葡萄素对SiHa和C-33A细胞的增殖抑制作用均增强(P<0.01);与蛇葡萄素组比较,3-MA+蛇葡萄素、 Z-VAD-FMK+蛇葡萄素对2种细胞的增殖抑制作用增强更显著(P<0.01),且活细胞数减少。与蛇葡萄素组比较,3-MA+蛇葡萄素组SiHa细胞中亮蓝色荧光增多,凋亡率升高(P<0.05),cleaved-PARP、 Bax、 P62蛋白表达升高(P<0.01),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、 Bcl-2蛋白表达降低(P<0.01)。与蛇葡萄素组比较,Z-VAD-FMK+蛇葡萄素组SiHa细胞中绿色点状荧光、自噬小体和自噬溶酶体数量均增多,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、 Atg13、 Beclin-1蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01),P62、 cleaved-PARP、 cleaved-Caspase3蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论 蛇葡萄素可诱导宫颈癌SiHa细胞自噬和凋亡,两者呈相互拮抗关系,且Beclin-1/Bcl-2可能为其关键作用靶点。 展开更多
关键词 蛇葡萄素 SIHA细胞 自噬 凋亡 拮抗 beclin-1/Bcl-2
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自噬相关蛋白ATG5/BECLIN-1调控细胞自噬和凋亡的分子机理研究进展 被引量:28
4
作者 谢昆 李密杰 +4 位作者 蒋成砚 鲁海菊 孔琼 高波 杨婉莹 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期272-275,285,共5页
ATG5和BECLIN-1(酵母ATG6同源物)是自噬体形成过程中所必需的两种自噬相关蛋白质,它们除了促进自噬体的形成,还能诱导细胞凋亡的发生,被认为是调控细胞自噬和凋亡的分子开关蛋白。前期研究揭示ATG5通过组成泛素化系统ATG5-ATG12-ATG16L... ATG5和BECLIN-1(酵母ATG6同源物)是自噬体形成过程中所必需的两种自噬相关蛋白质,它们除了促进自噬体的形成,还能诱导细胞凋亡的发生,被认为是调控细胞自噬和凋亡的分子开关蛋白。前期研究揭示ATG5通过组成泛素化系统ATG5-ATG12-ATG16L介导自噬体的形成,而BECLIN-1通过组成磷脂酰肌醇3-激酶(PtdIns3KC3)复合体诱导细胞自噬,现在认为ATG5的氨基端截短分子tATG5-N和BECLIN-1的羧基端截短分子BECLIN-1-C能诱导细胞凋亡。本研究对近年来ATG5和BECLIN-1调控细胞自噬和凋亡的研究进展作一综述,为研究ATG5/BECLIN-1调控细胞自噬和凋亡的分子机理奠定基础。 展开更多
关键词 自噬相关蛋白质5 beclin-1 自噬 凋亡 分子机理 调控
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电针对脑缺血再灌注模型大鼠脑组织Beclin-1蛋白及基因表达的影响 被引量:20
5
作者 冯晓东 高玲莉 +2 位作者 李瑞青 孙伟娟 白俊敏 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1307-1310,1354,共5页
目的:观察电针(EA)对脑缺血再灌注认知障碍模型大鼠脑组织中Beclin-1的影响,探讨脑卒中后认知障碍的康复机制。方法:健康SD雄性大鼠105只,随机分为3组:电针组、模型组和假手术组,每组35只;大鼠缺血再灌注模型采用改良线栓法栓塞左侧大... 目的:观察电针(EA)对脑缺血再灌注认知障碍模型大鼠脑组织中Beclin-1的影响,探讨脑卒中后认知障碍的康复机制。方法:健康SD雄性大鼠105只,随机分为3组:电针组、模型组和假手术组,每组35只;大鼠缺血再灌注模型采用改良线栓法栓塞左侧大脑中动脉制备。电针"神庭穴"、"百会穴"各30min,1次/日,从术后第1天至第10天动物处死。采用Morris水迷宫实验观测模型大鼠的学习、记忆能力;采用Western blot和荧光定量PCR法检测大鼠脑组织Beclin-1蛋白和基因的表达。结果:造模后的第4到第8天,模型组大鼠的逃避潜伏期较假手术组长(P<0.05),EA组大鼠的逃避潜伏期较模型组缩短(P<0.05)。电针组大鼠海马及左侧大脑皮质中Beclin-1蛋白的电泳条带与假手术组相比,电针组条带灰度值较假手术组高(P<0.05),与模型组相比,电针组Beclin-1蛋白电泳条带灰度较模型组高(P<0.05)。模型组和电针组的Beclin-1基因表达的2^(-△△)Ct与假手术组相比差异明显,均升高(P<0.05)。但电针组Beclin-1基因表达的2^(-△△)Ct明显较模型组高(P<0.05)结论:(1)电针神庭、百会可以促进脑缺血再灌注后认知障碍模型大鼠的认知功能的恢复;(2)电针可以提高缺血再灌注模型大鼠脑组织中的Beclin-1表达。Beclin-1是一种自噬相关蛋白,直接执行自噬的过程,被作为自噬发生的标志物。对自噬网络系统的调控可能是电针能够改善脑卒中后认知障碍的生物学机制之一。 展开更多
