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基于AMPK/ACC/CPT1A信号通路探讨羟基茜草素对AML-12细胞脂质沉积的影响
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作者 侯渌茗 李莹 +3 位作者 许嘉鸿 李正鑫 马函琳 陈逸云 《中成药》 北大核心 2025年第9期3096-3101,共6页
目的探讨羟基茜草素(Pur)对AML-12细胞脂质沉积的影响。方法通过棕榈酸+油酸(PO,0.5+0.25 mmol/L)或棕榈酸(PA,0.5 mmol/L)诱导AML-12细胞,建立体外细胞脂质沉积模型。将细胞分为对照组、模型组和Pur 20、40、80μmol/L组。CCK8法测定... 目的探讨羟基茜草素(Pur)对AML-12细胞脂质沉积的影响。方法通过棕榈酸+油酸(PO,0.5+0.25 mmol/L)或棕榈酸(PA,0.5 mmol/L)诱导AML-12细胞,建立体外细胞脂质沉积模型。将细胞分为对照组、模型组和Pur 20、40、80μmol/L组。CCK8法测定细胞活力;生化试剂盒检测细胞甘油三酯(TG)水平;尼罗红染色检测细胞脂滴沉积情况;RT-qPCR法检测细胞内相关脂质代谢基因SREBP1c、FASN、CD36、ACACα、PPAR-γ、SCD 1,炎症基因IL-1β、IL-6、TNF-α、CCL5、CXCL 10及AMPK/ACC/CPT1A通路相关基因AMPKα1、AMPKα2、ACC、CPT1A mRNA表达;Western blot法检测细胞p-AMPKα、AMPKα、p-ACC、ACC、CPT1A蛋白表达。结果0~100μmol/L Pur对AML-12细胞活力无明显抑制作用(P>0.05)。与对照组比较,模型组AML-12细胞尼罗红染色半定量和TG水平升高(P<0.01);SREBP1c、FASN、CD36、ACACα、PPAR-γ、SCD1、IL-1β、IL-6、TNF-α、CCL5、CXCL 10 mRNA表达升高(P<0.01),AMPKα1、AMPKα2、ACC、CPT1A mRNA表达降低(P<0.01);p-AMPK/AMPK、p-ACC/ACC比值及CPT1A蛋白表达降低(P<0.01)。与模型组比较,Pur 40、80μmol/L组细胞尼罗红染色半定量和TG水平降低(P<0.01);SREBP1c、FASN、CD36、ACACα、PPAR-γ、SCD1、IL-1β、IL-6、TNF-α、CCL5、CXCL 10 mRNA表达降低(P<0.05,P<0.01),AMPKα1、AMPKα2、ACC、CPT1A mRNA表达升高(P<0.05,P<0.01);p-AMPK/AMPK、p-ACC/ACC比值及CPT1A蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论Pur对AML-12细胞脂质沉积有较好的抑制作用,其作用可能与调控AMPK/ACC/CPT1A信号通路相关。 展开更多
关键词 羟基茜草素 AML-12细胞 棕榈酸 油酸 脂质沉积 脂代谢 炎症 AMPK/acc/CPT1A信号通路
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渗透胁迫和D-Arg对小麦幼苗内源多胺、ACC和MACC含量及乙烯产生的影响 被引量:4
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作者 张满效 王辉 +1 位作者 黄久常 王邦锡 《兰州大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期87-92,共6页
