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布氏杆菌BCSP_(31)/pVAX1重组表达质粒的构建及其免疫保护效果的研究被引量：7: 1; 作者李鹏罗德炎 +3 位作者高永辉张松乐宋艳王希良《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期493-497,共5页; 目的构建布氏杆菌BCSP31/pVAX1重组表达质粒,免疫BALB/c小鼠,观察其免疫应答及免疫保护效果。方法克隆BCSP31基因,构建BCSP31/pVAX1重组表达质粒。转染COS7细胞,免疫组化检测其BCSP31蛋白抗原的表达。BCSP31/pVAX1重组表达质粒肌肉注射... 展开更多; 关键词布氏杆菌bcsp31 重组表达质粒免疫应答免疫保护; 在线阅读下载PDF 职称材料

羊布鲁氏菌BCSP31、OMP31、L7/L12基因的原核表达载体构建及表达被引量：8: 2; 作者司瑞白文涛 +5 位作者张芳琳刘艳丽胡刚吴兴安阎岩徐志凯《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第11期961-964,共4页; 目的构建羊布鲁氏菌外膜蛋白BCSP31、OMP31和L7/L12基因的重组表达质粒,并在原核系统中表达。方法根据羊布鲁氏菌M5株外膜蛋白BCSP31、OMP31和抗原L7/L12蛋白基因序列设计引物,分别扩增出大小约为1kb、730bp和380bp的目的基因片断,插入p... 展开更多; 关键词羊布鲁氏菌 bcsp31蛋白 OMP31蛋白 L7/L12蛋白基因表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

8株布氏杆菌BCSP31基因的序列分析被引量：12: 3; 作者丁家波毛开荣 +3 位作者陈小云程君生戴志红蒋玉文《中国兽药杂志》 2006年第3期13-16,共4页; 参照GenBank中布氏杆菌的全基因组序列,设计一对特异性引物,通过PCR方法,扩增了8株来自3个布氏杆菌种的布氏杆菌表面蛋白31(BCSP31)全基因。PCR产物经克隆和序列分析后发现,该基因非常保守,8株不同菌株间的同源性高于99.3%;进化关系分... 展开更多; 关键词布氏杆菌 bcsp31基因序列分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

安徽省亳州市布鲁氏菌病病原学监测及其分子特征分析: 4; 作者康晓东王俊 +6 位作者钱树生王祥英汤云飞怀雪飞姜栋栋刘正祥柳燕《安徽医科大学学报》北大核心 2025年第5期964-970,共7页; 目的了解安徽省亳州市布鲁氏菌病患者群的分布及病菌流行的型别和基因特征,为制定本地区布鲁氏菌病预防与控制策略提供依据。方法对采集的698份血液样本进行虎红平板凝集试验(RBPT)和试管凝集试验(TAT),收集被检测者流行病学资料,对检... 展开更多; 关键词布鲁氏菌病病原学监测 bcsp31聚合酶链式反应 AMOS聚合酶链式反应 16S rRNA 羊种布鲁氏菌; 在线阅读下载PDF 职称材料

内蒙古兴安盟地区布鲁氏菌流行株种型鉴定和体外药物敏感性分析被引量：7: 5; 作者袁海涛崔建楠 +7 位作者彩花冯丽平王红郭长山吴金泉刘伟双曲振红蔡洪涛《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期826-830,共5页; 目的了解内蒙古兴安盟布鲁氏菌流行株的主要种型,分析布鲁氏菌流行株的体外药物敏感性,指导临床治疗。方法选择内蒙古兴安盟布病发病率较高的旗县和人口密集的旗县,采集临床诊断的布病患者200份血液样本,用全自动血液培养仪培养分离出2... 展开更多; 关键词布鲁氏菌种型鉴定 bcsp31-pcr 肉汤微量稀释法药敏试验; 在线阅读下载PDF 职称材料

牛、羊布鲁菌多重PCR方法的建立与应用被引量：1: 6; 作者杜涛峰韩文瑜 +4 位作者雷连成孙长江李扬顾敬敏许会会《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第11期80-84,共5页; 根据布鲁菌属特异性基因BCSP31和布鲁菌种间特异性标志IS711插入序列,设计合成了3对引物,以牛种布鲁菌544A、104M和羊种布鲁菌16M基因组DNA为模板,通过优化反应条件,建立了可同时检测布鲁菌属、牛种布鲁菌和羊种布鲁菌的多重PCR方法。... 展开更多; 关键词牛种布鲁菌羊种布鲁菌 bcsp31基因 IS711基因多重PCR; 在线阅读下载PDF 职称材料

