系统性红斑狼疮中医证型与BAFF及疾病活动指标关系探讨 被引量：11

1

作者 俞烜华 许小玲 +1 位作者 黄碧仙 邱磷安 《世界中医药》 CAS 2016年第11期2304-2307,共4页

目的:检测系统性红斑狼疮(Systemic Lupus Erythematosus,SLE)患者血清B细胞活化因子(B Cell Activating Factor,BAFF)表达水平,探讨SLE患者中医证型与BAFF水平及疾病活动指标关系。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测91例SLE患者及20... 目的:检测系统性红斑狼疮(Systemic Lupus Erythematosus,SLE)患者血清B细胞活化因子(B Cell Activating Factor,BAFF)表达水平,探讨SLE患者中医证型与BAFF水平及疾病活动指标关系。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测91例SLE患者及20例健康对照血清BAFF水平,同时检测SLE患者红细胞沉降率、补体3(C3)、补体4(C4)、C反应蛋白(CRP)。结果:1)SLE患者血清中BAFF水平高于健康对照组(P<0.01),其中SLE疾病活动组BAFF水平高于健康对照组与SLE非活动组(P<0.01)。2)SLE患者BAFF水平与SLE疾病活动指数(SLE Disease Activity Index,SLEDAI)、红细胞沉降率呈正相关(r=0.73,r=0.39,P<0.01);与C3呈负相关(r=-0.34,P<0.01)。3)热毒炽盛型SLE患者血清中BAFF水平较其余中医证型组SLE均明显升高(P<0.01);正虚邪恋型组SLE患者BAFF水平较其他证型均明显降低(P<0.01)。结论:SLE患者BAFF水平明显升高,与疾病活动指标相关;热毒炽盛型SLE患者血清中BAFF水平较其他证型组均明显升高,正虚邪恋型组较其他证型组均明显降低,提示抗BAFF单抗在不同中医证型SLE中可能疗效不同。 展开更多

关键词 baff 中医证型 红斑狼疮 系统性

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BAFF/BAFF-R通过PI3K/Akt/mTOR信号转导通路调节B淋巴细胞功能在类风湿关节炎发病机制中的意义 被引量：20

2

作者 张玲玲 魏伟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期847-850,共4页

B淋巴细胞活化和生存在类风湿关节炎(RA)病程中起关键作用。肿瘤坏死因子家族B细胞活化因子(BAFF)是维持B细胞功能的重要细胞因子。BAFF与其受体BAFF-R结合(BAFF/BAFF-R),能够激活PI3K/Akt/mTOR信号通路,调节B淋巴细胞的增殖、存活和活... B淋巴细胞活化和生存在类风湿关节炎(RA)病程中起关键作用。肿瘤坏死因子家族B细胞活化因子(BAFF)是维持B细胞功能的重要细胞因子。BAFF与其受体BAFF-R结合(BAFF/BAFF-R),能够激活PI3K/Akt/mTOR信号通路,调节B淋巴细胞的增殖、存活和活化。该文就B淋巴细胞、BAFF/BAFF-R以及PI3K/Akt/mTOR信号通路参与RA的发病机制加以综述。 展开更多

关键词 B淋巴细胞 功能 baff 类风湿关节炎 PI3K/AKT/MTOR 信号转导通路

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BAFF-BAFFR及信号转导分子参与佐剂性关节炎的免疫反应及芍药苷-6′-O-苯磺酸酯的作用 被引量：2

3

作者 徐澍 魏芳 +5 位作者 贾晓益 孙晓静 杨雪枝 赵英杰 常艳 魏伟 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2016年第5期643-649,共7页

目的观察佐剂性关节炎(AA)大鼠炎症不同时期脾脏B淋巴细胞刺激因子(BAFF)及其受体(BAFFR)表达变化以及芍药苷-6′-O-苯磺酸酯(CP-25)对其的影响。方法采用完全弗氏佐剂制备大鼠AA模型,随机分为正常组、AA组、CP-25(25、50、100 mg/kg)... 目的观察佐剂性关节炎(AA)大鼠炎症不同时期脾脏B淋巴细胞刺激因子(BAFF)及其受体(BAFFR)表达变化以及芍药苷-6′-O-苯磺酸酯(CP-25)对其的影响。方法采用完全弗氏佐剂制备大鼠AA模型,随机分为正常组、AA组、CP-25(25、50、100 mg/kg)组、甲氨蝶呤(0.5 mg/kg)组、白芍总苷(50 mg/kg)组、芍药苷(50 mg/kg)组,造模后第17~31天给药。ELISA法检测外周血BAFF水平;免疫组织化学法、流式细胞术、Q-PCR和Western blot法检测CP-25对脾脏BAFFR表达的影响;Western blot法检测脾脏肿瘤坏死因子相关因子2(TRAF2)蛋白的表达。结果与正常组比较,炎症反应期(D9)、炎症初期(D16)、炎症高峰期(D23)及炎症缓解期(D30)模型大鼠血清BAFF水平和脾脏BAFFR mRNA及蛋白表达均增加。与AA组比较,CP-25(25、50、100 mg/kg)体内给药明显下调AA大鼠脾脏BAFFR mRNA及蛋白表达。体外BAFF刺激后,大鼠脾脏细胞TRAF2及BAFFR蛋白表达显著增加,CP-25(1×10^(-6)mol/L)明显降低TRAF2及BAFFR蛋白的表达。结论 CP-25发挥炎症免疫调节作用可能与其抑制AA大鼠BAFFR受体及TRAF2信号分子表达有关。 展开更多