渗透胁迫能够诱导小麦幼苗内源多胺、ACC和MACC累积,增加乙烯释出;ADC的竞争性 抑制剂D-Arg可以有效地逆转内源PA,ACC以及乙烯在渗透胁迫下的累积和释出增加,但 能促进胁迫下MACC的累积.这是由于D-Arg竞争抑制了渗透胁迫下小麦幼苗... 渗透胁迫能够诱导小麦幼苗内源多胺、ACC和MACC累积,增加乙烯释出;ADC的竞争性 抑制剂D-Arg可以有效地逆转内源PA,ACC以及乙烯在渗透胁迫下的累积和释出增加,但 能促进胁迫下MACC的累积.这是由于D-Arg竞争抑制了渗透胁迫下小麦幼苗内源PA的生物 合成,有可能造成氨丙基的累积,加速了Met循环,导致ACC过量形成并迅速转化为MACC,因 此,就表现出OS+D-Arg处理6 h和12 h小麦幼苗内源PA和ACC含量下降,MACC明显积累,乙 烯释出量减少.综合实验结果认为:D-Arg可能与植物体渗透胁迫下的“去毒代谢”保护 机制有关. 展开更多
关键词 乙烯 acc Macc PA 渗透胁迫 D-Arg 小麦幼苗
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基于驾驶员行为模拟的ACC控制算法 被引量:8
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作者 管欣 王景武 +1 位作者 高振海 张立存 《汽车工程》 EI CSCD 北大核心 2004年第2期205-209,共5页
基于驾驶员最优预瞄加速度模型建立了一种适用于多种典型行驶工况的ACC控制算法。该算法采用基于多目标模糊决策方法的驾驶安全性、工效性、轻便性与合法性评价指标以及基于预瞄跟随理论的微分校正函数 ,描述了ACC控制系统对自由工况、... 基于驾驶员最优预瞄加速度模型建立了一种适用于多种典型行驶工况的ACC控制算法。该算法采用基于多目标模糊决策方法的驾驶安全性、工效性、轻便性与合法性评价指标以及基于预瞄跟随理论的微分校正函数 ,描述了ACC控制系统对自由工况、跟随工况和切入工况等不同行驶条件及汽车动力学系统强非线性特性的考虑。 展开更多
关键词 驾驶员行为模拟 acc控制算法 汽车 多目标模糊决策 acc控制系统 自适应巡航控制
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蝴蝶兰ACC氧化酶和ACC合成酶融合反义表达载体的构建 被引量:4
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作者 王宇腾 崔波 +3 位作者 蒋素华 武思 牛苏燕 叶永忠 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2011年第6期115-117,121,共4页
为了获得具有超常花期的蝴蝶兰新品系,根据已报道的蝴蝶兰ACC合成酶(ACS)基因和ACC氧化酶(ACO)基因的序列,设计引物从蝴蝶兰总RNA中克隆出ACS保守区的461 bp片段和ACO的333 bp片段,完成2个基因的克隆和测序后,将ACS基因片段和ACO基因片... 为了获得具有超常花期的蝴蝶兰新品系,根据已报道的蝴蝶兰ACC合成酶(ACS)基因和ACC氧化酶(ACO)基因的序列,设计引物从蝴蝶兰总RNA中克隆出ACS保守区的461 bp片段和ACO的333 bp片段,完成2个基因的克隆和测序后,将ACS基因片段和ACO基因片段以反义的方向插入到中间载体pBI221 CaMV启动子的下游,酶切后获得含有CaMV启动子的ACS和ACO基因的反义融合片段。将此包含启动子的反义融合片段连接到植物表达载体pCAM-BIA3301中,获得ACC合成酶基因和ACC氧化酶基因融合的反义表达载体,将构建好的植物表达载体转化农杆菌LBA4404,用于侵染蝴蝶兰原球茎。 展开更多
关键词 蝴蝶兰 acc氧化酶 acc合成酶 融合反义基因 根癌农杆菌
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抑制ACC合酶和ACC氧化酶对植物贮藏保鲜的影响 被引量:4
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作者 张红星 王廿 韩涛 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第9期269-271,共3页