叠氮溴化丙锭结合荧光定量PCR测定布鲁氏菌活菌数方法的建立被引量：3: 7; 作者张士军常恒祯 +9 位作者王路鹿翟菲菲鞠丹迪胡盼卢士英李岩松周玉柳增善李兆辉任洪林《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期352-359,共8页; 为简便、快速测定宿主体内或细胞内布鲁氏菌的活菌数,本研究以布鲁氏菌单拷贝bcsp31基因为检测靶标,设计特异性引物,经优化反应条件及叠氮溴化丙锭(PMA)最佳使用浓度与曝光时间,建立了一种测定布鲁氏菌活菌数的叠氮溴化丙锭--荧光定量PC... 展开更多; 关键词布鲁氏菌 bcsp31 叠氮溴化丙锭(PMA) 荧光定量PCR 标准曲线; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名布氏杆菌BCSP_(31)/pVAX1重组表达质粒的构建及其免疫保护效果的研究被引量：7: 1; 作者李鹏罗德炎高永辉张松乐宋艳王希良; 机构军事医学科学院微生物流行病研究所三室病原微生物生物安全国家重点实验室; 出处《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期493-497,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(No.30170853); 文摘目的构建布氏杆菌BCSP31/pVAX1重组表达质粒,免疫BALB/c小鼠,观察其免疫应答及免疫保护效果。方法克隆BCSP31基因,构建BCSP31/pVAX1重组表达质粒。转染COS7细胞,免疫组化检测其BCSP31蛋白抗原的表达。BCSP31/pVAX1重组表达质粒肌肉注射免疫BALB/c小鼠,观察特异性体液免疫和细胞免疫效果。进一步用1.25×104布氏杆菌A544强毒株腹腔攻毒,观察BCSP31/pVAX1重组表达质粒的免疫保护效果。结果扩增的BCSP31保护性抗原基因片断在牛、羊和猪布氏杆菌株中具有高度保守性,构建的BCSP31/pVAX1重组表达质粒在COS7细胞有目的蛋白抗原的表达。制备的BCSP31/pVAX1重组表达质粒肌肉免疫BALB/c小鼠4次,ELISA检测BCSP31/pVAX1重组表达质粒产生了较高水平的特异性IgG抗体,并随免疫次数增加抗体的滴度也递增,且抗体亚型以IgG2a为主,表明主要引起Th1型的免疫应答。FCM检测BCSP31/pVAX1重组表达质粒的CD4+/CD8+比值明显下降,说明激发了显著的CTL效应。MTT测定BCSP31/pVAX1重组表达质粒的淋巴细胞增殖能力与对照组比较差异显著。布氏杆菌A544强毒株攻毒后,动物存活及脾组织细菌数与对照组比较有显著性差异,说明BCSP31/pVAX1重组表达质粒能够产生有效的保护效果。结论研制的BCSP31/pVAX1重组表达质粒免疫BALB/c小鼠能产生高水平的特异性体液免疫和细胞免疫,以细胞免疫为主,并产生有效的免疫保护效果,为布氏杆菌病新型疫苗的研究奠定了基础。; 关键词布氏杆菌bcsp31 重组表达质粒免疫应答免疫保护; Keywords Brucella bcsp31 recombinant expressing plasmid immune response immune protection; 分类号 R392.7 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名羊布鲁氏菌BCSP31、OMP31、L7/L12基因的原核表达载体构建及表达被引量：8: 2; 作者司瑞白文涛张芳琳刘艳丽胡刚吴兴安阎岩徐志凯; 机构第四军医大学微生物学教研室; 出处《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第11期961-964,共4页; 基金第四军医大学科研重点项目(05XJZ006); 文摘目的构建羊布鲁氏菌外膜蛋白BCSP31、OMP31和L7/L12基因的重组表达质粒,并在原核系统中表达。