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PC-1基因表达增强C4-2B前列腺癌细胞生存 被引量:2
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作者 李素萍 张惠 +6 位作者 王健 施庆国 黄翠芬 陈亮 夏令 郭迟鸣 周建光 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期388-393,共6页
建立稳定表达外源PC-1基因的人前列腺癌骨转移C4-2B细胞模型,初步探讨PC-1基因表达对前列腺癌发展的影响.通过脂质体介导的方法,将融合PC-1基因的真核表达载体pcDNA3·1-PC-1稳定转染C4-2B细胞,Western印迹和RT-PCR技术,分别从蛋白... 建立稳定表达外源PC-1基因的人前列腺癌骨转移C4-2B细胞模型,初步探讨PC-1基因表达对前列腺癌发展的影响.通过脂质体介导的方法,将融合PC-1基因的真核表达载体pcDNA3·1-PC-1稳定转染C4-2B细胞,Western印迹和RT-PCR技术,分别从蛋白水平和RNA水平确定外源PC-1基因表达.MTT和软琼脂集落形成能力等一系列方法,研究PC-1基因的功能,RT-PCR和实时定量PCR检测前列腺癌发生发展相关基因表达的变化.结果表明,PC-1基因的高表达能够诱导雄激素受体(AR)调控基因和一系列重要的信号通路成员基因PSA、PSMA、NKX3·1、Jagged1、EphA3、SGEF和NOTCH3等表达发生变化.实验结果初步证明,PC-1基因表达在晚期前列腺癌中,以及在雄激素非依赖的转变中可以发挥作用,PC-1基因表达可调控一些重要信号通路.对PC-1基因功能深入研究将有可能为发现新的前列腺癌的诊断治疗分子靶标提供线索. 展开更多
关键词 c4-2b 细胞 Pc-1 基因 基因表达 前列腺癌 稳定转染
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泛素连接酶E4B介导PM20D2、PABPC1和TACO1蛋白质的泛素化验证 被引量:2
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作者 刘香男 范宇宸 +3 位作者 王亚楠 陆瑶 赵博 武正华 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期31-36,共6页
泛素连接酶E4B通过U-box基序可将经泛素活化酶(Ubiquitin-activating enzyme, E1)和泛素结合酶(Ubiquitin-conjugating enzyme, E2)传递的泛素(Ubiquitin, UB)标记至底物蛋白质。探究3个蛋白质:金属蛋白酶M20家族蛋白质2(Peptidase M20 ... 泛素连接酶E4B通过U-box基序可将经泛素活化酶(Ubiquitin-activating enzyme, E1)和泛素结合酶(Ubiquitin-conjugating enzyme, E2)传递的泛素(Ubiquitin, UB)标记至底物蛋白质。探究3个蛋白质:金属蛋白酶M20家族蛋白质2(Peptidase M20 domain-containing protein 2,PM20D2)、多腺苷酸结合蛋白质1(Polyadenylate-binding protein 1,PABPC1)、细胞色素C氧化酶Ⅰ翻译激活剂(Translational activator of cytochrome C oxidase Ⅰ,TACO1)是否可被E4B介导泛素化。从HEK293细胞中提取总RNA,反转录为cDNA,以其为模板调取底物基因并构建重组质粒,利用大肠杆菌表达系统表达并纯化泛素化过程所需的各个相关蛋白质,通过蛋白质体外泛素化实验,对3个蛋白质进行泛素化验证。结果表明3个蛋白质均可以在蛋白质水平被E4B泛素化,证明3个蛋白质都是E4B的底物,为进一步在细胞中研究其泛素化的机理奠定基础。 展开更多
关键词 泛素化 泛素连接酶E4b 金属蛋白酶M20家族蛋白质2 多腺苷酸结合蛋白质1 细胞色素c氧化酶Ⅰ翻译激活剂
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Streptomyces sp.Tü 4128中新型抗生素bagremycins抗性基因bagJ的研究
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作者 张玉琛 吴海珍 +3 位作者 鞠诚 祁双双 叶江 张惠展 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期184-192,共9页
通过框内敲除鉴定了链霉菌Streptomyces sp.Tü4128中基因bagJ的功能。HPLC结果表明,敲除基因bagJ导致抗生素生产水平大幅降低;回补菌株恢复了抗生素的生产;过表达菌株大幅提高了抗生素的产量,证明基因bagJ在新型抗生素bagremycins... 通过框内敲除鉴定了链霉菌Streptomyces sp.Tü4128中基因bagJ的功能。HPLC结果表明,敲除基因bagJ导致抗生素生产水平大幅降低;回补菌株恢复了抗生素的生产;过表达菌株大幅提高了抗生素的产量,证明基因bagJ在新型抗生素bagremycins的生物合成中必不可少。抑菌圈实验表明基因bagJ敲除菌株较野生菌株对bagremycins更加敏感;BagJ在Streptomyces lividans TK64中异源表达后使该菌株对bagremycins的耐受性增强,证明bagJ是新型抗生素bagremycins的抗性基因。扫描电镜的结果证明了BagJ异源表达后导致Streptomyces TK64的菌丝形态发生了改变。其他抗生素的敏感性实验表明,BagJ可能是一个逆向转运蛋白。 展开更多
