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结核分枝杆菌EsxV亚单位疫苗黏膜免疫诱导的免疫应答
被引量：
3
1
作者
白鹭
宁唤唤
+6 位作者
康健
梁璇
谢燕玲
彭钰君
张婧瑶
路延之
柏银兰
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第5期379-386,共8页
目的研究结核分枝杆菌抗原Rv3619c(EsxV)黏膜免疫小鼠诱导的免疫应答水平。方法PCR法扩增esxV基因克隆入原核表达载体pET28a(+),获得的重组E.coli诱导表达目的蛋白,SDS-PAGE电泳和Western Blot鉴定蛋白的表达,亲和层析法纯化EsxV蛋白。...
目的研究结核分枝杆菌抗原Rv3619c(EsxV)黏膜免疫小鼠诱导的免疫应答水平。方法PCR法扩增esxV基因克隆入原核表达载体pET28a(+),获得的重组E.coli诱导表达目的蛋白,SDS-PAGE电泳和Western Blot鉴定蛋白的表达,亲和层析法纯化EsxV蛋白。以EsxV和/或联合环二腺苷酸(c-di-AMP)经鼻黏膜免疫BALB/c小鼠,ELISA法检测小鼠特异性抗体水平及亚类,MTS法检测脾细胞增殖,qRT-PCR检测脾和肺脏细胞因子表达水平,ELISA法检测脾细胞因子分泌水平。结果成功构建EsxV的原核表达载体pET28a(+)-esxV并诱导表达目的蛋白,亲和层析法获得了纯化的重组EsxV蛋白。EsxV经黏膜免疫可诱导显著的体液免疫应答,但诱导的细胞免疫应答水平不高。EsxV与c-di-AMP经黏膜接种可诱导特异性IgG水平增加,EsxV蛋白特异的脾细胞增殖,脾和肺细胞的IFN-γ转录增加。c-di-AMP显著提高EsxV特异的IFN-γ、IL-2、IL-10和IL-17细胞因子分泌,而不诱导炎症因子TNF-α和IL-6表达。结论EsxV与c-di-AMP佐剂构建的亚单位疫苗可诱导特异性体液和细胞免疫应答,可进一步用于新型结核病亚单位疫苗的研制。
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关键词
结核分枝杆菌
6
kda
早期
分泌
靶
抗原
分泌系统
蛋白
v
(
esxv
)
亚单位疫苗
黏膜免疫
环二腺苷酸
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职称材料
题名
结核分枝杆菌EsxV亚单位疫苗黏膜免疫诱导的免疫应答
被引量：
3
1
作者
白鹭
宁唤唤
康健
梁璇
谢燕玲
彭钰君
张婧瑶
路延之
柏银兰
机构
延安大学生命科学学院
空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室
西北大学生命科学学院
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第5期379-386,共8页
基金
国家“十三五”重大传染病专项课题(No.2018ZX10302302002004)
国家自然科学基金面上项目(No.81971560,No.81671638)
陕西省重点研发项目(No.2019ZDLSF02-04)联合资助。
文摘
目的研究结核分枝杆菌抗原Rv3619c(EsxV)黏膜免疫小鼠诱导的免疫应答水平。方法PCR法扩增esxV基因克隆入原核表达载体pET28a(+),获得的重组E.coli诱导表达目的蛋白,SDS-PAGE电泳和Western Blot鉴定蛋白的表达,亲和层析法纯化EsxV蛋白。以EsxV和/或联合环二腺苷酸(c-di-AMP)经鼻黏膜免疫BALB/c小鼠,ELISA法检测小鼠特异性抗体水平及亚类,MTS法检测脾细胞增殖,qRT-PCR检测脾和肺脏细胞因子表达水平,ELISA法检测脾细胞因子分泌水平。结果成功构建EsxV的原核表达载体pET28a(+)-esxV并诱导表达目的蛋白,亲和层析法获得了纯化的重组EsxV蛋白。EsxV经黏膜免疫可诱导显著的体液免疫应答,但诱导的细胞免疫应答水平不高。EsxV与c-di-AMP经黏膜接种可诱导特异性IgG水平增加,EsxV蛋白特异的脾细胞增殖,脾和肺细胞的IFN-γ转录增加。c-di-AMP显著提高EsxV特异的IFN-γ、IL-2、IL-10和IL-17细胞因子分泌,而不诱导炎症因子TNF-α和IL-6表达。结论EsxV与c-di-AMP佐剂构建的亚单位疫苗可诱导特异性体液和细胞免疫应答,可进一步用于新型结核病亚单位疫苗的研制。
关键词
结核分枝杆菌
6
kda
早期
分泌
靶
抗原
分泌系统
蛋白
v
(
esxv
)
亚单位疫苗
黏膜免疫
环二腺苷酸
Keywords
Mycobacterium tuberculosis
6
kda
early secretory antigenic target secretion system protein
v
(
esxv
)
subunit
v
accine
mucosal immune
cyclic dimeric adenosine monophosphate(c-di-AMP)
分类号
R378.91 [医药卫生—病原生物学]
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1
结核分枝杆菌EsxV亚单位疫苗黏膜免疫诱导的免疫应答
白鹭
宁唤唤
康健
梁璇
谢燕玲
彭钰君
张婧瑶
路延之
柏银兰
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022
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