小檗碱对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响 被引量：18

1

作者 杨玮 徐道华 +3 位作者 周晨慧 刘钰瑜 戴滨 黄洪新 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1560-1563,共4页

目的探讨小檗碱对体外培养SD大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。方法应用MTT法检测不同浓度小檗碱对骨髓间充质干细胞增殖情况的影响,以对硝基苯磷酸盐法检测碱性磷酸酶活性,等离子体直读光谱仪检测钙沉积,放射免疫法检测骨钙素含量... 目的探讨小檗碱对体外培养SD大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。方法应用MTT法检测不同浓度小檗碱对骨髓间充质干细胞增殖情况的影响,以对硝基苯磷酸盐法检测碱性磷酸酶活性,等离子体直读光谱仪检测钙沉积,放射免疫法检测骨钙素含量,茜素红法染色观察钙化结节形成。结果小檗碱在1×10-9～1×10-5mol.L-1浓度范围对骨髓间充质干细胞增殖无明显影响。小檗碱浓度为1×10-7和1×10-6mol.L-1培养3～7d能明显提高骨髓间充质干细胞内碱性磷酸酶活性。小檗碱在1×10-7～1×10-5mol.L-1浓度范围培养22d能明显促进骨髓间充质干细胞骨钙素合成和分泌。小檗碱在浓度为1×10-6和1×10-5mol.L-1培养28d时钙盐沉积量和钙化结节形成增加。结论小檗碱可促进骨髓间充质干细胞向成骨细胞方向分化,增强骨钙化。这可能为其防治骨质疏松的机制之一。 展开更多

关键词 小檗碱 骨髓间充质干细胞 成骨分化 碱性磷酸酶 骨钙素 钙盐

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阿魏酸对体外培养的成骨细胞增殖、分化和矿化功能的影响 被引量：13

2

作者 高建林 陈珺 +4 位作者 李兵 卢丽 杨国柱 陆幸妍 李青南 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1479-1480,共2页

阿魏酸化学名称为3-甲氧基4-羟基丙烯酸,是当归等抗骨质疏松中药复方制剂的组方中药所含的一种水溶性单体成分,是其主要活性物质之一,具有降低胆固醇、抗氧化、抗血小板聚集等功能.目前阿魏酸对心肌细胞、淋巴细胞活性影响的研究已有报... 阿魏酸化学名称为3-甲氧基4-羟基丙烯酸,是当归等抗骨质疏松中药复方制剂的组方中药所含的一种水溶性单体成分,是其主要活性物质之一,具有降低胆固醇、抗氧化、抗血小板聚集等功能.目前阿魏酸对心肌细胞、淋巴细胞活性影响的研究已有报道,而其对成骨细胞活性影响的研究较为少见. 展开更多

关键词 阿魏酸 成骨细胞 细胞增殖 细胞分化 碱性磷酸酶 成骨基因

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黄芩苷通过Wnt/β-catenin信号通路对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的促进作用 被引量：29

3

作者 李晨睿 孟志远 +4 位作者 牛银波 翟远坤 潘亚磊 谢丽 梅其炳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期919-924,共6页

目的研究黄芩苷（baicalin）对大鼠骨髓间充质干细胞（rat bone marrow derived mesenchymal stem cells,rBMSC）成骨分化过程中Wnt/β-catenin信号通路的影响.方法采用贴壁筛选法体外培养rBMSC,给予黄芩苷3、5、7d后,比较药物处理组与... 目的研究黄芩苷（baicalin）对大鼠骨髓间充质干细胞（rat bone marrow derived mesenchymal stem cells,rBMSC）成骨分化过程中Wnt/β-catenin信号通路的影响.方法采用贴壁筛选法体外培养rBMSC,给予黄芩苷3、5、7d后,比较药物处理组与对照组之间碱性磷酸酶（ALP）的活性.同时检测给予黄芩苷对碱性磷酸酶阳性克隆和矿化结节形成的影响.提取总mRNA和总蛋白,用实时荧光定量PCR检测黄芩苷对Wnt10a、GSK-3β、β-catenin以及LEF1mRNA水平的影响.免疫印迹检测药物处理对β-catenin以及Runx2蛋白表达量的影响.结果黄芩苷明显提高ALP的活性.10μmol·L-1浓度的黄芩苷还可增加碱性磷酸酶克隆数和钙化结节的形成.黄芩苷还可提高Wnt10a、β-catenin、GSK-3β、LEF1以及osteocalcin的mRNA水平,并提高β-catenin和Runx2的蛋白表达量.结论黄芩苷在0.1～50μmol·L^-1的给药浓度下可促进rBMSC的成骨分化成熟,Wnt/β-cate-nin信号可能参与调控rBMSC的成骨分化. 展开更多