关键词 电针 认知障碍 神庭 百会 beclin-1 脑缺血
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五味温通除痹胶囊对佐剂性关节炎大鼠自噬蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ表达的影响 被引量:20
6
作者 姜辉 秦秀娟 +2 位作者 万磊 刘健 高家荣 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1566-1572,共7页
目的明确五味温通除痹胶囊(桂枝、茯苓、淫羊藿,等)对佐剂性关节炎大鼠自噬蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ表达的影响,探讨其防治类风湿关节炎的可能机制。方法雄性SD大鼠,随机分为正常组、模型组、五味温通除痹胶囊(0.80、1.60、3.20 g/kg)组、... 目的明确五味温通除痹胶囊(桂枝、茯苓、淫羊藿,等)对佐剂性关节炎大鼠自噬蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ表达的影响,探讨其防治类风湿关节炎的可能机制。方法雄性SD大鼠,随机分为正常组、模型组、五味温通除痹胶囊(0.80、1.60、3.20 g/kg)组、阳性药雷公藤多苷片(40 mg/kg)组,每组10只。除正常组外,采用弗氏完全佐剂诱导佐剂性关节炎大鼠模型。致炎后第12天灌胃给药,连续12 d。实验结束后,取非致炎侧踝关节,HE染色观察病理学改变,实时定量荧光PCR测定滑膜组织中Beclin-1、LC3-ⅡmRNA的表达,免疫荧光组织化学染色和Western blot法检测滑膜组织中Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白的表达。结果与模型组相比,五味温通除痹胶囊(1.60、3.20 g/kg)不仅可减轻佐剂性关节炎大鼠关节病理损伤程度,还可显著升高Beclin-1、LC3-ⅡmRNA和蛋白的表达水平。结论五味温通除痹胶囊对佐剂性关节炎大鼠具有一定的治疗作用,其机制可能与促进细胞自噬,减少滑膜细胞的过度增殖,从而减轻关节软骨损伤有关。 展开更多
关键词 五味温通除痹胶囊 佐剂性关节炎 大鼠 beclin-1 LC3-Ⅱ
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电针神庭、百会对脑缺血再灌注大鼠认知功能及Beclin-1表达的影响 被引量:29
7
作者 冯晓东 史景 +1 位作者 湾明月 刘承梅 《中国康复理论与实践》 CSCD 北大核心 2018年第1期49-53,共5页
目的观察电针神庭、百会对脑缺血再灌注大鼠认知功能的影响,并探讨其可能机制。方法雄性Sprague-Dawley大鼠45只随机分为假手术组(n=15)、模型组(n=15)和电针组(n=15)。模型组和电针组采用线栓法制备脑缺血2 h再灌注模型。电针组术后2 ... 目的观察电针神庭、百会对脑缺血再灌注大鼠认知功能的影响,并探讨其可能机制。方法雄性Sprague-Dawley大鼠45只随机分为假手术组(n=15)、模型组(n=15)和电针组(n=15)。模型组和电针组采用线栓法制备脑缺血2 h再灌注模型。电针组术后2 h起电针百会、神庭共7 d。各组术后1 d、3 d、5d、7 d行Longa评分;干预后4 d起,行Morris水迷宫测试,共4 d。干预后7 d,TTC染色检测脑梗死体积,Western blotting检测缺血侧Beclin-1蛋白表达。结果干预后3 d起,与模型组相比,电针组大鼠Longa评分降低(P<0.05)。各时间点,与模型组相比,电针组逃避潜伏期缩短(P<0.05),穿越平台次数提高(P<0.05)。与模型组相比,电针组脑梗死体积显著减小(F=7.651,P<0.001),Beclin-1表达增强(P<0.05)。结论电针百会、神庭穴可以改善脑缺血再灌注大鼠学习记忆能力,可能与调控自噬网络有关。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注 电针 学习记忆 自噬 beclin-1 大鼠