关键词 类风湿关节炎 佐剂性关节炎 CP-25 baff BAF-FR TRAF2

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BAFF与Bcl-2 mRNA水平对多发性骨髓瘤发生、发展及预后的影响 被引量：2

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作者 宋斌 万楚成 +2 位作者 章正华 李章志 陈雁 《海南医学院学报》 CAS 2013年第11期1490-1492,1496,共4页

目的：探讨B细胞活化因子（BAFF）及B细胞淋巴瘤-2基因（Bcl-2）mRNA表达水平对多发性骨髓瘤临床诊断和预后评估的应用价值。方法：选取本院2011年4月～2013年1月收治的多发性骨髓瘤患者37例，以11例同期健康志愿者为对照组，以密度梯... 目的：探讨B细胞活化因子（BAFF）及B细胞淋巴瘤-2基因（Bcl-2）mRNA表达水平对多发性骨髓瘤临床诊断和预后评估的应用价值。方法：选取本院2011年4月～2013年1月收治的多发性骨髓瘤患者37例，以11例同期健康志愿者为对照组，以密度梯度离心法分离各组骨髓的单个核细胞，采用RT—PCR技术测定BAFF及Bcl-2的mRNA表达水平；同时，采取各组的空腹静脉血，以ELISA试剂盒测定肿瘤负荷标记物β2-微球蛋白（β2-MG）的水平，分析BAFF及Bcl-2的mRNA表达与血清β2-MG含量的相关性。结果：多发性骨髓瘤患者的BAFF及Bcl-2mRNA表达水平显著高于对照组（P〈0．05）；同时，各分期患者之间亦有显著差异，随着分期的递增，BAFF及Bcl-2的mRNA表达水平依次升高（P〈0．05）。直线回归分析结果显示，BAFFmRNA表达水平与血清J32-MG含量呈直线正相关（R^2-7587，P〈0．05）；Bcl-2的mRNA表达水平与血清β2-MG含量亦呈直线正相关（R^2-837，P〈0．05）。结论：BAFF及Bcl-2的mRNA表达水平不仅与多发性骨髓瘤的发病和进程密切相关，且能够较为准确地反映患者机体的肿瘤负荷程度，对多发性骨髓瘤的临床诊断和预后评估均有重要预测价值。 展开更多

关键词 B细胞活化因子(baff) B细胞淋巴瘤-2基因(Bcl-2) MRNA表达 多发性骨髓瘤

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MC-LR急性胁迫对草鱼脾脏、头肾显微结构及BAFF和APRIL基因表达的影响 被引量：2

5

作者 隗黎丽 刘毅 +4 位作者 王自蕊 阮记明 周颖 熊六凤 钟其旺 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期2379-2387,共9页