关键词 黄芩苷 大鼠骨髓间充质干细胞 成骨分化 WNT/Β-CATENIN信号通路 碱性磷酸酶

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合成成骨生长肽对大鼠骨髓基质干细胞的促成骨作用 被引量：12

4

作者 徐杨 施德源 +1 位作者 陈统一 崔大敷 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期309-314,共6页

目的研究合成成骨生长肽(sOGP)对体外培养的大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)的作用,并与经典的成骨诱导剂地塞米松相对比。方法取大鼠股骨骨髓,贴壁法分离骨髓基质干细胞进行体外培养,加入不同浓度的sOGP,观察细胞形态变化,细胞增殖率,细胞... 目的研究合成成骨生长肽(sOGP)对体外培养的大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)的作用,并与经典的成骨诱导剂地塞米松相对比。方法取大鼠股骨骨髓,贴壁法分离骨髓基质干细胞进行体外培养,加入不同浓度的sOGP,观察细胞形态变化,细胞增殖率,细胞内碱性磷酸酶(ALP)的表达,RT-PCR法检测3种主要成骨标志物(ALP、Ⅰ型胶原、骨钙素)的表达,组织化学染色检测碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原的表达及钙质的沉积并进行图像分析。结果sOGP对BMSCs增殖的影响随浓度不同呈现双向作用。sOGP和地塞米松在mRNA和蛋白水平均能促进各成骨标志物的表达,定量分析结果显示,sOGP在10-9mol/L浓度组促成骨的作用最强,明显高于对照组和地塞米松组。结论sOGP能明显促进大鼠BMSCs向成骨方向转化。这种促成骨能力与其浓度密切相关,以10-9mol/L浓度下促成骨能力最强。 展开更多

关键词 成骨生长肽 骨髓基质干细胞 成骨

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人重组骨形成蛋白-1对牙髓细胞生物学效应的研究 被引量：4

5

作者 苏勤 何国华 +2 位作者 孙叶芳 陆怀秀 王胜朝 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第4期300-302,I016,共4页

通过细胞培养技术、噻唑盐比色测定（ＭＴＴ）、酶动力学方法和放射免疫技术，了解人重组骨形成蛋白－１（ｒｈＯＰ－１）对体外培养的人牙髓细胞增殖、碱性磷酸酶活性及骨钙素表达的影响。结果表明，ｒｈＯＰ－１可促进牙髓细胞增殖，... 通过细胞培养技术、噻唑盐比色测定（ＭＴＴ）、酶动力学方法和放射免疫技术，了解人重组骨形成蛋白－１（ｒｈＯＰ－１）对体外培养的人牙髓细胞增殖、碱性磷酸酶活性及骨钙素表达的影响。结果表明，ｒｈＯＰ－１可促进牙髓细胞增殖，提高牙髓碱性磷酸酶活性及骨钙素的表达，在本实验剂量范围内呈浓度依赖关系，具有诱导牙髓细胞向成骨方向转化的趋势。 展开更多

关键词 rhOP-1 牙髓细胞 碱性磷酸酶 骨钙素 细胞增殖

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成骨生长肽对不同血清浓度下OPG^(-/-)小鼠骨髓基质细胞增殖和分化作用 被引量：4

6

作者 郭常军 费琴明 +2 位作者 张键 陈统一 崔大敷 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期278-282,共5页