乙烯在植物成熟过程中起着重要的作用。ACC合酶和ACC氧化酶是植物乙烯生物合成的限速酶,在调节乙烯生物合成中起关键作用。本文从基因克隆及表达调控方面综述了ACC合酶和ACC氧化酶分子生物学研究进展,并介绍了抑制ACC合酶和ACC氧化酶对... 乙烯在植物成熟过程中起着重要的作用。ACC合酶和ACC氧化酶是植物乙烯生物合成的限速酶,在调节乙烯生物合成中起关键作用。本文从基因克隆及表达调控方面综述了ACC合酶和ACC氧化酶分子生物学研究进展,并介绍了抑制ACC合酶和ACC氧化酶对植物乙烯生物合成和花卉保鲜及果蔬贮藏的影响。 展开更多
关键词 乙烯生物合成 acc合酶 acc氧化酶 贮藏
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农杆菌介导法将ACC合成酶和氧化酶反义基因转入日本甜柿的研究 被引量:6
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作者 刘永巨 马俊莲 +1 位作者 张子德 宋春丽 《湖北农业科学》 北大核心 2009年第8期1800-1802,共3页
以日本甜柿品种次郎(Diospyros kaki Thunb.cv.Jirou)的叶片为外植体,通过农杆菌介导法,建立了次郎柿遗传转化体系。结果表明,菌液OD600值为0.6,乙酰丁香酮浓度为200mg·L-1,筛选培养3d,头孢霉素为300mg·L-1的转化率最高。在... 以日本甜柿品种次郎(Diospyros kaki Thunb.cv.Jirou)的叶片为外植体,通过农杆菌介导法,建立了次郎柿遗传转化体系。结果表明,菌液OD600值为0.6,乙酰丁香酮浓度为200mg·L-1,筛选培养3d,头孢霉素为300mg·L-1的转化率最高。在此条件下,将ACC合成酶和氧化酶的反义联合基因导入到次郎柿的组培苗中,经PCR检测,得到了8株转基因植株。 展开更多
关键词 次郎柿 acc合成酶 acc氧化酶 转基因
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C型管嵌入深度与结构面压力对ACC加固作用影响试验研究
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作者 仝潇 刘楠 +4 位作者 单仁亮 李兆龙 赵岩 刘冬 代卫林 《煤炭工程》 北大核心 2025年第9期165-174,共10页
管索组合结构(ACC)作为一种新型支护结构已应用于多个井巷工程。为了解决工程应用中对C型管嵌入岩壁深度与结构面压力对ACC加固作用影响尚不清晰的问题,采用自主研发的管索拉剪试验系统,分别测试了5种不同C型管嵌入岩壁深度以及3种不同... 管索组合结构(ACC)作为一种新型支护结构已应用于多个井巷工程。为了解决工程应用中对C型管嵌入岩壁深度与结构面压力对ACC加固作用影响尚不清晰的问题,采用自主研发的管索拉剪试验系统,分别测试了5种不同C型管嵌入岩壁深度以及3种不同初始预紧力条件下ACC的剪切力学性能,获取了ACC的剪切荷载-剪切位移曲线及其剪切变形量,研究了不同C型管嵌入岩壁深度下ACC的力学性能表现。试验结果表明,嵌入深度大的C型管会增加ACC的剪切荷载及剪切变形量,与嵌入深度0 mm相比,嵌入深度为50、100、150及300 mm时,峰值剪切荷载分别增加20.7%、43.1%、50.4%和54.6%,合理的C型管嵌入深度能够有效提高ACC的加固效果;与结构面无正压力比较,初始预紧力提供给结构面的正压力配合ACC高抗剪性能可以进一步提高整个支护系统的峰值剪切荷载;不同初始预紧力下ACC峰值剪切荷载和剪切变形量明显不同,其峰值剪切荷载和剪切变形量通过增加初始预应荷载而减小;ACC在剪切方向上的延展性远远大于锚索,有效解决了在施加高预紧力后,锚索的剪切位移显著减少的问题。基于试验结果提出了C型管参数设计方法,并详细介绍了ACC施工工艺,研究结果可为ACC在煤巷工程中的应用设计提供参考。 展开更多
关键词 管索组合结构 锚索 剪切试验 剪切荷载 剪切位移
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无定形碳酸钙(ACC)的制备和稳定性研究进展
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作者 周宇彤 李沁娱 +4 位作者 郑丹婷 徐圣波 晏培清 张兆鸿 蒋久信 《陶瓷学报》 北大核心 2025年第1期43-59,共17页
