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米曲霉碱性蛋白酶基因的克隆表达及水解特性被引量：8: 1; 作者柯野陈丹 +2 位作者李家洲谢明权罗晓春《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第8期88-94,共7页; 米曲霉碱性蛋白酶对植物蛋白具有高效的水解能力和较好的脱苦作用.为了便于大量获得该酶以利于工业上的应用,文中通过RT-PCR克隆获得米曲霉碱性蛋白酶基因,将之转化到毕赤酵母KM71菌株中并成功表达,之后用该酶进行牛胰岛素氧化链B链及... 展开更多; 关键词米曲霉重组碱性蛋白酶毕赤酵母克隆表达水解特性; 在线阅读下载PDF 职称材料

人胎盘碱性磷酸酯酶基因在毕赤酵母中的表达和活性检测: 2; 作者杜中军翟衡 +2 位作者朱水芳黄文胜束怀瑞《生物技术通报》 CAS CSCD 2003年第6期42-45,共4页; 将人胎盘碱性磷酸酯酶 (hPLAP)基因克隆到质粒ppICZαA中并在巴斯德毕赤酵母Pichiapastoris蛋白酶缺陷菌株SMD1 1 6 8中诱导表达。结果表明 :2拷贝子的重组酵母诱导表达产物酶活性最高 ,拷贝Mut+ 和Muts; 关键词人胎盘碱性磷酸酯酶基因毕赤酵母表达活性检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

碱性果胶酶基因在毕赤酵母中的非诱导表达: 3; 作者张爱平蔡少丽 +3 位作者杨鹤郑海英柯崇榕黄建忠《微生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第6期33-36,共4页; 为了使碱性果胶酶基因能在毕赤酵母中获得非诱导表达,利用聚合酶链式反应(PCR)技术,以实验室保藏菌株毕赤酵母EIM-60基因组为模板,设计引物扩增出编码碱性果胶酯裂解酶的基因PGL,大小约为1 206 bp。酶切后连接到毕赤酵母组成型表达载体p... 展开更多; 关键词碱性果胶酶 pGAPZαA 毕赤酵母异源表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)碱性脂肪酶基因在毕赤酵母中的表达被引量：3: 4; 作者戴苏赵小兰 +1 位作者林影韩双艳《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期135-140,共6页; 将来自枯草芽孢杆菌的碱性脂肪酶基因经密码子优化,全基因合成后克隆到pPICZαA载体,构建了pPICZαA-bsl分泌型重组质粒,该重组质粒经限制性内切酶PmeI线性化后使用LiCl法转化到毕赤酵母X-33,经过筛选获得分泌表达碱性脂肪酶的重组毕赤... 展开更多; 关键词枯草芽孢杆菌碱性脂肪酶密码子优化毕赤酵母分泌表达脱墨; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名米曲霉碱性蛋白酶基因的克隆表达及水解特性被引量：8: 1; 作者柯野陈丹李家洲谢明权罗晓春; 机构华南理工大学生物科学与工程学院广东轻工职业技术学院食品与生物工程系; 出处《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第8期88-94,共7页; 基金广东省自然科学基金资助项目(9452404801001943) 广东省科技计划项目(2011B010500018); 文摘米曲霉碱性蛋白酶对植物蛋白具有高效的水解能力和较好的脱苦作用.为了便于大量获得该酶以利于工业上的应用,文中通过RT-PCR克隆获得米曲霉碱性蛋白酶基因,将之转化到毕赤酵母KM71菌株中并成功表达,之后用该酶进行牛胰岛素氧化链B链及大豆和花生蛋白的水解试验.结果显示:在10 L发酵罐中诱导表达时,发酵液中重组碱性蛋白酶的酶活达4100U/mL;该蛋白酶最适反应pH值和温度分别为8.5～9.5和50℃,在pH值为6.0～10.0和温度低于40℃时具有较好的稳定性;该酶具有广泛的肽键选择性;该酶对大豆和花生蛋白显示出了强于部分商品化蛋白酶的水解能力.以上结果表明:该重组蛋白酶具有较大的开发利用潜力.; 关键词米曲霉重组碱性蛋白酶毕赤酵母克隆表达水解特性; Keywords Aspergillus oryzae recombinant alkaline protease pichia pastoris cloning expression hydrolysis cha-racteristic; 分类号 Q814.9 [生物学—生物工程] TS201.2 [轻工技术与工程—食品科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人胎盘碱性磷酸酯酶基因在毕赤酵母中的表达和活性检测: 2; 作者杜中军翟衡朱水芳黄文胜束怀瑞; 机构山东农业大学园艺学院国家动植物检疫实验所; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 2003年第6期42-45,共4页; 文摘将人胎盘碱性磷酸酯酶 (hPLAP)基因克隆到质粒ppICZαA中并在巴斯德毕赤酵母Pichiapastoris蛋白酶缺陷菌株SMD1 1 6 8中诱导表达。