目的研究合成成骨生长肽(synthetic osteogenic growth peptide,sOGP)对在不同血清浓度条件下OPG-/-小鼠骨髓基质细胞(bone marrow derived stroma cells,BMSCs)的增殖和分化作用。方法取OPG-/-小鼠股骨,分离骨髓基质细胞进行体外培养... 目的研究合成成骨生长肽(synthetic osteogenic growth peptide,sOGP)对在不同血清浓度条件下OPG-/-小鼠骨髓基质细胞(bone marrow derived stroma cells,BMSCs)的增殖和分化作用。方法取OPG-/-小鼠股骨,分离骨髓基质细胞进行体外培养。在各自培养条件下分为实验组(OGP组)、空白对照组(CON组)和阳性对照组(bone morphogenetic protein-2 group,BMP-2组),倒置相差显微镜下观察细胞形态变化、MTT法测定细胞增殖率、PNPP法测定碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的表达。结果OGP在含10%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)的LG-DMEM和矿化液的培养条件下,对OPG-/-小鼠BMSCs起到增殖作用,在第3、5天均高于CON组和BMP-2组(P<0.05);OGP组对ALP表达的影响与CON组相似,而与BMP-2组存在较大差异,BMP-2组在所有不同血清浓度条件下的第3、5天ALP活性均高于CON组和OGP组(P<0.05)。结论OGP组对OPG-/-小鼠BMSCs的增殖作用要求较高血清浓度的体外培养条件,但在ALP的分化活性方面弱于BMP-2组。 展开更多

关键词 成骨生长肽 OPG-/-小鼠 骨髓基质细胞 增殖 分化

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内毒素对重组人成骨蛋白-1诱导人牙髓细胞活性的影响 被引量：4

7

作者 苏勤 何国华 +1 位作者 张郁 李强 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期116-118,共3页

目的：研究具核梭杆菌的内毒素（ＬＰＳ）对重组人成骨蛋白－１（ｒｈＯＰ－１）诱导牙髓细胞增殖、分化的影响。方法：采用噻唑盐比色测定（ＭＴＴ）、酶动力学方法和放射免疫技术。结果：在较低浓度ＬＰＳ作用时，可协同增加ｒｈＯＰ... 目的：研究具核梭杆菌的内毒素（ＬＰＳ）对重组人成骨蛋白－１（ｒｈＯＰ－１）诱导牙髓细胞增殖、分化的影响。方法：采用噻唑盐比色测定（ＭＴＴ）、酶动力学方法和放射免疫技术。结果：在较低浓度ＬＰＳ作用时，可协同增加ｒｈＯＰ－１对牙髓细胞增殖和碱性磷酸酶（ＡＬＰａｓｅ）活性，但对骨钙素（ＢＧＰ）无明显影响，而高浓度ＬＰＳ则起抑制作用。结论：提示适度的ＬＰＳ在牙髓对龋病的防御反应过程中起着一定调节作用。 展开更多

关键词 脂多糖 rhOP-1 牙髓细胞 内毒素 龋齿

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低氧对成骨生长肽诱导的小鼠间充质干细胞成骨分化的影响 被引量：4

8

作者 张磊 龚跃昆 +1 位作者 赵学凌 周厚俊 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1380-1385,共6页

目的探讨低氧对成骨生长肽(osteogenic growth peptide,OGP)诱导的小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖与成骨分化的影响。方法将第三代小鼠BMSCs随机分为四组:对照组(A组,常氧条件下培养);1%O2组(B组,... 目的探讨低氧对成骨生长肽(osteogenic growth peptide,OGP)诱导的小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖与成骨分化的影响。方法将第三代小鼠BMSCs随机分为四组:对照组(A组,常氧条件下培养);1%O2组(B组,1%O2条件下培养);OGP组(C组,常氧条件下添加OGP培养)、1%O2联合OGP组(D组,1%O2条件下添加OGP)。分别于培养后1天、2天、3天、4天收集细胞,噻唑蓝(Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)比色法观察BMSCs增殖能力;培养7、14天后收集细胞,可见光比色法检测细胞碱性磷酸酶活性(alkaline phosphatase,ALP);培养1天后收集细胞,ELISA法检测低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor,HIF-1α)表达,培养3、7天后收集细胞,实时荧光定量PCR检测RUNX2、Osterix表达。结果 MTT结果显示,与C组相比,在培养第2、3、4天D组能明显促进BMSCs增殖(P<0.05)。与C组相比,在培养第7、14天D组能明显上调ALP表达(P<0.05)。与C组相比,在培养第3、7天D组能明显上调RUNX2、Osterix信使RNA表达(P<0.05)。在培养后1天,A组及C组未能检测到HIF-1α蛋白,B组与D组HIF-1α表达明显增加(P<0.001)。结论低氧明显增强了OGP促进BMSCs增殖及成骨分化的作用。 展开更多