为探讨微囊藻毒素-LR(microcystin-LR,MC-LR)对鱼类的免疫毒性,采用急性毒性实验方法,分别对草鱼经腹腔注射不同剂量的MC-LR并于24、48、72 h和96 h后取免疫器官脾脏和头肾进行组织显微结构分析。结果显示,随着MC-LR剂量的增加和时间的... 为探讨微囊藻毒素-LR(microcystin-LR,MC-LR)对鱼类的免疫毒性,采用急性毒性实验方法,分别对草鱼经腹腔注射不同剂量的MC-LR并于24、48、72 h和96 h后取免疫器官脾脏和头肾进行组织显微结构分析。结果显示,随着MC-LR剂量的增加和时间的延长,脾脏组织呈现出细胞空泡化并伴随着黑色素巨噬细胞先增多后减少的现象,尤其在75μg MC-LR·kg^(-1)BW和100μg MC-LR·kg^(-1)BW剂量组染毒48 h后,黑色素巨噬细胞中心体积显著增大;头肾组织显微结构变化主要表现为血窦、血管扩张,在75μg MC-LR·kg^(-1)BW和100μg MC-LR·kg^(-1)BW剂量组中的草鱼染毒72 h和96 h后,淋巴组织松散、排列混乱,淋巴细胞空泡化甚至细胞裂解。此外,采用荧光定量PCR分析了草鱼经不同剂量MC-LR处理96 h后脾脏和头肾中BAFF和APRIL基因表达的变化。结果显示BAFF和APRIL的表达均被不同程度地抑制,其中脾脏组织中BAFF基因在75μg MC-LR·kg^(-1)BW剂量组中被显著抑制(P<0.05),头肾组织BAFF基因在75、100μg MC-LR·kg^(-1)BW剂量组中均被显著抑制(P<0.05),而APRIL除了在25μg MC-LR·kg^(-1)BW剂量组的脾脏组织中表达下调不显著外,在其他处理组均被显著抑制(P<0.05)。以上研究结果表明,MC-LR可导致草鱼免疫器官一系列的病理变化,并有时间和剂量效应,此外,MC-LR还可抑制B淋巴细胞分裂相关基因的表达。 展开更多

关键词 微囊藻毒素-LR 草鱼 脾脏 头肾 组织病理 baff APRIL

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人BAFF cDNA的克隆及原核表达载体的构建 被引量：1

6

作者 高会广 何凤田 +5 位作者 李蓉芬 陈珊 唐蓓 彭家和 陈敏 周度金 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期498-500,共3页

目的　克隆人BAFF(BcellactivatingfactorbelongingtotheTNFfamily)全长及 12 8～ 2 85片段的cDNA并构建其原核表达载体 ,为表达和检测其生物学活性做准备。方法　提取HL 60细胞总RNA ,经RT PCR扩增编码人BAFF全长及12 8～ 2 85氨基酸... 目的　克隆人BAFF(BcellactivatingfactorbelongingtotheTNFfamily)全长及 12 8～ 2 85片段的cDNA并构建其原核表达载体 ,为表达和检测其生物学活性做准备。方法　提取HL 60细胞总RNA ,经RT PCR扩增编码人BAFF全长及12 8～ 2 85氨基酸残基的cDNA序列 ,并将其克隆至载体pUC18和pUC19进行序列测定 ,然后构建于新型原核表达载体pQE 80L中。结果　RT PCR扩增得到了 85 8bp和 477bp的DNA片段 ,序列分析与GenBank中报道的编码BAFF全长及 12 8～2 85氨基酸残基的cDNA序列完全一致。结论　BAFFcDNA的克隆及其原核表达载体的构建 。 展开更多

关键词 baff RT-PCR 克隆 序列分析

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家蚕抗菌肽CM4和人可溶性BAFF融合基因的克隆、表达及活性鉴定 被引量：2

7

作者 刘海峰 刘平 +1 位作者 李楠楠 张双全 《南京师大学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期87-91,共5页

采用PCR法从含有人可溶性BAFF基因的pET30a(+)扩增得到人sBAFF基因,通过rPCR将抗菌肽Cecropin CM4基因的2条单核苷酸链进行扩增得到CM4基因,再采用over-lap PCR法通过linker将hsBAFF与Cecropin CM4融合基因相连接.经纯化和鉴定后,定向... 采用PCR法从含有人可溶性BAFF基因的pET30a(+)扩增得到人sBAFF基因,通过rPCR将抗菌肽Cecropin CM4基因的2条单核苷酸链进行扩增得到CM4基因,再采用over-lap PCR法通过linker将hsBAFF与Cecropin CM4融合基因相连接.经纯化和鉴定后,定向插入到原核表达载体pET30a(+)中,然后转化E.coliBL21(DE3),通过实验确定了表达该融合基因的最佳诱导条件:IPTG终浓度为1.0mmol/L,诱导时间为5h,温度为30℃,其表达量占全菌蛋白的40%.表达产物经SDS-PAGE分析,得到相对分子质量约为22000的重组蛋白并且存在超声裂解后的上清中.重组蛋白经Western blot检测,结果显示重组蛋白可被鼠抗人可溶性BAFF的抗体识别.采用分子筛Sephadex G-75对重组融合蛋白进行纯化,并经SDS-PAGE对其鉴定.通过对其生物学功能的检测得知,纯化后的重组融合蛋白对大肠杆菌K12D31和真菌有明显的抑菌能力. 展开更多

关键词 抗菌肽CM4 人的可溶性baff 抗菌活性 融合基因 大肠杆菌 表达

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Baff转基因斑马鱼的构建及相关基因表达检测 被引量：1

