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梨褪绿叶斑伴随病毒P5蛋白与NbWRKY1的互作研究
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作者 高玉洁 任秋婷 +6 位作者 张永乐 张樾 张红艺 邓惠方 王先洪 洪霓 王国平 《西南农业学报》 北大核心 2025年第5期885-892,共8页
【目的】已有研究证实梨褪绿叶斑伴随病毒(PCLSaV)P5蛋白是沉默抑制子和致病因子,探究NbWRKY1对PCLSaV P5生物学功能的作用,为解析P5生物学功能的作用机制提供参考信息。【方法】采用双分子荧光互补和免疫共沉淀试验分析NbWRKY1与P5的... 【目的】已有研究证实梨褪绿叶斑伴随病毒(PCLSaV)P5蛋白是沉默抑制子和致病因子,探究NbWRKY1对PCLSaV P5生物学功能的作用,为解析P5生物学功能的作用机制提供参考信息。【方法】采用双分子荧光互补和免疫共沉淀试验分析NbWRKY1与P5的互作关系,同时通过根癌农杆菌介导的表达分析和绿色荧光蛋白RNA沉默诱导研究NbWRKY1对P5的生物学影响。【结果】NbWKY1与P5互作且共定位于细胞核中,并在细胞核内形成均匀的核体颗粒,不包含核仁,与NbWRKY1在本氏烟细胞内的分布特点相似。同时P5还可诱导NbWRKY1基因上调表达,2 d时NbWRKY1的表达水平显著上调4.2倍,至4 d时表达量有所回落,但仍高于对照。病毒诱导的基因沉默发现NbWRKY1在野生型本氏烟植株中沉默效率呈先上升后下降的动态变化趋势,在14 d时沉默效率最高。且NbWRKY1沉默植株表型与野生型植株相似。NbWRKY1沉默植株叶片上P5引起的细胞坏死程度明显比野生型植株叶片坏死程度减轻,由此判定当该基因下调表达时,能有效缓解由PCLSaV P5所引发的细胞坏死现象。检测NbWRKY1和P5的RNA沉默抑制活性,发现NbWRKY1具备直接抑制RNA沉默的能力,且P5与NbWRKY1的RNA沉默抑制能力存在叠加效应,当两种蛋白的沉默抑制活性叠加后,表现出比P5蛋白更强的RNA沉默抑制活性。【结论】本研究发现NbWRKY1可与P5互作,且NbWRKY1既可直接抑制RNA沉默,其下调表达后也可减轻PCLSaV P5引起的细胞坏死反应,同时NbWRKY1与PCLSaV P5的RNA沉默抑制活性存在叠加效应。研究结果为解析PCLSaV编码的P5蛋白的生物学功能提供了新的理论依据。 展开更多
关键词 梨褪绿叶斑伴随病毒 特异蛋白P5 NbWRKY1 蛋白互作 RNA沉默抑制
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侵染云南苹果的苹果褪绿叶斑病毒的RT-PCR检测和序列分析 被引量:5
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作者 姬盼 王连春 +3 位作者 孔宝华 李晓鹏 曹克强 马钧 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期458-464,共7页
以云南昭通、昆明、曲靖等地采集的苹果病毒病样品为试材,对其是否携带苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)进行RT-PCR检测,将本试验获得3个云南ACLSV分离物(ZT,ML,TJX)和GenBank上已登录的24个分离物进行序列比对分析。所有的ACLSV分离物的核苷酸... 以云南昭通、昆明、曲靖等地采集的苹果病毒病样品为试材,对其是否携带苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)进行RT-PCR检测,将本试验获得3个云南ACLSV分离物(ZT,ML,TJX)和GenBank上已登录的24个分离物进行序列比对分析。所有的ACLSV分离物的核苷酸序列相似性为81.3%~99.7%,它们可以被分成两大组群,组群A,包括了大部分不同寄主、地理来源的分离物,所有的ACLSV苹果分离物位于组A;组群B,包括了ACLSV全部的寄主为桃的分离物。本研究获得的3个苹果云南分离物属于组群A,组群A可分成两个亚组,其中,分离物ML和TJX位于同一个亚组,而分离物ZT位于另一个亚组。结果表明ACLSV苹果分离物与寄主种类存在一定的相关性,该研究为株系划分、分子流行和寄主抗性分析提供依据。 展开更多