关键词 低氧 成骨生长肽 骨髓间充质干细胞 成骨分化

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成骨生长肽调节鼠胚颅盖骨成骨细胞样细胞酶活性的观察 被引量：4

9

作者 李群 王智兴 朱雅萍 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2000年第4期16-19,共4页

目的　观察成骨生长肽 ( Osteogenic growth peptide,简称 OGP)对 SD大鼠鼠胚颅盖骨成骨细胞样细胞酶活性的影响。方法　无菌条件下培养鼠胚颅盖骨成骨细胞样细胞 ,分为不加 OGP的对照组和加 OGP的用药组 ,用药组在 10 -12 M～ 10 -8M ... 目的　观察成骨生长肽 ( Osteogenic growth peptide,简称 OGP)对 SD大鼠鼠胚颅盖骨成骨细胞样细胞酶活性的影响。方法　无菌条件下培养鼠胚颅盖骨成骨细胞样细胞 ,分为不加 OGP的对照组和加 OGP的用药组 ,用药组在 10 -12 M～ 10 -8M OGP浓度范围内 ,再分为三组 (分别为 OGP浓度10 -12 M、10 -10 M、10 -8M) ,收集以上四组细胞及细胞培养液 ,测定它们的碱性磷酸酶及酸性磷酸酶活性。结果　用药组的碱性磷酸酶活性均显著地高于对照组 ( P<0 .0 1～ 0 .0 5,用药组 OGP10 -8M浓度、培养7天的细胞培养液中碱性磷酸酶活性为 0 .82± 0 .16U/ L,而对照组同样条件活性为 0 .2 3± 0 .10 U/ L) ,且随着 OGP浓度的升高碱性磷酸酶活性也升高 ,而酸性磷酸酶用药组与对照组无显著差异。 展开更多

关键词 成骨生长肽 成骨细胞样细胞 碱性磷酸酶

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成骨生长肽对钛表面人牙周膜成纤维细胞增殖分化影响的研究 被引量：3

10

作者 周雯雯 王璐 徐凌 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期873-876,共4页

目的:研究成骨生长肽(Osteogenic growth peptide,OGP)对人牙周膜成纤维细胞(Periodontal ligament cells,PDLCs)在钛金属表面增殖分化的影响。方法:将纯钛试件放在12孔培养板内,取生长良好的第五代人牙周膜成纤维细胞接种在试件表面,... 目的:研究成骨生长肽(Osteogenic growth peptide,OGP)对人牙周膜成纤维细胞(Periodontal ligament cells,PDLCs)在钛金属表面增殖分化的影响。方法:将纯钛试件放在12孔培养板内,取生长良好的第五代人牙周膜成纤维细胞接种在试件表面,加入不同浓度的OGP(10-11～10-7mol/L),分别在接种后1、3、5、7d应用MTT法检测细胞增殖;接种后3、7、10d应用酶联免疫法检测细胞内碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)活性的表达。结果:OGP在该浓度范围内时,对钛表面的人牙周膜成纤维细胞的增殖率有明显的促进作用(P<0.05),并且能促进细胞内ALP表达活性(P<0.05),最佳作用浓度为10-9mol/L。结论:OGP可促进钛片表面人牙周膜成纤维细胞的增殖活性,同时可以增强细胞碱性磷酸酶表达的活性,提示OGP在口腔种植领域中具有良好的应用前景。 展开更多

关键词 成骨生长肽 人牙周膜成纤维细胞 细胞增殖 碱性磷酸酶

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成骨生长肽对人牙周膜细胞增殖和总蛋白含量的影响 被引量：3

