2'-脱氧-5-氟尿苷的合成工艺改进 被引量：2

1

作者 曹萌萌 李玲 +1 位作者 罗振福 黄耀东 《天津药学》 2007年第4期82-84,共3页

目的:改进2'-脱氧-5-氟尿苷的合成工艺。方法:参照文献方法,以氟尿嘧啶为起始原料,经硅醚化、缩合、溴化、氢化和皂化等工艺合成2'-脱氧-5-氟尿苷,并对其关键步骤进行了改进。结果:该合成工艺对2'-脱氧-5-氟尿苷有较高的收... 目的:改进2'-脱氧-5-氟尿苷的合成工艺。方法:参照文献方法,以氟尿嘧啶为起始原料,经硅醚化、缩合、溴化、氢化和皂化等工艺合成2'-脱氧-5-氟尿苷,并对其关键步骤进行了改进。结果:该合成工艺对2'-脱氧-5-氟尿苷有较高的收率,总收率为34.31%。结论:工艺更趋于合理,操作条件更为简单,三废易于处理,适合于工业化生产。 展开更多

关键词 2'-脱氧-5-氟尿苷 5-氟尿嘧啶 合成工艺

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2-溴-3,3,3-三氟丙烯的合成与应用 被引量：2

2

作者 徐卫国 《化工新型材料》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期27-28,31,共3页

介绍了2溴3,3,3三氟丙烯的用途及合成方法。

关键词 2-溴-3 3 3-三氟丙烯 合成方法 三氟乙炔基化合物 5-三氟甲基二氢尿嘧啶 烯丙醇化合物

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5-Aza-CdR联合5-FU对人结肠癌SW480和LS-174T细胞生长、凋亡的影响

3

作者 祝丽丽 朱家明 韩爱民 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第41期36-38,共3页

目的观察5-氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)联合氟尿嘧啶(5-FU)对人结肠癌SW480和LS-174T细胞生长、凋亡的影响。方法将SW480和LS-174T细胞各分为四组:对照组、DAC组、5-FU组、联合组,对照组以等量PBS液加入SW480或LS-174T细胞培养液中;5... 目的观察5-氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)联合氟尿嘧啶(5-FU)对人结肠癌SW480和LS-174T细胞生长、凋亡的影响。方法将SW480和LS-174T细胞各分为四组:对照组、DAC组、5-FU组、联合组,对照组以等量PBS液加入SW480或LS-174T细胞培养液中;5-FU组用100μg/m L的5-FU干预SW480或70μg/m L的5-FU干预LS-174T细胞24 h;DAC组用5μmol/L的DAC干预SW480或LS-174T细胞48 h;联合组予5μmol/L的DAC干预SW480或LS-174T细胞48 h,再用100μg/m L的5-FU干预SW480或70μg/m L的5-FU干预LS-174T细胞24 h。MTT法测算细胞增殖抑制率;实时荧光定量PCR法检测各组凋亡相关基因(Bax、Bcl-2)mRNA表达;免疫细胞化学法检测Bax、Bcl-2蛋白表达。结果 DAC组和5-FU组细胞增殖抑制率高于对照组(P均<0.05),而联合组与其他三组相比细胞增殖抑制率亦升高(P均<0.01)。DAC组、5-FU组与对照组相比,Bax mRNA及蛋白表达增多(P均<0.05);与其他三组相比,联合组中Bax mRNA及蛋白表达增多(P均<0.01)。5-FU组、联合组与对照组相比,Bcl-2 mRNA及蛋白表达减少(P均<0.05),而联合组与5-FU组相比,Bcl-2 mRNA及蛋白表达差异无统计学意义(P均>0.05)。结论 5-Aza-CdR和5-FU均能抑制人结肠癌SW480、LS-174T细胞生长,促进细胞凋亡,联合时作用更显著。 展开更多