关键词 苹果褪绿叶斑病毒(aclsv) RT-PCR CP外壳蛋白 克隆 序列分析
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苹果褪绿叶斑病毒外壳蛋白基因的原核表达及抗血清制备 被引量:3
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作者 耿超 牟安丽 +2 位作者 刘志强 李向东 周涛 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期755-758,I0002,共5页
【目的】为了制备苹果褪绿叶斑病毒(Apple chlorotic leaf spot virus,ACLSV)的抗血清,【方法】将ACLSV外壳蛋白(Coat protein,CP)基因克隆到原核表达载体pEHISTEV和pEHISEGFPTEV,转化大肠杆菌Rosetta,切胶回收诱导表达的CP融合蛋白免... 【目的】为了制备苹果褪绿叶斑病毒(Apple chlorotic leaf spot virus,ACLSV)的抗血清,【方法】将ACLSV外壳蛋白(Coat protein,CP)基因克隆到原核表达载体pEHISTEV和pEHISEGFPTEV,转化大肠杆菌Rosetta,切胶回收诱导表达的CP融合蛋白免疫新西兰长耳兔,制备ACLSV的抗血清。【结果】利用原核表达载体pEHISTEV和pE-HISEGFPTEV在Rosetta中分别表达出了分子质量为25 ku和55 ku的ACLSV CP融合蛋白。切胶回收25 ku的融合蛋白免疫新西兰长耳兔。经ELISA测定,所制备的抗血清效价为1∶1 024,Western blot及组织印迹分析表明抗血清能与ACLSV CP发生特异性的免疫反应。【结论】该血清特异性强,效价高,可用于苹果叶片、果实和枝条等样品中A-CLSV的检测。 展开更多
关键词 苹果褪绿叶斑病毒 外壳蛋白基因 原核表达 抗血清 组织印迹分析
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苹果褪绿叶斑病毒库尔勒香梨分离物外壳蛋白基因的序列分析 被引量:2
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作者 蔡瑜 向本春 +2 位作者 席德慧 都业娟 刘升学 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2004年第3期197-200,共4页
利用RT-PCR,获得苹果褪绿叶斑病毒库尔勒香梨分离物外壳蛋白基因的cDNA克隆。序列分析结果表明,库尔勒香梨分离物外壳蛋白基因由582个核苷酸组成,编码一个由193个氨基酸组成的蛋白质。与已报道的P863、P205、A-Ball分离物序列比较,核苷... 利用RT-PCR,获得苹果褪绿叶斑病毒库尔勒香梨分离物外壳蛋白基因的cDNA克隆。序列分析结果表明,库尔勒香梨分离物外壳蛋白基因由582个核苷酸组成,编码一个由193个氨基酸组成的蛋白质。与已报道的P863、P205、A-Ball分离物序列比较,核苷酸序列同源性为80.0%~86.1%,推导的氨基酸序列同源性为84.9%~89.6%。 展开更多
关键词 苹果褪绿叶斑病毒 库尔勒香梨分离物 外壳蛋白基因 CDNA克隆 序列分析 核苷酸 氨基酸
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库尔勒香梨病毒病多重RT-PCR检测技术研究 被引量:3
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作者 牛建新 刘连科 +3 位作者 马兵钢 朱军 李海生 何梅 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2004年第2期93-96,共4页
在建立PVYV和ACLSVRT PCR优化体系的基础上,主要研究了多重PCR中2套引物的浓度和退火温度的影响,研究表明:多重PCR体系中引物Tm值越高、长度越长浓度就需越高;如果Tm值相差不大,退火温度的确定要以Tm值高的引物为准。应用该体系可以节... 在建立PVYV和ACLSVRT PCR优化体系的基础上,主要研究了多重PCR中2套引物的浓度和退火温度的影响,研究表明:多重PCR体系中引物Tm值越高、长度越长浓度就需越高;如果Tm值相差不大,退火温度的确定要以Tm值高的引物为准。应用该体系可以节约成本、缩短时间。 展开更多