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基于Bcl-2/Beclin-1复合体探讨黄连素对脑缺血再灌注损伤大鼠模型的保护作用 被引量:14
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作者 丁实 赵学荣 +5 位作者 李宝群 赵亮 周健 毕红东 庞冲 郭娜娜 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期651-657,共7页
目的基于B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)/Beclin-1复合体研究黄连素对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用。方法 SPF级SD大鼠108只,按照随机数字表法分为假手术组(sham组)、模型组(I/R)、黄连素低、中、高剂量组(BBR-L、BBR-M、BBR-H),... 目的基于B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)/Beclin-1复合体研究黄连素对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用。方法 SPF级SD大鼠108只,按照随机数字表法分为假手术组(sham组)、模型组(I/R)、黄连素低、中、高剂量组(BBR-L、BBR-M、BBR-H),尼莫地平预处理组(NMDP组),造模后对大鼠进行神经功能评分;TTC染色观察大鼠脑梗死面积;HE染色观察大鼠脑组织病理学变化;RT-PCR法检测脑组织中Bcl-2、caspase-3、Bax mRNA的表达;Western blot检测脑皮质中Bcl-2、caspase-3、Bax、Beclin-1蛋白表达水平。结果 I/R组 6、24、48 h3个时间点的神经功能评分均显著高于Sham组,24 h的神经功能评分最高;与模型组比较,BBR处理组和NMDP组24、48 h的神经功能缺损评分显著降低( P<0.05);与Sham组比较,I/R组梗死面积百分比、细胞坏死比例显著升高,与I/R组比较,BBR治疗组和NMDP组显著减少( P<0.05);与Sham组比较,I/R组Bcl-2、caspase-3、Bax mRNA和蛋白水平均显著升高;与I/R组比较,BBR治疗组和NMDP组Bcl-2 mRNA和蛋白水平均显著升高,caspase-3、Bax mRNA和蛋白水平均显著降低;与Sham组比较,I/R组Bcl-2/Bax比值显著降低;与I/R组比较,各治疗组Bcl-2/Bax比值均显著上升,且呈剂量依赖性升高;与Sham组比较,I/R组Beclin-1蛋白水平及Bcl-2/Beclin-1比值升高( P<0.05);与I/R组比较,BBR组和NMDP组Beclin-1蛋白水平显著升高( P<0.05),Bcl-2/Beclin-1比值均降低,且BBR-M组、BBR-H组、NMDP组Bcl-2/Beclin-1无显著差异。结论黄连素对大鼠脑缺血再灌注损伤具有神经保护作用,其可通过调节自噬蛋白与凋亡蛋白的水平,使自噬达到合适水平,发挥神经保护作用。 展开更多
关键词 SD大鼠 BCL-2 beclin-1 脑缺血再灌注
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Beclin-1在稽留流产中的表达模式及临床意义 被引量:13
9
作者 谢冰 陈霞 +5 位作者 于骏 颜一丹 栾晓瑾 刘佳佳 乔晨 方杰 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2019年第1期78-81,共4页
目的自噬在稽留流产中的相关研究鲜有报道。文中通过检测自噬相关因子Beclin-1及LC3在正常妊娠者和稽留流产者的绒毛及蜕膜中的表达情况,探讨稽留流产与细胞自噬之间的关系,为稽留流产的早期防治提供理论依据。方法选取2017年1月至3月... 目的自噬在稽留流产中的相关研究鲜有报道。文中通过检测自噬相关因子Beclin-1及LC3在正常妊娠者和稽留流产者的绒毛及蜕膜中的表达情况,探讨稽留流产与细胞自噬之间的关系,为稽留流产的早期防治提供理论依据。方法选取2017年1月至3月在江苏大学第四附属医院妇科收治的30例稽留流产患者作为稽留组,同期收治的30例正常妊娠患者作为对照组。利用荧光定量PCR方法检测2组绒毛及蜕膜组织中Beclin-1 mRNA的表达水平,利用Western Blot检测两组绒毛及蜕膜组织中Beclin-1、LC3II/LC3I蛋白的表达水平,利用免疫组化观察Beclin-1在2组绒毛及蜕膜组织中的定位情况。