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AD5/F35腺病毒载体对不同来源造血系统恶性细胞转染效率的研究被引量：6: 1; 作者王凯彭建强 +1 位作者袁振华吴小兵《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第3期525-528,共4页; 本研究比较AD5/F35腺病毒载体对不同来源的血液系统恶性细胞系感染效率的差异和细胞毒性反应。用AD5/F35-EGFP以不同MOI(感染复数)感染不同来源的血液恶性细胞系并用AD5-EGFP作为对照;用流式细胞术检测荧光阳性细胞比例,进行荧光显微镜... 展开更多; 关键词 ad5/f35型腺病毒载体 ad5型腺病毒载体感染效率细胞毒作用造血系统肿瘤细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

嵌合性5型腺病毒载体Ad5/F35体外转染大鼠骨髓间充质干细胞的研究被引量：1: 2; 作者杨鎏毛曦 +1 位作者刘英李建勇《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1075-1079,F0002,共6页; 目的:研究携带35型腺病毒纤毛的嵌合性5型腺病毒载体Ad5/F35能否有效地将增强型绿色荧光蛋白(eGFP)基因体外转染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),并观察eGFP基因在大鼠BMSCs内持续表达的时间。方法:贴壁培养法分离、扩增大鼠BMSCs。用带有e... 展开更多; 关键词间充质干细胞 ad5/f35腺病毒载体转染绿色荧光蛋白大鼠; 在线阅读下载PDF 职称材料

Ad5F35嵌合腺病毒载体介导的突变性IκBα对白血病细胞凋亡的诱导作用被引量：3: 3; 作者王光平王凯 +5 位作者信红亚段朝军荆照正谭三勤齐振华陈方平《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2011年第2期332-336,共5页; 多种不同类型的白血病均存在持续活化的核转录因子κB(NF-κB),而抑制NF-κB活化诱导细胞凋亡有可能成为治疗白血病新的方法。本研究探讨修饰的5型腺病毒载体即Ad5F35嵌合腺病毒载体(Ad5F35 Vec)介导的突变性IκBα(IκBαDN)对白血病... 展开更多; 关键词 ad5f35载体 Nf-ΚB IΚBΑ 白血病; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组腺病毒Ad5F35-IL-12感染不同单核-巨噬细胞的研究被引量：2: 4; 作者王秦成凤 +5 位作者张维理匡文斌李朴董晋豫梁勤东涂植光《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期113-117,共5页; 目的确定人IL-12基因重组腺病毒Ad5F35-IL-12在不同人单核-巨噬细胞中的表达。方法将人IL-12基因重组腺病毒Ad5F35-IL-12分别感染人外周血单个核细胞、胸水巨噬细胞,以及THP-1和U937单核细胞株及其经佛波酯(PMA)诱导后生成的巨噬细胞;感... 展开更多; 关键词 IL-12 腺病毒ad5f35 单核巨噬细胞基因治疗; 在线阅读下载PDF 职称材料

人Wilms瘤基因1重组腺病毒Ad5/F35的制备及感染树突状细胞后的鉴定被引量：1: 5; 作者张晓颖金悦 +1 位作者张斌陈虎《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期135-138,共4页; 目的构建人Wilms瘤基因1(WT1)重组腺病毒载体Ad5/F35并鉴定。方法运用不同病毒滴度的Ad5-EGFP和Ad5/F35-EGFP感染黑素瘤患者外周血树突状细胞(DC),用荧光显微镜检测EGFP的表达,选择对DC感染率高的腺病毒;同源重组构建Ad5/F35-WT1腺病毒... 展开更多; 关键词 WT1基因树突状细胞 ad5 f35腺病毒鸡尾酒; 在线阅读下载PDF 职称材料

表达呼吸道合胞病毒融合前F蛋白的重组人5型腺病毒的构建被引量：1: 6; 作者马亚林柴鹏弟 +4 位作者王金冬毛彤瑶张鹏李慧莹段招军《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期515-522,共8页; 目的筛选并构建成功表达A亚型人呼吸道合胞病毒(Human Respiratory Syncytial Virus,HRSV)融合前构象F蛋白的重组人5型腺病毒(Recombinant Human type5 adenovirus,rHADV-5),为制备和研发HRSV重组腺病毒载体疫苗奠定基础。方法在真核表... 