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牙鲆碱性磷酸酶基因5'调控区的克隆及其功能检测
被引量：
4
1
作者
施志仪
顾一峰
+1 位作者
陈晓武
胡燕林
《生物技术通报》
CAS
CSCD
2008年第2期207-213,共7页
通过基因组步移的方法扩增出一段924bp的牙鲆碱性磷酸酶基因5'调控区序列,在线软件分析表明5'调控区内可能含有GKLF、Oct、CREB、E2F、CEBP、GATA-1、Pitx-1、Pit1、RARE/TRE、AP4等转录因子结合位点。采用DNA重组的方法,将克...
通过基因组步移的方法扩增出一段924bp的牙鲆碱性磷酸酶基因5'调控区序列,在线软件分析表明5'调控区内可能含有GKLF、Oct、CREB、E2F、CEBP、GATA-1、Pitx-1、Pit1、RARE/TRE、AP4等转录因子结合位点。采用DNA重组的方法,将克隆得到的5'调控区片段插入启动子缺失的增强型绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-1中,构建重组表达载体pEGFP-JFALP。重组载体瞬时转染COS-7细胞,在倒置荧光显微镜下可以检测到绿色荧光信号,且荧光信号随着时间的延长而增强。结果表明本实验克隆的牙鲆碱性磷酸酶基因5'调控区具有一定的启动子活性,为今后进一步研究碱性磷酸酶基因表达调控的分子机制奠定基础。
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关键词
碱性磷酸酶
基因
5
'调控区
克隆
功能
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职称材料
题名
牙鲆碱性磷酸酶基因5'调控区的克隆及其功能检测
被引量：
4
1
作者
施志仪
顾一峰
陈晓武
胡燕林
机构
上海水产大学生物技术研究中心
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
2008年第2期207-213,共7页
基金
国家自然科学基金项目(No.30571420)
国家教育部博士基金项目(No.20040264001)
上海市教委重点科研项目资助(No.052252)
文摘
通过基因组步移的方法扩增出一段924bp的牙鲆碱性磷酸酶基因5'调控区序列,在线软件分析表明5'调控区内可能含有GKLF、Oct、CREB、E2F、CEBP、GATA-1、Pitx-1、Pit1、RARE/TRE、AP4等转录因子结合位点。采用DNA重组的方法,将克隆得到的5'调控区片段插入启动子缺失的增强型绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-1中,构建重组表达载体pEGFP-JFALP。重组载体瞬时转染COS-7细胞,在倒置荧光显微镜下可以检测到绿色荧光信号,且荧光信号随着时间的延长而增强。结果表明本实验克隆的牙鲆碱性磷酸酶基因5'调控区具有一定的启动子活性,为今后进一步研究碱性磷酸酶基因表达调控的分子机制奠定基础。
关键词
碱性磷酸酶
基因
5
'调控区
克隆
功能
Keywords
alkaline phosphatase gene 5＇regulation region clone function
分类号
S917.4 [农业科学—水产科学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
牙鲆碱性磷酸酶基因5'调控区的克隆及其功能检测
施志仪
顾一峰
陈晓武
胡燕林
《生物技术通报》
CAS
CSCD
2008
4
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