方法根据羊布鲁氏菌M5株外膜蛋白BCSP31、OMP31和抗原L7/L12蛋白基因序列设计引物,分别扩增出大小约为1kb、730bp和380bp的目的基因片断,插入pGEM7Zf(+)中测序并进行分析。将3种基因片段亚克隆入pGEX-4T-1中,转化大肠杆菌,IPTG诱导表达,用SDS-PAGE及Western-blot进行分析鉴定。结果SDS-PAGE结果表明3个目的蛋白均以融合蛋白的方式成功表达,在相对分子量57kDa、49kDa、38kDa处有表达条带,经薄层扫描分析,目的蛋白分别占全菌蛋白的42%、36%、40%。Western-blot证实3种融合蛋白均能被布鲁氏菌免疫兔血清识别。结论成功构建了3种蛋白的表达载体并进行了高效表达,3种蛋白均具有良好的免疫原性。; 关键词羊布鲁氏菌 bcsp31蛋白 OMP31蛋白 L7/L12蛋白基因表达; Keywords Brucella melitensis bcsp31 OMP31 L7/L12 protein gene expvession; 分类号 R378.5 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名8株布氏杆菌BCSP31基因的序列分析被引量：12: 3; 作者丁家波毛开荣陈小云程君生戴志红蒋玉文; 机构中国兽医药品监察所; 出处《中国兽药杂志》 2006年第3期13-16,共4页; 文摘参照GenBank中布氏杆菌的全基因组序列,设计一对特异性引物,通过PCR方法,扩增了8株来自3个布氏杆菌种的布氏杆菌表面蛋白31(BCSP31)全基因。PCR产物经克隆和序列分析后发现,该基因非常保守,8株不同菌株间的同源性高于99.3%;进化关系分析显示,5株中国来源的菌株(S2,M5,M111,M28,A387)显示了最近的同源关系,其中2个弱毒菌株S2和M5的BCSP31基因序列100%同源。3株外国来源的菌株(S19,2308,Rev.1)中,S19和2308同源性为100%。Rev.1与其他7株布氏杆菌BCSP31基因均有较大的差异。序列分析结果表明,BCSP31基因序列差异与布氏杆菌的种属和毒力无相关性。; 关键词布氏杆菌 bcsp31基因序列分析; Keywords Brucella bcsp31 gene sequence analysis; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名安徽省亳州市布鲁氏菌病病原学监测及其分子特征分析: 4; 作者康晓东王俊钱树生王祥英汤云飞怀雪飞姜栋栋刘正祥柳燕; 机构安徽医科大学基础学院微生物学教研室亳州市疾病预防控制中心微生物实验室安徽省疾病预防控制中心微生物实验室; 出处《安徽医科大学学报》北大核心 2025年第5期964-970,共7页; 基金高校学科(专业)拔尖人才学术资助项目(编号:gxbj ZD2020058) 安徽省重点研发长三角科技合作项目(编号:2022i01020022) 安徽医科大学科研水平提升计划项目(编号:2020xkjT003)。; 文摘目的了解安徽省亳州市布鲁氏菌病患者群的分布及病菌流行的型别和基因特征,为制定本地区布鲁氏菌病预防与控制策略提供依据。方法对采集的698份血液样本进行虎红平板凝集试验(RBPT)和试管凝集试验(TAT),收集被检测者流行病学资料,对检测结果进行统计分析;培养并提取阳性菌株基因组DNA,采用16S rRNA测序方法进行分离菌株的分子鉴定和分型,通过Clustal W和MEGA 7进行序列比对分析,结果与BCSP31-PCR及AMOS-PCR的检测结果进行比较。结果血清学检测共测出阳性样本66份,阳性检出率为9.46%;检出率最高的人群主要从事活羊宰杀工作;培养出的10株阳性菌株16S rRNA基因测序结果显示,均与羊种布鲁氏菌亲缘关系较近,进化树显示在同一分枝上,与BCSP31-PCR、AMOS-PCR鉴定结果一致。结论羊种布鲁氏菌在本地区传播中处于优势地位,从事羊养殖、屠宰、售卖等职业的人群为高风险人群;该研究结果为本地区的患者群体分布及布鲁氏菌病基因分型和溯源研究提供了分子生物学证据,同时也验证了16S rRNA进行分子溯源的有效性。