8

作者 张力 谢英 +2 位作者 周昕 徐增年 刘树锋 《四川动物》 CSCD 北大核心 2013年第3期343-347,共5页

通过RT-PCR法由斑马鱼脾脏克隆B细胞刺激因子baff基因,构建过表达斑马鱼baff且携带有绿色荧光标记蛋白的重组质粒pIRES2-GFP-baff;胚胎显微注射获得转基因斑马鱼胚胎;通过GFP荧光标记跟踪并筛选转基因阳性鱼;Western blot法鉴定Baff-GF... 通过RT-PCR法由斑马鱼脾脏克隆B细胞刺激因子baff基因,构建过表达斑马鱼baff且携带有绿色荧光标记蛋白的重组质粒pIRES2-GFP-baff;胚胎显微注射获得转基因斑马鱼胚胎;通过GFP荧光标记跟踪并筛选转基因阳性鱼;Western blot法鉴定Baff-GFP融合蛋白表达情况;qPCR检测baff,GFP及baff下游相关基因bcl-2,il-4mR-NA表达情况。结果表明细胞、胚胎及幼鱼baff和GFP均高表达,baff下游基因bcl-2激活和il-4基因抑制表达。通过胚胎显微注射法可成功获得过表达baff的转基因斑马鱼,此研究为建立红斑狼疮转基因斑马鱼模型及高通量筛选Baff拮抗剂奠定了基础。 展开更多

关键词 斑马鱼 红斑狼疮 baff BCL-2 IL-4

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外寒对小鼠肺组织BAFF和NF-κB表达的影响 被引量：1

9

作者 陈会敏 马作峰 张六通 《辽宁中医杂志》 CAS 2013年第2期345-348,共4页

目的:观察外寒对小鼠肺组织BAFF和NF-κB表达的影响。方法:50只昆明小鼠随机分为5组:常温对照组、4℃7天组、4℃14天组、0℃7天组、0℃14天组,置于人工气候箱中处理后取小鼠肺脏进行病理切片,ELISA法检测IgG-S和IgG-R,实时荧光定量PCR检... 目的:观察外寒对小鼠肺组织BAFF和NF-κB表达的影响。方法:50只昆明小鼠随机分为5组:常温对照组、4℃7天组、4℃14天组、0℃7天组、0℃14天组,置于人工气候箱中处理后取小鼠肺脏进行病理切片,ELISA法检测IgG-S和IgG-R,实时荧光定量PCR检测BAFF的表达,Western blot法检测小鼠肺组织中NF-κB蛋白的表达情况。结果 4℃7天组、0℃7天组小鼠肺部出现明显的病理的改变,肺泡内出现大量的渗出液,各实验处理组IgG-S和IgG-R较常温对照组明显升高,差异具有显著性意义,实时荧光定量PCR检测发现各处理组BAFF的表达与常温对照组比较,明显上调,Western blot结果显示各处理组NF-κB蛋白的表达较常温对照组明显增加。结论外寒通过上调BAFF和NF-κB的表达,促发机会的获得性免疫。 展开更多

关键词 外寒 肺 baff NF—kB

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BAFF分子在部分肾移植受者外周血淋巴细胞异常高表达及其可能的生物学意义

10

作者 何小舟 徐海燕 +7 位作者 宋广来 邱国强 钟敏 屠筠 刘青 陈颖娣 巢志复 张学光 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期902-905,共4页

目的:分析BAFF分子在肾移植受者外周血淋巴细胞的表达情况以及初步分析其异常表达的生物学意义。方法:以来院随访的肾移植受者为研究对象,采集患者外周血,以EDTA-Na2抗凝。采用单色和多色标记的免疫荧光分析法,分析BAFF分子在外周血淋... 目的:分析BAFF分子在肾移植受者外周血淋巴细胞的表达情况以及初步分析其异常表达的生物学意义。方法:以来院随访的肾移植受者为研究对象,采集患者外周血,以EDTA-Na2抗凝。采用单色和多色标记的免疫荧光分析法,分析BAFF分子在外周血淋巴细胞的表达情况,同时检测淋巴细胞CD3、CD4、CD8、CD134、CD25和CD127的表达。结果:共分析了86位肾移植受者。BAFF分子在受者外周血淋巴细胞的表达率分别介于0.18%至76.97%之间。以15%为界将所有数据分成两组(表达率>15%组和表达率<15%组),对所获得的数据进行统计分析。在BAFF分子表达率>15%组其BAFF分子表达的平均值为36.91%;BAFF+细胞群的增加与外周血CD4+/CD8+比值、与循环中CD4+CD25+CD127-/low T细胞群等没有显著相关性;但是与循环中CD134+ T细胞群和CD4+CD134+ T细胞群的增加存在显著相关性(P<0.01和P<0.05),具有统计学意义。而BAFF表达率<15%组所检测的相关指标均没有统计学意义。结论:BAFF分子在部分肾移植受者外周血淋巴细胞的异常高表达可能与移植排斥反应相关。 展开更多

