在RBS-1催化剂上环己酮肟气相Beckmann重排反应副产物的研究 被引量：5

1

作者 程时标 张树忠 +1 位作者 吴巍 闵恩泽 《石油学报（石油加工）》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第2期14-19,共6页

采用色谱-质谱联用仪分析鉴定了RBS-1催化剂上环己酮肟气相Beckmann重排反应的副产物。结果表明,在152.0 kPa、380℃反应条件下,环己酮肟发生气相Beckmann重排反应主反应的同时,伴随发生裂解、水解、醇解、加氢、脱氢、分解、氧化、热... 采用色谱-质谱联用仪分析鉴定了RBS-1催化剂上环己酮肟气相Beckmann重排反应的副产物。结果表明,在152.0 kPa、380℃反应条件下,环己酮肟发生气相Beckmann重排反应主反应的同时,伴随发生裂解、水解、醇解、加氢、脱氢、分解、氧化、热缩合和Mannich反应等多种副反应,生成种类繁多的副产物。其中大部分副产物会影响ε-己内酰胺产品质量。副产物中的乙基-ε-己内酰亚胺缩合物和四氢吖庚因-2-酮能通过水解或加氢反应生成目的产物ε-己内酰胺。 展开更多

关键词 Beckmann重排反应 RBS-1催化剂 副产物

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美拉德反应产物对肠道微生物影响的研究进展 被引量：7

2

作者 韩凯宁 董士远 +2 位作者 姚烨 杨宇鸿 靳卫亚 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第9期265-270,共6页

美拉德(Maillard)反应是食品加工、贮藏及烹饪过程中普遍存在的重要反应。Maillard反应会导致蛋白质或氨基酸的胃肠消化性下降,进而增加其进入大肠被肠道微生物发酵利用的可能性。本文主要综述Maillard反应产物对肠道微生物生长及其发... 美拉德(Maillard)反应是食品加工、贮藏及烹饪过程中普遍存在的重要反应。Maillard反应会导致蛋白质或氨基酸的胃肠消化性下降,进而增加其进入大肠被肠道微生物发酵利用的可能性。本文主要综述Maillard反应产物对肠道微生物生长及其发酵代谢产物形成等影响的研究进展,旨在为研究Maillard反应产物、肠道微生物与健康的关系提供参考。 展开更多

关键词 MAILLARD反应 肠道微生物 amadori重排产物 类黑精 益生元活性

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硝酸铵催化2,10-环氧蒎烷液相重排反应规律——溶剂效应

3

作者 詹小雄 李谦和 彭沙 《湖南师范大学自然科学学报》 EI CAS 北大核心 2006年第2期65-67,共3页

研究了溶剂对硝酸铵催化的2,10-环氧蒎烷液相重排反应的影响.重点考察了催化剂在不同溶剂中的溶解性及溶剂对重排产物分布的影响.结果表明:硝酸铵难溶于硝基甲烷、氯仿而易溶于DMF,溶剂的极性、酸碱性和形成氢键的特性对重排产物分布有... 研究了溶剂对硝酸铵催化的2,10-环氧蒎烷液相重排反应的影响.重点考察了催化剂在不同溶剂中的溶解性及溶剂对重排产物分布的影响.结果表明:硝酸铵难溶于硝基甲烷、氯仿而易溶于DMF,溶剂的极性、酸碱性和形成氢键的特性对重排产物分布有显著的影响. 展开更多

关键词 2 10-环氧蒎烷 液相重排 产物分布 溶剂效应

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保护法合成Amadori化合物的研究进展

4

作者 张峻松 李海燕 +1 位作者 朱智志 李孟华 《安徽农学通报》 2009年第6期18-19,111,共3页

本文综合了国内外对Amadori化合物的合成方法,重点对保护法进行了综述,对于单氨基单羧基的氨基酸可采用保护还原糖的方法,对于一些多氨基或多羧基的氨基酸应采用保护氨基酸的方法。