无定形CaCO_(3)(amorphous calcium carbonate,ACC)作为晶态CaCO_(3)的重要前驱体,在生物矿化中起着重要作用。因其良好的生物相容性,ACC广泛应用于补钙、骨再生、生物医药、药物载体和蛋白质吸附等方面。虽然已有多种通过模拟计算得到... 无定形CaCO_(3)(amorphous calcium carbonate,ACC)作为晶态CaCO_(3)的重要前驱体,在生物矿化中起着重要作用。因其良好的生物相容性,ACC广泛应用于补钙、骨再生、生物医药、药物载体和蛋白质吸附等方面。虽然已有多种通过模拟计算得到的结构模型,但ACC的真实结构尚存在争议。由于ACC极低的热力学稳定性,特别是水的存在能够促进其向球霰石、文石或方解石的结晶,因此ACC在合成和储存均面临诸多挑战。通过系统性地综述近年来ACC的合成方法以及反应因素对ACC稳定和结晶的影响,总结了各合成体系的优缺点,指出了无水体系对ACC的合成与储存具有的独特优势。最后,提出了ACC的制备和存储所面临的挑战,并对未来ACC相关材料的发展进行了展望。 展开更多
关键词 碳酸钙 无定形碳酸钙 合成 储存 研究进展
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2013年AHA/ACC/CDC有效控制高血压的科学建议解读
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作者 张宇清 《中国医学前沿杂志(电子版)》 2013年第12期68-70,共3页
由美国心脏协会(AHA)、美国心脏病学会(ACC)和美国疾病预防与控制中心(CDC)共同制定的《有效控制高血压的科学建议》[1](以下简称《建议》)于2013年11月15日在高血压杂志(Hypertension)在线发表。这是第一次由这3个学术和疾... 由美国心脏协会(AHA)、美国心脏病学会(ACC)和美国疾病预防与控制中心(CDC)共同制定的《有效控制高血压的科学建议》[1](以下简称《建议》)于2013年11月15日在高血压杂志(Hypertension)在线发表。这是第一次由这3个学术和疾病预防组织在高血压的防控方面提出联合的建议。 展开更多
关键词 高血压 科学建议 防控 治疗率 疾病预防 AHA/acc/CDC 血压控制率 acc 噻嗪类 苯骈噻二嗪类 CDC
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水稻籽粒中乙烯和ACC对土壤水分的反应及其与籽粒灌浆的关系 被引量:20
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作者 刘凯 叶玉秀 +2 位作者 唐成 王志琴 杨建昌 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期539-546,共8页
以武运粳8号(粳稻)和扬稻6号(籼稻)为材料,自抽穗后9d至成熟期进行保持浅水层(WW)、土壤轻度落干(MD)和土壤水分严重亏缺(SD)3种处理。观察在不同土壤水分条件下灌浆期籽粒中乙烯和1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)浓度的变化及其与籽粒灌浆的... 以武运粳8号(粳稻)和扬稻6号(籼稻)为材料,自抽穗后9d至成熟期进行保持浅水层(WW)、土壤轻度落干(MD)和土壤水分严重亏缺(SD)3种处理。观察在不同土壤水分条件下灌浆期籽粒中乙烯和1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)浓度的变化及其与籽粒灌浆的关系,并使用化学调控物质进行验证。结果表明,MD显著提高籽粒灌浆速率和粒重,SD明显降低籽粒灌浆速率和粒重。籽粒中乙烯释放速率和ACC浓度在MD中降低,在SD中增加。籽粒乙烯释放速率及根系伤流液中ACC浓度与籽粒中ACC浓度呈极显著的正相关。籽粒灌浆速率与乙烯释放速率呈极显著负相关。在花后9~13d喷施乙烯合成的抑制物质氨基-乙氧基乙烯基甘氨酸(AVG),明显降低籽粒中ACC的浓度和乙烯的释放速率,显著提高了籽粒灌浆速率和粒重以及籽粒中的蔗糖合成酶(SuSase)、ADP葡萄糖焦磷酸化酶(AGPase)和可溶性淀粉合成酶(SSSase)活性;喷施乙烯释放的促进物质乙烯利,结果则相反。表明结实期土壤轻度落干或适度干旱处理可以抑制水稻体内乙烯的产生,促进籽粒灌浆。 展开更多