关键词 baff 肾移植 淋巴细胞

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抗BAFF单克隆抗体轻链和重链可变区基因的克隆及鉴定

11

作者 肖黎明 龚玖瑜 +4 位作者 王畅 陈恒悦 栗向东 金伯泉 陈丽华 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期49-52,共4页

目的:在本实验室成功制备小鼠抗人BAFF单克隆抗体的基础上,通过分子克隆方法获得该抗体可变区基因序列。方法:从1株小鼠抗人BAFF单克隆抗体杂交瘤细胞FMMUB4中提取总RNA,以此为模版反转录成cDNA,用针对小鼠单克隆抗体重链和轻链可变区... 目的:在本实验室成功制备小鼠抗人BAFF单克隆抗体的基础上,通过分子克隆方法获得该抗体可变区基因序列。方法:从1株小鼠抗人BAFF单克隆抗体杂交瘤细胞FMMUB4中提取总RNA,以此为模版反转录成cDNA,用针对小鼠单克隆抗体重链和轻链可变区基因序列的特异性引物分别进行PCR反应,PCR产物连接入载体,经筛选阳性克隆、酶切鉴定后送测序,测序结果进行生物信息学分析。结果:成功克隆了抗BAFF单克隆抗体FMMUB4重链和轻链可变区基因,测序结果证实序列正确。结论:获得了抗BAFF单克隆抗体FMMUB4重链和轻链可变区基因序列,为下一步构建相关基因工程抗体打下良好基础。 展开更多

关键词 baff 单克隆抗体 轻 重链可变区基因 基因克隆

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人BAFF转基因斑马鱼的构建及早期免疫基因表达检测

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作者 张力 周昕 +3 位作者 谢英 刘超 徐增年 刘树锋 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2013年第5期63-68,I0012,共7页

目的建立人BAFF转基因斑马鱼模型,探讨其在自身免疫性疾病发病中的作用。方法 RT-PCR法由人淋巴瘤细胞克隆了人BAFF基因全长855 bp蛋白编码区域,构建表达人BAFF重组质粒Tol2-hBAFF,体外细胞转染并通过免疫印迹法验证蛋白表达。重组载体... 目的建立人BAFF转基因斑马鱼模型,探讨其在自身免疫性疾病发病中的作用。方法 RT-PCR法由人淋巴瘤细胞克隆了人BAFF基因全长855 bp蛋白编码区域,构建表达人BAFF重组质粒Tol2-hBAFF,体外细胞转染并通过免疫印迹法验证蛋白表达。重组载体经显微注射斑马鱼受精卵后,GFP荧光跟踪并筛选阳性鱼。qPCR法检测早期免疫相关基因表达情况。结果人BAFF-GFP融合蛋白可成功表达,利用Tol2-hBAFF重组质粒显微注射斑马鱼受精卵可获得表达人BAFF的转基因斑马鱼,且表达人BAFF斑马鱼1 dpf胚胎中TCRAC明显高表达,而Ikaros则表达量显著降低,表明在斑马鱼胚胎中表达人BAFF蛋白会造成早期淋巴系统中基因的过早表达。结论建立的表达人BAFF的转基因斑马鱼,可为系统性红斑狼疮等与BAFF功能亢进密切相关的自身免疫性疾病的治疗,及相关机制研究提供一种具有诸多优点的新型工具。 展开更多