关键词 bagremycins STREPTOMYcES sp.Tü 4128 bagJ MFS家族 抗性基因
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B_4C/Al复合材料力学性能及其断裂机理的研究 被引量:11
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作者 彭可武 吴文远 +1 位作者 徐璟玉 涂赣峰 《热加工工艺》 CSCD 北大核心 2007年第4期1-3,37,共4页
对无压浸渗法制备的B4C/Al复合材料进行了力学性能测试。结果表明,B4C/Al复合材料的抗弯强度和断裂韧性与单一B4C材料相比有显著提高。B4C/Al复合材料的抗弯强度及断裂韧性分别比单一B4C提高了18.39%和75.27%,但其硬度降低。B4C/Al复合... 对无压浸渗法制备的B4C/Al复合材料进行了力学性能测试。结果表明,B4C/Al复合材料的抗弯强度和断裂韧性与单一B4C材料相比有显著提高。B4C/Al复合材料的抗弯强度及断裂韧性分别比单一B4C提高了18.39%和75.27%,但其硬度降低。B4C/Al复合材料经扫描电镜和背散射仪分析后发现,无压浸渗法制备的B4C/Al复合材料中没有大尺寸的显微缺陷,组织分布比较均匀、致密;B4C以连续的骨架结构存在,而渗入的铝相也以连续基体的形式存在;单一B4C存在较多的穿晶断裂,而B4C/Al复合材料的断裂方式主要以沿晶断裂为主,这是B4C/Al复合材料断裂韧性提高的主要原因。 展开更多
关键词 b4c/a1复合材料 碳化硼 无压浸渗 力学性能 断裂方式
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柯萨奇B4病毒非结构蛋白P_2C重组质粒的构建 被引量:1
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作者 高久春 黄红兰 李凡 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期583-585,共3页
目的:构建柯萨奇B4病毒非结构蛋白P2C重组质粒。方法:用RT-PCR技术,从柯萨奇B4病毒中钓取非结构蛋白P2CcDNA片段,克隆入PUCm-T载体,转化大肠杆菌DH5α,构建重组质粒。结果:以柯萨奇B4病毒的总RNA为模板,扩增出987bp大小的片段,克隆入PUC... 目的:构建柯萨奇B4病毒非结构蛋白P2C重组质粒。方法:用RT-PCR技术,从柯萨奇B4病毒中钓取非结构蛋白P2CcDNA片段,克隆入PUCm-T载体,转化大肠杆菌DH5α,构建重组质粒。结果:以柯萨奇B4病毒的总RNA为模板,扩增出987bp大小的片段,克隆入PUCm-T载体,用BamHⅠ、HindⅢ双酶切鉴定,与非结构蛋白P2C的PCR扩增产物片段大小一致。结论:成功地构建了柯萨奇B4病毒非结构蛋白P2C重组质粒。 展开更多
关键词 柯萨奇b4病毒(cVb4) 1型糖尿病 非结构蛋白P2c 重组质粒
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过表达BMI-1对HeLa细胞中HOX基因表达和细胞周期的影响 被引量:2
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作者 陈凤花 李一荣 +1 位作者 王琳 胡丽华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期2366-2370,共5页
目的:将构建成功的真核表达载体pEGFP-BMI-1转染宫颈癌细胞系HeLa,检测其对同源盒(HOX)基因表达和细胞周期的影响。方法:采用脂质体转染法,将质粒pEGFP-BMI-1DNA瞬时转染HeLa细胞,确定融合蛋白B细胞特异性莫洛尼氏白血病毒插入位点1-加... 目的:将构建成功的真核表达载体pEGFP-BMI-1转染宫颈癌细胞系HeLa,检测其对同源盒(HOX)基因表达和细胞周期的影响。方法:采用脂质体转染法,将质粒pEGFP-BMI-1DNA瞬时转染HeLa细胞,确定融合蛋白B细胞特异性莫洛尼氏白血病毒插入位点1-加强型绿色荧光蛋白(BMI-1-EGFP)表达后,实时荧光定量RT-PCR方法检测转染前后HeLa细胞中周期素依赖性激酶抑制剂P16INK4a、人类端粒酶逆转录酶(hTERT)、同源盒A9(HOXA9)、同源盒B4(HOXB4)和同源盒C13(HOXC13)mRNA的表达变化,PI染色流式细胞仪检测细胞周期。结果:(1)在HeLa细胞中过表达BMI-1显著下调P16INK4a、HOXA9和HOXC13 mRNA的表达,分别平均降低为对照组的9.2%、10.9%和69.7%(P<0.01),而hTERT和HOXB4 mRNA的表达变化无显著差异(P>0.05)。(2)pEGFP-BMI-1转染HeLa细胞后,G1期细胞由65.68%减少至50.53%,S期细胞则由27.17%增加至39.59%(P<0.01)。结论:真核表达载体pEGFP-BMI-1转染HeLa细胞过表达外源性BMI-1,显著下调P16INK4a、HOXA9和HOXC13的表达,同时G1期细胞减少、S期细胞增加,这可能是BMI-1参与肿瘤发生发展的机制之一。 展开更多
关键词 b细胞特异性莫洛尼氏白血病毒插入位点1 周期素依赖性激酶抑制剂P16INK4a 同源盒A9 同源盒c13
