CVB对OL细胞和OL/BDV细胞I型IFN信号转导途径的影响

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作者 翟爱霞 颜冬梅 +4 位作者 王海萍 卜桐 崔乐乐 考文萍 张凤民 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2019年第4期46-51,共6页

探讨柯萨奇病毒(coxsackievirus, CVB)对人类少突胶质细胞(oligodendrocyte, OL)和博尔纳病病毒(Borna disease virus, BDV)持续感染的OL细胞(OL/BDV)中I型干扰素(interferon, IFN)、microRNA-155(miR-155)表达以及干扰素调节因子(inter... 探讨柯萨奇病毒(coxsackievirus, CVB)对人类少突胶质细胞(oligodendrocyte, OL)和博尔纳病病毒(Borna disease virus, BDV)持续感染的OL细胞(OL/BDV)中I型干扰素(interferon, IFN)、microRNA-155(miR-155)表达以及干扰素调节因子(interferon regulatory factor, IRF)7细胞定位的影响。CVB感染OL细胞和OL/BDV细胞0、2、4、6、12和24 h,qPCR检测I型IFN mRNA和miR-155表达水平。OL细胞和OL/BDV细胞分别转染IRF7-EGFP质粒,CVB感染4 h,观察IRF7细胞定位情况。CVB感染OL细胞2、4、12和24 h,IFN-αmRNA和miR-155表达水平显著增加,IFN-βmRNA表达水平在4、12和24 h显著增加;CVB感染OL/BDV细胞IFN-α和IFN-βmRNA表达水平除0 h均显著增加,但miR-155表达仅在12和24 h显著增加。CVB感染OL细胞和OL/BDV细胞4 h,IRF7绿色荧光蛋白由细胞浆转移至细胞核内。综上所述,CVB可诱导OL细胞和OL/BDV细胞I型IFN、miR-155的表达,促进IRF7入核,从而激活I型IFN信号转导途径。 展开更多

关键词 柯萨奇病毒 OL细胞 OL/bdv细胞 I型IFN信号转导途径 microRNA-155

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基于BDV新型高级职业人才培养模式的探索

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作者 刘莉 王秋楠 《职教论坛》 北大核心 2013年第11期64-66,共3页

随着我国职业教育与继续教育人才培养模式的发展,汽车行业高级职业人才培养问题日益严峻。为了适应汽车行业发展趋势,加快我国汽车产业发展脚步,结合区域汽车行业发展的需求和长春汽车工业高等专科学校职业人才培养的实际,提出了基于BD... 随着我国职业教育与继续教育人才培养模式的发展,汽车行业高级职业人才培养问题日益严峻。为了适应汽车行业发展趋势,加快我国汽车产业发展脚步,结合区域汽车行业发展的需求和长春汽车工业高等专科学校职业人才培养的实际,提出了基于BDV新型汽车行业高级职业人才培养模式的改革与实践。 展开更多

关键词 bdv 高级职业人才 职业教育 继续教育

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贵州遵义地区山羊Borna病毒P24基因片段的检测 被引量：7

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作者 王长明 徐平 +1 位作者 葛均江 郭振元 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期149-151,共3页

目的探讨贵州遵义及周边地区山羊博尔纳病病毒(BDV)感染状况。方法采用荧光定量套式逆转录酶聚合酶链反应(FQ-nRT-PCR)检测了300只山羊外周血单个核细胞(PBMC)中BDVP24基因片段。对阳性产物进行基因序列测定,氨基酸顺序,及同源性分析。... 目的探讨贵州遵义及周边地区山羊博尔纳病病毒(BDV)感染状况。方法采用荧光定量套式逆转录酶聚合酶链反应(FQ-nRT-PCR)检测了300只山羊外周血单个核细胞(PBMC)中BDVP24基因片段。对阳性产物进行基因序列测定,氨基酸顺序,及同源性分析。结果300只山羊PBMC中2只检出BDVP24基因阳性片段。山羊BDVP24基因片段阳性率为0.67(。BDVP24基因片段测序结果与GenBank提供的strainV毒株比较同源性为96.51%,有3个位点出现一致性沉寂突变,与BDV/MDCK毒株比较同源性为96.51%,有3个位点出现一致性沉寂突变,与C6BV毒株比较同源性为96.51%,有3个位点出现一致性沉寂突变,但所编码的氨基酸没有改变。结论贵州遵义及周边部分地区山羊存在BDV自然感染。 展开更多