关键词 人baff 转基因 斑马鱼 早期免疫基因 系统性红斑狼疮

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Act1在B细胞淋巴瘤中调控BAFF信号通路的机制研究

13

作者 王永伦 闵迅 葛晓军 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1787-1792,共6页

目的:探讨Act1在B细胞淋巴瘤细胞中调控BAFF信号通路的机制,为B淋巴细胞恶性肿瘤的治疗提供新的思路。方法:培养3种人B细胞淋巴瘤细胞系,即淋巴瘤细胞系(Raji),Burkitt人淋巴瘤细胞系(Daudi细胞)和B细胞白血病细胞系(BALL-1);待细胞进... 目的:探讨Act1在B细胞淋巴瘤细胞中调控BAFF信号通路的机制,为B淋巴细胞恶性肿瘤的治疗提供新的思路。方法:培养3种人B细胞淋巴瘤细胞系,即淋巴瘤细胞系(Raji),Burkitt人淋巴瘤细胞系(Daudi细胞)和B细胞白血病细胞系(BALL-1);待细胞进入对数生长期,提取RNA,应用RT-PCR扩增Act1,构建p TT5-Act1表达质粒;采用构建过表达质粒并转染细胞,采用Act1siRNA干扰以实现Act1沉默;NF-κB信号通路蛋白检测使用Western-blot法。结果:Act1沉默与过表达后,3种B细胞淋巴瘤细胞增殖水平分别出现了上调与下调。过表达与沉默Act1能够分别下调与上调细胞BAFFR的表达,并分别对细胞NF-κB信号通路的活性产生抑制与激活作用。结论:在3种B细胞淋巴瘤细胞中,Act1发挥了负性调控作用。此结果说明Act1可能是B细胞淋巴瘤的一个潜在的治疗靶点。 展开更多

关键词 B细胞活化因子 baff Act1 B细胞淋巴瘤

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甘氨酸/丝氨酸置换146位半胱氨酸对sBAFF功能的影响

14

作者 黄刚 何凤田 +4 位作者 李蓉芬 高会广 陈麟凤 张立 胡大强 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期753-756,共4页

目的探讨甘氨酸/丝氨酸置换146位半胱氨酸对sBAFF功能的影响,为深入探讨sBAFF的功能和机制奠定基础。方法采用一步反向PCR法,将编码sBAFF第146位半胱氨酸(Cys)的核苷酸序列置换为甘氨酸(G)和丝氨酸(S)的编码序列,测序正确后,亚克隆到高... 目的探讨甘氨酸/丝氨酸置换146位半胱氨酸对sBAFF功能的影响,为深入探讨sBAFF的功能和机制奠定基础。方法采用一步反向PCR法,将编码sBAFF第146位半胱氨酸(Cys)的核苷酸序列置换为甘氨酸(G)和丝氨酸(S)的编码序列,测序正确后,亚克隆到高效原核表达载体pQE80L;以IPTG诱导表达,SDSPAGE和Westernblot检测表达产物,Ni2+NTA柱层析纯化目的蛋白;最后经MTT法检测其促B淋巴细胞增殖活性。结果经一步反向PCR扩增后均得到459bp的DNA片段,经测序分析表明分别为sBAFF第146位半胱氨酸残基点突变为甘氨酸和丝氨酸的序列,目的蛋白在大肠杆菌中得到高效表达。活性检测证实其能明显刺激B淋巴细胞系Raji细胞增殖,与正常sBAFF相比,置换为丝氨酸后活性升高,置换为甘氨酸后活性无明显改变。结论在原核表达时,通过置换146位半胱氨酸为丝氨酸可明显提高sBAFF的活性,为进一步探讨sBAFF的功能机制奠定了基础。 展开更多

关键词 TNF家族的B细胞激活因子(baff) CDNA克隆 原核表达 蛋白纯化 细胞活化

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NF-κB抑制剂和IFN-γ对BAFF-R基因启动子活性的影响

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作者 袁宏香 王跃国 +4 位作者 吴信华 倪红兵 浦江 申娴娟 鞠少卿 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期111-114,共4页

目的:探讨IFN-γ和NF-κB抑制剂对人BAFF-R基因启动子活性的影响。方法:以人全血基因组DNA为模板,PCR方法扩增得到BAFF-R基因转录起始点上游5’端-1562^+261 bp的片段,与荧光素酶报告基因载体pGL3-Basic连接构建8个序列缺失质粒。将重... 目的:探讨IFN-γ和NF-κB抑制剂对人BAFF-R基因启动子活性的影响。方法:以人全血基因组DNA为模板,PCR方法扩增得到BAFF-R基因转录起始点上游5’端-1562^+261 bp的片段,与荧光素酶报告基因载体pGL3-Basic连接构建8个序列缺失质粒。将重组质粒瞬时转染人多发性骨髓瘤细胞株KM3,通过检测荧光素酶的相对活性,确定启动子活性最强的区域;分别用NF-κB抑制剂(BAY11-7082)和IFN-γ对活性最强的启动子进行干预,测定并比较荧光素酶的相对活性;同时RT-PCR检测干预前后BAFF-R基因mRNA的表达水平。结果:IFN-γ对BAFF-R基因启动子活性有促进作用并且可以上调BAFF-R mRNA的表达,NF-κB抑制剂(BAY11-7082)对BAFF-R基因启动子活性有抑制作用并且可以下调BAFF-R mRNA的表达。结论:IFN-γ和NF-κB信号通路参与了BAFF-R基因的转录调控,为进一步研究BAFF-R的调节机制提供了基本的依据。 展开更多