关键词 梨脉黄病毒(PVYV) 苹果褪绿叶斑病毒(aclsv) 多重RT-PCR
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3种苹果潜隐性病毒一步多重RT-PCR检测体系的优化 被引量:2
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作者 陈红霞 邵建柱 +2 位作者 孙建设 乔雪华 曹晓凤 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期51-57,共7页
为建立更为快速准确的苹果潜隐性病毒检测方法,以携带苹果茎沟病毒(ASGV)、苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)和苹果茎痘病毒(ASPV)的田间苹果成龄树为试材,设计合成了扩增目的片段为273bp(ASGV)、358bp(ACLSV)和432bp(ASPV)的3对特异性引物,并... 为建立更为快速准确的苹果潜隐性病毒检测方法,以携带苹果茎沟病毒(ASGV)、苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)和苹果茎痘病毒(ASPV)的田间苹果成龄树为试材,设计合成了扩增目的片段为273bp(ASGV)、358bp(ACLSV)和432bp(ASPV)的3对特异性引物,并对影响RT-PCR体系的主要参数进行试验优化。结果表明:建立的一步多重RT-PCR体系可以实现对3种主要潜隐性病毒的特异性检测;通过对田间多个样品的检测验证,表明该方法的准确性和灵敏度都很高,并缩短了单个样品的检测时间,极大地提高了工作效率。 展开更多
关键词 苹果茎沟病毒 苹果褪绿叶斑病毒 苹果茎痘病毒 一步多重RT—PCR
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苹果褪绿叶斑病毒一步法RT-PCR检测 被引量:5
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作者 张强 牛建新 李西萍 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期67-69,共3页
RT-PCR技术在植物病毒检测方面有着快速、灵敏、特异性强等优点。然而传统的RT-PCR是在两个酶(逆转录酶和Taq酶)分别催化下在两个体系中的两步反应,即由RNA逆转录为cDNA,再以模板cDNA进行PCR扩增,操作步骤比较繁琐,而且很容易造成交叉... RT-PCR技术在植物病毒检测方面有着快速、灵敏、特异性强等优点。然而传统的RT-PCR是在两个酶(逆转录酶和Taq酶)分别催化下在两个体系中的两步反应,即由RNA逆转录为cDNA,再以模板cDNA进行PCR扩增,操作步骤比较繁琐,而且很容易造成交叉污染。笔者建立的一步法RT-PCR是在逆转录酶(M-MLV)和Taq DNA聚合酶共同作用下,只需在一个反应管中就可以完成反转录和cDNA扩增的全过程,两个步骤一步完成,以达到对苹果褪绿叶斑病毒快速、简便、敏感的检测。 展开更多
关键词 一步法RT-PCR 检测 苹果褪绿叶斑病毒(aclsv)
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库尔勒香梨的苹果褪绿叶斑病毒cDNA探针检测技术研究 被引量:1
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作者 牛建新 朱军 马兵钢 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期58-63,共6页