关键词 水稻 1-氨基环丙烷-1-羧酸(acc) 乙烯 籽粒灌浆 根系伤流液 土壤水分
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间隙升温处理对芒果内源多胺和ACC含量的影响 被引量:13
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作者 张昭其 洪汉君 +1 位作者 李雪萍 季作梁 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期77-80,共4页
紫花芒果(MangiferaindicaL.)在冷害低温中贮藏,对其进行间隙升温处理,结果表明:芒果发生冷害以后,其内源SPD(亚精胺)和SPM(精胺)含量显著增加,但内源PUT(腐胺)和CAD(尸胺)含量的变化不显... 紫花芒果(MangiferaindicaL.)在冷害低温中贮藏,对其进行间隙升温处理,结果表明:芒果发生冷害以后,其内源SPD(亚精胺)和SPM(精胺)含量显著增加,但内源PUT(腐胺)和CAD(尸胺)含量的变化不显著;冷害还导致了ACC(1-氨基丙烷-1-羧酸)的累积。间隙升温处理显著地减轻了芒果的冷害,延迟了多胺及ACC含量的上升。 展开更多
关键词 紫花芒果 多胺 acc 芒果 果实贮藏 低温贮藏
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ACC氧化酶cDNA克隆及其对美洲黑杨体内乙烯产生的反义抑制 被引量:10
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作者 李明亮 韩一凡 +3 位作者 李玲 田颖川 李凝 王世绩 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 1999年第3期223-228,共6页
利用RT-PCR技术克隆了番茄ACC氧化酶基因LEETHYBR编码区0.9kb的cDNA片段,经酶切图谱分析和序列分析鉴定后,反向插入到植物表达载体pBin438中,构建了表达ACC氧化酶反义RNA的二元载体。用农杆... 利用RT-PCR技术克隆了番茄ACC氧化酶基因LEETHYBR编码区0.9kb的cDNA片段,经酶切图谱分析和序列分析鉴定后,反向插入到植物表达载体pBin438中,构建了表达ACC氧化酶反义RNA的二元载体。用农杆菌侵染美洲黑杨叶片,在含卡那霉素的MS培养基上选择转化子和植株再生,通过PCR检测筛选到16株转基因杨树植株,Southernblot分析初步确证了外源基因是以单拷贝插入到杨树基因组中;对杨树幼苗乙烯释放量的测定结果表明转基因杨树的乙烯释放量为对照植株的28%。 展开更多
关键词 acc 氧化酶 基因 反义RNA 美洲黑杨
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根癌农杆菌介导反义ACC合成酶基因对枣树的转化 被引量:19
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作者 何业华 熊兴华 +4 位作者 林顺权 吴会桃 林良斌 何钢 陈建华 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期33-36,共4页
以枣树鲜食品种鸡蛋枣为材料,通过根癌农杆菌介导ACC合成酶反义基因转化,得到了转基因植株.预培养1d的枣树幼嫩茎段经根癌农杆菌感染后共培养3d,转移至分化选择培养基MS(1/2NO3)+0.15mg/LNAA+1.75mg/LZT+10mg/LKm+500mg/LCarb上诱导产... 以枣树鲜食品种鸡蛋枣为材料,通过根癌农杆菌介导ACC合成酶反义基因转化,得到了转基因植株.预培养1d的枣树幼嫩茎段经根癌农杆菌感染后共培养3d,转移至分化选择培养基MS(1/2NO3)+0.15mg/LNAA+1.75mg/LZT+10mg/LKm+500mg/LCarb上诱导产生不定芽,将抗Km不定芽先后在15mg/LKm的生长、增殖和生根培养基上继续选择,诱导成完整植株.经PCR检测从抗Km植株中选择到7株阳性植株,进一步经Southern杂交证实有6株外源基因已整合到了枣树基因组中.Real timePCR定量检测表明,ACC合成酶反义基因在5株转基因植株中得到表达. 展开更多