关键词 结直肠癌 5-氮-2'-脱氧胞苷 氟尿嘧啶 细胞凋亡 B细胞淋巴瘤 白血病基因伴随蛋白x B细胞淋巴瘤 白血病-2基因

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人肝癌细胞培养中CCK-8法与BrdU-ELISA法检测细胞增殖的比较 被引量：4

4

作者 张大伟 邢雪 +2 位作者 邓乃梅 谭雪莹 汤海涛 《临床普外科电子杂志》 2013年第4期4-7,共4页

目的比较CCK-8法与BrdU-ELISA法检测人肝癌HepG2细胞增殖的可靠性。方法待细胞贴壁生长融合度分别达60%及80%时,以10-7mol/L浓度AngⅡ刺激细胞增殖,24小时后分别用CCK-8法和BrdU-ELISA法,以及免疫荧光方法检测细胞增殖情况。结果细胞60... 目的比较CCK-8法与BrdU-ELISA法检测人肝癌HepG2细胞增殖的可靠性。方法待细胞贴壁生长融合度分别达60%及80%时,以10-7mol/L浓度AngⅡ刺激细胞增殖,24小时后分别用CCK-8法和BrdU-ELISA法,以及免疫荧光方法检测细胞增殖情况。结果细胞60%汇合时CCK-8检测组和BrdU-ELISA检测组与各自的对照组比较,比值分别为1.30和1.59,检测值近似;细胞80%汇合时二者分别为1.02和1.40,免疫荧光结果显示AngⅡ刺激组的增殖细胞明显高于对照组。结论与CCK-8法相比,BrdU-ELISA更能客观地反映细胞增殖情况。 展开更多

关键词 CCK-8检测 5-溴脱氧尿嘧啶核苷-ELISA检测 血管紧张素Ⅱ 细胞增殖

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“综合修复法”在BrdU免疫组化染色中的应用

5

作者 陈余朋 王行富 何观文 《湖北民族学院学报（医学版）》 2011年第3期18-20,共3页

目的探讨Brdu免疫组织化学染色的最佳修复方法。方法采用不同的抗原修复方法:酶修复,pH6.0柠檬酸盐缓冲液高压修复或微波修复,pH 9.0 Tris-EDTA高压修复或微波修复,以及0.1%Triton X-100/0.1%柠檬酸钠渗透及胰酶增加细胞膜的通透性、冷0... 目的探讨Brdu免疫组织化学染色的最佳修复方法。方法采用不同的抗原修复方法:酶修复,pH6.0柠檬酸盐缓冲液高压修复或微波修复,pH 9.0 Tris-EDTA高压修复或微波修复,以及0.1%Triton X-100/0.1%柠檬酸钠渗透及胰酶增加细胞膜的通透性、冷0.1mol/L盐酸去除染色体组蛋白、2mol/L盐酸使DNA双链变性、四硼酸钠重建碱性环境的"综合修复法",对小鼠BrdU标记的嗅上皮组织进行免疫组织化学染色。结果经"综合修复"后,免疫组化染色敏感性较其他修复方法明显增强,并且准确定位优于其他方法(P<0.01)。结论在BrdU的免疫组化染色中,"综合修复法"是较理想的抗原修复方法。 展开更多

关键词 5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷 抗原修复 免疫组化

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缺血性脑损伤与海马齿状回神经元发生 被引量：12

6

作者 王卫东 江文 +1 位作者 王洪典 万琪 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 2002年第1期58-60,共3页

关键词 神经元 脑缺血 5-溴脱氧尿核苷

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鸡胚视顶发育过程中神经元增殖、迁移和分层形成的规律 被引量：1

7

作者 杨慈清 杜蕊 +2 位作者 张学乾 林俊堂 赵善廷 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期177-180,共4页