以库尔勒香梨叶片和皮层为材料,对两种植物总RNA提取方法进行了比较研究,从中筛选出了适合库尔勒香梨的提取方法;并利用RT-PCR反应体系成功合成了生物素标记的cDNA探针,在此基础上,对影响杂交灵敏度的主要因素进行了实验研究。结果表明... 以库尔勒香梨叶片和皮层为材料,对两种植物总RNA提取方法进行了比较研究,从中筛选出了适合库尔勒香梨的提取方法;并利用RT-PCR反应体系成功合成了生物素标记的cDNA探针,在此基础上,对影响杂交灵敏度的主要因素进行了实验研究。结果表明,当探针浓度为400ng/mL,甲酰胺浓度为45%,42℃杂交反应6h,可获得最高灵敏度。Tween20的封闭效果比牛血清白蛋白好。对不同组织和不同提取方法提取的总RNA进行了杂交检测,并对库尔勒地区香梨带毒情况进行了检测。结果表明,不论幼叶、老叶、皮层及冷冻叶片均可出现杂交信号,两种提取方法提取的总RNA也都出现了杂交信号,库尔勒香梨样品有45%的带苹果褪绿叶斑病毒。 展开更多
关键词 苹果褪绿叶斑病毒 CDNA探针 库尔勒香梨 检测技术 RNA提取方法 PCR反应体系 Tween20 牛血清白蛋白 总RNA 杂交信号 生物素标记 库尔勒地区 比较研究 实验研究 杂交反应 高灵敏度 杂交检测 甲酰胺 皮层 叶片 浓度 幼叶 老叶
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苹果褪绿叶斑病毒库尔勒香梨分离物外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达 被引量:1
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作者 蔡瑜 向本春 +2 位作者 席德慧 都业娟 刘升学 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2004年第4期295-297,共3页
将ACLSVCP基因克隆到表达载体pET 28a(+)中,转化大肠杆菌BL21,筛选得到阳性克隆pET ACP,用IPTG诱导使其表达,SDS PAGE电泳分析表明,预期的22kD外壳蛋白在大肠杆菌中得到大量表达,并加以纯化,用于制备抗血清。
关键词 苹果褪绿叶斑病毒 库尔勒香梨 外壳蛋白 基因表达 大肠杆菌
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桃上苹果褪绿叶斑病毒的发生与检测 被引量:2
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作者 王海荣 刘伟 +2 位作者 安淼 董晓民 余贤美 《山东农业科学》 2016年第4期109-110,128,共3页
对山东省果树研究所试验基地‘玉妃’、‘超红’、‘岱妃’三个桃品种的苹果褪绿叶斑病毒病的发生情况进行调查,采集22份样品,利用ACLSV特异性引物进行RT-PCR检测。结果表明,在‘玉妃’桃的叶片中扩增出与苹果褪绿叶斑病毒(Apple chloro... 对山东省果树研究所试验基地‘玉妃’、‘超红’、‘岱妃’三个桃品种的苹果褪绿叶斑病毒病的发生情况进行调查,采集22份样品,利用ACLSV特异性引物进行RT-PCR检测。结果表明,在‘玉妃’桃的叶片中扩增出与苹果褪绿叶斑病毒(Apple chlorotic leaf spot virus,ACLSV)预期大小一致的目的片段,并与GenBank登录的病毒核苷酸序列具有较高的一致性,而在‘超红’和‘岱妃’桃中均未检测到该病毒。 展开更多
关键词 苹果褪绿叶斑病毒 病原检测
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5种苹果病毒多重PCR检测体系的建立 被引量:1
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作者 胡国君 范旭东 +4 位作者 李军 任芳 孙喜陈 张尊平 董雅凤 《中国果树》 北大核心 2023年第10期79-83,88,共6页
苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)、苹果茎沟病毒(ASGV)、苹果茎痘病毒(ASPV)、苹果坏死花叶病毒(ApNMV)和苹果锈果类病毒(ASSVd)是影响我国苹果产业健康发展的重要病毒病害,建立快速、准确的检测方法是防控病毒病的基础。分别设计了ACLSV、ApNM... 苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)、苹果茎沟病毒(ASGV)、苹果茎痘病毒(ASPV)、苹果坏死花叶病毒(ApNMV)和苹果锈果类病毒(ASSVd)是影响我国苹果产业健康发展的重要病毒病害,建立快速、准确的检测方法是防控病毒病的基础。