关键词 amadori化合物 MAILLARD反应 希夫碱 amadori重排

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一种环己酮肟气相重排生产己内酰胺的方法

5

《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第3期677-677,共1页

一种环己酮肟气相重排生产己内酰胺的方法，包括己内酰胺粗产品分离回收己内酰胺的方法及其己内酰胺制备方法中的应用，己内酰胺粗产品经脱水、脱轻质副产物后，进入脱重塔中分馏脱除较重副产物，脱重塔在绝对压力为0～0．5bar、塔釜温... 一种环己酮肟气相重排生产己内酰胺的方法，包括己内酰胺粗产品分离回收己内酰胺的方法及其己内酰胺制备方法中的应用，己内酰胺粗产品经脱水、脱轻质副产物后，进入脱重塔中分馏脱除较重副产物，脱重塔在绝对压力为0～0．5bar、塔釜温度为100-200℃的条件下操作，塔顶得到己内酰胺产品，塔釜出料为含有己内酰胺的较重副产物，将塔底出料引入强制蒸发单元，在较低温度下将己内酰胺蒸发出来，蒸发后的气相经冷凝后返回脱重塔中，蒸发后的残留液相为较重副产物排出装置。本发明提供的方法提高了己内酰胺的收率，同时减少了三废的量。 展开更多

关键词 己内酰胺 环己酮肟 气相 生产 重排 副产物 脱重塔 制备方法

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上海有机所在开环甾体天然产物Pinnigorgiols的合成研究中获进展

6

作者 新型 《化工新型材料》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期214-214,共1页

近期,上海有机所桂敬汉课题组完成了pinnigorgiols B和E的首次合成。受Kigoshi等人提出的aplysiasecosterol A生源合成的启发,研究人员设计出半频哪醇重排和酰基自由基环化的策略以进行三环双酮核心骨架结构的构建。以麦角甾醇为起始原... 近期,上海有机所桂敬汉课题组完成了pinnigorgiols B和E的首次合成。受Kigoshi等人提出的aplysiasecosterol A生源合成的启发,研究人员设计出半频哪醇重排和酰基自由基环化的策略以进行三环双酮核心骨架结构的构建。以麦角甾醇为起始原料,在引入9,11-双键后进行5,6-双键的双羟化反应,得到的三烯化合物通过烯烃选择性还原得到仅9,11-双键保留的产物,后者发生半频哪醇重排反应构建五并七元环结构。 展开更多

关键词 频哪醇重排 羟化反应 天然产物 麦角甾醇 自由基 骨架结构 起始原料 生源合成

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急性淋巴细胞白血病IgH与TCRγ基因重排模式的探讨

7

作者 李守新 王辨明 李崇渔 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1995年第2期212-214,共3页

急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblasticleukemia,ALL)IgH和TCRγ基因重排产生了特异性的肿瘤标记,其重排模式反映了白血病细胞克隆形成情况。本研究应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术,体外扩增检测了30例ALL病人Ig... 急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblasticleukemia,ALL)IgH和TCRγ基因重排产生了特异性的肿瘤标记,其重排模式反映了白血病细胞克隆形成情况。本研究应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术,体外扩增检测了30例ALL病人IgH和TCRγ基因重排,试图在基因水平上观察和分析其重排模式。 展开更多