目的：采用5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）标记鸡胚发育过程中视顶新生神经元，阐明鸡胚发育过程中视顶盖神经元增殖、迁移规律。方法：采用鸡胚开窗带壳培养的方式，在培养过程中，分别在胚胎发育的第E4天至E18．5d滴加1mg／ml浓度的BrdU... 目的：采用5-溴脱氧尿嘧啶核苷（BrdU）标记鸡胚发育过程中视顶新生神经元，阐明鸡胚发育过程中视顶盖神经元增殖、迁移规律。方法：采用鸡胚开窗带壳培养的方式，在培养过程中，分别在胚胎发育的第E4天至E18．5d滴加1mg／ml浓度的BrdU各10肛l，每组5个胚胎，滴加BrdU后密封开口，继续培养，当培养到胚胎发育的E18．5d时，取材、甲醛固定、震荡切片，采用硫堇染色，观察视顶盖层的结构，免疫组织化学显示BrdU标记的新生细胞；显微拍照，分析不同时期表面灰质纤维层增殖细胞的数量、总面积、灰度平均值、平均光密度和平均积分光密度等参数，综合分析各阶段新生神经元的差异。结果：鸡胚视顶结构通过硫堇染色可以明显分成6层，在胚胎发育的E4d-8d是细胞大量增殖阶段，新生细胞数明显高于其他阶段；新生细胞在胚胎发育的E12d后明显减少。结论：鸡胚发育过程中，视顶从胚胎发育的E4d开始到E12d时，6层结构已经基本形成，新生神经元E12d后明显减少，其视顶盖6层结构的形成规律是从内向外。 展开更多

关键词 鸡胚 5-溴脱氧尿嘧啶核苷 视顶盖 增殖 神经元迁移

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BrdU和EGFP标记大鼠骨髓间充质干细胞的对比研究 被引量：1

8

作者 刘超 苗雷英 +2 位作者 孙新华 孙宏晨 乔春燕 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期19-22,共4页

目的:研究5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromo-21-deoxyuridine,BrdU)和腺病毒介导的增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)标记骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的最佳标记时间与剂量,并进行比较。方法... 目的:研究5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5-Bromo-21-deoxyuridine,BrdU)和腺病毒介导的增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)标记骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的最佳标记时间与剂量,并进行比较。方法:密度梯度离心分离大鼠骨髓MSCs并体外扩增。AdCMV-EGFP分为100、200、400及800 particles/cell四组进行转染;BrdU以终浓度5、10、15μmol/L进行标记。分别于实验第1、3、5、7 d检测两种方法对MSCs的标记率。通过MTT检测两种标记方法对细胞增殖活性的影响。结果:AdCMV-EGFP以100 par-ticles/cell转染未引起MSCs凋亡,转染3d时效率最高(44.4±3.5%);BrdU以10μmol/L、标记3 d的标记率为(75.1±3.1)%。两种方法均不影响细胞增殖。结论:AdCMV-EGFP和BrdU均可高效标记MSCs,根据研究需要不同均可作为高效的MSCs标记方法。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 增强型绿色荧光蛋白 5-溴脱氧尿嘧啶核苷

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运动对急性癫痫大鼠海马神经发生的影响 被引量：1

9

作者 温晓妮 李红 +1 位作者 李萍 尤勇 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期698-701,共4页

目的探讨中等负荷运动对急性癫痫大鼠海马神经发生的影响。方法应用免疫荧光单标记和激光共聚焦显微镜观察癫痫大鼠在中等负荷运动后海马齿状回新生神经元的5-溴脱氧尿核苷(BrdU)表达情况;应用RT-PCR半定量分析癫痫大鼠在中等负荷运动... 目的探讨中等负荷运动对急性癫痫大鼠海马神经发生的影响。方法应用免疫荧光单标记和激光共聚焦显微镜观察癫痫大鼠在中等负荷运动后海马齿状回新生神经元的5-溴脱氧尿核苷(BrdU)表达情况;应用RT-PCR半定量分析癫痫大鼠在中等负荷运动后海马神经生长因子(neurotrophic growth factor,NGF)的表达情况。结果运动组癫痫大鼠海马齿状回BrdU的表达比未运动组癫痫大鼠表达减少,差异有统计学意义(P<0.01);运动组癫痫大鼠海马NGF基因表达比未运动组癫痫大鼠也下调,差异有统计学意义(P<0.01),且海马NGF基因表达与齿状回BrdU的表达变化相一致。结论中等负荷的运动可减少急性癫痫大鼠海马新生神经元BrdU的表达,而NGF对急性癫痫大鼠神经发生可能有一定的促进作用。 展开更多