关键词 博尔纳病病毒 巢式逆转录荧光定量PCR bdv P24基因 山羊

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分泌抗BVDV McAb杂交瘤细胞株的建立 被引量：4

4

作者 王新华 沈敏 +2 位作者 周鹏飞 钟发刚 温建新 《西北农业学报》 CAS CSCD 1999年第3期1-4,共4页

用牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ） 感染ＭＤＢＫ 细胞，将感染细胞培养物冻融后离心取上清经ＰＥＧ 沉淀浓缩抗原免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，取血清抗体效价高的免疫鼠的脾细胞与ＳＰ２／Ｏ 细胞在ＰＥＧ作用下融合，产生杂交瘤细胞，用间接... 用牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ） 感染ＭＤＢＫ 细胞，将感染细胞培养物冻融后离心取上清经ＰＥＧ 沉淀浓缩抗原免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，取血清抗体效价高的免疫鼠的脾细胞与ＳＰ２／Ｏ 细胞在ＰＥＧ作用下融合，产生杂交瘤细胞，用间接ＥＬＩＳＡ 法检测杂交瘤细胞生长孔上清，筛选阳性杂交瘤细胞株。以有限稀释法克隆２ ～３次，得到８ 株分泌抗ＢＶＤＶ 的单克隆抗体（ＭｃＡｂ） 杂交瘤细胞株。８ 株ＭｃＡｂ 对ＢＶＤＶ、猪瘟（ＣＳＦＶ） 均呈阳性反应。杂交瘤细胞核内染色体数为９８～１０５ 条。ＭｃＡｂ 属性为：６ 株属ＩｇＧ１ ，２ 株属ＩｇＧ２ａ 。经抗原结合位点分析，８ 株ＭｃＡｂ 可识别３ 个不同的抗原决定位点。将杂交瘤细胞注射ＢＡＬＢ／Ｃ 小鼠腹腔诱生腹水，其抗体效价提高３ ２００ 倍以上，有３ 株腹水单抗的ＥＬＩＳＡ 效价在１∶１０ 万以上，最高ＭｃＡｂ 株达１∶２０ 万。杂交瘤在液氮中保存１～２ ａ 后复苏仍能稳定地分泌抗ＢＶＤ 病毒的ＭｃＡｂ 。所有腹水ＭｃＡｂ 对ＢＶＤＶ 的中和指数均大于５０（ｌｏｇ１０１ ．７），最高达５０１１８（ｌｏｇ１０４．７） 。ＭｃＡｂ 展开更多

关键词 单克隆抗体 BVDV bdv CSFV

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博尔纳病病毒p24重组蛋白的表达与初步鉴定 被引量：2

5

作者 杨爱英 张凤民 +1 位作者 郭彩玲 谷鸿喜 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2001年第4期62-63,共2页

博尔纳病病毒 (BornaDiseaseVirus,BDV)是一种嗜神经病毒。研究表明 ,BDV不仅可以引起马、羊等家畜的自然感染 ,从啮齿类动物到人以外的灵长类动物均易受到BDV的实验性感染 ,而且BDV感染还可能与人类的某些精神神经疾病的发生相关。本... 博尔纳病病毒 (BornaDiseaseVirus,BDV)是一种嗜神经病毒。研究表明 ,BDV不仅可以引起马、羊等家畜的自然感染 ,从啮齿类动物到人以外的灵长类动物均易受到BDV的实验性感染 ,而且BDV感染还可能与人类的某些精神神经疾病的发生相关。本研究对含有BDV p2 4重组质粒PGEX 3X的大肠杆菌表达系统进行了优化表达BDV p2 4蛋白 ,在IPTG 2mmol/L、3h表达量最大 ,同时用BDV p2 4单克隆抗体证实了其特异性。从而为建立检测待检血清中BDV p2 展开更多

关键词 博尔纳病毒 bdv-p24蛋白 WESTERN-BLOT 表达 鉴定 血清抗体 家畜人

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波那病病毒:一种正在形成的人畜共患动物传染病病原体

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作者 李凯年 《畜牧兽医科技信息》 2002年第10期6-10,共5页

