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精氨酸代琥珀酸合成酶-1对胰岛β细胞增殖与凋亡的影响
1
作者 夏芷晴 张紫晨 +3 位作者 付麒 何云强 杨涛 孙敏 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2023年第6期764-771,共8页
目的:探讨精氨酸代琥珀酸合成酶⁃1(argininosuccinate synthetase 1,ASS1)对胰岛β细胞增殖与凋亡的影响及机制。方法:利用siRNA和慢病毒载体在胰岛β⁃TC6细胞中分别敲低和过表达ASS1;5⁃乙炔基⁃2′⁃脱氧尿嘧啶核苷(5⁃ethynyl⁃2′⁃deoxyu... 目的:探讨精氨酸代琥珀酸合成酶⁃1(argininosuccinate synthetase 1,ASS1)对胰岛β细胞增殖与凋亡的影响及机制。方法:利用siRNA和慢病毒载体在胰岛β⁃TC6细胞中分别敲低和过表达ASS1;5⁃乙炔基⁃2′⁃脱氧尿嘧啶核苷(5⁃ethynyl⁃2′⁃deoxyuridine,EdU)和CCK⁃8检测细胞增殖能力;Annexin V⁃PI流式细胞术和原位末端转移酶标记技术(terminal dUTP nick⁃end labeling assay,TUNEL)检测细胞凋亡水平;Western blot检测B细胞淋巴瘤⁃2(B⁃cell leukaemia⁃2,Bcl⁃2)蛋白、Bcl⁃2相关X蛋白(Bcl⁃2 associated X protein,Bax)、半胱氨酸天冬氨酸酶3(Caspase3)、切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶⁃3(cleaved Caspase⁃3)、凋亡诱导因子(apoptosis inducing factor,AIF)、细胞核增殖抗原(Ki67)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian rapamycin target protein,mTOR)的表达水平;RT⁃qPCR检测AIF、Ki67和mTOR mRNA水平。结果:①与对照相比,敲低ASS1后,胰岛β细胞EdU阳性率和CCK⁃8细胞增殖活力降低,TUNEL阳性细胞数和AV/PI检测的细胞凋亡率升高。胰岛β细胞内AIF表达量明显升高,Bax/Bcl⁃2比值下降,Caspase⁃3活性降低。②过表达ASS1后,TUNEL阳性细胞数和AV/PI检测的细胞凋亡率均较对照组降低,伴随胰岛β细胞内Ki67和mTOR表达量升高。但胰岛β细胞EdU阳性率和CCK⁃8细胞增殖活力无明显变化。结论:ASS1过表达可能激活mTOR信号通路促进胰岛β细胞增殖;ASS1表达降低时,胰岛β细胞可通过AIF途径启动细胞凋亡。ASS1可能在胰岛β细胞的增殖和凋亡中发挥一定调控作用。 展开更多
关键词 精氨酸代琥珀酸合成酶 胰岛Β细胞 增殖 凋亡
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一氧化氮合成与尿素循环酶的关系:“瓜氨酸—一氧化氮循环” 被引量：7
2
作者 王冰梅 《中国体育科技》 北大核心 2005年第5期130-131,140,共3页
由于NO合成不是一条闭合环路,产物C it对反应存在负反馈调节,因此,只有在增加精氨酸供应的同时清除瓜氨酸,才能促进NO合成。“瓜氨酸—一氧化氮循环”是细胞内保持精氨酸补充与瓜氨酸清除处于动态平衡的途径。在小肠、肾、脾、脑、血管... 由于NO合成不是一条闭合环路,产物C it对反应存在负反馈调节,因此,只有在增加精氨酸供应的同时清除瓜氨酸,才能促进NO合成。“瓜氨酸—一氧化氮循环”是细胞内保持精氨酸补充与瓜氨酸清除处于动态平衡的途径。在小肠、肾、脾、脑、血管平滑肌等肝外组织或细胞,虽然不存在完整的尿素循环,但存在尿素循环中的一些酶,如A S、AL,它们能将NO合成的终产物瓜氨酸重新合成精氨酸,供NO S再利用。一般来说,在生理状况下,除肝组织结构性表达丰富的A S、AL外,其他细胞只有微量的A S、AL活性,在受到免疫刺激的病理条件下,A S、AL可与iNO S共同表达,但其出现的时间、部位、程度不一。与肝实质细胞尿素循环的高效性和各酶连接的紧凑性相比,非肝细胞的“C it-NO cycle”是低效的,其低效性原因尚不可知,很可能对于大多数细胞来说,细胞外精氨酸提供了诱导性NO的大部分底物。 展开更多
关键词 一氧化氮 尿素循环酶 瓜氨酸 一氧化氮循环 精氨酸代琥珀酸合成酶 精氨酸代琥珀 酸裂解酶
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乳腺癌中ASS1的表达及其与临床病理特征和预后的相关性
3
作者 聂雅婷 丁兰 +2 位作者 袁媛 刘磊 沈立新 《西北大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期627-634,共8页
探究乳腺癌组织中尿素循环关键分子及其与乳腺癌临床病理特征和预后的关系。首先,通过TCGA及GTEx数据库筛选乳腺癌中差异表达的尿素循环关键分子,分析其与乳腺癌患者预后的关系。然后,收集2010年11月至2016年12月在西京医院进行手术治疗... 探究乳腺癌组织中尿素循环关键分子及其与乳腺癌临床病理特征和预后的关系。首先,通过TCGA及GTEx数据库筛选乳腺癌中差异表达的尿素循环关键分子,分析其与乳腺癌患者预后的关系。然后,收集2010年11月至2016年12月在西京医院进行手术治疗的97例乳腺癌患者以及54例非肿瘤(乳腺腺病)患者的手术标本,制作组织芯片,利用免疫组化染色法研究乳腺癌和正常乳腺(乳腺腺病)组织中精氨酸代琥珀酸合成酶(argininosuccinate synthase 1,ASS1)的表达情况,并确定其与临床病理特征和预后之间的关系。分析TCGA及GTEx数据库发现,尿素循环关键分子ASS1在乳腺癌中表达下降,并与患者的预后显著相关(p<0.05)。免疫组化染色显示ASS1主要定位于胞浆,在乳腺癌中表达下降,且与Ki-67表达及分子分型显著相关(p=0.0215,0.0005)。ASS1在乳腺癌中表达显著下降,与肿瘤的分子分型、Ki-67表达密切相关,推测其在肿瘤发生发展中起着重要的作用。因此,ASS1低表达可以作为评估乳腺癌预后的潜在指标。 展开更多
关键词 尿素循环 ass1(精氨酸代琥珀酸合成酶) 乳腺癌 预后
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