关键词 运动 海马 神经发生 5-溴脱氧尿核苷 癫痫 神经生长因子

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BrdU示踪的恒河猴血管内皮细胞移植替代角膜内皮细胞的免疫组化染色观察 被引量：1

10

作者 张虹 朱勤 胡竹林 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2012年第12期1101-1103,1109,共4页

目的观察BrdU示踪标记的恒河猴血管内皮细胞移植替代同种异体角膜内皮细胞后角膜内表面免疫组化染色,探索血管内皮细胞移植替代角膜内皮细胞的可行性。方法体外培养恒河猴视网膜脉络膜血管内皮细胞,培养增生至第2代后置于含BrdU(10μg&#... 目的观察BrdU示踪标记的恒河猴血管内皮细胞移植替代同种异体角膜内皮细胞后角膜内表面免疫组化染色,探索血管内皮细胞移植替代角膜内皮细胞的可行性。方法体外培养恒河猴视网膜脉络膜血管内皮细胞,培养增生至第2代后置于含BrdU(10μg·mL-1)的1640培养液中传代72h,通过离心沉淀法移植到撕除后弹力层的恒河猴角膜内表面,术后取角膜行HE染色及抗BrdU免疫组化染色,观察角膜后表面的细胞分布及有无后弹力膜样组织,并观察角膜后表面细胞能否被抗BrdU染色着染。结果 HE染色显示,实验组角膜内表面可见细胞层生长,细胞后方未见后弹力膜样物质,抗BrdU免疫组化染色阳性,示该细胞为培养的BrdU示踪的血管内皮细胞;对照组角膜组织HE染色显示,角膜内表面光滑,未见细胞样结构,BrdU染色呈阴性,未见棕黄色着色的细胞样组织。结论 BrdU可成功示踪标记体外培养的血管内皮细胞,恒河猴血管内皮细胞能够在撕除后弹力层的角膜内表面生长。 展开更多

关键词 5-溴脱氧尿嘧啶核苷 角膜移植 恒河猴 免疫组化染色

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电针对慢性癫痫大鼠海马新生神经元生长抑素表达的影响 被引量：1

11

作者 温晓妮 黄远桂 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期370-373,共4页

目的探讨电针对慢性癫痫大鼠海马新生神经元生长抑素(SS)表达的影响。方法应用免疫荧光双标记和激光共聚焦显微镜观察了电针慢性癫痫大鼠督脉穴位"大椎"与"百会"后海马新生神经元生长抑素的表达情况。结果海马新生... 目的探讨电针对慢性癫痫大鼠海马新生神经元生长抑素(SS)表达的影响。方法应用免疫荧光双标记和激光共聚焦显微镜观察了电针慢性癫痫大鼠督脉穴位"大椎"与"百会"后海马新生神经元生长抑素的表达情况。结果海马新生神经元有SS的表达,且电针后的癫痫大鼠表达比未电针的癫痫大鼠减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论电针可抑制海马新生神经元SS的表达,而SS有致痫作用。由此推测电针的抑痫机制可能是通过海马新生神经元SS的表达而实现的。 展开更多