分别设计了ACLSV、ApNMV和ASSVd 3种病毒的检测引物ACL-F1/R1、ApN-F2/R2和ASS-F1/R1,片段的大小分别为1112、1025、213 bp。利用新设计和已报道的苹果病毒特异性引物,通过引物检测效果比较、组合筛选、用量优化及退火温度调试,建立了5种苹果病毒多重PCR检测体系。该检测体系的扩增片段大小分别为ACLSV1112 bp、ApNMV640 bp、ASGV449 bp、ASPV349 bp和ASSVd213 bp。利用多重PCR和单一PCR分别对50份田间苹果样品进行病毒检测,结果显示,各样品多重PCR检测与单一PCR检测结果一致,表明本研究建立的多重RT-PCR方法可准确、快速、高效地检测单一或复合侵染的5种苹果病毒。 展开更多
关键词 苹果 苹果褪绿叶斑病毒 苹果茎沟病毒 苹果茎痘病毒 苹果坏死花叶病毒 苹果锈果类病毒 多重PCR
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梨树苹果褪绿叶斑病毒在昆诺藜与梨树上的基因序列比较研究
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作者 韩晓燕 牛建新 +2 位作者 刘宏 樊新民 戴志新 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2006年第1期83-86,共4页
以已知带苹果褪绿叶斑病毒的梨树叶片和皮层及昆诺藜为实验材料,对两种植物总RNA的提取、RT-PCR、目的片断的克隆及其酶切鉴定、基因序列进行了分析比较。结果表明,从两种植物中均可以获得高纯度的总RNA及RT-PCR特异性产物,序列分析结... 以已知带苹果褪绿叶斑病毒的梨树叶片和皮层及昆诺藜为实验材料,对两种植物总RNA的提取、RT-PCR、目的片断的克隆及其酶切鉴定、基因序列进行了分析比较。结果表明,从两种植物中均可以获得高纯度的总RNA及RT-PCR特异性产物,序列分析结果表明,从梨树中提取的病毒目的片断基因序列与从昆诺藜中提取的病毒基因序列之间存在着差异,但差异不大。 展开更多
关键词 苹果褪绿叶斑病毒 梨树 昆诺藜 序列比较
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苹果褪绿叶斑病毒的分子杂交检测
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作者 杨洪一 李昱莹 《安徽农业科学》 CAS 2013年第31期12324-12325,共2页
[目的]探索检测苹果褪绿叶斑病毒的技术体系。[方法]利用CTAB法提取感病苹果叶片总RNA,以总RNA为模板,利用特异性引物,建立利用cDNA探针检测苹果褪绿叶斑病毒的技术体系。[结果]扩增出了预期片段,经克隆、测序证明该片段为苹果褪绿叶斑... [目的]探索检测苹果褪绿叶斑病毒的技术体系。[方法]利用CTAB法提取感病苹果叶片总RNA,以总RNA为模板,利用特异性引物,建立利用cDNA探针检测苹果褪绿叶斑病毒的技术体系。[结果]扩增出了预期片段,经克隆、测序证明该片段为苹果褪绿叶斑病毒的特异性片段。以带有特异片段的质粒为模板,利用PCR技术制备出地高辛标记的cDNA探针。[结论]以质粒为模板可高效制备大量探针。地高辛标记探针为非放射性标记探针,安全性较好,灵敏度较高,具有重要的应用价值。 展开更多
关键词 苹果褪绿叶斑病毒 CDNA探针 检测
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库尔勒香梨苹果褪绿叶斑病毒RNAi载体构建及烟草遗传转化 被引量:2
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作者 李诗林 郑银英 +4 位作者 崔百明 都业娟 乔亚红 田桂英 向本春 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2012年第4期422-428,共7页
