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温经汤对子宫内膜异位症大鼠LncRNA H19/miR-216a/ACTA2分子轴的影响
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作者 王娜梅 李潇 +2 位作者 余晓依 李鑫坤 张宇航 《中成药》 北大核心 2025年第6期1997-2002,共6页
目的 探讨温经汤对子宫内膜异位症(EMs)大鼠长链非编码核糖核酸H19(LncRNA H19)/微小核糖核酸-216a(miR-216a)/α-平滑肌肌动蛋白2(ACTA2)分子轴的影响。方法 将大鼠随机分为空白组、模型组、温经汤组、温经汤+阴性对照组、温经汤+LncRN... 目的 探讨温经汤对子宫内膜异位症(EMs)大鼠长链非编码核糖核酸H19(LncRNA H19)/微小核糖核酸-216a(miR-216a)/α-平滑肌肌动蛋白2(ACTA2)分子轴的影响。方法 将大鼠随机分为空白组、模型组、温经汤组、温经汤+阴性对照组、温经汤+LncRNA H19过表达组,每组10只,前3组注射生理盐水,温经汤+阴性对照组注射阴性对照病毒,温经汤+LncRNA H19过表达组注射LncRNA H19过表达腺相关病毒(AAV9-H19),每天1次,持续2周。空白组进行假手术,其余各组进行子宫内膜自体移植,建模成功后肌肉注射青霉素5 d,空白组、模型组灌胃生理盐水,各给药组灌胃给予温经汤(4.7 g/kg),持续4周。HE染色法观察子宫内膜组织病理形态,ELISA法检测血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平,RT-qPCR法检测子宫内膜组织LncRNA H19、miR-216a mRNA表达,Western blot法检测子宫内膜组织ACTA2、BCL2、Bax、Caspase-3蛋白表达,免疫组化法检测子宫内膜组织细胞增殖能力。结果 与模型组比较,温经汤组异位子宫内膜萎缩,血管和炎症细胞数量减少,结缔组织排列紧密,未见异物肉芽肿或多核巨细胞,血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平降低(P<0.01),子宫内膜组织LncRNA H19 mRNA表达及细胞增殖能力降低(P<0.01),miR-216a mRNA及Bax、Caspase-3蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01);与温经汤+阴性对照组比较,温经汤+LncRNA H19过表达组子宫内膜组织增生明显,有大量血管和炎症细胞浸润,水肿明显,结缔组织排列疏松,可见异物肉芽肿和多核巨细胞,IL-6水平、LncRNA H19 mRNA及ACTA2蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01),miR-216a mRNA表达降低(P<0.05)。结论 温经汤可减少炎症因子释放,抑制异位子宫内膜组织细胞增殖,其机制与调控LncRNA H19/miR-216a/ACTA2分子轴有关。 展开更多
关键词 温经汤 子宫内膜异位症 长链非编码核糖核酸H19/微小核糖核酸-216a/α-平滑肌肌动蛋白2分子轴(LncRNA H19/miR-216a/acta2) 细胞凋亡
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ACTA 2基因c.583delC突变导致家族性胸主动脉瘤及夹层的实验研究
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作者 李金洁 张全增 +2 位作者 朱琳 刘家云 杨柳 《西安交通大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第5期835-841,共7页
目的寻找并验证导致家族性胸主动脉瘤及夹层的遗传因素。方法从临床胸主动脉瘤及夹层的病例中筛选出具有家系背景的病患,收集相关临床资料,提取先证者血标本全基因组DNA后进行基因组合检测,并对先证者直系及旁系亲属血样进行一代测序验... 目的寻找并验证导致家族性胸主动脉瘤及夹层的遗传因素。方法从临床胸主动脉瘤及夹层的病例中筛选出具有家系背景的病患,收集相关临床资料,提取先证者血标本全基因组DNA后进行基因组合检测,并对先证者直系及旁系亲属血样进行一代测序验证,同时设计相关细胞实验。首先构建ACTA 2野生型及ACTA 2-Leu195*点突变质粒,然后将突变质粒及野生ACTA 2通过表达质粒分别转染细胞,48 h后提取RNA及总蛋白分别进行qPCR和Western blotting检测。结果通过高通量测序找到了ACTA 2基因c.583delC这一突变位点,同时证实了在家系中该位点杂合突变与家族性胸主动脉瘤及夹层密切相关。细胞实验结果显示,ACTA 2-Leu195*突变质粒组转染细胞后mRNA及蛋白表达较野生型均显著下降,提示突变体不能正常表达蛋白。结论通过临床家系研究和细胞水平实验发现了导致家族性胸主动脉瘤及夹层的ACTA 2的新突变位点,为家族性胸主动脉瘤及夹层的筛查、检测乃至临床治疗提供了新的路径。 展开更多
