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Apc⁃Kras⁃Cre肠腺瘤转基因小鼠模型构建
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作者 陈苇善 汪舒云 +4 位作者 袁路云 王皓月 孙可向 高嘉敏 邓皖利 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第7期60-67,156,共9页
目的探讨构建Apc⁃Kras⁃Cre肠腺瘤小鼠模型最佳他莫昔芬诱导方式,建立小鼠模型。方法以C57BL/6J野生型小鼠为健康的对照组。以不同浓度、剂量、给药时长他莫昔芬腹腔注射于转基因小鼠,即组1以低剂量他莫昔芬(5 mg/kg)给药1 d,组2以低剂... 目的探讨构建Apc⁃Kras⁃Cre肠腺瘤小鼠模型最佳他莫昔芬诱导方式,建立小鼠模型。方法以C57BL/6J野生型小鼠为健康的对照组。以不同浓度、剂量、给药时长他莫昔芬腹腔注射于转基因小鼠,即组1以低剂量他莫昔芬(5 mg/kg)给药1 d,组2以低剂量他莫昔芬(5 mg/kg)给药3 d,组3以高剂量他莫昔芬(50 mg/kg)给药1 d,组4以高剂量他莫昔芬(50 mg/kg)给药3 d,给药4周后观察各组小鼠生存率、体重变化,药物诱导4周后观察各组小鼠肠道长度变化、肠内腺瘤生长数量以及大小,再通过苏木精伊红染色、显微镜下观察肠道组织、腺瘤的生理情况。结果第一部分实验发现雌鼠生存率低于雄鼠(P<0.001),死亡率高于雄鼠(P<0.05),各组不同浓度与剂量之间比较生存率差异具有统计学意义(P<0.01)。各组小鼠体重变化与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.001),组1与组2,组2与组3,组1与组4之间差异各具统计学意义(P<0.001,P<0.01,P<0.05)。各组小鼠大肠长度与对照组相比未具统计学意义(P>0.05),组1与组3差异具有统计学意义(P<0.05)。各组小鼠大肠内都长有腺瘤,多数于结肠远端,组3与组4腺瘤较多也较大。给药组小鼠大肠病理情况与健康对照组相比出现腺瘤生长,腺体组织排列紊乱、上皮细胞排列不齐,肠道黏膜屏障松散,隐窝分歧不规则,组3、组4也有炎症发生,组4部分区域发现细胞坏死。结论他莫昔芬诱导Apc⁃Kras⁃Cre肠腺瘤转基因小鼠造模成功,并且由此判断,他莫昔芬浓度10 mg/mL、5 mg/kg的剂量诱导1 d的诱导方式最为合适。 展开更多
关键词 肠腺瘤 apc基因 KRAS基因 动物模型 小鼠
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Min基因突变小鼠模型在肠道肿瘤研究中的应用 被引量:8
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作者 盛弘强 陈俭 来茂德 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期277-282,共6页
迄今为止,肠道肿瘤相关的基因突变小鼠或敲除小鼠大约有30多种,Min(multiple intestinal neoplasia)小鼠是具有肠道多发性腺瘤特征的Apc基因突变小鼠,被认为是当前较为理想的家族性腺瘤性息肉病(FAP)的研究模型。APC基因是Wnt途径中重... 迄今为止,肠道肿瘤相关的基因突变小鼠或敲除小鼠大约有30多种,Min(multiple intestinal neoplasia)小鼠是具有肠道多发性腺瘤特征的Apc基因突变小鼠,被认为是当前较为理想的家族性腺瘤性息肉病(FAP)的研究模型。APC基因是Wnt途径中重要的抑癌基因,该途径不仅是动物胚胎发育过程中关键的信号转导途径,也对结直肠肿瘤的发生发展起到不同寻常的作用。对Min小鼠模型历史、分子遗传学与表型特征、肠道肿瘤与Wnt途径异常、抑癌基因甲基化、TGF-β途径和多药耐药基因等内容进行了介绍,并分析了该小鼠模型在抗结直肠肿瘤药物研究中的应用和意义。 展开更多
关键词 apc基因 min小鼠 Wnt基因
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非对称PCR鉴定Min基因突变小鼠 被引量:1
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作者 魏吉清 周卫民 +1 位作者 陈民利 盛弘强 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期490-492,共3页
关键词 apc基因 min小鼠 WNT途径
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铁皮石斛对小鼠和胰岛瘤细胞胰岛素抵抗的改善作用 被引量:12
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作者 陈瑛波 宋丹 +5 位作者 吴晋 景作磊 刘利平 姜如娇 孙捷 吴英杰 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期709-717,共9页