关键词 急性淋巴细胞白血病 基因重排 TCRΓ 特异性 免疫表型 白血病细胞 PCR扩增产物 单克隆 PCR检测 形态学诊断

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美拉德反应对肉类风味物质形成影响的研究进展 被引量：2

8

作者 于梓洇 吴冬蕊 +3 位作者 孔佑梦 李玲玉 刘玲 沈昳潇 《中国调味品》 CAS 北大核心 2024年第12期209-214,共6页

美拉德反应(MR)是一种广泛存在于肉类加工和肉制品储藏等领域的一种复杂反应。其反应底物、中间产物和反应途径的差异性可以使肉制品产生不同的风味物质,因此对于不同肉及肉制品风味的形成具有非常重要的意义。文章主要从MR途径、MR中... 美拉德反应(MR)是一种广泛存在于肉类加工和肉制品储藏等领域的一种复杂反应。其反应底物、中间产物和反应途径的差异性可以使肉制品产生不同的风味物质,因此对于不同肉及肉制品风味的形成具有非常重要的意义。文章主要从MR途径、MR中氨基酸种类、脂类与MR中间产物的相互作用这3个方面对不同肉类风味形成的影响进行总结分析,通过其反应过程中所存在的差异以及产生的可以用于改善食品风味的物质,明确不同方面的MR参与肉制品加工过程中风味形成的机制,为应用MR提高和改善肉及肉制品的风味提供一定的参考。 展开更多

关键词 美拉德反应 肉类 风味 amadori重排 氨基酸

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美拉德反应中间体对卷烟评吸品质的影响及其风味受控形成研究 被引量：18

9

作者 甘学文 王光耀 +6 位作者 邓仕彬 张春晖 崔和平 刘曙光 于静洋 成涛 张晓鸣 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2017年第6期46-52,共7页

完全美拉德反应产物(MRPs)是构成烟草特征香味的重要来源,但普遍存在易逸失、不稳定的问题。以果糖为原料,制备了6种Heyns重排产物(HRP)类美拉德反应中间体,通过卷烟感官评吸筛选发现,果糖和苯丙氨酸反应得到的中间体2-脱氧-2-L-苯丙氨... 完全美拉德反应产物(MRPs)是构成烟草特征香味的重要来源,但普遍存在易逸失、不稳定的问题。以果糖为原料,制备了6种Heyns重排产物(HRP)类美拉德反应中间体,通过卷烟感官评吸筛选发现,果糖和苯丙氨酸反应得到的中间体2-脱氧-2-L-苯丙氨酸-D-葡萄糖具有最理想的加香效果。比较了苯丙氨酸—果糖的完全美拉德反应产物溶液和相应中间体HRP溶液的后续热加工稳定性,随着热处理时间延长,完全美拉德反应产物的香气降低了74.7%,而中间体HRP溶液挥发性风味成分增加为未加热的12.1倍,具有加工风味受控形成的特点,从而很好地克服了完全美拉德反应产物在食品、烟草加工过程中的加香缺陷。 展开更多

关键词 Heyns重排产物 感官评吸 风味受控形成

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脂肪醛对“半胱氨酸-木糖”美拉德反应进程及肉香物质形成的影响 被引量：9

10

作者 赵健 赵梦瑶 +4 位作者 曹长春 甄大卫 王佳欣 李力 谢建春 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第20期63-69,共7页

为研究脂肪醛对"半胱氨酸-木糖"美拉德反应进程及肉香物质形成的影响,设计"半胱氨酸-木糖"及"半胱氨酸-木糖"中分别添加己醛、反-2-庚烯醛、反,反-2,4-癸二烯醛的4个反应体系,在温度90℃、p H 5.5条件下... 为研究脂肪醛对"半胱氨酸-木糖"美拉德反应进程及肉香物质形成的影响,设计"半胱氨酸-木糖"及"半胱氨酸-木糖"中分别添加己醛、反-2-庚烯醛、反,反-2,4-癸二烯醛的4个反应体系,在温度90℃、p H 5.5条件下反应5 h,液相色谱-蒸发光散射检测监测反应原料(半胱氨酸、木糖)和初期反应中间体(半胱氨酸的Amadori重排化合物(Cys-Amadori)、2-木糖化噻唑烷-4-羧酸)随反应时间的浓度变化,同时还监测反应液p H值及波长294、420 nm处紫外-可见吸光度随反应时间的变化,并且采用固相微萃取-气相色谱-质谱联机分析比较3 h反应产物的挥发性风味物质组成。添加3种脂肪醛后,形成的Cys-Amadori重排化合物、2-木糖化噻唑烷-4-羧酸中间体浓度均下降,表明均对"半胱氨酸-木糖"初期美拉德反应有抑制作用,且相比之下抑制强弱为反-2-庚烯醛>反,反-2,4-癸二烯醛>己醛。但添加己醛时,反应液于波长294、420 nm处的吸光度下降,表明中、末期美拉德反应也受到抑制;而加入反-2-庚烯醛、反,反-2,4-癸二烯醛时,反应液于波长294、420 nm处的吸光度却增加,表明中、末期美拉德反应被促进,且相比之下反,反-2,4-癸二烯醛的促进作用大于反-2-庚烯醛。另外,比较挥发性风味组成发现,加入反-2-庚烯醛、反,反-2,4-癸二烯醛的体系,含硫化合物的总量增多,检测到醛参与美拉德反应或醛自身受美拉德反应影响而形成的多种带烷基侧链的含硫化合物和呋喃化合物如2-己基噻吩和2-丙基呋喃。 展开更多