波那病(BD)是一种中枢神经系统(CNS)的传染病,主要发生在中欧的马和绵羊.其名称来源于1894年左右在德国萨克森州波那市的一个骑兵团马匹中首次发现本病.1927年,Zwick等人证实本病为病毒感染.近些年来,对波那病的研究取得很大进展,发现... 波那病(BD)是一种中枢神经系统(CNS)的传染病,主要发生在中欧的马和绵羊.其名称来源于1894年左右在德国萨克森州波那市的一个骑兵团马匹中首次发现本病.1927年,Zwick等人证实本病为病毒感染.近些年来,对波那病的研究取得很大进展,发现马BD在德国、瑞士、列支敦士登以及澳大利亚都有散在发生,而且在其他一些国家的动物和人也证实有病毒特异性抗体.特别是1985年Rott等人从精神病患者检出BDV特异性抗体表明波那病可能是一种人畜共患动物传染病后,波那病日益受到全世界的关注.但是,BDV是否是人畜共患动物传染病的病原体,至今仍是一个待解之谜. 展开更多

关键词 bdv RNA 检出 动物传染病 特异性抗体 人畜共患 病原体 病原物

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1株绵羊边界病病毒的分离鉴定与序列分析 被引量：3

7

作者 刘霞 毛立 +4 位作者 李文良 杨蕾蕾 张纹纹 魏建忠 江杰元 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期434-442,共9页

对华东地区某羊场采集定点监测的绵羊血液样品进行边界病的感染情况调查。通过RT-PCR方法检测瘟病毒5′-UTR基因,发现1只绵羊的血清样品在不同时间检测均为阳性,证实其为边界病病毒(BDV)持续性感染。将该阳性血清样品接种MDBK细胞,进行... 对华东地区某羊场采集定点监测的绵羊血液样品进行边界病的感染情况调查。通过RT-PCR方法检测瘟病毒5′-UTR基因,发现1只绵羊的血清样品在不同时间检测均为阳性,证实其为边界病病毒(BDV)持续性感染。将该阳性血清样品接种MDBK细胞,进行病毒分离鉴定。通过Npro基因RT-PCR扩增、电镜观察、病毒全基因组序列分析,并对分离毒株5′-UTR和Npro基因进行遗传进化分析。结果显示,该毒株在MDBK细胞上盲传至第8代,不发生细胞病变。RT-PCR扩增获得Npro基因预期大小片段,电镜观察以及测序分析表明成功分离出1株BDV,将其命名为JSLS12-01。设计覆盖BDV全基因组的6对引物,RT-PCR扩增并测序,该分离株全基因组序列大小为12 227bp(GenBank登录号为KC963426)。序列比对结果显示,该毒株基因组序列和氨基酸序列与已有BDV分离株之间相似性分别为72.3%~80.4%和80.1%~89.7%。5′-UTR和Npro基因系统进化分析显示,该分离株与BDV 3参考毒株亲缘关系最近,相似性最高分别为87.7%和75.8%。结果证实从绵羊血液样品中鉴定并分离到1株ncp型BDV分离株,经序列分析表明该毒株属于BDV 3亚型。 展开更多

关键词 边界病病毒 分离 鉴定 序列分析

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抗博尔纳病病毒磷蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 被引量：1

8

作者 马丽华 邓榕 +2 位作者 徐晓艳 杨宏静 谢鹏 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期779-783,共5页