关键词 癫痫 海马 新生神经元 电针 5-溴脱氧尿核苷 生长抑素

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运动对不同年龄大鼠海马神经发生的影响 被引量：1

12

作者 张葆欣 温晓妮 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期793-796,共4页

目的探讨运动对不同年龄大鼠海马神经发生的影响。方法应用免疫荧光单标记和激光共聚焦显微镜观察不同年龄大鼠在中等负荷运动后海马新生神经元的表达情况;应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)半定量分析不同年龄大鼠在中等负荷运动后海... 目的探讨运动对不同年龄大鼠海马神经发生的影响。方法应用免疫荧光单标记和激光共聚焦显微镜观察不同年龄大鼠在中等负荷运动后海马新生神经元的表达情况;应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)半定量分析不同年龄大鼠在中等负荷运动后海马脑源性神经生长因子(BDNF)的表达情况。并探讨二者的相关性。结果运动组幼年大鼠与青年大鼠海马齿状回5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)的表达均比相应年龄段未运动组大鼠增加,且运动组幼年大鼠比青年大鼠海马齿状回BrdU表达增加,各组差异均有统计学意义(P<0.01);运动组大鼠海马BDNF基因表达上调,以幼年运动组上调明显,差异有统计学意义(P<0.05),且海马BDNF基因表达与齿状回BrdU的表达规律基本一致。结论中等负荷的运动可增加海马新生神经元的表达,而年龄因素可影响运动对海马新生神经元的增殖效应;海马神经发生的快慢与年龄依赖的BDNF表达有关。 展开更多

关键词 运动 海马 神经发生 5-溴脱氧尿核苷 不同年龄 脑源性神经生长因子

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枸杞多糖对Aβ1~40诱导大鼠学习记忆功能减退的影响 被引量：2

13

作者 贺婕 彭贵海 +1 位作者 黄琪 李德梅 《浙江临床医学》 2014年第1期13-15,共3页

目的：探讨枸杞多糖（LBP）对阿尔茨海默病（AD）大鼠学习记忆功能减退的影响。方法 SD健康大鼠随机分为5组：AD模型组，LBP高、中、低剂量干预组，空白对照组，每组24只。通过双侧海马注射Aβ1-40，建立AD大鼠模型。采用LBP连续灌胃6... 目的：探讨枸杞多糖（LBP）对阿尔茨海默病（AD）大鼠学习记忆功能减退的影响。方法 SD健康大鼠随机分为5组：AD模型组，LBP高、中、低剂量干预组，空白对照组，每组24只。通过双侧海马注射Aβ1-40，建立AD大鼠模型。采用LBP连续灌胃6周作用于AD大鼠，观察各组大鼠行为学、海马SOD、GSH-Px活性和MDA含量以及BrdU标记阳性细胞表达的变化。结果（1）与AD模型组比较，LBP低、中、高剂量组潜伏期明显缩短、过平台次数明显增加（P〈0.05）。（2）与AD模型组比较，LBP低、中、高剂量组海马SOD、GSH-Px活性明显升高、MDA含量明显降低（P〈0.05）。（3）与AD模型组比较，LBP低、中、高剂量组齿状回BrdU阳性细胞表达明显增多（P〈0.05）。（4）LBP中、低剂量组比较，上述各指标均有明显差异（P〈0.05）。LBP高、中剂量组比较，上述各指标均无明显差异（P〉0.05）。结论 LBP可能通过提高海马SOD、GSH-Px活性、降低MDA含量以及增强齿状回BrdU阳性细胞表达，改善AD大鼠学习记忆功能。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 枸杞多糖 学习记忆 超氧化物歧化酶 谷胱甘肽过氧化物酶 丙二醛 5-溴脱氧尿嘧啶核苷

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表皮生长因子对小鼠肾小管发育中细胞增殖的影响

14

作者 李晓明 马云胜 +1 位作者 奥瑞芳 郭敏 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期758-760,共3页