结果与对照组相比,Beclin-1 mRNA在稽留流产绒毛(1.00±0.28 vs 2.17±0.87)及蜕膜组织(1.75±0.41 vs 4.74±0.93)中显著性上调,差异有统计学意义(P<0.05)。Beclin-1和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白在稽留流产绒毛及蜕膜组织中均呈上调趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。免疫组化显示Beclin-1蛋白在稽留流产绒毛及蜕膜组织中的表达水平均呈现上调趋势。结论Beclin-1 mRNA及蛋白、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ在稽留流产的绒毛及蜕膜组织中均上调,提示细胞自噬参与了稽留流产的发生,为研究稽留流产的发病机制提供新的理论依据。 展开更多
关键词 beclin-1 LC3 稽留流产 自噬 细胞死亡
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侵袭性垂体腺瘤中自噬相关基因Beclin-1和MAPLC3的表达 被引量:9
10
作者 冯清林 霍钢 +3 位作者 唐茂源 姜蓉 冉建华 黄良库 《中国神经精神疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期476-479,共4页
目的检测自噬相关基因Beclin-1和微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein3,MAPLC3)在侵袭性和非侵袭性垂体腺瘤组织中的表达情况,探讨其与侵袭性垂体腺瘤侵袭性的关系。方法 61例垂体腺瘤手术标本按侵袭性垂体腺瘤综合判定... 目的检测自噬相关基因Beclin-1和微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein3,MAPLC3)在侵袭性和非侵袭性垂体腺瘤组织中的表达情况,探讨其与侵袭性垂体腺瘤侵袭性的关系。方法 61例垂体腺瘤手术标本按侵袭性垂体腺瘤综合判定方法分为侵袭组和非侵袭组,采用免疫荧光检测Beclin-1和MAPLC3蛋白的表达,RT-PCR法检测Beclin-1和MAPLC3mRNA的表达,分析侵袭组和非侵袭组Beclin-1和MAP1LC3表达水平的差异。结果 61例垂体瘤患者中,32例为侵袭性垂体腺瘤,29例为非侵袭性垂体腺瘤。侵袭性垂体腺瘤组Beclin-1的蛋白和mRNA表达均低于非侵袭性腺瘤组(P<0.05),MAPLC3的蛋白和mRNA表达也均低于非侵袭性腺瘤组(P<0.05),差别具有统计学意义。结论自噬相关基因Beclin-1和MAPLC3在侵袭性垂体腺瘤中的表达下调,提示其可能与侵袭性垂体腺瘤的侵袭性有关。 展开更多
关键词 自噬 beclin-1 MAPLC3 垂体腺瘤
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瑞舒伐他汀对心肌肥厚大鼠心肌组织Beclin-1蛋白表达的影响 被引量:7
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作者 丁同斌 简立国 +3 位作者 张丽华 刘士超 赵江涛 程栋 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2016年第2期251-254,共4页
目的:探讨瑞舒伐他汀对心肌肥厚大鼠心肌组织中自噬相关蛋白Beclin-1表达的影响。方法:健康雄性SD大鼠75只,随机分为假手术组、模型组和RSV组,每组25只,模型组和RSV组通过腹主动脉缩窄术建立心肌肥厚模型,术后分别给予生理盐水和瑞舒伐... 目的:探讨瑞舒伐他汀对心肌肥厚大鼠心肌组织中自噬相关蛋白Beclin-1表达的影响。方法:健康雄性SD大鼠75只,随机分为假手术组、模型组和RSV组,每组25只,模型组和RSV组通过腹主动脉缩窄术建立心肌肥厚模型,术后分别给予生理盐水和瑞舒伐他汀(4 mg/kg)灌胃,1次/d,连用4周。4周后测定心脏指数,用RT-PCR和Western blot法分别检测大鼠左心室心肌组织中Beclin-1 mRNA和蛋白的表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠心肌明显肥厚,心脏指数升高,心肌组织中Beclin-1 mRNA和蛋白表达上调(P<0.05);与模型组比较,RSV组大鼠心肌无明显肥厚,心脏指数降低,心肌组织中Beclin-1 mRNA和蛋白表达下降(P<0.05)。结论:瑞舒伐他汀可抑制压力超负荷性心肌肥厚,其作用机制可能与降低自噬水平有关。 展开更多
关键词 瑞舒伐他汀 压力超负荷 心肌肥厚 beclin-1 大鼠 自噬