关键词 脂质氧化 美拉德反应 肉香味 己醛 反-2-庚烯醛 反 反-2 4-癸二烯醛 amadori重排化合物

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烟草花蕾酶解基底高效制备美拉德反应中间体研究 被引量：6

11

作者 孙振春 杨慧 +4 位作者 瞿方 林叶春 张长云 龙勇 苏贤坤 《中国烟草科学》 CSCD 北大核心 2022年第4期96-103,共8页

美拉德反应中间体Amadori重排产物(ARP)作为烟草重要潜香物,具有常温下化学性质稳定,加热后可快速形成新鲜风味的特性,是性能优异的潜在烟用香料。为了获得产率高、能明显改善烟香品质的ARP产品,本研究以烟草花蕾为原料制备烟草花蕾酶解... 美拉德反应中间体Amadori重排产物(ARP)作为烟草重要潜香物,具有常温下化学性质稳定,加热后可快速形成新鲜风味的特性,是性能优异的潜在烟用香料。为了获得产率高、能明显改善烟香品质的ARP产品,本研究以烟草花蕾为原料制备烟草花蕾酶解液,以此为溶剂,在控温真空条件下补充脯氨酸和葡萄糖以促进脯氨酸-葡萄糖ARP的合成。结果表明,烟草花蕾酶解物作为反应溶剂在90℃,25 mbar条件下反应120 min获得的ARP产率较水溶液反应体系由39.91%提高至92.20%,实现了烟草花蕾脯氨酸-葡萄糖ARP的高效制备;化学反应动力学分析表明,烟草花蕾酶解液体系制备ARP反应活化能为14.64 kJ/mol,低于水溶液制备体系(25.68 kJ/mol),合成更易进行。卷烟加香感官评吸结果表明,烟草花蕾基ARP能有效改善烟气品质,提高香吃味。 展开更多

关键词 amadori重排产物 烟草花蕾 美拉德反应 化学反应动力学

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外源美拉德反应中间体在卷烟加工中的含量变化及致香效果 被引量：6

12

作者 甘学文 王光耀 +6 位作者 邓仕彬 张春晖 崔和平 刘曙光 于静洋 成涛 张晓鸣 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2017年第5期77-82,共6页

为研究美拉德反应中间体在卷烟中的作用,以果糖和苯丙氨酸为原料,制备Heyns重排产物(HRP)类中间体,并添加至烟叶中。研究烟叶外源HRP的分析方法,确定外源HRP的最佳萃取条件:甲醇为萃取剂,液料比201(mL/g),萃取温度25℃,萃取时间40min... 为研究美拉德反应中间体在卷烟中的作用,以果糖和苯丙氨酸为原料,制备Heyns重排产物(HRP)类中间体,并添加至烟叶中。研究烟叶外源HRP的分析方法,确定外源HRP的最佳萃取条件:甲醇为萃取剂,液料比201(mL/g),萃取温度25℃,萃取时间40min,该条件下萃取效率能够达到95%。利用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法对萃取液中的HRP进行定量分析。考察贮叶、切丝及烘丝过程中外源HRP的稳定性,研究其含量在加工过程的变化规律。结果表明,贮叶、切丝工序中外源HRP损失较小,而烘丝工序中HRP含量降低了23.6%。将烘后的烟丝制成卷烟,利用气质联用技术(GC-MS)分析该中间体在卷烟燃烧过程中卷烟香气成分及含量的变化情况,证实了果糖-苯丙氨酸HRP具有增强卷烟香气的作用。 展开更多