关键词 家族性胸主动脉瘤及夹层 acta 2 基因突变 蛋白表达异常
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单核细胞增生李斯特菌毒力基因inlB/actA双缺失突变株的构建 被引量:4
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作者 王莉 冯飞飞 +4 位作者 张强 冯莹颖 邓灵福 张晓莉 罗勤 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期182-185,共4页
单核细胞增生李斯特菌inlB和actA毒力基因的编码产物InlB和ActA是与其致病性相关的重要毒力因子,与该菌在细胞间扩散、传播有着直接的关系,其中肌动蛋白聚集因子ActA是细菌由细胞浆扩散至相邻细胞所必须的因子,而内化素InlB在对肝细胞... 单核细胞增生李斯特菌inlB和actA毒力基因的编码产物InlB和ActA是与其致病性相关的重要毒力因子,与该菌在细胞间扩散、传播有着直接的关系,其中肌动蛋白聚集因子ActA是细菌由细胞浆扩散至相邻细胞所必须的因子,而内化素InlB在对肝细胞的侵袭过程中起着重要作用。本研究中利用同源重组技术在inlB缺失菌株基础上成功构建了毒力基因inlB和actA双缺失的突变株,获得减毒突变株,为构建预防人类和动物疾病的疫苗载体奠定了基础。 展开更多
关键词 单核细胞增生李斯特菌 基因敲除 inlB基因 acta基因 同源重组
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血清H-FABP、ACTA、ADT、BNP及血管紧张素与心力衰竭的关系 被引量:14
4
作者 王书英 栾兴龙 《海南医学院学报》 CAS 2015年第7期908-910,共3页
目的:研究血清H-FABP、ACTA、ADT、BNP及血管紧张素与心力衰竭的关系。方法:选取于本院进行诊治的84例心力衰竭患者为观察组,并选取同时期的84名体检健康的同龄人为对照组,然后将两组的血清H-FABP、ACTA、ADT、BNP及血管紧张素水平进行... 目的:研究血清H-FABP、ACTA、ADT、BNP及血管紧张素与心力衰竭的关系。方法:选取于本院进行诊治的84例心力衰竭患者为观察组,并选取同时期的84名体检健康的同龄人为对照组,然后将两组的血清H-FABP、ACTA、ADT、BNP及血管紧张素水平进行比较,同时比较观察组中不同NYHA分级心力衰竭患者的血清检测水平,并采用Logistic分析处理上述血清指标与心力衰竭的关系。结果:观察组的血清H-FABP、ACTA、ADT、BNP及血管紧张素水平均高于对照组,同时观察组中较高NYHA分级心力衰竭患者的血清检测水平高于较低NYHA分级的患者,且经Logistic分析显示上述血清指标均与心力衰竭有密切的关系,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:血清H-FABP、ACTA、ADT、BNP及血管紧张素与心力衰竭有密切的关系,可作为心力衰竭患者诊治的重要监测指标。 展开更多
关键词 血清 H-FABP acta ADT BNP 血管紧张素 心力衰竭
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延边黄牛ACTA1基因的SNPs检测及其与肉质性状的关联分析 被引量:5
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作者 田万年 杨翰林 +1 位作者 夏广军 严昌国 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第4期1108-1114,共7页