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自噬相关蛋白Beclin-1在ⅢB期结肠癌的表达及其与预后关系 被引量:6
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作者 李宝秀 李春燕 +4 位作者 彭瑞清 王海英 伍小军 万德森 张晓实 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期146-149,共4页
目的:自噬是细胞利用溶酶体降解自身受损的细胞器和大分子物质的过程,是真核细胞的一种死亡形式。自噬在肿瘤发生发展中的作用尚不完全清楚。Beclin-1是一种双等位抑癌基因且是哺乳动物参与自噬的特异性基因。本研究观察肿瘤细胞自噬... 目的:自噬是细胞利用溶酶体降解自身受损的细胞器和大分子物质的过程,是真核细胞的一种死亡形式。自噬在肿瘤发生发展中的作用尚不完全清楚。Beclin-1是一种双等位抑癌基因且是哺乳动物参与自噬的特异性基因。本研究观察肿瘤细胞自噬水平变化对ⅢB期结肠癌患者预后的影响。方法:收集我院1999年1月~2003年7月经过根治性手术治疗并有完整随访资料的115例ⅢB期结肠癌组织标本,用免疫组化方法观察自噬相关蛋白Beclin-1在癌组织与癌旁正常粘膜表达情况,分析beclin-1表达水平与患者临床病理参数关系及与患者预后的关系。结果:Beclin-1蛋白表达于肿瘤细胞膜、胞浆和(或)细胞核,正常粘膜缺乏Beclin—1表达。肿瘤组织Beclin—1阳性率达85.2%(98/115);Beclin-1表达者的5年生存率较高(67.3%VS47.1%)。此外,Beclin-1表达与患者其它临床病理参数如年龄、性别、发病部位、病理类型、细胞分化程度及T分期无相关性。结论:局部晚期结肠癌细胞保留自噬功能没有提高肿瘤细胞的生存能力,而丧失自噬功能可能促进肿瘤进展。 展开更多
关键词 自噬 beclin-1 结肠癌 预后
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饥饿诱导胶质瘤细胞自噬发生及Beclin-1表达的变化 被引量:6
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作者 赵建祥 贺华 +3 位作者 马建芳 卞留贯 孙青芳 沈建康 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期933-936,共4页
目的探讨饥饿诱导大鼠胶质瘤细胞C6自噬的发生及自噬相关蛋白Beclin-1的变化。方法在培养大鼠胶质瘤细胞C6至对数生长期后,以无氨基酸培养液EBSS(Earle's balanced salt)代替DMEM培养液培养细胞,培养1、3、6、12、18h后收集细胞,采... 目的探讨饥饿诱导大鼠胶质瘤细胞C6自噬的发生及自噬相关蛋白Beclin-1的变化。方法在培养大鼠胶质瘤细胞C6至对数生长期后,以无氨基酸培养液EBSS(Earle's balanced salt)代替DMEM培养液培养细胞,培养1、3、6、12、18h后收集细胞,采用蛋白质印迹分析和免疫荧光检测特异性标记自噬的微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain3,LC-3)以及自噬相关蛋白Beclin-1,采用透射电镜观察自噬体。结果饥饿处理1h后胶质瘤细胞C6中LC-3表达开始增加,并随着饥饿时间延长而逐渐增加,12h达到高峰后开始下降;免疫荧光下可见点状自噬体;透射电镜下观察到自噬体的形成。饥饿处理1h后胶质瘤细胞C6中Beclin-1表达开始升高,3h达到高峰后逐渐下降;免疫荧光下观察到Beclin-1表达增高。结论饥饿可以诱导胶质瘤细胞C6发生自噬,Beclin-1与饥饿诱导的胶质瘤细胞C6的自噬相关,为进一步研究Beclin-1在胶质瘤细胞自噬中的作用机制打下基础。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 自噬 LC-3 beclin-1
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免疫抑制剂治疗对阿尔茨海默病大鼠海马自噬蛋白Beclin-1和LC3表达的影响 被引量:8
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作者 王晓平 黄斌 +2 位作者 马帅 黄睿 李晓佳 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期450-454,共5页