关键词 baff-R 启动子 荧光素酶报告基因载体 IFN-Γ NFΚ-B

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雷公藤多苷对IgA肾病小鼠结肠病理及血清BAFF/Gd-IgA1表达的影响 被引量：8

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作者 宋珂 宋丹 +5 位作者 宋纯东 潘兰兰 田金芝 丁樱 任献青 翟文生 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2022年第10期129-132,I0023,I0024,共6页

目的 探讨雷公藤多苷(tripterygium wilfordii polyglycosides, GTW)通过影响IgA肾病(immunoglobulin A nephropathy, IgAN)小鼠结肠黏膜病理及血清BAFF/Gd-IgA1表达而减轻肾脏损伤的疗效机制。方法 清洁级雄性Balb/c小鼠40只,适应性喂... 目的 探讨雷公藤多苷(tripterygium wilfordii polyglycosides, GTW)通过影响IgA肾病(immunoglobulin A nephropathy, IgAN)小鼠结肠黏膜病理及血清BAFF/Gd-IgA1表达而减轻肾脏损伤的疗效机制。方法 清洁级雄性Balb/c小鼠40只,适应性喂养1周后,随机分为4组:空白组、IgAN模型组(模型组)、醋酸泼尼松干预组(激素组)、GTW干预组(GTW组),每组10只。除空白组用同等量的蒸馏水灌胃及生理盐水皮下注射外,其余3组均采用BSA+CCL4+LPS法建立IgAN小鼠模型,于造模第3周开始药物灌胃,共6周。动物处死前留取小鼠24 h尿液、血液、肾脏及结肠组织。生化检测各组小鼠24-UTP、Scr、BUN、ALB、ALT;HE染色光镜观察肾组织和结肠黏膜病理改变,免疫荧光判定免疫球蛋白IgA在肾小球系膜区的沉积;ELISA法检测血清BAFF、Gd-IgA1的表达。结果 模型组ALB减少,24-UTP、Scr、BUN及ALT升高,肾脏损伤较重,系膜区IgA沉积强度下降,结肠黏膜炎症明显,与空白组比较,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。GTW组及激素组BAFF、Gd-IgA1的表达下调,ALB升高,24-UTP、Scr、BUN及ALT降低,肾脏病理改善,系膜区IgA沉积减少,结肠炎症性病变减轻,与模型组比较差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。GTW组与激素组两组间比较,24-UTP及BAFF表达升高,Scr下降,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论 GTW可能通过改善IgAN小鼠结肠炎症反应、影响血清BAFF的表达,抑制Gd-IgA1分泌,从而改善上述生化指标、减轻肾脏病理损害。 展开更多

关键词 雷公藤多苷 IgAN 结肠病理 baff/Gd-IgA1 肾损伤

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非洲鸵鸟BAFF蛋白的表达及其对B淋巴细胞的促增殖作用研究 被引量：2

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作者 杨克礼 彭克美 +3 位作者 肖珂 黄海波 孙鹏鹏 王静 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期922-926,共5页

为探讨非洲鸵鸟B淋巴细胞刺激因子(BAFF)蛋白对B淋巴细胞的作用,本研究根据前期克隆获得的非洲鸵鸟BAFF基因序列设计特异性引物,构建阳性重组表达质粒p ET-Os BAFF。将获得的表达产物进行SDS-PAGE电泳分析、western blot验证并利用MTT... 为探讨非洲鸵鸟B淋巴细胞刺激因子(BAFF)蛋白对B淋巴细胞的作用,本研究根据前期克隆获得的非洲鸵鸟BAFF基因序列设计特异性引物,构建阳性重组表达质粒p ET-Os BAFF。将获得的表达产物进行SDS-PAGE电泳分析、western blot验证并利用MTT法检测其对于法氏囊B淋巴细胞的增殖作用。结果显示非洲鸵鸟BAFF重组融合蛋白纯度高,非洲鸵鸟法氏囊B淋巴细胞生长情况与重组蛋白BAFF的浓度有明显的相关性,表明其具有促进法氏囊淋巴细胞增殖的作用。本研究为探讨非洲鸵鸟BAFF作为B淋巴细胞生长促进剂和免疫增强剂等潜在用途提供了实验依据。 展开更多

关键词 非洲鸵鸟 baff 原核表达 纯化

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糖皮质激素和硼替佐米体外干预多发性骨髓瘤细胞BAFF/APRIL mRNA表达的初步探索 被引量：5

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作者 李玲姝 申建凯 张广森 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2011年第6期1419-1423,共5页