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敲减BMI-1表达诱导HeLa细胞G_1期阻滞 被引量:1
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作者 陈凤花 李一荣 +1 位作者 王琳 胡丽华 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期134-139,共6页
B细胞特异性莫洛尼氏白血病毒插入位点1(B-cell specific moloney leukemia virus insertionsite1,BMI-1)在多种恶性肿瘤中高表达.为探索BMI-1在宫颈癌发生发展过程中的生物学作用,将构建成功并已鉴定为有效序列的短发夹状RNA(short hai... B细胞特异性莫洛尼氏白血病毒插入位点1(B-cell specific moloney leukemia virus insertionsite1,BMI-1)在多种恶性肿瘤中高表达.为探索BMI-1在宫颈癌发生发展过程中的生物学作用,将构建成功并已鉴定为有效序列的短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体BMI-1shRNA2和BMI-1shRNA4,转染人宫颈癌细胞系HeLa并筛选稳定转染细胞株,Western印迹检测BMI-1蛋白表达,实时荧光定量RT-PCR检测周期素依赖性激酶抑制剂p16INK4a(cyclin-dependentkinase inhibitor p16INK4a)、人类端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)、同源盒A9(homeoboxA9,HOXA9)、同源盒B4(homeoboxB4,HOXB4)和同源盒C13(homeoboxC13,HOXC13)基因mRNA的表达变化,PI染色流式细胞仪检测细胞周期变化.结果表明,在稳定转染BMI-1shRNA2、BMI-1shRNA4的HeLa细胞中,显著抑制BMI-1蛋白表达,上调p16INK4a、HOXA9和HOXC13三者mRNA表达,而hTERT和HOXB4两者mRNA的表达水平无明显改变,同时G1期细胞增加、S期细胞减少,提示敲减BMI-1表达诱导HeLa细胞G1期阻滞,BMI-1可能是宫颈癌基因治疗的靶分子. 展开更多
关键词 b细胞特异性莫洛尼氏白血病毒插入位点1(bMI-1) 短发夹状RNA(shRNA) 周期素依赖性激酶抑制剂p16INK4a 同源盒A9 同源盒c13
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Ballistic behavior of boron carbide reinforced AA7075 aluminium alloy using friction stir processing-An experimental study and analytical approach 被引量:1
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作者 I.SUDHAKAR G.MADHUSUDHAN REDDY K.SRINIVASA RAO 《Defence Technology(防务技术)》 SCIE EI CAS CSCD 2016年第1期25-31,共7页
High strength-to-weight ratio of non-ferrous alloys, such as aluminium, magnesium and titanium alloys, are considered to be possible replacement of widely accepted steels in transportation and automobile sectors. Amon... High strength-to-weight ratio of non-ferrous alloys, such as aluminium, magnesium and titanium alloys, are considered to be possible replacement of widely accepted steels in transportation and automobile sectors. Among these alloys, magnesium is self explosive and titanium is costlier, and aluminium is most likely to replace steels. Application of aluminium or its alloys is also thought of as an appropriate replacement in defence field, especially to enhance the easiness in mobility of combat vehicles while maintaining the same standard as that of conventional armour grade steels. Hence most of the investigations have been confined to aluminium or its alloys as base material and open an era of developing the newer composite materials to address the major limitation, i.e. tribological