关键词 枣树 acc合成酶反义基因 转化
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反义ACC氧化酶基因的导入对番茄乙烯生成的抑制作用 被引量:20
14
作者 叶志彪 李汉霞 +1 位作者 郑用琏 刘后利 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第4期305-309,共5页
将反向克隆的ACC氧化酶基因通过Ti质粒导入到番茄基因组中,转基因番茄植株叶片和果实中ACC氧化酶活性和乙烯产生速率均受到显著抑制,显示出反义基因能抑制靶基因(ACC氧化酶)的表达。子代抗性标记基因的分离结果表明呈单... 将反向克隆的ACC氧化酶基因通过Ti质粒导入到番茄基因组中,转基因番茄植株叶片和果实中ACC氧化酶活性和乙烯产生速率均受到显著抑制,显示出反义基因能抑制靶基因(ACC氧化酶)的表达。子代抗性标记基因的分离结果表明呈单基因遗传。 展开更多
关键词 番茄 反义基因 基因表达 acc 氧化酶
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柿果实ACC合成酶cDNA的克隆及其序列分析 被引量:13
15
作者 饶景萍 童斌 +1 位作者 中野龙平 稻叶昭次 《西北植物学报》 CAS CSCD 2001年第5期819-825,共7页
根据其它植物 ACC合成酶 ( 1 - aminocyclopropane- 1 - carboxylic acid synthase,ACS)氨基酸保守区 ,设计 1组简并引物 ,用 RT- PCR法 ,从柿 ( Diospyros kaki Thunb.)果实扩增出3个约 1 kb左右的 c DNA片段 ,将其克隆至 p GEM- T载体... 根据其它植物 ACC合成酶 ( 1 - aminocyclopropane- 1 - carboxylic acid synthase,ACS)氨基酸保守区 ,设计 1组简并引物 ,用 RT- PCR法 ,从柿 ( Diospyros kaki Thunb.)果实扩增出3个约 1 kb左右的 c DNA片段 ,将其克隆至 p GEM- T载体上 ,对这些重组克隆进行序列测定和氨基酸序列推导 ,DK- ACS1由 1 1 0 1个碱基组成 ,编码 364个氨基酸 ;DK- ACS2是 1 0 86个碱基 ,编码 35 9个氨基酸 ;DK- ACS3为 1 0 89个碱基 ,编码 363个氨基酸。它们均具有其它植物 ACS合成酶中存在的 7个保守区和 1 1个不变氨基酸残基 ,且在多肽水平上有较高的同源性。与番茄 L E- ACS2的同源性 DK- ACS1是 60 .5 % ,DK- ACS2是 70 .7% ,DK- ACS3为66.9% ;与甜瓜 CM- ACS1的同源性依次分别是 60 .4% ,72 .1 %和 64.4%。 展开更多
关键词 柿果 acc合成酶 基因克隆 序列分析 果实 成熟软化
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产ACC脱氨酶植物根际促生菌的筛选及其对修复植物高羊茅生长的影响 被引量:14
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作者 丁琳琳 刘五星 +3 位作者 孙剑英 骆永明 徐旭士 李振高 《土壤》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期271-276,共6页