目的分析免疫抑制剂治疗对阿尔茨海默病大鼠海马自噬蛋白Beclin-1与微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain 3,LC3)表达的影响。方法将雄性SD大鼠采用Aβ25-35侧脑室注射法制备阿尔茨海默病模型大鼠,将制备... 目的分析免疫抑制剂治疗对阿尔茨海默病大鼠海马自噬蛋白Beclin-1与微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain 3,LC3)表达的影响。方法将雄性SD大鼠采用Aβ25-35侧脑室注射法制备阿尔茨海默病模型大鼠,将制备的阿尔茨海默病大鼠随机分为4组:模型组、吗替麦考酚酯高剂量组(0.8 g/kg)、吗替麦考酚酯低剂量组(0.4 g/kg)和阳性药多奈哌齐组(0.5 g/kg)。对照组与模型组给予生理盐水,吗替麦考酚酯高剂量组、吗替麦考酚酯低剂量组和阳性药多奈哌齐组均给予对应药物灌胃处理,所有大鼠连续给药4周,检测所有大鼠的识别指数、水迷宫实验、小脑Tunel染色及采用Western blot实验分析海马组织的Beclin-1与LC3蛋白表达。结果与对照组比较,模型组的识别指数和穿环次数明显降低(均P<0.05),潜伏期和游泳距离明显增加(均P<0.05);与模型组比,吗替麦考酚酯低剂量组、高剂量组和阳性药组的识别指数和穿环次数明显增加(均P<0.05),潜伏期和游泳距离明显降低(均P<0.05)。镜下显示,凋亡的小脑神经细胞呈棕色,与对照组比较,模型组凋亡的小脑神经细胞明显增多;与模型组比较,吗替麦考酚酯低剂量组、高剂量组和阳性药组凋亡的小脑神经细胞明显减少。与对照组比较,模型组大鼠海马的Beclin-1和LC3表达明显降低(均P<0.05);与模型组比较,吗替麦考酚酯低剂量组、高剂量组和阳性药组Beclin-1和LC3表达明显增加(均P<0.05),且吗替麦考酚酯组中,凋亡的小脑神经细胞减少及Beclin-1和LC3表达增高均呈剂量依赖性趋势。结论吗替麦考酚酯可以改善阿尔茨海默病大鼠的学习认知能力,其机制可能与增强自噬水平和提高自噬蛋白Beclin-1和LC3表达相关。 展开更多
关键词 免疫抑制剂 吗替麦考酚酯 阿尔茨海默病 海马 自噬 beclin-1 微管相关蛋白1轻链3
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舒胃汤对FD肝郁脾虚证模型大鼠胃肠平滑肌Beclin-1、mTOR、Cx43蛋白与mRNA表达的影响 被引量:13
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作者 郭璇 阳松威 +4 位作者 姜苏南 徐寅 王小娟 黄琳桂 朱洁 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期270-275,共6页
目的通过研究舒胃汤(柴胡、香附、白术,等)对功能性消化不良(FD)肝郁脾虚证模型大鼠胃窦和幽门区平滑肌中自噬调控基因Beclin-1、雷帕霉素靶蛋白mTOR、连接蛋白Cx43蛋白与mRNA表达的影响,从自噬与细胞间缝隙连接通道探讨舒胃汤对功能性... 目的通过研究舒胃汤(柴胡、香附、白术,等)对功能性消化不良(FD)肝郁脾虚证模型大鼠胃窦和幽门区平滑肌中自噬调控基因Beclin-1、雷帕霉素靶蛋白mTOR、连接蛋白Cx43蛋白与mRNA表达的影响,从自噬与细胞间缝隙连接通道探讨舒胃汤对功能性消化不良的治疗作用及机制。方法取60只Wistar大鼠随机分为空白组,模型组,莫沙必利组(1.37 mg/kg),舒胃汤低、中、高剂量组(7.67、15.34、30.68 g/kg)。除空白组外,各组大鼠按复合病因造模法造模21 d复制FD肝郁脾虚证大鼠模型。于造模结束后第1天开始给药,空白组与模型组大鼠给予等量蒸馏水,其余各组大鼠按剂量要求灌胃给药,每天1次,连续给药14 d。末次给药2 h后,颈静脉放血处死大鼠,摘取各组大鼠胃窦与幽门组织,Western blot法检测Beclin-1、mTOR、Cx43蛋白表达,RT-qPCR法检测Beclin-1、mTOR、Cx43 mRNA表达。结果 Western blot结果显示,舒胃汤低、中、高剂量组Beclin-1表达明显降低(P<0.01),舒胃汤高剂量组Cx43表达明显升高(P<0.05);RT-qPCR结果显示,舒胃汤中、高剂量组Beclin-1表达明显降低(P<0.01),mTOR表达明显升高(P<0.01),舒胃汤低、中、高剂量组Cx43表达明显升高(P<0.01)。结论舒胃汤可通过上调FD模型大鼠胃肠平滑肌细胞mTOR mRNA、Cx43蛋白及mRNA表达,下调Beclin-1蛋白及mRNA表达,抑制细胞自噬及增强细胞间缝隙连接治疗功能性消化不良。 展开更多
关键词 舒胃汤 功能性消化不良(FD) 自噬 缝隙连接 beclin-1 MTOR Cx43