试验旨在研究延边黄牛ACTA1基因的遗传变异,分析其多态性对肉质性状的影响。采用PCR-RFLP和PCR-SSCP方法探讨ACTA1基因多态性及其与肉质性状的关联性。结果发现,延边黄牛ACTA1基因存在2个突变位点:A193G突变,导致氨基酸Arg→Gly的错义突... 试验旨在研究延边黄牛ACTA1基因的遗传变异,分析其多态性对肉质性状的影响。采用PCR-RFLP和PCR-SSCP方法探讨ACTA1基因多态性及其与肉质性状的关联性。结果发现,延边黄牛ACTA1基因存在2个突变位点:A193G突变,导致氨基酸Arg→Gly的错义突变;A298G突变,导致氨基酸Lys→Arg的错义突变。χ2检验显示,A193G和A298G位点于检测群体中处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05)。关联分析显示,延边黄牛ACTA1基因2个突变位点的不同基因型与肌肉中肉豆蔻酸、油酸含量、眼肌面积、大理石花纹等级呈显著相关(P<0.05)。初步认为ACTA1基因对延边黄牛肉质性状有显著影响,可作为延边黄牛新品种早期选择的候选基因。 展开更多
关键词 延边黄牛 acta1基因 多态性 肉质性状
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猪ACTA2基因的克隆、表达分析及其与生产性状的关联 被引量:8
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作者 黄京书 熊远著 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期489-494,共6页
为鉴定对猪生产性状有重要影响的新分子标记,文章采用电子克隆结合PCR方法获得了猪肌动蛋白α2(Actin alpha 2,ACTA2)基因编码区序列和部分基因组序列,建立了第2内含子C1554T替换的PCR-HinfⅠ-RFLP基因分型方法,在所检测的7个不同猪群... 为鉴定对猪生产性状有重要影响的新分子标记,文章采用电子克隆结合PCR方法获得了猪肌动蛋白α2(Actin alpha 2,ACTA2)基因编码区序列和部分基因组序列,建立了第2内含子C1554T替换的PCR-HinfⅠ-RFLP基因分型方法,在所检测的7个不同猪群中除大白和梅大群体外,其他群体中均是C等位基因频率高于T等位基因的频率。标记与性状关联分析发现ACTA2基因型与肩部背膘厚、臀部背膘厚、肥肉率、瘦肉率、股二头肌pH和肌内脂肪显著或极显著相关,TT基因型与CC基因型相比具有更高的瘦肉率以及更低的肥肉率和背膘厚。通过Real-time RT-PCR分析发现ACTA2在大白和梅山两个品种猪骨骼肌中的表达量都随着日龄的增加而降低,在各个阶段,梅山猪中的表达量都比大白猪中的表达量高。 展开更多
关键词 acta2 PCR—RFLP 表达谱 关联分析
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单增李斯特菌ActA的表达、免疫原性研究及单克隆抗体的制备 被引量:3
7
作者 张辉 崔焕忠 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2010年第3期71-74,共4页
原核表达单增李斯特菌(Lm)ActA蛋白并进行亲合层析纯化,检测ActA的免疫原性,以表达蛋白为检测抗原制备Lm单克隆抗体,并对单抗的亚型、效价、亲合力及特异性进行测定。结果表明,成功表达了ActA蛋白;表达蛋白诱导了特异性的细胞免疫和体... 原核表达单增李斯特菌(Lm)ActA蛋白并进行亲合层析纯化,检测ActA的免疫原性,以表达蛋白为检测抗原制备Lm单克隆抗体,并对单抗的亚型、效价、亲合力及特异性进行测定。结果表明,成功表达了ActA蛋白;表达蛋白诱导了特异性的细胞免疫和体液免疫,具有良好的免疫原性;共获得4株抗Lm ActA单克隆抗体。其中3G6、4E10和2B9为IgG1亚类;腹水抗体效价,3G6和4E10为1∶64000,2B9为1∶32000;3G6、4E10和2B9的亲和常数分别为6.62×107M-1、5.67×107M-1和7.15×106M-1;3G6、2B4和4E10为Lm特异性单抗,2B9为致病性李斯特菌特异性单抗。所制备的单抗可用于Lm检测方法的建立。 展开更多
关键词 单增李斯特菌 acta 表达 免疫原性 单克隆抗体
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GFP用于单核细胞增生李斯特菌PrfA调控毒力基因actA转录表达的研究 被引量:1
8
作者 冯莹颖 张晓莉 +4 位作者 张强 罗勤 蒋苹 钱悦 冯爱平 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期139-143,共5页