以1.氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)为唯一氮源,从石油污染的土壤中分离得到一株具有ACC脱氨酶活性的菌株D5A。该菌在以ACC为唯一氮源条件下,其ACC脱氨酶比活力为0.084U/mg。另外,D5A还具有产生吲哚乙酸(IAA)、耐盐以及溶磷的特性。... 以1.氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)为唯一氮源,从石油污染的土壤中分离得到一株具有ACC脱氨酶活性的菌株D5A。该菌在以ACC为唯一氮源条件下,其ACC脱氨酶比活力为0.084U/mg。另外,D5A还具有产生吲哚乙酸(IAA)、耐盐以及溶磷的特性。在液体培养条件下该菌株产IAA高达112mg/L,在90g/kg盐含量的培养基中仍能够正常生长且具有较强的溶解矿物磷能力。同时该菌对酸碱具有良好的适应性,在初始pH4~10的LB培养基中生长良好。种子发芽试验表明在3g/kg和6g/kg浓度NaCl的逆境条件下,该菌株能显著提高高羊茅种子的发芽率和芽长。最后,通过对其进行生理生化特性和16SrDNA序列分析,该菌株初步鉴定为克雷伯氏菌(Klebsiellasp.)。 展开更多
关键词 高羊茅 acc脱氨酶 IAA 铁载体 溶磷
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香石竹ACC氧化酶基因的克隆与植物表达载体构建 被引量:15
17
作者 余义勋 张俊卫 +1 位作者 孙振元 包满珠 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2002年第3期256-260,共5页
根据已发表的ACO核苷酸序列 ,设计一对引物 ,以香石竹品种‘American’基因组DNA为模板 ,扩增出香石竹ACC氧化酶基因 ,将其连接到pMD18加T质粒载体上 ,通过中间载体pBluescriptSK ,构建了ACO基因正向和反向插入的植物表达载体 ,并将其... 根据已发表的ACO核苷酸序列 ,设计一对引物 ,以香石竹品种‘American’基因组DNA为模板 ,扩增出香石竹ACC氧化酶基因 ,将其连接到pMD18加T质粒载体上 ,通过中间载体pBluescriptSK ,构建了ACO基因正向和反向插入的植物表达载体 ,并将其导入了农杆菌。酶切检测表明该片段已插入表达载体 ,序列测定结果显示所克隆基因片段含 3个外显子 ,2个内含子 ,其中 展开更多
关键词 植物表达载体 香石竹 acc氧化酶 基因克隆 重组载体
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1,3,7,9-四甲基尿酸激活SirT3/AMPK/ACC信号通路减少高脂饮食小鼠肝脏脂肪化 被引量:12
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作者 徐军 王国恩 +3 位作者 章时杰 何蓉蓉 栗原博 秦书俭 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期791-795,共5页
目的研究嘌呤生物碱1,3,7,9-四甲基尿酸(theacrine)对高脂饮食小鼠肝脏甘油三酯蓄积的影响,并进一步探讨其作用机制。方法 C57BL/6J小鼠高脂喂养17周诱导单纯性脂肪肝模型,连续6周给予theacrine后,分别对肝组织切片进行HE和苏丹IV染色,... 目的研究嘌呤生物碱1,3,7,9-四甲基尿酸(theacrine)对高脂饮食小鼠肝脏甘油三酯蓄积的影响,并进一步探讨其作用机制。方法 C57BL/6J小鼠高脂喂养17周诱导单纯性脂肪肝模型,连续6周给予theacrine后,分别对肝组织切片进行HE和苏丹IV染色,测定肝脏中甘油三酯(TG)水平,用Western blot法检测肝脏中SirT3蛋白表达、AMPK及ACC蛋白的磷酸化水平。应用compound C抑制HepG2细胞中AMPK磷酸化,检测theacrine干预后相关蛋白的表达。结果 Theacrine能减少高脂饮食小鼠肝脏中TG水平,改善肝脏脂肪变性状态,增加肝脏中SirT3蛋白表达及AMPK和ACC蛋白的磷酸化水平。抑制细胞内AMPK的磷酸化后,theacrine仍能激活SirT3,但抑制了ACC的磷酸化作用。结论 Theacrine对SirT3的激活不依赖于AMPK的激活,而对ACC的磷酸化依赖于AMPK的激活。其改善高脂饮食小鼠肝脏脂肪化的作用可能与激活SirT3/AMPK/ACC信号通路相关。 展开更多
