根据GenBank中收录的鸡B淋巴细胞激活因子(chicken B cell activator factor,ChBAFF)基因序列,设计特异引物,以3周龄鸡法氏囊总RNA为模板,经RT-PCR扩增出ChBAFF的ORF序列,测序后,插入质粒pMAL-c2X,构建重组表达载体,转染到大肠杆菌Rosse...根据GenBank中收录的鸡B淋巴细胞激活因子(chicken B cell activator factor,ChBAFF)基因序列,设计特异引物,以3周龄鸡法氏囊总RNA为模板,经RT-PCR扩增出ChBAFF的ORF序列,测序后,插入质粒pMAL-c2X,构建重组表达载体,转染到大肠杆菌Rosset(DE3),并以IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表明,重组蛋白的表达量约占菌体总蛋白的25/,融合蛋白的分子量约为75ku,所表达重组蛋白主要存在于菌体裂解物上清液中,为可溶性表达。以淀粉树脂柱亲和层析纯化重组蛋白后进行SDS-PAGE,用BandScan软件分析,提纯重组蛋白的含量可达97.5/。MTT比色法分析证明,纯化的重组蛋白可显著刺激鸡脾脏淋巴细胞的活化。展开更多
B淋巴细胞成熟是一个高度的选择过程,需要精细的分化和存活信号.BAFF(TNF家族的B细胞活化因子)能够结合B淋巴细胞,促进BCR介导的细胞增殖.阻断BAFF的作用时外周B细胞数目减少,而在BAFF转基因小鼠中则可检测到高水平的Bcl-2.该研究主要...B淋巴细胞成熟是一个高度的选择过程,需要精细的分化和存活信号.BAFF(TNF家族的B细胞活化因子)能够结合B淋巴细胞,促进BCR介导的细胞增殖.阻断BAFF的作用时外周B细胞数目减少,而在BAFF转基因小鼠中则可检测到高水平的Bcl-2.该研究主要探讨了BAFF在体外对脾脏未成熟移行B细胞(Transitional B lymphocyte)存活的作用.展开更多
文摘根据GenBank中收录的鸡B淋巴细胞激活因子(chicken B cell activator factor,ChBAFF)基因序列,设计特异引物,以3周龄鸡法氏囊总RNA为模板,经RT-PCR扩增出ChBAFF的ORF序列,测序后,插入质粒pMAL-c2X,构建重组表达载体,转染到大肠杆菌Rosset(DE3),并以IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析表明,重组蛋白的表达量约占菌体总蛋白的25/,融合蛋白的分子量约为75ku,所表达重组蛋白主要存在于菌体裂解物上清液中,为可溶性表达。以淀粉树脂柱亲和层析纯化重组蛋白后进行SDS-PAGE,用BandScan软件分析,提纯重组蛋白的含量可达97.5/。MTT比色法分析证明,纯化的重组蛋白可显著刺激鸡脾脏淋巴细胞的活化。
文摘B淋巴细胞成熟是一个高度的选择过程,需要精细的分化和存活信号.BAFF(TNF家族的B细胞活化因子)能够结合B淋巴细胞,促进BCR介导的细胞增殖.阻断BAFF的作用时外周B细胞数目减少,而在BAFF转基因小鼠中则可检测到高水平的Bcl-2.该研究主要探讨了BAFF在体外对脾脏未成熟移行B细胞(Transitional B lymphocyte)存活的作用.