展开更多; 关键词人5型腺病毒载体人呼吸道合胞病毒融合前f蛋白 HEK293细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名AD5/F35腺病毒载体对不同来源造血系统恶性细胞转染效率的研究被引量：6: 1; 作者王凯彭建强袁振华吴小兵; 机构长沙湘雅医院血液科长沙湘雅第三医院中心实验室国家; 出处《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第3期525-528,共4页; 文摘本研究比较AD5/F35腺病毒载体对不同来源的血液系统恶性细胞系感染效率的差异和细胞毒性反应。用AD5/F35-EGFP以不同MOI(感染复数)感染不同来源的血液恶性细胞系并用AD5-EGFP作为对照;用流式细胞术检测荧光阳性细胞比例,进行荧光显微镜照相并用MTT法检测病毒对感染靶细胞的杀伤作用。结果表明:对于髓系来源的细胞在MOI为30时,AD5/F35载体的感染效率大于99%,AD5载体在MOI为1000时感染效率为26.4%;对于B系来源的细胞在MOI为1000时,AD5/F35载体感染效率为11.7%,AD5载体为5.7%;AD5/F35和AD5载体都不能有效地感染T系来源细胞,在MOI达到1000也未检测到荧光阳性细胞。在MOI为1000的情况下AD5/F35载体对感染靶细胞也无明显杀伤作用。结论:AD5/F35载体对不同来源的血液恶性细胞的感染具有一定的选择性,对髓系来源细胞感染能力强,对B系来源细胞有一定感染能力,而且对感染靶细胞毒性小。AD5/F35载体优于常用的5型腺病毒载体,在以髓系细胞为靶细胞的基因治疗中有着较好的应用前景。; 关键词 ad5/f35型腺病毒载体 ad5型腺病毒载体感染效率细胞毒作用造血系统肿瘤细胞; Keywords ad5/f35 adenoviral vector ad5 adenoviral vector transfer efficiency cytotoxicity malignant hematopoietic cell line; 分类号 R782 [医药卫生—口腔医学] R733 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名嵌合性5型腺病毒载体Ad5/F35体外转染大鼠骨髓间充质干细胞的研究被引量：1: 2; 作者杨鎏毛曦刘英李建勇; 机构东南大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系南京医科大学第一附属医院血液科; 出处《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1075-1079,F0002,共6页; 基金江苏省基础研究重大招标项目资助(BK2004004); 文摘目的:研究携带35型腺病毒纤毛的嵌合性5型腺病毒载体Ad5/F35能否有效地将增强型绿色荧光蛋白(eGFP)基因体外转染大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),并观察eGFP基因在大鼠BMSCs内持续表达的时间。方法:贴壁培养法分离、扩增大鼠BMSCs。用带有eGFP基因的Ad5/F35(Ad5/F35-eGFP)分别以1、10、100、1000的感染复数(MOI)转染第2代大鼠BMSCs;荧光倒置显微镜和流式细胞仪(FCM)检测eGFP基因的转染效率与表达水平,观察细胞生长状态以评估病毒对大鼠BMSCs基本生物学特性的影响;对MOI=100的病毒转染的大鼠BMSCs在转染后第2、7、14、21、30天分别用FCM检测大鼠BMSCs内eGFP的表达情况。结果:MOI在1到1000范围内,eGFP基因转染效率和表达水平与Ad5/F35-eGFP的MOI呈正向剂量相关性。MOI=100的病毒可转染90%左右的大鼠BMSCs,且eGFP基因在1个月内均有表达。MOI为1、10、100的病毒不影响大鼠BMSCs的活力和增殖能力。结论:Ad5/F35可以高效地将eGFP基因体外转染大鼠BMSCs,eGFP基因可持续表达1个月。本研究为Ad5/F35作为BMSCs的基因转移和表达载体进行细胞治疗与基因治疗提供了实验依据。; 关键词间充质干细胞 ad5/f35腺病毒载体转染绿色荧光蛋白大鼠; Keywords mesenchymal stem cells ad5/f35 adenovirus vector transfection green fluorescent proteins rats; 分类号 R331.22 [医药卫生—人体生理学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Ad5F35嵌合腺病毒载体介导的突变性IκBα对白血病细胞凋亡的诱导作用被引量：3: 3; 作者王光平王凯信红亚段朝军荆照正谭三勤齐振华陈方平; 机构中南大学湘雅医院血液科海军总医院儿科中南大学医学实验中心; 出处《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2011年第2期332-336,共5页; 基金国家自然科学基金资助(编号30270575); 文摘多种不同类型的白血病均存在持续活化的核转录因子κB(NF-κB),而抑制NF-κB活化诱导细胞凋亡有可能成为治疗白血病新的方法。