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血管性痴呆大鼠海马神经元LC3和Beclin-1的表达 被引量:7
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作者 高健 王德秀 +1 位作者 王凤斌 王玉良 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期467-472,共6页
目的:在血管性痴呆(vascular dementia,VD)模型大鼠,观察自噬相关蛋白LC3和Beclin-1在海马CA1区神经元中的表达变化情况。方法:采用重复夹闭双侧颈总动脉(CCA)同时腹腔注射硝普钠溶液方法制备VD大鼠模型,在1、3、5和7 d四个时间点,分别... 目的:在血管性痴呆(vascular dementia,VD)模型大鼠,观察自噬相关蛋白LC3和Beclin-1在海马CA1区神经元中的表达变化情况。方法:采用重复夹闭双侧颈总动脉(CCA)同时腹腔注射硝普钠溶液方法制备VD大鼠模型,在1、3、5和7 d四个时间点,分别采用Morris水迷宫检测大鼠空间学习记忆能力;HE染色观察CA1区神经元形态变化情况;免疫组化和Western Blot观察海马CA1区神经元上LC3和Beclin-1的表达情况。结果:模型组大鼠各时间点的逃逸潜伏期(escape latency,EL)比假手术组均明显延长(P<0.01)。HE染色结果发现,与假手术组相比,模型组大鼠海马神经元出现严重损伤,且随时间延长逐渐加重。免疫组化和Western Blot积分光密度值测定结果显示,模型组大鼠各时间点LC3和Beclin-1的表达均比假手术组明显升高(P<0.01),5 d时间点达到高峰。结论:VD模型大鼠缺血再灌注短时间内海马CA1区神经元出现严重损伤,伴有自噬相关的LC3和Beclin-1一过性表达升高。 展开更多
关键词 VD模型 自噬 LC3 beclin-1 海马
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Beclin-1基因shRNA慢病毒载体的构建及其对B16F10细胞自噬及活力的影响 被引量:4
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作者 贾艳艳 赵莹莹 +6 位作者 余祖华 何雷 廖成水 李静 郁川 张春杰 李银聚 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期2609-2616,共8页
利用RNA干扰技术构建稳定沉默Beclin-l基因的B16F10小鼠黑色素瘤细胞系,分析稳转细胞系的自噬水平和活力,为探讨Beclin-1基因、自噬与肿瘤三者关系奠定基础。构建小鼠Beclin-l基因干扰载体,转染至293T细胞,获得慢病毒颗粒,将病毒颗粒感... 利用RNA干扰技术构建稳定沉默Beclin-l基因的B16F10小鼠黑色素瘤细胞系,分析稳转细胞系的自噬水平和活力,为探讨Beclin-1基因、自噬与肿瘤三者关系奠定基础。构建小鼠Beclin-l基因干扰载体,转染至293T细胞,获得慢病毒颗粒,将病毒颗粒感染B16F10细胞,通过加压筛选、有限稀释、细胞驯化得到稳定转染m-Beclin-1-shRNA1的B16F10细胞系。采用RT-PCR和免疫荧光技术检测对Beclin-l的干扰效果,Western blot和透射电镜分析稳转细胞系中自噬标志物LC3蛋白表达及自噬小体形成情况,CCK-8法检测稳转细胞系的活力。结果表明,成功构建了靶向抑制Beclin-l基因表达的shRNA,纯化的慢病毒滴度为1×10^(8) TU·mL^(-1),建立的细胞系中Beclin-1 mRNA和蛋白表达都受到不同程度的抑制,mRNA的沉默效率约为75%(P<0.01),发现干预Beclin-1表达能够抑制LC3-Ⅱ蛋白的表达及自噬小体的形成数量,降低B16F10细胞活力。以上结果表明,干扰Beclin-1表达能够有效降低B16F10细胞自噬活性,促进B16F10细胞死亡,这为探讨Beclin-1基因功能及自噬在抗肿瘤中的作用奠定重要基础。 展开更多
关键词 RNA干扰 B16F10细胞 beclin-1基因 慢病毒载体 细胞自噬
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Bcl-2/Beclin-1复合体在自噬中的调节作用 被引量:27
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作者 叶挺 邵增务 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期513-519,共7页