11

作者 徐凌 黄姣 向学熔 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期420-423,共4页

目的:研究成骨生长肽(Osteogenic growth peptide,OGP)对体外培养的人牙周膜细胞增殖和细胞总蛋白含量的影响。方法:在体外培养的人牙周膜细胞中加入不同浓度的OGP(10-11～10-7mol/L),用MTT法检测细胞的增殖率;考马斯亮蓝染色法检测细... 目的:研究成骨生长肽(Osteogenic growth peptide,OGP)对体外培养的人牙周膜细胞增殖和细胞总蛋白含量的影响。方法:在体外培养的人牙周膜细胞中加入不同浓度的OGP(10-11～10-7mol/L),用MTT法检测细胞的增殖率;考马斯亮蓝染色法检测细胞内总蛋白含量的变化。结果:OGP在该浓度范围内时,对人牙周膜细胞的增殖率有明显的促进作用(P<0.05),并且在该浓度范围内时,能明显增加人牙周膜细胞总蛋白的合成(P<0.05),最佳作用浓度为10-9mol/L。结论:OGP可促进人牙周膜细胞的增殖活性,同时可以增强细胞总蛋白的合成,提示OGP在牙周组织再生领域中具有良好的应用前景。 展开更多

关键词 成骨生长肽 人牙周膜细胞 细胞增殖 总蛋白含量

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成骨生长肽促成骨作用的研究进展 被引量：2

12

作者 陈晓 罗贝尔 苏佳灿 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1565-1568,共4页

成骨生长肽(OGP)具有促成骨作用,具有较大的潜在临床应用价值,是国内外研究的热点。动物体内实验和体外细胞实验表明,OGP能促进骨密度增加,加速骨折愈合,促进体外培养大鼠成骨细胞的成骨功能,增加核心结合因子α1、Ⅰ型胶原mRNA表达水平... 成骨生长肽(OGP)具有促成骨作用,具有较大的潜在临床应用价值,是国内外研究的热点。动物体内实验和体外细胞实验表明,OGP能促进骨密度增加,加速骨折愈合,促进体外培养大鼠成骨细胞的成骨功能,增加核心结合因子α1、Ⅰ型胶原mRNA表达水平,促进骨髓间充质干细胞的增殖和分化,上调成骨标志物的表达。文章对OGP促成骨作用的研究进展进行综述。 展开更多

关键词 成骨生长肽 成骨 骨髓间充质干细胞

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丹酚酸B对人牙周膜细胞成骨分化的影响 被引量：3

13

作者 马玥 任嫒姝 付钢 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期468-473,共6页

目的探讨中药丹参主要活性成分丹酚酸B(Sal B)对人牙周膜细胞(h PDLCs)成骨分化的影响。方法取第3代h PDLCs进行实验,运用甲基噻唑基四唑(MTT)法检测不同浓度丹酚酸B对h PDLCs增殖活性影响,通过检测碱性磷酸酶(ALP)活性、矿化结节染色... 目的探讨中药丹参主要活性成分丹酚酸B(Sal B)对人牙周膜细胞(h PDLCs)成骨分化的影响。方法取第3代h PDLCs进行实验,运用甲基噻唑基四唑(MTT)法检测不同浓度丹酚酸B对h PDLCs增殖活性影响,通过检测碱性磷酸酶(ALP)活性、矿化结节染色、骨钙素(OCN)m RNA表达来探讨丹酚酸B对h PDLCs成骨分化的影响。结果丹酚酸B对h PDLCs增殖活性无影响。当丹酚酸B浓度为0.5、1、5μmol·L-1时均能增加h PDLCs的ALP活性和OCN m RNA表达,与OIM组比较差异有统计学意义(P<0.05);且当丹酚酸B浓度为0.5、1、5μmol·L-1时h PDLCs形成矿化结节数量明显高于OIM组。结论适宜浓度的丹酚酸B能有效促进h PDLCs成骨分化。 展开更多

关键词 丹酚酸B 人牙周膜细胞 成骨分化 碱性磷酸酶活性 矿化结节

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OGP对低氧环境中小鼠BMSCs成脂分化影响的研究 被引量：3