结果表明 :2拷贝子的重组酵母诱导表达产物酶活性最高 ,拷贝Mut+ 和Muts; 关键词人胎盘碱性磷酸酯酶基因毕赤酵母表达活性检测; Keywords alkaline phosphatase pichia pastoris expression system; 分类号 Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名碱性果胶酶基因在毕赤酵母中的非诱导表达: 3; 作者张爱平蔡少丽杨鹤郑海英柯崇榕黄建忠; 机构福建师范大学工业微生物教育部工程研究中心生命科学学院福建省现代发酵技术工程研究中心; 出处《微生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第6期33-36,共4页; 基金福建省发改委产业化关键技术重点项目(闽发改投资(2009)958号); 文摘为了使碱性果胶酶基因能在毕赤酵母中获得非诱导表达,利用聚合酶链式反应(PCR)技术,以实验室保藏菌株毕赤酵母EIM-60基因组为模板,设计引物扩增出编码碱性果胶酯裂解酶的基因PGL,大小约为1 206 bp。酶切后连接到毕赤酵母组成型表达载体pGAPZαA的多克隆位点上,成功构建了重组载体pGAPZαA-PGL,将其电转化入毕赤酵母GS115进行异源表达。SDS-PAGE银染结果表明,该重组质粒在毕赤酵母中获得了异源表达,分子量为44.3 ku。通过考马斯亮蓝法蛋白浓度试剂盒测定其蛋白含量为0.430 g/L,通过BandScan软件分析目的蛋白占总蛋白的41.4%,即0.178 g/L。; 关键词碱性果胶酶 pGAPZαA 毕赤酵母异源表达; Keywords alkaline pectinase pGAPZaA pichia pastoris heterogenic expression; 分类号 Q939.97 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)碱性脂肪酶基因在毕赤酵母中的表达被引量：3: 4; 作者戴苏赵小兰林影韩双艳; 机构华南理工大学生物科学与工程学院; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期135-140,共6页; 基金广东省工业攻关项目(2008A010900002 2010A010500003); 文摘将来自枯草芽孢杆菌的碱性脂肪酶基因经密码子优化,全基因合成后克隆到pPICZαA载体,构建了pPICZαA-bsl分泌型重组质粒,该重组质粒经限制性内切酶PmeI线性化后使用LiCl法转化到毕赤酵母X-33,经过筛选获得分泌表达碱性脂肪酶的重组毕赤酵母X-33/pPICZαA-bsl。摇瓶发酵液上清酶活最高可达4.78 U/mL,初步研究了该脂肪酶的酶学性质,其最适作用温度为40-60℃,最适pH9.0,且具有高度耐碱的特性。该重组脂肪酶对旧新闻纸具备较明显的脱墨能力。; 关键词枯草芽孢杆菌碱性脂肪酶密码子优化毕赤酵母分泌表达脱墨; Keywords Bacillus subtilis alkaline lipase Codon optimization pichia pastoris Secreted expression Deinking; 分类号 Q78 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	米曲霉碱性蛋白酶基因的克隆表达及水解特性	柯野陈丹李家洲谢明权罗晓春	《华南理工大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心	2012	8	在线阅读下载PDF 职称材料
2	人胎盘碱性磷酸酯酶基因在毕赤酵母中的表达和活性检测	杜中军翟衡朱水芳黄文胜束怀瑞	《生物技术通报》 CAS CSCD	2003	0	在线阅读下载PDF 职称材料
3	碱性果胶酶基因在毕赤酵母中的非诱导表达	张爱平蔡少丽杨鹤郑海英柯崇榕黄建忠	《微生物学杂志》 CAS CSCD	2012	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)碱性脂肪酶基因在毕赤酵母中的表达	戴苏赵小兰林影韩双艳	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2012	3	在线阅读下载PDF 职称材料