为了初步研究苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)中CP、MP基因的功能及致病相关性,根据Genbank中登录的ACLSV序列设计简并引物,通过RT-PCR扩增CP基因5’端序列377bp(PCR-CLA)和MP基因3’端序列354bp(PCR-CLB)作为靶标基因。以植物表达载体pBi35SG1... 为了初步研究苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)中CP、MP基因的功能及致病相关性,根据Genbank中登录的ACLSV序列设计简并引物,通过RT-PCR扩增CP基因5’端序列377bp(PCR-CLA)和MP基因3’端序列354bp(PCR-CLB)作为靶标基因。以植物表达载体pBi35SG12为骨架载体,卡那霉素抗性基因为筛选基因,将靶标基因的正向序列和反向重复序列分别插入到内含子(intron)的两侧,构建RNAi载体pBi35S_CLA和pBi35S_CLB,利用农杆菌介导的方法转化西方烟(Nicotiana occidentalis),通过对各载体的干扰效果评价来分析各基因的主要功能。通过PCR检测pBi35S_CLA和pBi35S_CLB,结果表明已分别获得27株和24株转基因植株。本研究为进一步评价各载体的干扰效果和研究ACLSV主要基因的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 苹果褪绿叶斑病毒 克隆 RNAI载体 遗传转化
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山西苹果褪绿叶斑病毒的分布及遗传多样性分析 被引量:2
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作者 续海红 王燕飞 +2 位作者 窦彦鑫 陈伟 杨凯 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期75-82,92,共9页
苹果褪绿叶斑病毒Apple chlorotic leaf spot virus(ACLSV)是侵染苹果的主要潜隐性病毒之一,在我国苹果植株上发生普遍,严重威胁我国苹果的品质与产量。本研究从山西省12个苹果主产区随机采集360份表现褪绿和斑驳等症状的苹果叶片作为... 苹果褪绿叶斑病毒Apple chlorotic leaf spot virus(ACLSV)是侵染苹果的主要潜隐性病毒之一,在我国苹果植株上发生普遍,严重威胁我国苹果的品质与产量。本研究从山西省12个苹果主产区随机采集360份表现褪绿和斑驳等症状的苹果叶片作为研究样本,通过RT-PCR检测,360份样本中有209份样本为ACLSV阳性,对209份阳性样本的外壳蛋白(coat protein,CP)基因进行分离、测序、克隆,得到12个新的ACLSV分离物(分别命名为Shanxi 1~Shanxi 12)。选择17个来自不同国家的分离物与12个新的ACLSV分离物在核苷酸和氨基酸层面上进行序列一致性和系统发育分析。结果显示,29个ACLSV分离物被划分为2个不同进化群体。进一步对2个不同ACLSV群体进行选择压分析和中性检验,结果表明,组Ⅰ与组Ⅱ的ACLSV群体之间存在明显的遗传差异,其中负向选择可能是ACLSV遗传变异的原因之一。本研究较全面地分析了ACLSV的发生、危害,并对山西苹果的ACLSV分离物进行了遗传结构分析,为山西苹果褪绿叶斑病毒病的防治提供了理论指导。 展开更多
关键词 山西苹果 隐性病毒 苹果褪绿叶斑病毒 外壳蛋白 遗传变异
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苹果属植物对苹果褪绿叶斑病毒病的抗性 被引量:3
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作者 曾明 《果树科学》 CSCD 北大核心 1994年第1期5-9,共5页
毒原P204双芽嫁接接种苹果褪绿叶斑病毒(Apple Chlortic Leaf Spot Virus),对所用试材都能进行有效浸染.试验表明,苹果属植物受CLSV浸染后,过氧化物酶活性及同工酶都产生显著变化,并且相对酶活性的大小及同工酶的变化与植株对CLSV抗性... 毒原P204双芽嫁接接种苹果褪绿叶斑病毒(Apple Chlortic Leaf Spot Virus),对所用试材都能进行有效浸染.试验表明,苹果属植物受CLSV浸染后,过氧化物酶活性及同工酶都产生显著变化,并且相对酶活性的大小及同工酶的变化与植株对CLSV抗性的强弱显著相关;受侵染后新酶带的出现不是新酶成分的产生,只是由于病毒的侵染诱发酶蛋白的提前合成.试验初步发现所用试材中河南海棠、丽江山定子、小金海棠抗性相对较强;垂丝海棠、锡金海棠抗性较弱;扁果海棠、森林苹果R12740—7A、湖北海棠、三叶海棠则甚敏感. 展开更多