自噬(autophagy)是一种进化保守的溶酶体依赖性分解代谢途径,是细胞维持自稳态的重要机制之一,并参与多种疾病的发生.Beclin-1作为自噬体成核的关键分子之一,是1个调节自噬的关键靶点.Beclin-1有1个BH3结构域,Bcl-2、Bcl-XL等可以通过这... 自噬(autophagy)是一种进化保守的溶酶体依赖性分解代谢途径,是细胞维持自稳态的重要机制之一,并参与多种疾病的发生.Beclin-1作为自噬体成核的关键分子之一,是1个调节自噬的关键靶点.Beclin-1有1个BH3结构域,Bcl-2、Bcl-XL等可以通过这个BH3结构域与Beclin-1结合而影响其活性.抗凋亡Bcl-2家族蛋白和Beclin-1的表达水平、磷酸化、分子的亚细胞定位以及BH3-only蛋白等,均可调节Beclin-1蛋白和Bcl-2家族蛋白结合水平,进而调控自噬的发生,并可能对细胞最终走向自噬还是凋亡起着关键作用. 展开更多
关键词 自噬 beclin-1 BCL-2家族 BH3结构域
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自噬基因Beclin-1和微管相关蛋白LC3在大鼠阿霉素心肌病中的表达及其意义 被引量:4
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作者 黄洁 严文华 +2 位作者 吕海涛 孙凌 徐秋琴 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期76-80,共5页
目的探讨自噬基因Beclin-1及微管相关蛋白LC3在大鼠阿霉素心肌病中的表达及其意义,初步证实自体吞噬(autophagy)参与了大鼠阿霉素心肌病的发病,并探讨其机制。方法雄性SD大鼠45只,随机分为3组,阿霉素(ADR)组、阿霉素(ADR)+3-甲基腺嘌呤(... 目的探讨自噬基因Beclin-1及微管相关蛋白LC3在大鼠阿霉素心肌病中的表达及其意义,初步证实自体吞噬(autophagy)参与了大鼠阿霉素心肌病的发病,并探讨其机制。方法雄性SD大鼠45只,随机分为3组,阿霉素(ADR)组、阿霉素(ADR)+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组和对照组。建立大鼠阿霉素心肌病模型,电镜观察自噬体形态及数量,检测心肌组织中Beclin-1含量及LC3含量。结果ADR组大鼠心肌组织自噬体的数量较对照组及ADR+3-MA组增多;ADR组心肌组织中Beclin-1水平及LC3含量均较对照组及ADR+3-MA组增高。结论自噬性程序性细胞死亡参与了阿霉素心肌病的发病。 展开更多
关键词 阿霉素 心肌病 beclin-1 微管相关蛋白LC3 3-甲基腺嘌呤 自体吞噬
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CD147通过Beclin-1抑制前列腺癌PC-3细胞自噬 被引量:3
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作者 方芳 方青 +4 位作者 赵良中 李强 陈爽 张铎 王立国 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期15-18,I0002,共5页
目的:通过建立饥饿诱导的自噬模型,探讨CD147对前列腺癌PC-3细胞自噬作用的影响,并阐明其作用机制。方法:通过饥饿诱导方式建立自噬细胞模型。实验分为阴性对照组和RNAi干扰CD147组(PC-3/shCD147组)。GFP-LC3质粒转染观察细胞自噬斑点... 目的:通过建立饥饿诱导的自噬模型,探讨CD147对前列腺癌PC-3细胞自噬作用的影响,并阐明其作用机制。方法:通过饥饿诱导方式建立自噬细胞模型。实验分为阴性对照组和RNAi干扰CD147组(PC-3/shCD147组)。GFP-LC3质粒转染观察细胞自噬斑点形成情况,免疫印迹技术检测自噬蛋白LC3和Beclin-1表达,台盼蓝排斥实验检测细胞死亡率。结果:与阴性对照组比较,PC-3/shCD147组GFP-LC3斑点细胞数增加(P<0.01),自噬相关蛋白LC3-Ⅱ(P<0.01)和Beclin-1(P<0.05)表达水平升高;与阴性对照组(22.3%±3.5%)比较,PC-3/shCD147组细胞死亡率(38.4%±3.1%)明显升高(P<0.05)。结论:在前列腺癌PC-3细胞中,CD147通过Beclin-1抑制饥饿诱导的自噬过程,减少细胞自噬的发生。 展开更多
关键词 CD147 自噬 beclin-1 细胞增殖 前列腺癌
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