14

作者 张磊 龚跃昆 尹勇 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期670-674,共5页

目的检测成骨生长肽(osteogenic growth peptide,OGP)与低氧环境对小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成脂肪分化的影响。方法实验随机分为4组:A组(常氧组)、B组(1%O_(2)组)、C组(常氧+10^(-9)mol/L OGP组... 目的检测成骨生长肽(osteogenic growth peptide,OGP)与低氧环境对小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成脂肪分化的影响。方法实验随机分为4组:A组(常氧组)、B组(1%O_(2)组)、C组(常氧+10^(-9)mol/L OGP组)、D组(1%O_(2)+10^(-9)mol/L OGP组)。ELISA法定量检测低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor 1α,HIF-1α)蛋白的表达;14 d后,油红O染色观察BMSCs脂滴形成情况;实时荧光定量PCR和Western blotting检测成脂相关基因PPAR-γ和C/EBPα的mRNA和蛋白表达水平。结果与A组及C组相比,B组与D组HIF-1α表达明显上调(P<0.01);与A组相比,B组、C组、D组脂滴生成及PPAR-γ和C/EBPα的mRNA和蛋白表达降低(P<0.01);与B组及C组相比,D组中脂滴生成及PPAR-γ和C/EBPα的信使RNA和蛋白表达下调(P<0.01)。结论OGP及1%低氧环境均能抑制BMSCs成脂分化,且二者抑制BMSCs成脂分化具有协同效应。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 低氧 成骨生长肽 成脂分化

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大鼠骨髓基质干细胞的成骨诱导及鉴定 被引量：1

15

作者 郭立达 王捷 夏冰 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期678-679,F0005,共3页

目的:研究大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)在体外培养、诱导后的形态学改变及生物活性,探讨BMSCs作为骨组织工程种子细胞的可能性和可行性。方法:通过改良的骨髓培养法分离成年大鼠BMSCs,经条件培养液诱导培养后,进行形态学观察和碱性磷酸酶(... 目的:研究大鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)在体外培养、诱导后的形态学改变及生物活性,探讨BMSCs作为骨组织工程种子细胞的可能性和可行性。方法:通过改良的骨髓培养法分离成年大鼠BMSCs,经条件培养液诱导培养后,进行形态学观察和碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)的测定。结果:经过体外成骨诱导的BMSCs表现出增殖、聚集、结节和矿化期的阶段性形态特征,同时在诱导2周后表达ALP活性,在结节期和矿化期OCN表达呈阳性。结论:体外成骨定向诱导的BMSCs具有典型的成骨细胞的形态和功能性特征,可以作为骨组织工程的种子细胞。 展开更多

关键词 骨髓基质干细胞 成骨诱导 碱性磷酸酶 骨钙素

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成骨生长肽诱导的大鼠骨髓基质细胞基因表达谱变化中骨折愈合相关基因的筛选 被引量：1

16

作者 肖毅 王建国 +1 位作者 吴保君 白增亮 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2010年第7期473-475,共3页

目的基因表达谱芯片筛选成骨生长肽诱导大鼠骨髓基质细胞骨折愈合相关基因的表达变化及其促进骨折愈合的机制。方法密度梯度离心法分离大鼠骨髓基质细胞,以10-9mol/L的成骨生长肽诱导24h的第三代大鼠骨髓基质细胞作为实验组,以第三代大... 目的基因表达谱芯片筛选成骨生长肽诱导大鼠骨髓基质细胞骨折愈合相关基因的表达变化及其促进骨折愈合的机制。方法密度梯度离心法分离大鼠骨髓基质细胞,以10-9mol/L的成骨生长肽诱导24h的第三代大鼠骨髓基质细胞作为实验组,以第三代大鼠骨髓基质细胞为对照组,提取诱导组与实验组总RNA,分别用cy5和cy3探针逆转录标记,与博奥27KRat Genome Array芯片杂交,荧光扫描分析。结果芯片结果显示大鼠骨髓基质细胞经成骨生长肽刺激24h后共有145个差异表达的基因,其中91个上调表达的基因,54个下调表达的基因。差异表达的基因中可能与骨折愈合相关的基因共有27个:包括4个血管发生相关的基因、9个骨代谢相关的基因、14个炎症与免疫相关的基因。结论基因表达谱芯片有助于研究成骨生长肽诱导大鼠骨髓基质细胞促进骨折愈合的分子机制。 展开更多

关键词 成骨生长肽 骨髓基质细胞 基因芯片 骨折愈合

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氢气减弱脂多糖对人牙周膜细胞成骨能力的抑制 被引量：1

17

作者 刘红卫 袁昌青 +2 位作者 于新波 吉秋霞 隋爱华 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期797-800,共4页