PrfA是单核细胞增生李斯特菌(LM)中迄今为止发现的惟一个调控绝大多数毒力基因转录表达的蛋白因子。为了研究PrfA转录调控毒力基因表达的分子机制,将无启动子的绿色荧光蛋白(GFP)基因与毒力基因actA的启动子融合,连接到穿梭载体pLSV16... PrfA是单核细胞增生李斯特菌(LM)中迄今为止发现的惟一个调控绝大多数毒力基因转录表达的蛋白因子。为了研究PrfA转录调控毒力基因表达的分子机制,将无启动子的绿色荧光蛋白(GFP)基因与毒力基因actA的启动子融合,连接到穿梭载体pLSV16质粒上,构建成表达融合载体pLSV16-PactA-gfp,然后将其电转化入LM野生株P14、PrfA高表达突变株P14a和prfA基因等位缺失突变株A42中表达。利用荧光显微镜和荧光酶标仪检测上述3株细菌中绿色荧光蛋白的不同表达强度,从而评价actA基因依赖于PrfA的转录活性强弱。结果显示,绿色荧光蛋白在P14a中发出的荧光强度最高,P14次之,A42最弱,两两比较均有显著差异(P<0.01),表明毒力基因actA的转录水平高低与PrfA的活性成正相关,其转录表达依赖于PrfA的调控;该试验同时也显示GFP能方便、有效地用于研究PrfA调控LM不同毒力基因的转录表达水平。 展开更多
关键词 单核细胞增生李斯特菌 PrfA acta毒力基因 绿色荧光蛋白报告基因 转录调控
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论我国知识产权的刑事法律保护——以TRIPS协议与ACTA为视域 被引量:5
9
作者 马治国 王文 《苏州大学学报(哲学社会科学版)》 CSSCI 北大核心 2011年第5期102-106,共5页
在我国加入世界贸易组织(WTO)十周年之际,本文以TRIPS协议为视域对我国知识产权刑事法律保护加以回顾并认为:我国对所承诺TRIPS协议中知识产权的刑事法律保护义务通过国内法得到了切实落实,个别规定还高出了国际公约。随着知识经济的逐... 在我国加入世界贸易组织(WTO)十周年之际,本文以TRIPS协议为视域对我国知识产权刑事法律保护加以回顾并认为:我国对所承诺TRIPS协议中知识产权的刑事法律保护义务通过国内法得到了切实落实,个别规定还高出了国际公约。随着知识经济的逐渐发展,无论中国的主观意愿如何,越来越高标准的国际知识产权保护体系必将中国裹挟其中,对中国经济贸易的发展产生巨大影响。中国今后能否达到知识产权保护国际标准、这种国际标准是否符合中国国情无疑给中国知识产权刑事保护带来隐忧,而政府对知识产权保护的积极态度及其强有力的国家力量、法学界对中国知识产权刑事保护的积极探索与研究则是中国知识产权刑事保护的希望所在。本文提出我国知识产权刑事立法应采取分散型模式、立法内容应以达到国际公约基本要求的适度保护为准、应对相关出口企业普及相关国际公约知识以免受制裁。 展开更多
关键词 知识产权 刑事法律保护 TRIPS协议 acta
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真武汤对转基因扩张型心肌病小鼠心肌Acta1、Col3a1基因及蛋白表达的影响 被引量:6
10
作者 李峥 李文杰 于凯洋 《辽宁中医杂志》 CAS 2019年第3期642-646,共5页
目的:本研究旨在观察转基因扩张型心肌病小鼠心肌组织Acta1、Col3a1基因及蛋白表达变化,探究真武汤防治扩张型心肌病的分子生物学机制。方法:将cT nT R141W基因转入C57BL/6J小鼠,建立了心肌组织特异表达cT nT R141W基因的转基因小鼠模型... 目的:本研究旨在观察转基因扩张型心肌病小鼠心肌组织Acta1、Col3a1基因及蛋白表达变化,探究真武汤防治扩张型心肌病的分子生物学机制。方法:将cT nT R141W基因转入C57BL/6J小鼠,建立了心肌组织特异表达cT nT R141W基因的转基因小鼠模型,以C57BL/6J小鼠15只作为空白对照组,模型组小鼠60只,随机分为模型对照组、西药组、中药高剂量组及中药中剂量组,中药组以真武汤高中剂量对模型小鼠治疗4周,卡托普利为阳性对照药物。4周后采用qRT-PCR法检测各组心肌组织Acta1、Col3a1相对表达量; Western Blot法检测各组心肌组织Acta1、Col3a1蛋白表达。结果:与空白对照组比较模型对照组Acta1、Col3a1基因及蛋白表达显著升高(P <0. 01),与模型对照组比较西药组及中药高中剂量组Acta1、Col3a1基因及蛋白表达均显著下降(P <0. 01)。结论:DCM的发病机制与心肌组织中Acta1与Col3a1mRNA及蛋白表达升高有关,真武汤通过下调心肌组织中Acta1与Col3a1 mRNA及蛋白表达,抑制心肌细胞肥大及纤维化过程,起到防治DCM的作用。 展开更多
关键词 扩张型心肌病 cTnTR141W 真武汤 acta1 Col3a1
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单核细胞增生李斯特菌ActA单克隆抗体的制备 被引量:1