关键词 Heyns重排产物 液相色谱-串联质谱法 烟气成分分析

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1-L-亮氨酸-1-脱氧-D-果糖和1-L-异亮氨酸-1-脱氧-D-果糖的热裂解分析 被引量：11

13

作者 毛多斌 鞠华波 +1 位作者 牟定荣 白晓莉 《中国烟草学报》 EI CAS CSCD 2010年第6期1-9,共9页

采用热重-差热法对1-L-亮氨酸-1-脱氧-D-果糖(Ⅰ)和1-L-异亮氨酸-1-脱氧-D-果糖(Ⅱ)的热失重和热裂解温度进行了研究,通过在线裂解GC-MS联用技术分别对(Ⅰ)和(Ⅱ)在350℃、450℃、550℃、650℃、750℃和850℃条件下的裂解产物进行了鉴... 采用热重-差热法对1-L-亮氨酸-1-脱氧-D-果糖(Ⅰ)和1-L-异亮氨酸-1-脱氧-D-果糖(Ⅱ)的热失重和热裂解温度进行了研究,通过在线裂解GC-MS联用技术分别对(Ⅰ)和(Ⅱ)在350℃、450℃、550℃、650℃、750℃和850℃条件下的裂解产物进行了鉴定。研究结果表明2种Amadori化合物的的热失重曲线相似,(Ⅰ)的裂解温度为144.67℃,(Ⅱ)的裂解温度为164.26℃,600℃时(Ⅰ)和(Ⅱ)失重约80%;二者裂解产物主要为吡嗪类、吡啶类、吡咯类、喹啉类和呋喃类等杂环化合物,芳香族化合物以及醛类和酮类,其中以吡嗪类为主;裂解产物的数量随着裂解温度的升高而增多,(Ⅰ)的裂解产物数量与(Ⅱ)的裂解产物数量相当。对(Ⅰ)和(Ⅱ)的主要裂解产物形成途径进行了初步探讨,可为研究其在卷烟燃烧过程中的转化行为提供参考。 展开更多

关键词 amadori化合物 在线裂解气相色谱-质谱 热重-差热 热裂解产物

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高效液相色谱法研究双酚A二烯丙基醚的转位反应 被引量：2

14

作者 李荣强 张燕 +4 位作者 孙威 王凯 张海金 孙胜男 高科 《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1385-1389,共5页

用工业原料双酚A和3-氯丙烯制备出纯度高于90%的双酚A二烯丙基醚,利用热重分析法确定了双酚A二烯丙基醚发生Claisen﹡转位反应的温度为200℃左右。利用高压液相色谱技术,在不同温度条件下,分别考查了二烯丙基双酚A的产品含量、外观与反... 用工业原料双酚A和3-氯丙烯制备出纯度高于90%的双酚A二烯丙基醚,利用热重分析法确定了双酚A二烯丙基醚发生Claisen﹡转位反应的温度为200℃左右。利用高压液相色谱技术,在不同温度条件下,分别考查了二烯丙基双酚A的产品含量、外观与反应时间的关系。结果表明,在190℃、200℃、210℃条件下,二烯丙基双酚A的最高含量分别为56.2%、59.7%、57.5%,最佳反应时间分别为270 mins、130 mins、90 mins。200℃时产品色泽为琥珀色,其余产品颜色发黑。二烯丙基双酚A的形成不是一步完成的,经过了中间产物的形成及转化过程。 展开更多

关键词 克莱森重排 二烯丙基双酚A 高压液相色谱 中间产物

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Maillard反应体系中亚硫酸根对2-氨基-2-脱氧葡萄糖降解的影响 被引量：2

15

作者 于淑娟 马菲 徐献兵 《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第10期34-39,46,共7页