目的:研究氢气(H_2)对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(P.g-LPS)刺激的人牙周膜成纤维细胞(hPDLCs)成骨能力的影响。方法:取生长状态良好的hPDLCs分为对照组、成骨诱导组、成骨诱导+LPS(100 ng/ml)刺激组及成骨诱导+H,(3%)+LPS(100 ng/ml)组培养3... 目的:研究氢气(H_2)对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(P.g-LPS)刺激的人牙周膜成纤维细胞(hPDLCs)成骨能力的影响。方法:取生长状态良好的hPDLCs分为对照组、成骨诱导组、成骨诱导+LPS(100 ng/ml)刺激组及成骨诱导+H,(3%)+LPS(100 ng/ml)组培养3周后行茜素红(ARS)染色,另取上述各组处理培养7 d的细胞提取RNA进行RT^DCR检测比较碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OC)的表达差异。结果:hPDLCs成骨、成脂诱导后具有定向分化能力。钙化物含量LPS刺激组少于成骨诱导组(P<0.01);H_2+LPS处理组多于LPS刺激组(P<0.05)。LPS刺激组细胞ALP表达降低(P<0.001),OC表达降低(P<0.001);与LPS刺激组相比H_2+LPS处理组细胞ALP表达增高(P<0.05),OC表达增高(P<0.05)。结论:高浓度P.g-LPS能够抑制hPDLC的成骨能力,而氢气能够一定程度上改善P.g-LPS对hPDLC成骨能力的抑制作用。 展开更多

关键词 氢气 人牙周膜成纤维细胞(h PDLCs) 成骨能力 P.g-LPS 碱性磷酸酶(ALP) 骨钙素(OC)

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成骨生长肽对体外培养奶牛成骨细胞碱性磷酸酶和骨钙素的影响初探 被引量：1

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作者 王红 郭定宗 《中国奶牛》 2008年第4期11-14,共4页

体外培养奶牛成骨细胞,用10-12mol/L、10-11mol/L、10-10mol/L、10-9mol/L和10-8mol/L成骨生长肽(OGP)干预5d后,紫外分光光度法检测细胞上清液中碱性磷酸酶(ALP)活性,以放射免疫法检测细胞上清液中骨钙素(OC)含量。结果显示:成骨生长肽... 体外培养奶牛成骨细胞,用10-12mol/L、10-11mol/L、10-10mol/L、10-9mol/L和10-8mol/L成骨生长肽(OGP)干预5d后,紫外分光光度法检测细胞上清液中碱性磷酸酶(ALP)活性,以放射免疫法检测细胞上清液中骨钙素(OC)含量。结果显示:成骨生长肽对细胞上清液中ALP活性起抑制作用,其中在10-10mol/L时抑制作用最为显著(P<0.01);对细胞上清液中OC亦起抑制作用,且该抑制呈现剂量双向性,在10-10mol/L时抑制作用显著。结论:成骨生长肽对体外培养奶牛成骨细胞碱性磷酸酶和骨钙素起轻微抑制作用而且呈双向性。 展开更多

关键词 成骨生长肽 成骨细胞 碱性磷酸酶 骨钙素

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MicroRNA-196a靶向调节HDAC9对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响 被引量：1

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作者 李华峰 张广凤 +3 位作者 张旭 鞠文文 王婧婷 吴桐 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期1303-1309,共7页

目的 探究微小RNA(miR)-196a靶向调节组蛋白去乙酰化酶9(HDAC9)对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响。方法将MC3T3-E1细胞分为对照组(Cont)组、诱导组、miR-196a-mimics-NC组、miR-196a-mimics组、miR-196a-inhibitor-NC组、miR-196a-inhibito... 目的 探究微小RNA(miR)-196a靶向调节组蛋白去乙酰化酶9(HDAC9)对MC3T3-E1细胞成骨分化的影响。方法将MC3T3-E1细胞分为对照组(Cont)组、诱导组、miR-196a-mimics-NC组、miR-196a-mimics组、miR-196a-inhibitor-NC组、miR-196a-inhibitor组、miR-196a-mimics+pCMV-HDAC9-NC组、miR-196a-mimics+pCMV-HDAC9组,根据分组转染后进行成骨诱导。定量荧光PCR检测MC3T3-E1细胞中miR-196a、HDAC9表达量;试剂盒检测碱性磷酸酶(ALP)活性;茜素红染色观察矿化程度;Western blot检测HDAC9、ALP、Runt相关转录因子2(Runx2)、胶原蛋白I(COL1)、骨桥蛋白(OPN)、Histone H3、Histone H3(acetyl K9、K14和K23)表达量。结果 与Cont组相比,诱导组MC3T3-E1细胞中miR-196a表达、ALP、Runx2、COL1、OPN蛋白表达、ALP活性、矿化程度及Histone H3 K9、K14、K23位点乙酰化水平增高(P<0.05),HDAC9 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05)。转染miR-196a-mimics可明显增加miR-196a表达,降低HDAC9表达,并增加ALP、Runx2、COL1、OPN蛋白表达、ALP活性、矿化程度及Histone H3乙酰化,转染miR-196a-inhibitor则作用相反。miR-196a可靶向下调HDAC9表达,过表达HDAC9可部分逆转miR-196a mimics对MC3T3-E1细胞成骨分化的促进效应。结论 miR-196a可靶向下调HDAC9表达,增加组蛋白乙酰化水平,促进MC3T3-E1细胞成骨分化。 展开更多