本研究观察糖皮质激素和硼替佐米对U266骨髓瘤细胞株和多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓单个核细胞(BMMNC)BAFF/APRIL mRNA表达的影响。分离MM患者BMMNC,对U266骨髓瘤细胞株和BMMNC进行药物干预(单用地塞米松100、200μg/ml,甲基强的松龙100、... 本研究观察糖皮质激素和硼替佐米对U266骨髓瘤细胞株和多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓单个核细胞(BMMNC)BAFF/APRIL mRNA表达的影响。分离MM患者BMMNC,对U266骨髓瘤细胞株和BMMNC进行药物干预(单用地塞米松100、200μg/ml,甲基强的松龙100、200μg/ml,硼替佐米0.1μg/ml,以及地塞米松或甲基强的松龙与硼替佐米联用)48小时,收集细胞,进行荧光定量实时PCR检测BAFF/APRIL mRNA表达的水平。采用SPSS 17.0进行统计学分析。结果表明,U266细胞及7例初治的MM患者BMMNC均高表达BAFF/APRIL基因。地塞米松,甲基强的松龙,硼替佐米单独作用于U266细胞或MM患者BMMNC后,BAFF/APRIL基因表达较未干预前降低(p<0.01),其中硼替佐米干预后BAFF/APRIL表达最低(p<0.05)。地塞米松或甲基强的松龙和硼替佐米联用后BAFF/APRIL基因表达较单独干预时低(p<0.01);地塞米松联用硼替佐米时BAFF/APRIL基因表达的抑制强度大于甲基强的松龙和硼替佐米联用的抑制强度(p<0.05)。结论:糖皮质激素和硼替佐米干预后的骨髓瘤细胞BAFF/APRIL基因表达下降,提示糖皮质激素和硼替佐米除了存在已知的糖皮质激素受体和蛋白酶体作用靶点外,可能还存在BAFF/APRIL及其受体这种新的作用靶点。 展开更多

关键词 多发性骨髓瘤 baffmRNA APRILmRNA 糖皮质激素 硼替佐米

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BAFF在自身免疫性疾病方面的研究进展 被引量：3

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作者 吴蔚 陈民利 《中国比较医学杂志》 CAS 2012年第1期79-82,共4页

自身免疫性疾病的特征是B细胞耐受丧失,B细胞激活因子(B cell activating factor belonging to theTNF family,BAFF)通过与受体结合,对B细胞的增殖、存活起重要作用。BAFF转基因小鼠易出现自身免疫性疾病。因此,拮抗或抑制BAFF的表达可... 自身免疫性疾病的特征是B细胞耐受丧失,B细胞激活因子(B cell activating factor belonging to theTNF family,BAFF)通过与受体结合,对B细胞的增殖、存活起重要作用。BAFF转基因小鼠易出现自身免疫性疾病。因此,拮抗或抑制BAFF的表达可能是治疗自身免疫性疾病的靶点。本文主要对BAFF在自身免疫性疾病方面的研究进展进行综述。 展开更多

关键词 baff B细胞 自身免疫性疾病

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BAFF启动子-871C/T基因多态性在ITP患者中的意义 被引量：5

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作者 刘俊庆 杨林花 +5 位作者 陈秀花 覃艳红 刘秀娥 陈剑芳 常丽贤 高艳 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第3期690-693,共4页

本研究通过检测B细胞活化因子(BAFF)启动子-871C/T基因多态性在特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者中的分布情况,探讨其与ITP发病的相关性,并研究ITP患者初诊时血小板计数与BAFF-871C/T基因型的关系。选择133例ITP患者和117例健康对照者,... 本研究通过检测B细胞活化因子(BAFF)启动子-871C/T基因多态性在特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者中的分布情况,探讨其与ITP发病的相关性,并研究ITP患者初诊时血小板计数与BAFF-871C/T基因型的关系。选择133例ITP患者和117例健康对照者,应用等位基因特异性PCR(ASP?PCR)及琼脂糖凝胶电泳检测BAFF-871C/T多态性,判定各研究对象的基因型,并统计各基因型及等位基因的频率。结果表明:C/C、C/T、T/T3种基因型分布在ITP组分别为33.1%、42.1%、24.8%,对照组分别为55.6%、33.3%、11.1%。T等位基因频率在ITP组为45.9%、对照组为27.4%,差异均有统计学意义(p<0.05)。ITP组T等位基因频率高于对照组。各基因型间血小板计数无统计学差异(p>0.05)。结论:BAFF启动子-871C/T多态性可能与ITP的发病有相关性,但各基因型之间患者初诊时血小板计数没有差别,不能作为病情严重程度的评价指标。 展开更多

关键词 特发性血小板减少性紫癜 B细胞活化因子 基因多态性

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