关键词 Theacrine 嘌呤生物碱 高脂饮食 单纯性脂肪肝 SirT3 AMPK acc
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电针对胰岛素抵抗大鼠肝脏AMPK及ACC蛋白表达的影响 被引量:10
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作者 李知行 蓝丹纯 +3 位作者 张弘弢 张海华 陈小砖 孙健 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2017年第4期864-867,共4页
目的:探讨电针改善胰岛素抵抗大鼠脂质代谢紊乱的分子生物学机制。方法:将40只雄性SD大鼠随机选取8只作为对照组,余制造胰岛素抵抗模型,选取24只大鼠造模成功的大鼠按随机区组原则分为模型组(8只)、西药组(8只)和电针组(8只)。造模成功... 目的:探讨电针改善胰岛素抵抗大鼠脂质代谢紊乱的分子生物学机制。方法:将40只雄性SD大鼠随机选取8只作为对照组,余制造胰岛素抵抗模型,选取24只大鼠造模成功的大鼠按随机区组原则分为模型组(8只)、西药组(8只)和电针组(8只)。造模成功后,空白组和模型组将大鼠固定于自制袋中,不进行任何处理。西药组按大鼠质量以吡格列酮10 mg/kg灌胃,电针组取双侧"丰隆""三阴交"穴电针治疗,1次/d,连续2周。治疗结束后,禁食12 h,检测葡萄糖输注率(GIR)。采用酶联免疫法检测各组大鼠血清脂联素、FFA含量。蛋白印迹法分析肝脏AMPK、ACC的蛋白表达。结果:经治疗后,与模型组比较,西药组、电针组的GIR显著升高(P<0.01)。与空白组比较,模型组大鼠血清脂联素含量显著降低(P<0.01),FFA含量显著升高(P<0.01);与模型组比较,西药组、电针组大鼠血清脂联素含量显著升高(P<0.01,P<0.05),FFA含量显著降低(P<0.01,P<0.05)。与空白组比较,模型组大鼠肝脏AMPK蛋白表达显著降低(P<0.01),ACC蛋白表达显著升高(P<0.05);西药组、电针组大鼠肝脏AMPK蛋白表达显著升高(P<0.01),ACC蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论:电针可通过改善脂质代谢紊乱而发挥防治IR作用,其机制可能与调节脂联素介导AMPK-ACC信号转导通路有关。 展开更多
关键词 电针 胰岛素抵抗 脂联素 AMPK acc
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梨ACC氧化酶基因(ACO)的片段克隆及其RNAi载体构建 被引量:10
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作者 胡钟东 乔玉山 +2 位作者 王三红 姚泉洪 章镇 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期877-879,共3页
以若光梨成熟果实为材料,提取总RNA,在ACC氧化酶基因(ACO)cDNA序列同源性较高区域设计一对特异引物,利用RT-PCR克隆了ACC氧化酶(ACO)基因片段。将ACO反义基因、与副球菌中类胡罗卜素合成有关的间隔基因YYT和ACO正义基因3个片段串联在一... 以若光梨成熟果实为材料,提取总RNA,在ACC氧化酶基因(ACO)cDNA序列同源性较高区域设计一对特异引物,利用RT-PCR克隆了ACC氧化酶(ACO)基因片段。将ACO反义基因、与副球菌中类胡罗卜素合成有关的间隔基因YYT和ACO正义基因3个片段串联在一起,经鉴定后,插入到植物表达载体中,构建成能够表达ACC氧化酶基因的双链RNA的植物载体pYF028,为耐贮砂梨的遗传转化创造条件。 展开更多
关键词 acc氧化酶(ACO) RT-PCR 克隆 RNAI载体构建
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