目的:探讨铁皮石斛(DC)对MKR小鼠和MIN6细胞中胰岛素抵抗的作用,并阐明其作用机制。方法:9周龄MKR小鼠随机分为4组,分别灌胃给予10、20、40g·kg-1·d-1 DC和生理盐水(空白对照组),连续给药6周,每2周检测小鼠的血糖,以确定DC降... 目的:探讨铁皮石斛(DC)对MKR小鼠和MIN6细胞中胰岛素抵抗的作用,并阐明其作用机制。方法:9周龄MKR小鼠随机分为4组,分别灌胃给予10、20、40g·kg-1·d-1 DC和生理盐水(空白对照组),连续给药6周,每2周检测小鼠的血糖,以确定DC降糖作用最佳浓度。8周龄MKR雄鼠随机分为对照组、DC组、二甲双胍(Met)组和联合用药(Met+DC)组,灌胃给予生理盐水和相应药物8周,同时检测小鼠血糖,给药结束后对小鼠进行葡萄糖耐量实验(GTT)和胰岛素耐量实验(ITT),采用qPCR法检测小鼠肝脏和皮下脂肪组织中糖脂代谢相关基因表达水平。体外培养MIN6细胞,分为对照组、高浓度棕榈酸(H-PA)组、高浓度葡萄糖(H-Glu)组、H-PA+H-Glu组、H-PA+DC组、H-Glu+DC组和H-Glu+H-PA+DC组,进行葡萄糖刺激下胰岛素分泌能力实验(GSIS),采用MTT法和ELISA法检测各组细胞增殖活性和胰岛素分泌水平,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中PI3K/AKT通路蛋白表达水平。结果:在小鼠体内,DC降糖作用最佳浓度为20g·kg-1·d-1。与对照组比较,DC组、Met组和联合用药组小鼠血糖水平降低(P<0.05);与DC组和Met组比较,联合用药组小鼠血糖水平进一步降低(P<0.05)。GTT和ITT实验,与DC组和Met组比较,联合用药组小鼠糖耐量和胰岛素敏感性明显提高,胰岛素抵抗情况明显改善。与对照组比较,联合用药组小鼠肝组织中磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(Pepck)mRNA表达水平明显降低(P<0.05),葡萄糖激酶(Gck)mRNA表达水平明显升高(P<0.05),Met组和联合用药组小鼠皮下脂肪组织中氧化物酶增殖物激活受体γ(Ppar-γ)mRNA表达水平明显升高(P<0.05)。在MIN6细胞中,经筛选,选择160μmol·L-1 H-PA和30mmol·L-1 H-Glu诱导MIN6细胞胰岛素抵抗,以1.44g·L-1 DC处理各组细胞。GSIS,分别与H-PA组、H-Glu组和H-PA+H-Glu组比较,加入DC后,H-PA+DC组、H-Glu+DC组和H-PA+H-Glu+DC组MIN6细胞胰岛素分泌水平明显升高(P<0.05),细胞凋亡率降低,磷酸化胰岛素受体底物1(p-IRS-1)、磷酸化磷酸肌醇3激酶(p-PI3K)和磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白表达水平明显升高(P<0.05);H-PA+H-Glu+DC组MIN6细胞磷酸化糖原合成酶激酶3β(p-GSK3β)蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:DC可以改善MKR小鼠的胰岛素抵抗,与Met联合用药后效果更加明显;在体外,DC可以通过PI3K/AKT信号通路改善H-PA和H-Glu诱导的MIN6细胞的胰岛素抵抗,并可增加胰岛素分泌水平,降低细胞凋亡率。 展开更多
关键词 铁皮石斛 胰岛素抵抗 糖代谢 小鼠 MKR min6细胞
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利用FAP动物模型观察小檗碱对肠道息肉组织中巨噬细胞分型的影响 被引量:3
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作者 朴美玉 曹海龙 +4 位作者 何娜娜 许梦雀 鄢芳 周冰 王邦茂 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期323-326,共4页
目的观察小檗碱对家族性腺瘤性息肉病(FAP)动物模型Apc(Min/+)小鼠肠道息肉组织中巨噬细胞分型的影响,探讨其治疗FAP的作用机制。方法 SPF级4周龄Apc(Min/+)小鼠20只,随机分为小檗碱组和对照组,0.1%的小檗碱混入饮水中给药。连续给药12... 目的观察小檗碱对家族性腺瘤性息肉病(FAP)动物模型Apc(Min/+)小鼠肠道息肉组织中巨噬细胞分型的影响,探讨其治疗FAP的作用机制。方法 SPF级4周龄Apc(Min/+)小鼠20只,随机分为小檗碱组和对照组,0.1%的小檗碱混入饮水中给药。连续给药12周后处死小鼠,免疫组织化学法观察息肉组织中巨噬细胞标志物F4/80、M1型巨噬细胞标志物诱导型一氧化氮合酶(i NOS)、M2型巨噬细胞标志物巨噬细胞甘露糖受体(MR)的表达情况;real-time PCR检测i NOS、MR和白介素10(IL-10)mRNA表达。结果小檗碱组肠道息肉总数较对照组显著降低(t=16.727,P=0.001)。小檗碱组肠道息肉间质中F4/80表达较对照组明显减少(t=5.327,P=0.043),i NOS表达较对照组显著增加(t=7.335,P=0.004),而MR表达较对照组明显减少(t=5.634,P=0.016)。小檗碱组i NOS mRNA表达较对照组明显增加(t=7.827,P=0.035),MR、IL-10mRNA表达较对照组明显减少(t=6.923,P=0.039;t=8.135,P=0.026)。结论小檗碱可能通过改变Apc(Min/+)小鼠肠道息肉组织中巨噬细胞的分型,从而发挥抑制息肉生长的作用。 展开更多
关键词 小檗碱 apc(min/+)小鼠 肿瘤相关巨噬细胞 巨噬细胞分型
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