; 关键词布鲁氏菌病病原学监测 bcsp31聚合酶链式反应 AMOS聚合酶链式反应 16S rRNA 羊种布鲁氏菌; Keywords brucellosis pathogen surveillance bcsp31-pcr AMOS-pcr 16S rRNA brucella melitensis; 分类号 R378.5 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名内蒙古兴安盟地区布鲁氏菌流行株种型鉴定和体外药物敏感性分析被引量：7: 5; 作者袁海涛崔建楠彩花冯丽平王红郭长山吴金泉刘伟双曲振红蔡洪涛; 机构兴安盟疾病预防控制中心科尔沁右翼前旗疾病预防控制中心科尔沁右翼中旗疾病预防控制中心突泉县疾病预防控制中心乌兰浩特市疾病预防控制中心; 出处《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期826-830,共5页; 文摘目的了解内蒙古兴安盟布鲁氏菌流行株的主要种型,分析布鲁氏菌流行株的体外药物敏感性,指导临床治疗。方法选择内蒙古兴安盟布病发病率较高的旗县和人口密集的旗县,采集临床诊断的布病患者200份血液样本,用全自动血液培养仪培养分离出28株布鲁氏菌,用全自动生化鉴定系统、BCSP31-PCR及传统经典的方法进行种型鉴定,最后用肉汤微量稀释法对其中的25株布鲁氏菌进行13种抗生素的体外药敏试验。结果 28株布鲁氏菌中羊种3型18株(64.29%)和羊种1型10株(35.71%),进行药敏试验的25株菌中,100%菌株对多西环素、庆大霉素、链霉素、四环素均敏感,16%的菌株对利福平、头孢曲松的药物敏感性可能降低,20%的菌株对复方新诺明耐药,100%的菌株对阿奇霉素耐药。结论内蒙古兴安盟布鲁氏菌流行株主要是羊种3型和羊种1型,目前对一线方案药物较为敏感,在布病的急性期治疗上,宜规范化治疗,首选一线方案药物:多西环素、庆大霉素、链霉素、利福平。; 关键词布鲁氏菌种型鉴定 bcsp31-pcr 肉汤微量稀释法药敏试验; Keywords Brucella species identification bcsp31-pcr broth microdilution method drug sensitivity test; 分类号 R378.5 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名牛、羊布鲁菌多重PCR方法的建立与应用被引量：1: 6; 作者杜涛峰韩文瑜雷连成孙长江李扬顾敬敏许会会; 机构吉林大学畜牧兽医学院预防兽医学系; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第11期80-84,共5页; 基金吉林省省长基金(20070613) 国家支撑计划课题(2008BAD96B11); 文摘根据布鲁菌属特异性基因BCSP31和布鲁菌种间特异性标志IS711插入序列,设计合成了3对引物,以牛种布鲁菌544A、104M和羊种布鲁菌16M基因组DNA为模板,通过优化反应条件,建立了可同时检测布鲁菌属、牛种布鲁菌和羊种布鲁菌的多重PCR方法。牛种布鲁菌可扩增出301和114bp 2条带,羊种布鲁菌可扩增出301和253bp 2条带,该方法对牛种布鲁菌544A和羊种布鲁菌16M混合DNA模板的最小检出量为100pg,对大肠杆菌O157∶H7、小肠结肠炎耶尔森菌等15种参照菌的核酸扩增结果均为阴性。应用该方法对吉林省某牛场的106份粪便进行检测,虎红平板凝集试验作对照,结果PCR检测9份为阳性,且全为牛种布鲁菌阳性,对应的虎红平板凝集试验也为阳性。结果表明,建立的多重PCR方法具有良好的敏感性和特异性,为布鲁菌病的鉴别诊断提供了一种分子检测工具。