properties. The surface composites can be fabricated by incorporating the ceramic carbides like silicon carbide, carbides of transition metals and oxides of aluminium using surface modification techniques, such as high energy laser melt treatment, high energy electron beam irradiation and thermal spray process which are based on fusion route. These techniques yield the fusion related problems, such as interfacial reaction, pin holes, shrinkage cavities or voids and other casting related defects, and pave the way to need of an efficient technique which must be based on solid state. Recently developed friction stir processing technique was used in the present investigation for surface modification of AA7075 aluminum alloy, which is an alternative to steels. In the present investigation, 160 μm sized boron carbide powder was procured and was reduced to 60 μm and 30 μm using high energy ball mill. Subsequently these powders were used to fabricate the surface composites using friction stir processing.Ballistic performance testing as per the military standard(JIS.0108.01) was carried out. In the present work, an analytical method of predicting the ballistic behavior of surface composites was developed. This method was based on energy balance, i.e., the initial energy of impact is same as that of energy absorbed by multi layers. An attempt also has been made to validate the analytical results with the experimental findings. Variation between the analytical and experimental results may be accounted due to the assumptions considering such as isotropic behavior of target and shearing area of contact as cylindrical instead of conical interface As the analytical model yields the ballistic performance in the closer proximity of experimentally obtained, it can be considered to be an approximation to evaluate the ballistic performance of targets. 展开更多
关键词 AA7075 aluminium alloy Friction stir processing(FSP) Surface metal matrix composite(SMMc) boron carbide(b4c) ballistic performance TARGET
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各具特色的玉米收获机械
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作者 周良墉 《农村实用工程技术(温室园艺)》 2002年第10期18-19,共2页
关键词 4YL-1A秸秆回收型玉米联合收获机 北京4YZ-3b/c型自走式玉米联合收割机 结构 技术参数 玉米收获机械
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四种新型玉米联合收获机械
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作者 周良墉 《山西农机》 2002年第5期28-29,共2页
关键词 玉米联合收获机械 品种 北京4YZ-3b/c 4YZ-3型 4YD-3型 4YL-1A型
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