11
作者 张辉 崔焕忠 王兴龙 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第5期82-85,共4页
原核表达单核细胞增生李斯特菌(Lm)ActA蛋白并进行亲合层析纯化,以Lm全菌为免疫原、以纯化的表达蛋白为检测抗原制备Lm单克隆抗体,共获得4株抗Lm ActA单克隆抗体。其中3G6、4E10和2B9为IgG1亚类,2B4为IgM亚类;检测腹水抗体效价,3G6和4E1... 原核表达单核细胞增生李斯特菌(Lm)ActA蛋白并进行亲合层析纯化,以Lm全菌为免疫原、以纯化的表达蛋白为检测抗原制备Lm单克隆抗体,共获得4株抗Lm ActA单克隆抗体。其中3G6、4E10和2B9为IgG1亚类,2B4为IgM亚类;检测腹水抗体效价,3G6和4E10为1∶64 000,2B9为1∶32 000;3G6、4E10和2B9的亲和常数分别为6.62×107L/mol、5.67×107L/mol和7.15×106L/mol;3G6、2B4和4E10为Lm ActA特异性单抗,2B9为致病性李斯特菌特异性单抗。所制备的单抗为Lm检测方法的建立奠定了基础。 展开更多
关键词 单核细胞增生李斯特菌 acta 表达 单克隆抗体 制备
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知识产权执法的国际新标准以及我国的应对——以ACTA民事救济措施为例 被引量:4
12
作者 张伟君 李茂 《东方法学》 2012年第3期58-67,共10页
ACTA作为知识产权执法的最新国际标准,在个别侵权救济措施方面超越了TRIPs协议的要求。但是,我国现行知识产权法与ACTA之间并不存在深刻的矛盾,甚至在大多数方面已经符合ACTA的标准。因此,是否接受ACTA规则可以作为我国政府在知识产权... ACTA作为知识产权执法的最新国际标准,在个别侵权救济措施方面超越了TRIPs协议的要求。但是,我国现行知识产权法与ACTA之间并不存在深刻的矛盾,甚至在大多数方面已经符合ACTA的标准。因此,是否接受ACTA规则可以作为我国政府在知识产权国际谈判中的筹码。同时,ACTA提供了一个全面审视、评估、反思和构建我国知识产权执法制度的机会。 展开更多
关键词 acta TRIPS协议 知识产权执法 民事救济
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槟榔江水牛ACTA1基因多态性与生长性状的相关性研究 被引量:3
13
作者 张斌 王静 +3 位作者 宋敏艳 刘学洪 李杨 史宪伟 《中国牛业科学》 2014年第6期31-33,共3页
[目的]揭示α-肌动蛋白1(actin alpha 1,ACTA1)基因多态性与槟榔江水牛生长性状的相关性。[方法]采用PCR扩增及基因测序技术研究了槟榔江水牛ACTA1基因多态性,并分析了该基因变异与水牛生长性状的关联关系。[结果]检测到槟榔江水牛ACTA... [目的]揭示α-肌动蛋白1(actin alpha 1,ACTA1)基因多态性与槟榔江水牛生长性状的相关性。[方法]采用PCR扩增及基因测序技术研究了槟榔江水牛ACTA1基因多态性,并分析了该基因变异与水牛生长性状的关联关系。[结果]检测到槟榔江水牛ACTA1基因存在2个SNP位点,分别位于第5内含子与第6外显子,水牛ACTA1基因变异与体重、管围等性状存在显著相关。[结论]本研究首次检测了槟榔江水牛ACTA1基因多态性与生长发育性状的关联关系,为槟榔江水牛遗传资源保护利用及标记辅助选择提供了理论依据。 展开更多
关键词 槟榔江水牛 acta1基因 多态性 生长性状
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话语视角下的知识产权国际保护秩序:以ACTA立法进程为例 被引量:2
14
作者 杨静 《东方法学》 CSSCI 2016年第1期96-104,共9页
知识产权已成为20世纪中后期以降国际舞台最具利益纷争与政治争议的话题。话语视角能够促进知识产权国际保护研究的视域拓展,是研究知识产权国际保护论争与秩序的有效路径。话语既是权力结构的现实反映,又作为一种真实的拟制而成为知识... 知识产权已成为20世纪中后期以降国际舞台最具利益纷争与政治争议的话题。话语视角能够促进知识产权国际保护研究的视域拓展,是研究知识产权国际保护论争与秩序的有效路径。话语既是权力结构的现实反映,又作为一种真实的拟制而成为知识产权复杂机制网络的介入力量,在塑造、影响制度身份与认同,促进机制的演进与重构方面起着能动作用。对ACTA立法进程的实证分析表明,话语作为一种非物质力量构建、影响知识产权国际保护秩序的生成。 展开更多