以果糖与铵盐在Maillard初级反应阶段产生的一种典型的海恩氏(Heyns)重排产物——2-氨基-2-脱氧葡萄糖为初始美拉德反应物,分别加入不同量的亚硫酸钠,在110℃下反应0.5、1.0、2.0、3.0和4.0h;通过紫外-可见分光光度法分析了亚硫酸根对... 以果糖与铵盐在Maillard初级反应阶段产生的一种典型的海恩氏(Heyns)重排产物——2-氨基-2-脱氧葡萄糖为初始美拉德反应物,分别加入不同量的亚硫酸钠,在110℃下反应0.5、1.0、2.0、3.0和4.0h;通过紫外-可见分光光度法分析了亚硫酸根对体系褐变程度的影响,通过高效液相色谱和阴离子交换色谱分别了亚硫酸根对体系中丙酮醛及2-氨基-2-脱氧葡萄糖等还原糖含量的影响.结果表明:亚硫酸根可显著抑制反应体系的褐变,促进裂解产物丙酮醛的产生;亚硫酸根对2-氨基-2-脱氧葡萄糖的降解没有抑制作用;体系中少量亚硫酸根的存在有利于葡萄糖的生成,过量亚硫酸根可促进体系中葡萄糖的消耗;亚硫酸根对体系中果糖含量的影响规律与对葡萄糖的基本一致. 展开更多

关键词 美拉德反应 亚硫酸钠 2-氨基-2-脱氧葡萄糖 Heyns重排产物 降解 丙酮醛

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手性4-膦酸二酯基-2-(5H)呋喃酮的合成

16

作者 李学强 黄敏 陈庆华 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1999年第S1期124-124,共1页

关键词 呋喃酮 手性 不对称合成 有机磷化合物 膦酸 酯基 亚磷酸 天然产物 重排反应 绝对构型

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乙硼烷对红霉素类衍生物亚胺醚的还原 被引量：4

17

作者 谭春燕 廖联安 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1999年第S1期531-531,共1页

关键词 乙硼烷 红霉素类 衍生物 重排产物 金属硼氢化物 硼氢化钠 还原性 四氢呋喃 胺醚 阿齐霉素

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果糖嗪的合成及抗衰老评价

18

作者 姜丁宁 李悦青 +3 位作者 郭修晗 李广哲 王世盛 赵伟杰 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第8期1644-1649,1659,共7页

以D-葡萄糖为原料,通过Amadori重排、异丙叉基保护、Pd/C催化加氢脱苄基和氧化芳构化串联反应、脱异丙叉保护4步反应得到果糖嗪,HPLC纯度达96%。使用NMR、MS、X射线单晶衍射技术对关键中间体异丙叉基果糖嗪的结构进行了表征。使用噻唑蓝... 以D-葡萄糖为原料,通过Amadori重排、异丙叉基保护、Pd/C催化加氢脱苄基和氧化芳构化串联反应、脱异丙叉保护4步反应得到果糖嗪,HPLC纯度达96%。使用NMR、MS、X射线单晶衍射技术对关键中间体异丙叉基果糖嗪的结构进行了表征。使用噻唑蓝(MTT)法测定果糖嗪对人胚肺二倍体成纤维细胞(2BS细胞)活力的影响,筛选获得最佳培养浓度为1μmol/L,可以上调细胞活力,为对照组的125%。采用细胞衰老β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色法对果糖嗪的抗衰老活性进行了评价,以1μmol/L果糖嗪连续传代培养衰老早期细胞和衰老中期细胞,其蓝染率比对照组分别降低了14%和19%。实验表明,果糖嗪对衰老早期或中期的2BS细胞都有抗衰老活性。 展开更多

关键词 果糖嗪 amadori重排 Pd/C催化脱苄基 Pd/C催化氧化芳构化 抗衰老 医药原料

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转座酶Tn3体外定向进化和酶活力提高方法的建立

19

作者 宋尚桥 马围围 +5 位作者 李晓剑 曾素先 李鑫 严瑾 孙翠翠 黎宗强 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第4期984-991,共8页