; 关键词牛种布鲁菌羊种布鲁菌 bcsp31基因 IS711基因多重PCR; Keywords B.abortus B.melitensis bcsp31gene IS711gene multiplex PCR; 分类号 S854 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名叠氮溴化丙锭结合荧光定量PCR测定布鲁氏菌活菌数方法的建立被引量：3: 7; 作者张士军常恒祯王路鹿翟菲菲鞠丹迪胡盼卢士英李岩松周玉柳增善李兆辉任洪林; 机构吉林大学人兽共患病研究所/人兽共患病研究教育部重点实验室/动物医学学院; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期352-359,共8页; 基金国家重点研发计划资助(2018YFD0500900) 吉林省科技发展计划项目(20170101149JC); 文摘为简便、快速测定宿主体内或细胞内布鲁氏菌的活菌数,本研究以布鲁氏菌单拷贝bcsp31基因为检测靶标,设计特异性引物,经优化反应条件及叠氮溴化丙锭(PMA)最佳使用浓度与曝光时间,建立了一种测定布鲁氏菌活菌数的叠氮溴化丙锭--荧光定量PCR方法(PMA-qPCR),并评估了该方法的特异性、敏感性、重复性。结果显示,建立的qPCR标准曲线Ct值与质粒标准品拷贝数对数值之间线性关系良好;特异性试验结果显示,该方法对布鲁氏菌S2株扩增结果为阳性,对大肠杆菌、沙门氏菌、小肠结肠炎耶氏菌、副溶血弧菌扩增结果均为阴性;其对布鲁氏菌S2的检测限为10~3cfu/mL,比常规PCR方法敏感性高100倍;重复性试验结果显示,批间及批内重复试验的变异系数均为0.63%~2.04%,重复性好。利用该方法对不同比例布鲁氏菌S2活菌/死菌混合样品定量测定,结果显示随活菌比例的增大,测得的活菌数与常规qPCR测定值越接近,表明经优化处理的PMA有效抑制了qPCR对死菌DNA的扩增,但对活菌的qPCR扩增无影响。将该方法与平板计数法共同测定TSB纯培养的布鲁氏菌S2活菌数,结果二者的测定值无统计学差异。随后利用这两种方法同时测定两种不同浓度的S2侵染巨噬细胞后的胞内活菌数,结果显示两种方法测定值虽然均差异显著(p<0.05),但测得的活菌数均在一个数量级且变化趋势一致,并均与侵染的活菌数呈正相关。上述结果表明,本研究建立的PMA-qPCR检测方法可以对布鲁氏菌活菌实现快速定量检测,为布鲁氏菌活菌数测定相关研究提供可行技术。; 关键词布鲁氏菌 bcsp31 叠氮溴化丙锭(PMA) 荧光定量PCR 标准曲线; Keywords Brucella bcsp31 propidium monoazide(PMA) qPCR standard curve; 分类号 S852.61 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	布氏杆菌BCSP_(31)/pVAX1重组表达质粒的构建及其免疫保护效果的研究	李鹏罗德炎高永辉张松乐宋艳王希良	《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心	2006	7	在线阅读下载PDF 职称材料
2	羊布鲁氏菌BCSP31、OMP31、L7/L12基因的原核表达载体构建及表达	司瑞白文涛张芳琳刘艳丽胡刚吴兴安阎岩徐志凯	《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心	2005	8	在线阅读下载PDF 职称材料
3	8株布氏杆菌BCSP31基因的序列分析	丁家波毛开荣陈小云程君生戴志红蒋玉文	《中国兽药杂志》	2006	12	在线阅读下载PDF 职称材料
4	安徽省亳州市布鲁氏菌病病原学监测及其分子特征分析	康晓东王俊钱树生王祥英汤云飞怀雪飞姜栋栋刘正祥柳燕	《安徽医科大学学报》北大核心	2025	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	内蒙古兴安盟地区布鲁氏菌流行株种型鉴定和体外药物敏感性分析	袁海涛崔建楠彩花冯丽平王红郭长山吴金泉刘伟双曲振红蔡洪涛	《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心	2019	7	在线阅读下载PDF 职称材料
6	牛、羊布鲁菌多重PCR方法的建立与应用	杜涛峰韩文瑜雷连成孙长江李扬顾敬敏许会会	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2010	1	在线阅读下载PDF 职称材料
7	叠氮溴化丙锭结合荧光定量PCR测定布鲁氏菌活菌数方法的建立	张士军常恒祯王路鹿翟菲菲鞠丹迪胡盼卢士英李岩松周玉柳增善李兆辉任洪林	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2020	3	在线阅读下载PDF 职称材料