关键词 语言分析 acta 知识产权国际保护机制 民主商谈
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TRIPS-PLUS标准:ACTA的知识产权边境措施研究 被引量:1
15
作者 朱玛 《理论月刊》 CSSCI 北大核心 2012年第10期120-124,共5页
知识产权边境措施是一个国家境内措施的有效补充,TRIPS协定首次确定了知识产权边境措施的国际规则。但发达国家对知识产权的高要求并未就此止步,ACTA便是这种努力的最新进展和实践。与TRIPS协定相比较,ACTA关于知识产权边境保护的规定... 知识产权边境措施是一个国家境内措施的有效补充,TRIPS协定首次确定了知识产权边境措施的国际规则。但发达国家对知识产权的高要求并未就此止步,ACTA便是这种努力的最新进展和实践。与TRIPS协定相比较,ACTA关于知识产权边境保护的规定更加细致和严格。鉴于我国知识产权边境保护的立法起点高,ACTA对我国国内法并没有造成实质性的挑战。但是,ACTA对于我国国际贸易环境的影响却不容忽视。 展开更多
关键词 知识产权边境措施 TRIPS协定 acta
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单增李斯特氏菌ActA的原核表达与纯化
16
作者 张辉 王兴龙 《现代畜牧兽医》 2008年第3期50-53,共4页
PCR扩增单增李斯特氏菌ActA基因,纯化后克隆到pMD 18T simple vector中,以BamHI和EcoRI双酶切克隆载体pMD-18T/ActA,再将其亚克隆到表达载体pGEX-3X中,获得重组质粒pGEX-3X/ActA,转化E.coli BL21(DE3)细胞,IPTG诱导融合蛋白(GST-ActA)表... PCR扩增单增李斯特氏菌ActA基因,纯化后克隆到pMD 18T simple vector中,以BamHI和EcoRI双酶切克隆载体pMD-18T/ActA,再将其亚克隆到表达载体pGEX-3X中,获得重组质粒pGEX-3X/ActA,转化E.coli BL21(DE3)细胞,IPTG诱导融合蛋白(GST-ActA)表达,Western blot分析表明该蛋白可与单增李斯特氏菌多克隆抗体发生特异性反应。试验采用Glutathione Sepharose 4B亲合层析纯化融合蛋白。对单增李斯特氏菌ActA的原核表达与纯化的研究为单增李斯特氏菌诊断试剂的研制及ActA的免疫原性研究奠定了基础。 展开更多
关键词 单增李斯特氏菌 acta 原核表达 蛋白纯化
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基于单核细胞增生李斯特菌actA基因的环介导等温扩增技术快速检测方法的建立 被引量:10
17
作者 胡仲皓 单兴根 +2 位作者 何晓花 吴金节 胡青海 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期47-52,共6页
单核细胞增生李斯特菌(Lm)是主要的食源性致病菌之一,也是一种重要的人畜共患病原菌,感染人和动物后主要表现为败血症、脑膜炎和单核细胞增多症等。为建立快速检测Lm的方法,本研究以Lm毒力因子actA作为特异性检测的靶基因,通过条件优化... 单核细胞增生李斯特菌(Lm)是主要的食源性致病菌之一,也是一种重要的人畜共患病原菌,感染人和动物后主要表现为败血症、脑膜炎和单核细胞增多症等。为建立快速检测Lm的方法,本研究以Lm毒力因子actA作为特异性检测的靶基因,通过条件优化初步建立了快速检测食源性Lm的环介导等温扩增(LAMP)方法。并采用该方法进行了特异性、敏感性及临床样品检测试验。结果显示,利用建立的LAMP方法检测Lm、肠出血性大肠杆菌O157:H7、鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、小肠结肠炎耶尔森菌、产气荚膜梭菌、空肠弯曲菌、胸膜肺炎放线杆菌、副猪嗜血杆菌、多杀性巴氏杆菌、猪链球菌、猪丹毒丝菌或支气管败血波氏杆菌基因组DNA,除Lm为阳性外,其他病原菌均为阴性,表明该方法的特异性较强;将Lm菌液10倍倍比稀释为4.7×10^(9)cfu/mL~4.7×10^(0)cfu/mL,再采用该LAMP方法和常规PCR方法进行检测,结果显示,LAMP对Lm的检测下限为4.7×10^(1)cfu/mL,而常规PCR对Lm的检测下限为4.7×10^(3)cfu/mL,即LAMP比普通PCR的敏感性高100倍,表明本研究建立的LAMP方法敏感性较高;采用建立的LAMP方法对118份猪肉临床样品进行检测,结果显示有3份样品为阳性,与常规PCR和国标的检测结果均一致。本研究基于Lm actA基因建立了Lm LAMP检测方法,且该方法具有特异性强、敏感性高、结果可视等优点,适用于实验室和基层食品安全监管部门的现场快速检测。 展开更多