试验旨在对转座酶Tn3的酶活力提高和进化进行初步探索。采用PCR扩增、限制性酶切、DNA连接、重组质粒的转化、易错PCR的优化及构建、D值的测定、酶切鉴定方法对转座酶Tn3进行体外定向进化研究。结果表明,用SacⅠ和XbaⅠ对重组质粒进行酶... 试验旨在对转座酶Tn3的酶活力提高和进化进行初步探索。采用PCR扩增、限制性酶切、DNA连接、重组质粒的转化、易错PCR的优化及构建、D值的测定、酶切鉴定方法对转座酶Tn3进行体外定向进化研究。结果表明,用SacⅠ和XbaⅠ对重组质粒进行酶切,得到了450 bp的酶切产物;在含有卡那霉素的LB培养基培养菌体24 h,测量其D值,经过3轮重复性的研究,其D值和增殖能力从开始的0上升至0.18、0.42、0.60,说明Tn3活性有了明显的提高;将筛选得到的进化型重组质粒进行质粒抽提,用内切酶XhoⅠ和XbaⅠ进行双酶切鉴定,发现进化型重组质粒酶切产物条带相对较小;之后对进化型重组质粒进行基因测序分析,发现Tn 3基因序列的多个位点发生了突变以及Tn3-Gal4靶向序列中间的CCR5-delta32基因被切除。说明成功完成了转座酶Tn 3基因的克隆;确立了易错PCR的最优反应体系;选择卡那霉素作为筛选标记对进化型Tn3进行筛选,初步验证利用含有卡那霉素的LB培养基和对菌液D值的测定来进行筛选是可行的;Tn 3基因序列突变和基因敲除,说明不论是在功能上还是在基因序列上Tn3都发生了改变,这种变化正是向着需要的方向进行的。 展开更多

关键词 Tn3 易错PCR DNA重排 定向进化 酶切产物 基因序列

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三甲苯草酮溶液稳定性研究 被引量：1

20

作者 石凯威 王琴 +1 位作者 黄伟 吴进龙 《农药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1047-1053,共7页

初步研究了三甲苯草酮在不同溶剂和不同温度下的溶液稳定性。三甲苯草酮标样经乙腈、甲醇和V (乙腈):V (2%乙酸水溶液)=80:20的混合溶剂溶解后,分别在25℃、40℃和60℃条件下恒温水浴,24 h内多点取样,样品经超高效液相色谱-串联质谱仪(U... 初步研究了三甲苯草酮在不同溶剂和不同温度下的溶液稳定性。三甲苯草酮标样经乙腈、甲醇和V (乙腈):V (2%乙酸水溶液)=80:20的混合溶剂溶解后,分别在25℃、40℃和60℃条件下恒温水浴,24 h内多点取样,样品经超高效液相色谱-串联质谱仪(UPLC-MS/MS)定性分析,高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-DAD)定量分析,通过分析三甲苯草酮异构体比例和噁唑重排产物转化率,对溶液的稳定性进行了评估。结果表明:烯醇式E-三甲苯草酮和Z-三甲苯草酮存在异构化现象,其中前者为优势构象;三甲苯草酮在溶液中的稳定性与溶剂种类和温度密切相关。本研究中,在极性较低的乙腈溶剂中三甲苯草酮稳定性较好;在极性较高的甲醇和V (乙腈):V (2%乙酸水溶液)=80:20混合溶剂中,存在E-三甲苯草酮向Z-三甲苯草酮转化现象,并很快达到平衡,同时可经贝克曼重排生成1,3-噁唑重排产物,且高温和高极性溶剂都有利于噁唑重排产物的生成。研究表明,极性较低的乙腈适宜作为三甲苯草酮的储备液溶剂和流动相,且低温环境有利于提高三甲苯草酮溶液的稳定性。 展开更多

关键词 三甲苯草酮 异构体 稳定性 贝克曼重排 噁唑重排产物 超高效液相色谱-串联质谱

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