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烟草BBLc基因CRISPR/Cas 9载体构建与遗传转化
被引量：
1
1
作者
苏龙
仆田秀南
+3 位作者
杨竞
万克
王麟麒
刘洋
《种子》
北大核心
2022年第7期21-26,共6页
小檗碱桥状酶在烟碱生物合成的最后一步起到关键催化作用。本研究对小檗碱桥状酶基因家族中的BBLc基因进行研究,利用CRISPR/Cas 9技术构建BBLc基因的编辑载体,通过农杆菌介导法遗传转化烟草,经卡那霉素抗性筛选获得35株抗性苗,利用PCR和...
小檗碱桥状酶在烟碱生物合成的最后一步起到关键催化作用。本研究对小檗碱桥状酶基因家族中的BBLc基因进行研究,利用CRISPR/Cas 9技术构建BBLc基因的编辑载体,通过农杆菌介导法遗传转化烟草,经卡那霉素抗性筛选获得35株抗性苗,利用PCR和RT-qPCR技术鉴定获得7株突变株。观察发现,突变株烟叶褶皱程度较野生型增大,其余农艺性状与野生型相比差别不大。利用HPLC法测定盛花期叶片烟碱含量,突变株烟碱含量较对照平均降低了24.2%;其中突变烟株CB 10的烟碱含量为0.88%,降幅最大(37.6%)。研究表明,BBLc基因在烟草中表达量的降低引起烟碱含量的降低。
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关键词
栽培烟草
bblc基因
遗传转化
烟碱
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题名
烟草BBLc基因CRISPR/Cas 9载体构建与遗传转化
被引量：
1
1
作者
苏龙
仆田秀南
杨竞
万克
王麟麒
刘洋
机构
贵州大学烟草学院
出处
《种子》
北大核心
2022年第7期21-26,共6页
基金
中国烟草总公司贵州省公司重点研发项目(2021 XM 04)。
文摘
小檗碱桥状酶在烟碱生物合成的最后一步起到关键催化作用。本研究对小檗碱桥状酶基因家族中的BBLc基因进行研究,利用CRISPR/Cas 9技术构建BBLc基因的编辑载体,通过农杆菌介导法遗传转化烟草,经卡那霉素抗性筛选获得35株抗性苗,利用PCR和RT-qPCR技术鉴定获得7株突变株。观察发现,突变株烟叶褶皱程度较野生型增大,其余农艺性状与野生型相比差别不大。利用HPLC法测定盛花期叶片烟碱含量,突变株烟碱含量较对照平均降低了24.2%;其中突变烟株CB 10的烟碱含量为0.88%,降幅最大(37.6%)。研究表明,BBLc基因在烟草中表达量的降低引起烟碱含量的降低。
关键词
栽培烟草
bblc基因
遗传转化
烟碱
Keywords
tobacco cultivation
bblc
gene
genetic transformation
nicotine
分类号
S572 [农业科学—烟草工业]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
烟草BBLc基因CRISPR/Cas 9载体构建与遗传转化
苏龙
仆田秀南
杨竞
万克
王麟麒
刘洋
《种子》
北大核心
2022
1
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