关键词 褪绿叶斑病毒 过氧化物酶 苹果树
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苹果3种潜隐病毒研究进展 被引量:2
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作者 袁彧伟 张磊 +4 位作者 付崇毅 孙平平 武占敏 马强 李正男 《北方农业学报》 2021年第4期83-97,共15页
苹果褪绿叶斑病毒、苹果茎痘病毒和苹果茎沟病毒是苹果生产中最常见的3种病毒,通常复合侵染苹果树,在世界范围内给苹果产业造成了巨大经济损失。目前,生产中主要是通过培育无病毒苗木和加强检疫防止3种病毒的大面积暴发。文章基于国内外... 苹果褪绿叶斑病毒、苹果茎痘病毒和苹果茎沟病毒是苹果生产中最常见的3种病毒,通常复合侵染苹果树,在世界范围内给苹果产业造成了巨大经济损失。目前,生产中主要是通过培育无病毒苗木和加强检疫防止3种病毒的大面积暴发。文章基于国内外对3种病毒的研究进展,从生物学、分子特性、致病机制3个方面系统地综述了3种病毒的研究进展情况,并展望了上述病毒未来在基因功能、致病机制等方面的研究,以期为3种病毒的有效防控提供参考。 展开更多
关键词 苹果褪绿叶斑病毒 苹果茎痘病毒 苹果茎沟病毒 研究进展
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通辽市塞外红苹果中3种苹果潜隐病毒的检测及变异分析
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作者 张悦东 孙平平 +4 位作者 李小燕 杨荣 王宝侠 张磊 李正男 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期978-987,共10页
【目的】明确通辽地区塞外红苹果(Maluspumila‘Saiwaihong’)中苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)、苹果茎痘病毒(ASPV)和苹果茎沟病毒(ASGV)3种苹果潜隐病毒的普遍率和遗传多样性。【方法】从通辽市开鲁县8个乡镇随机采集了96份塞外红苹果枝条... 【目的】明确通辽地区塞外红苹果(Maluspumila‘Saiwaihong’)中苹果褪绿叶斑病毒(ACLSV)、苹果茎痘病毒(ASPV)和苹果茎沟病毒(ASGV)3种苹果潜隐病毒的普遍率和遗传多样性。【方法】从通辽市开鲁县8个乡镇随机采集了96份塞外红苹果枝条,采用RT-PCR法对样品进行3种苹果潜隐病毒检测。对检测为阳性的样品进行病毒基因克隆、测序,并进行序列一致性分析和系统发育分析。【结果】检测结果表明,被检测的塞外红苹果中3种苹果潜隐病毒均有不同程度的发生,并且存在2种或3种病毒的复合侵染。基于CP基因对病毒一致性和变异情况进行分析,结果表明,来源于塞外红苹果的29个ACLSV分离物的核苷酸序列一致性为78.1%~99.9%,与其他15个已知的ACLSV分离物的一致性为69.1%~93.6%;来源于塞外红苹果的12个ASPV分离物的核苷酸序列一致性为83.6%~99.7%,与其他15个已知的ASPV分离物的一致性为75.4%~91.5%;来源于塞外红苹果的21个ASGV分离物的核苷酸序列一致性为96.4%~100.0%,与其他已知的40个ASGV分离物的一致性为89.9%~98.9%。系统发育分析结果表明,44个ACLSV分离物聚集在7个主支,其中29个塞外红苹果的ACLSV分离物分别位于JB组、Balatonl组、B6组和一个独立分支;27个ASPV分离物聚集为6支,其中12个塞外红苹果的ASPV分离物分别位于Ⅰ、Ⅳ、Ⅴ组;61个ASGV分离物聚集为8个支,其中塞外红苹果的21个ASGV分离物聚集在一起,形成独立分支。【结论】ACLSV、ASGV、ASPV均能侵染塞外红苹果,并且发生率较高。与其他来源的病毒相比,塞外红苹果的3种病毒分离物,各种内各分离物彼此之间的序列一致性较好并且进化关系较近。研究结果为塞外红苹果产业绿色、健康、持续发展提供基本理论依据。 展开更多
关键词 塞外红苹果 RT-PCR 苹果褪绿叶斑病毒 苹果茎痘病毒 苹果茎沟病毒
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