目的:观察小鼠肾小管发育中细胞增殖和表皮生长因子(EGF)的表达特征,探讨EGF对小鼠肾小管发育中细胞增殖的影响。方法:应用5-溴-2-脱氧尿嘧啶(BrdU)标记增殖细胞,应用免疫组织化学、免疫荧光、免疫印迹技术并结合体视学方法检测生后1、3... 目的:观察小鼠肾小管发育中细胞增殖和表皮生长因子(EGF)的表达特征,探讨EGF对小鼠肾小管发育中细胞增殖的影响。方法:应用5-溴-2-脱氧尿嘧啶(BrdU)标记增殖细胞,应用免疫组织化学、免疫荧光、免疫印迹技术并结合体视学方法检测生后1、3、5、6、7、14、21、28、40d小鼠肾小管BrdU阳性细胞和EGF的表达。结果:EGF于生后6d表达在肾小管上皮细胞,之后随着日龄的增加表达渐增;BrdU阳性细胞于生后1d表达,14d达高峰,之后随着日龄增加而逐渐减少;生后14d之后EGF与细胞增殖表达趋势完全相反。结论:推测EGF在生后小鼠肾发育中对肾小管的分化和成熟起重要作用,但并不促进细胞增殖。 展开更多

关键词 表皮生长因子 5-溴-2-脱氧尿嘧啶 肾小管 小鼠

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痫性发作后的神经再生研究进展

15

作者 李听松 蒋莉 《儿科药学杂志》 CAS 2007年第5期58-60,64,共4页

传统观点认为，中枢神经系统缺乏再生能力，创伤和癫痫等病理过程引发的神经元丢失等病理改变无法逆转。一些细胞增殖标记物如5-溴2-脱氧尿嘧啶核苷（5-bmnmo-dexyuridine，BrdU）及逆转录病毒的应用，使得人们发现在啮齿类动物的中枢... 传统观点认为，中枢神经系统缺乏再生能力，创伤和癫痫等病理过程引发的神经元丢失等病理改变无法逆转。一些细胞增殖标记物如5-溴2-脱氧尿嘧啶核苷（5-bmnmo-dexyuridine，BrdU）及逆转录病毒的应用，使得人们发现在啮齿类动物的中枢神经系统内至少有两个区域存在神经再生（neurogenesis）能力：齿状回颗粒细胞下区（Subgranular Zone，SGZ）和侧脑室下区（Subventricular Zone，SVZ）。 展开更多

关键词 神经再生 5-溴2-脱氧尿嘧啶核苷 发作后 中枢神经系统 细胞增殖标记物 齿状回颗粒细胞 逆转录病毒 再生能力

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兔骨髓基质干细胞的培养、鉴定及标记的实验研究

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作者 邓辰红 王飞 +1 位作者 王文兰 朱华 《中国实用医药》 2016年第32期194-196,共3页

目的对兔骨髓基质干细胞的培养方法、鉴定及标记技术进行初步研究。方法采用贴壁法培养幼年兔骨髓细胞,经反复传代细胞逐渐纯化,以流式细胞术检测细胞表面抗原。以5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)标记骨髓基质干细胞,将骨髓基质干细胞注入兔... 目的对兔骨髓基质干细胞的培养方法、鉴定及标记技术进行初步研究。方法采用贴壁法培养幼年兔骨髓细胞,经反复传代细胞逐渐纯化,以流式细胞术检测细胞表面抗原。以5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)标记骨髓基质干细胞,将骨髓基质干细胞注入兔脑内,2周后取脑作石蜡切片,进行免疫荧光染色。结果通过贴壁法培养幼年兔骨髓细胞可获得较纯化的细胞,并能在体外长期培养。CD31的阴性率为5.67%,CD34的阴性率为4.31%,CD45的阴性率为4.42%,CD44的阳性率为98.82%,CD71的阳性率为99.17%,CD90的阳性率为98.23%。提示CD31、CD34、CD45的结果为呈阴性,CD44、CD71、CD90的结果为阳性,Brd U能够掺DNA合成期的骨髓基质干细胞。结论贴壁法可获得高纯度的骨髓基质干细胞,Brd U可作为骨髓基质干细胞体内示踪的理想标记物。 展开更多

关键词 骨髓基质干细胞 CD分子 5-溴脱氧尿嘧啶核苷

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