关键词 微小RNA-196a 组蛋白去乙酰化酶9 MC3T3-E1细胞 成骨分化 碱性磷酸酶

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二甲基乙二酰基甘氨酸对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞增殖和分化的影响

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作者 周亮亮 翁土军 +5 位作者 钱隆 聂振国 何莹 张春丽 王自强 李利 《中国脊柱脊髓杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期262-269,共8页

目的 :探讨低氧模拟剂二甲基乙二酰基甘氨酸(dimethyloxalylglycine,DMOG)对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)的增殖、成骨分化及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响。方法:将MC3T3-E1细胞接种到... 目的 :探讨低氧模拟剂二甲基乙二酰基甘氨酸(dimethyloxalylglycine,DMOG)对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1)的增殖、成骨分化及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响。方法:将MC3T3-E1细胞接种到培养板24h后,实验组培养基中分别加入50μM(50μM组)和200μM(200μM组)的DMOG,对照组加入完全培养液。分别于培养1、3、5d时采用MTT法检测MC3T3-E1细胞增殖情况,5、10d行碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色及ALP活性检测成骨细胞分化,21d用茜素红染色检测MC3T3-E1细胞钙结节的形成并进行定量分析,采用ELISA法检测MC3T3-E1培养3d情况时上清液中的VEGF蛋白含量,并用实时荧光定量PCR法检测MC3T3-E1细胞VEGF mRNA的相对表达量。结果:培养1d时对照组、50μM组和200μM组的MC3T3-E1的光密度(optical density,OD)值分别为0.041±0.009、0.074±0.019、0.086±0.044,3d时分别为0.123±0.027、0.148±0.020、0.224±0.061,5d时分别为0.297±0.044、0.325±0.084、0.354±0.038,1d、3d时50μM组和200μM组与同时间点对照组比较均有显著性差异(P<0.05),3d时50μM组与200μM组有显著性差异(P<0.05)。培养5d和10d时对照组ALP染色颜色较深,50μM组颜色中等,200μM组颜色较浅;5d时对照组ALP活性为1.943±0.072,50μM组为1.632±0.051,200μM组为1.319±0.065;10d时对照组ALP活性为3.734±0.067,50μM组为3.381±0.070,200μM组为2.831±0.086。三组间同时间点比较均有统计学差异(P<0.05),同组10d时与5d时比较均有统计学差异(P<0.05)。茜素红染色200μM组可见少量红色结节,50μM组可见中等量红色结节,对照组可见大量红色结节;对照组茜素红含量(μg/ml)为56.178±7.940,50μM组为41.922±2.438,200μM组为31.929±1.922,三组间比较均有统计学差异(P<0.05)。培养3d时对照组细胞培养上清液中VEGF蛋白含量(ng/孔)为9.063±0.603,50μM组为12.123±0.870,200μM组为15.540±0.581,三组间比较均有统计学差异(P<0.05);50μM组VEGF mRNA表达量为对照组的1.792±0.067,200μM组为对照组的3.963±0.092,三组间比较均有统计学差异(P<0.05)。结论 :低氧模拟剂DMOG可促进MC3T3-E1细胞增殖和VEGF表达,抑制其成骨分化。 展开更多

关键词 二甲基乙二酰基甘氨酸 小鼠胚胎成骨细胞前体细胞 碱性磷酸酶 血管内皮生长因子 成骨分化

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