本研究探讨修饰的5型腺病毒载体即Ad5F35嵌合腺病毒载体(Ad5F35 Vec)介导的突变性IκBα(IκBαDN)对白血病细胞凋亡的作用。将携带缺失5'端1-70个氨基酸编码序列的人IκBαAd5F35-IκBαDN Vec转染HL-60细胞。采用流式细胞术、DNA结合试验、实时定量PCR和Western blot技术分别检测细胞凋亡、NF-κB DNA结合活性、IκBα,cIAP-2和xIAP的表达。结果显示,转染48小时后,转染Ad5F35-IκBαDN Vec细胞、空白载体Ad5F35-EGFP Vec细胞以及未转染细胞的凋亡率分别为(22.53±2.999)%,(6.08±2.464)%和(4.86±1.366)%,其差异具有显著意义(Ad5F35-IκBαDN Vec vs未转染:p<0.001;Ad5F35-IκBαDNVec vs Ad5F35-EGFP Vec:p<0.001,p<0.002)。同时,NF-κB DNA结合活性降低,IκBα表达增加,但cIAP-2和xIAP mRNA的表达降低。结论:Ad5F35 Vec能够有效介导IκBαDN cDNA在HL-60细胞的表达,IκBαDN可抑制HL-60细胞NF-κB DNA结合活性并诱导其凋亡。; 关键词 ad5f35载体 Nf-ΚB IΚBΑ 白血病; Keywords ad5f35 vector Nf-κB IκBα leukemia; 分类号 R733.7 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组腺病毒Ad5F35-IL-12感染不同单核-巨噬细胞的研究被引量：2: 4; 作者王秦成凤张维理匡文斌李朴董晋豫梁勤东涂植光; 机构重庆医科大学检验医学院; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期113-117,共5页; 基金国家自然科学基金(81172016); 文摘目的确定人IL-12基因重组腺病毒Ad5F35-IL-12在不同人单核-巨噬细胞中的表达。方法将人IL-12基因重组腺病毒Ad5F35-IL-12分别感染人外周血单个核细胞、胸水巨噬细胞,以及THP-1和U937单核细胞株及其经佛波酯(PMA)诱导后生成的巨噬细胞;感染48 h后荧光显微镜观察对相应细胞的感染效率,RT-PCR检测IL-12双亚基p35和p40的mRNA表达情况,ELISA检测细胞培养上清中IL-12p70的分泌水平。结果人IL-12基因重组腺病毒Ad5F35-IL-12可成功感染人外周血单个核细胞、胸水巨噬细胞以及THP-1和U937单核细胞株及其PMA诱导后生成的巨噬细胞,并分泌IL-12 p70蛋白,蛋白表达量从高至低依次是胸水巨噬细胞、PMA诱导后U937细胞、PMA诱导后THP-1细胞、U937细胞、外周血单个核细胞、THP-1细胞。结论人IL-12基因重组腺病毒Ad5F35-IL-12可以感染不同的单核-巨噬细胞,并成功表达分泌IL-12 p70蛋白。; 关键词 IL-12 腺病毒ad5f35 单核巨噬细胞基因治疗; Keywords IL-12 adenovirus ad5f35 mononuclear macrophage gene therapy; 分类号 R392.33 [医药卫生—免疫学] R392.12 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人Wilms瘤基因1重组腺病毒Ad5/F35的制备及感染树突状细胞后的鉴定被引量：1: 5; 作者张晓颖金悦张斌陈虎; 机构解放军全军造血干细胞研究所哈尔滨医科大学附属第一医院输血科; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期135-138,共4页; 基金 "十一五"新药创制重大专项(2009zx09503); 文摘目的构建人Wilms瘤基因1(WT1)重组腺病毒载体Ad5/F35并鉴定。方法运用不同病毒滴度的Ad5-EGFP和Ad5/F35-EGFP感染黑素瘤患者外周血树突状细胞(DC),用荧光显微镜检测EGFP的表达,选择对DC感染率高的腺病毒;同源重组构建Ad5/F35-WT1腺病毒载体,用免疫细胞化学和流式细胞术(FCM)检测WT1的表达。结果在相同滴度下,腺病毒载体Ad5/F35的感染优于Ad5;成功构建了Ad5/F35-WT1重组腺病毒,免疫细胞化学染色和FCM证实该病毒能有效介导WT1在DC中的表达。结论 Ad5/F35-WT1重组腺病毒能将WT1基因成功导入DC并有效表达。