关键词 食源性致病菌 单增李斯特菌 环介导等温扩增技术(LAMP) acta基因 可视化检测
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A BRIEF INTRODUCTION OF ACTA AGRONOMICA SINICA
18
《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期M0003-M0003,共1页
Acta Agronomica Sinica (AAS, ISSN 0496-3490) is a monthly academic journal co-sponsored by Crop Science Society of China and the Institute of Crop Sciences, Chinese Academy of Agricultural Sciences,
关键词 AAS A BRIEF INTRODUCTION OF acta AGRONOMICA SINICA acta
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A BRIEF INTRODUCTION OF ACTA AGRONOMICA SINICA
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《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1418-,共1页
Acta Agronomica Sinica(AAS,ISSN 0496-3490)is a monthly academic journal co-sponsored by Crop Science Society of China and the Institute of Crop Science,Chinese Academy of Agricultural Sciences,under the leadership of ... Acta Agronomica Sinica(AAS,ISSN 0496-3490)is a monthly academic journal co-sponsored by Crop Science Society of China and the Institute of Crop Science,Chinese Academy of Agricultural Sciences,under the leadership of China Association for Science and Technology and published by Science Press,Chinese Academy of Sciences.AAS was firstly published in 1962.The predecessors were Chinese Journal of Agricultural Research started in 1950 and 展开更多
关键词 AAS A BRIEF INTRODUCTION OF acta AGRONOMICA SINICA acta
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A BRIEF INTRODUCTION OF ACTA AGRONOMICA SINICA
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《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期M0003-M0003,共1页
Acta Agronomica Sinica (AAS, ISSN 0496-3490) is a monthly academic journal co-sponsored by Crop Science Society of China and the Institute of Crop Sciences, Chinese Academy of Agricultural Sciences, under the
关键词 AAS A BRIEF INTRODUCTION OF acta AGRONOMICA SINICA acta
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