目的以重组的博尔纳病病毒(BDV)磷蛋白(p24)为免疫原制备单克隆抗体,并鉴定其特异性。方法以纯化后的重组BDVp24免疫小鼠,将骨髓瘤细胞与其脾细胞进行融合,经ELISA法筛选出分泌抗p24单抗的细胞株,并对其进行克隆与亚克隆培养,将最终获... 目的以重组的博尔纳病病毒(BDV)磷蛋白(p24)为免疫原制备单克隆抗体,并鉴定其特异性。方法以纯化后的重组BDVp24免疫小鼠,将骨髓瘤细胞与其脾细胞进行融合,经ELISA法筛选出分泌抗p24单抗的细胞株,并对其进行克隆与亚克隆培养,将最终获得的其中2株细胞株分别注入小鼠腹腔制备单抗,经亲和纯化法纯化后,采用ELISA法测定效价,利用蛋白免疫印迹和免疫荧光鉴定其特异性。结果建立了2株稳定分泌抗p24单抗的杂交瘤细胞株,抗体亚类均为IgG1型。纯化后的腹水抗p24单抗纯度为98%和93%,ELISA效价在1∶81 000以上,该抗体均能识别重组p24蛋白和BDV感染人类少突胶质细胞(Oligodendroglia cell,OL细胞)所表达的p24蛋白。结论成功制备了灵敏性高、特异性好的抗BDVp24单抗,为博尔纳病病毒诊断方法的研制及感染机理的研讨提供依据。 展开更多

关键词 博尔纳病病毒 磷蛋白类 单克隆抗体

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边界病 被引量：2

9

作者 杨林 张绍学 +1 位作者 牛钟相 王新平 《山东农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 1999年第1期79-84,共6页

本文依据众多资料，对羊边界病的病原学、流行病学、临床症状、发病机理、病理学、免疫学、诊断及控制作了全面概述。

关键词 边界病 边界病病毒 羊

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贵州遵义地区蝙蝠脑组织博尔纳病病毒磷蛋白的检测

10

作者 杨利玲 雷以会 徐平 《野生动物学报》 北大核心 2016年第2期126-128,共3页

研究贵州省遵义地区野生蝙蝠脑组织中BDV自然感染情况。方法:采用蛋白免疫印迹检测贵州省遵义地区82只野生蝙蝠脑组织中BDV磷蛋白表达情况。结果:82只蝙蝠脑组织中BDV磷蛋白阳性9例(11%)。结论:贵州省遵义地区蝙蝠存在BDV自然感染。

关键词 蝙蝠 bdv 磷蛋白 蛋白免疫印迹

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博尔纳病病毒pEGFP-p24基因重组质粒的构建及鉴定

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作者 翟爱霞 答嵘 +3 位作者 宋武琦 李小光 李玉军 张凤民 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2008年第3期4-6,共3页

构建博尔纳病病毒pEGFP-p24基因重组表达质粒。通过PCR方法扩增获得博尔纳病痛毒p24基因的完整序列,将此片段定向克隆到pEGFP-N1载体多克隆位点区,筛选重组阳性菌株,提取重组质粒,利用PCR方法和核酸序列测定验证重组质粒构建的正确性。... 构建博尔纳病病毒pEGFP-p24基因重组表达质粒。通过PCR方法扩增获得博尔纳病痛毒p24基因的完整序列,将此片段定向克隆到pEGFP-N1载体多克隆位点区,筛选重组阳性菌株,提取重组质粒,利用PCR方法和核酸序列测定验证重组质粒构建的正确性。PCR及核酸序列测定证明博尔纳病病毒pEGFP-p24基因重组表达质粒构建成功。构建的重组质粒将为研究博尔纳病病毒p24基因在真核细胞中的功能和作用提供实验依据。 展开更多

关键词 博尔纳病病毒 基因重组 PCR 序列分析

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牛病毒性腹泻/粘膜病病毒在不同细胞上生长增殖的比较

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作者 印娜 张斌 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第S1期101-102,共2页

牛病毒性腹泻／粘膜病病毒（ＢＶＤ／ＭＤ）Ｏｒｅｇｏｎ　Ｃ２４Ｖ弱毒株抗原的制备一直以在犊牛仔细胞上生长为主，为了使该病毒有更广泛的宿主细胞，对该病毒株在犊牛仔细胞上和睾丸细胞上生长增殖情况作了对比，结果证明，该病毒在... 牛病毒性腹泻／粘膜病病毒（ＢＶＤ／ＭＤ）Ｏｒｅｇｏｎ　Ｃ２４Ｖ弱毒株抗原的制备一直以在犊牛仔细胞上生长为主，为了使该病毒有更广泛的宿主细胞，对该病毒株在犊牛仔细胞上和睾丸细胞上生长增殖情况作了对比，结果证明，该病毒在两种细胞上的增殖情况无差异。 展开更多

关键词 BVD/MD 犊牛仔细胞 犊牛睾丸细胞 增殖

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