; 关键词 WT1基因树突状细胞 ad5 f35腺病毒鸡尾酒; Keywords Wilms＇ tumor gene-1 （WT1 gene） dendritic cells adS/f35 adenovirus vector; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学] R737.11 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名表达呼吸道合胞病毒融合前F蛋白的重组人5型腺病毒的构建被引量：1: 6; 作者马亚林柴鹏弟王金冬毛彤瑶张鹏李慧莹段招军; 机构甘肃中医药大学公共卫生学院中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家卫生健康委员会医学病毒和病毒病重点实验室潍坊医学院; 出处《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期515-522,共8页; 基金国家自然科学基金(No.21934005)。; 文摘目的筛选并构建成功表达A亚型人呼吸道合胞病毒(Human Respiratory Syncytial Virus,HRSV)融合前构象F蛋白的重组人5型腺病毒(Recombinant Human type5 adenovirus,rHADV-5),为制备和研发HRSV重组腺病毒载体疫苗奠定基础。方法在真核表达载体pcDNA3.1(+)上插入具有不同突变位点的HRSV F蛋白编码序列,利用融合前F蛋白单克隆抗体AM14和D25筛选HRSV F蛋白突变体;通过同源重组将筛选出的前构象F蛋白突变体编码序列插入非复制型人5型腺病毒载体,在HEK293细胞中进行重组病毒的包装和扩增,经氯化铯密度梯度法获得纯化的重组病毒;应用夹心ELISA法和Western blot鉴定F蛋白的表达及构象。结果通过AM14和D25单克隆抗体筛选出了2个稳定维持在融和前构象的HRSV F蛋白序列(SC-3M和SC-5M)。将SC-3M和SC-5M编码序列插入非复制型人5型腺病毒载体,对两种重组人5型腺病毒(pAd5-SC-3M和pAd5-SC-5M)和空载体(pAd5-vector)纯化,病毒滴度分别达到2.016×10^(10),2.52×10^(10)和2.948×10^(11)IU/mL。pAd5-SC-3M和pAd5-SC-5M感染HEK293后均能高效表达HRSV融合前构象的F蛋白并维持三聚体结构,且pAd5-SC-5M感染细胞中F蛋白表达量高于pAd5-SC-3M。结论成功在体外传代细胞中获得可高效表达A型HRSV融合前F蛋白的重组人5型腺病毒,为进一步通过动物试验评价该HRSV重组腺病毒载体疫苗奠定了基础。; 关键词人5型腺病毒载体人呼吸道合胞病毒融合前f蛋白 HEK293细胞; Keywords human adenovirus type 5 vector human respiratory syncytial virus prefusion f protein HEK293 cells; 分类号 R373 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	AD5/F35腺病毒载体对不同来源造血系统恶性细胞转染效率的研究	王凯彭建强袁振华吴小兵	《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD	2006	6	在线阅读下载PDF 职称材料
2	嵌合性5型腺病毒载体Ad5/F35体外转染大鼠骨髓间充质干细胞的研究	杨鎏毛曦刘英李建勇	《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心	2007	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	Ad5F35嵌合腺病毒载体介导的突变性IκBα对白血病细胞凋亡的诱导作用	王光平王凯信红亚段朝军荆照正谭三勤齐振华陈方平	《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD	2011	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	重组腺病毒Ad5F35-IL-12感染不同单核-巨噬细胞的研究	王秦成凤张维理匡文斌李朴董晋豫梁勤东涂植光	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2013	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	人Wilms瘤基因1重组腺病毒Ad5/F35的制备及感染树突状细胞后的鉴定	张晓颖金悦张斌陈虎	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2014	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	表达呼吸道合胞病毒融合前F蛋白的重组人5型腺病毒的构建	马亚林柴鹏弟王金冬毛彤瑶张鹏李慧莹段招军	《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心	2023	1	在线阅读下载PDF 职称材料