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嗜酸氧化亚铁硫杆菌半胱氨酸合成酶的表达、纯化及其性质鉴定
被引量：
4
1
作者
郑春丽
李艳君
+1 位作者
钱林
柳建设
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第3期180-184,共5页
半胱氨酸合成酶是半胱氨酸合成反应的关键限速酶,催化了半胱氨酸合成的最后一个步骤。以A.ferro-oxidans ATCC 23270基因组为模板,通过PCR扩增得到编码半胱氨酸合成酶(cysM)的基因,与原核表达载体PLM 1构建重组体,转入大肠杆菌DH5α中,...
半胱氨酸合成酶是半胱氨酸合成反应的关键限速酶,催化了半胱氨酸合成的最后一个步骤。以A.ferro-oxidans ATCC 23270基因组为模板,通过PCR扩增得到编码半胱氨酸合成酶(cysM)的基因,与原核表达载体PLM 1构建重组体,转入大肠杆菌DH5α中,测序正确后,加IPTG诱导表达,用一步亲和层析法纯化出了浓度和纯度都较高的半胱氨酸合成酶。由蛋白颜色和紫外分析,确定是以PLP辅基作为活性中心。表达产物进行SDS-PAGE分析,证实分子量为32 kD。
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关键词
嗜酸氧化亚铁硫杆菌
半胱氨酸合成酶(
cysm
)
克隆
表达
纯化
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职称材料
题名
嗜酸氧化亚铁硫杆菌半胱氨酸合成酶的表达、纯化及其性质鉴定
被引量：
4
1
作者
郑春丽
李艳君
钱林
柳建设
机构
东华大学环境科学与工程学院
内蒙古科技大学数理与生物工程学院
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第3期180-184,共5页
基金
全国优秀博士学位论文专项资金资助项目(200549)
国家自然科学基金项目(0874032)
上海市重点学科建设项目(B604)
文摘
半胱氨酸合成酶是半胱氨酸合成反应的关键限速酶,催化了半胱氨酸合成的最后一个步骤。以A.ferro-oxidans ATCC 23270基因组为模板,通过PCR扩增得到编码半胱氨酸合成酶(cysM)的基因,与原核表达载体PLM 1构建重组体,转入大肠杆菌DH5α中,测序正确后,加IPTG诱导表达,用一步亲和层析法纯化出了浓度和纯度都较高的半胱氨酸合成酶。由蛋白颜色和紫外分析,确定是以PLP辅基作为活性中心。表达产物进行SDS-PAGE分析,证实分子量为32 kD。
关键词
嗜酸氧化亚铁硫杆菌
半胱氨酸合成酶(
cysm
)
克隆
表达
纯化
Keywords
acidithiobacillus ferrooxidans cysteine synthase（cysm） clone expression purification
分类号
Q814 [生物学—生物工程]
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题名
作者
出处
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被引量
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1
嗜酸氧化亚铁硫杆菌半胱氨酸合成酶的表达、纯化及其性质鉴定
郑春丽
李艳君
钱林
柳建设
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
4
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