通过核糖核苷酸还原酶M2逆转肝癌细胞对5-氟尿嘧啶耐药 被引量：3

1

作者 余赛红 郑晓亮 +3 位作者 蒲依依 颜冬梅 王孝举 于洁 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2021年第7期729-737,共9页

目的:探讨核糖核苷酸还原酶M2(RRM2)在肝癌细胞对5-氟尿嘧啶(5-FU)耐药中的作用,并开发潜在的策略来提高肝癌细胞对5-FU的敏感性。方法:利用Western blot检测5-FU耐药肝癌细胞(BEL/5-FU)与非耐药肝癌细胞(BEL7402)中RRM2蛋白的表达差异... 目的:探讨核糖核苷酸还原酶M2(RRM2)在肝癌细胞对5-氟尿嘧啶(5-FU)耐药中的作用,并开发潜在的策略来提高肝癌细胞对5-FU的敏感性。方法:利用Western blot检测5-FU耐药肝癌细胞(BEL/5-FU)与非耐药肝癌细胞(BEL7402)中RRM2蛋白的表达差异;通过用RNA干扰技术下调BEL/5-FU细胞中RRM2的表达或RRM2抑制剂3-AP(Triapine)抑制RRM2活性;CCK-8和集落形成实验用于检测细胞的增殖能力;使用高内涵细胞成像系统仪检测与分析细胞凋亡。结果:BEL/5-FU细胞中RRM2的表达量是BEL7402细胞的2.5倍。RNA干扰技术能够下调BEL/5-FU细胞中RRM2的表达,并使5-FU对BEL/5-FU细胞的半数抑制浓度(IC_(50))下降约50%,同时细胞集落形成能力也显著减弱。3-AP与5-FU联合处理BEL/5-FU细胞,使5-FU对BEL/5-FU细胞的IC_(50)下降约40%,细胞集落形成能力减弱,并促进5-FU导致的细胞凋亡。结论:RRM2与肝癌细胞对5-FU的耐药相关,本研究通过抑制RRM2的活性来逆转肝癌细胞对5-FU的耐药,为提高肝癌的5-FU化疗疗效提供新靶点和新思路。 展开更多

关键词 肝细胞癌 核糖核苷酸还原酶M2 耐药 3-AP(Triapine) 5-氟尿嘧啶

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水解核糖核酸生产5′-核苷酸的条件优化及初步鉴定 被引量：2

2

作者 王端好 王震 蒋丹丹 《粮食与油脂》 北大核心 2022年第10期102-105,共4页

以啤酒废酵母中提取的核糖核酸为原料,利用单因素试验和响应面优化试验优化了核酸酶P1催化水解核糖核酸的条件,并利用离子交换层析法对水解液中5′-核苷酸进行了初步分离鉴定。结果表明:最佳水解条件为核糖核酸质量浓度7.5 g/L、水解液... 以啤酒废酵母中提取的核糖核酸为原料,利用单因素试验和响应面优化试验优化了核酸酶P1催化水解核糖核酸的条件,并利用离子交换层析法对水解液中5′-核苷酸进行了初步分离鉴定。结果表明:最佳水解条件为核糖核酸质量浓度7.5 g/L、水解液初始pH 5、水解温度54℃、水解时间2.0 h。通过分离初步确定核糖核酸水解液中含有尿嘧啶核苷酸、鸟嘌呤核苷酸、胞嘧啶核苷酸和腺嘌呤核苷酸。 展开更多

关键词 核糖核酸 5′-核苷酸 核酸酶P1 水解 离子交换

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5-氨基咪唑-4-甲酰胺核糖核苷酸联合干扰素对K562细胞的影响

3

作者 王红娟 刘蕊 +1 位作者 张媛媛 葛繁梅 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1892-1898,共7页

目的:研究5-氨基咪唑-4-甲酰胺核糖核苷酸(AICAR)联合干扰素(IFN-ɑ-2b)对慢性粒细胞白血病K562细胞的增殖及凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:采用CCK-8法检测细胞增殖抑制情况;Wright-Giemsa方法染色,光学显微镜下观察细胞形... 目的:研究5-氨基咪唑-4-甲酰胺核糖核苷酸(AICAR)联合干扰素(IFN-ɑ-2b)对慢性粒细胞白血病K562细胞的增殖及凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:采用CCK-8法检测细胞增殖抑制情况;Wright-Giemsa方法染色,光学显微镜下观察细胞形态;FITC AnnexinV/PI双染法分析细胞凋亡率的变化;免疫细胞化学法检测野生型P53蛋白的阳性表达率。结果:不同浓度AICAR于不同作用时间24、48和72 h对K562细胞均有抑制作用,抑制程度呈时间、剂量依赖性(r=0.71,r=0.84)。AICAR与IFN-ɑ-2b联合应用后可以有效抑制K562细胞增殖,促进细胞凋亡,联合作用72 h时细胞的抑制率可达(45.26±2.54)%,联合作用48 h早期凋亡率达(33.72±0.23)%,与对照组及单用AICAR和单用IFN-ɑ-2b相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。AICAR与IFN-ɑ-2b联合作用促进野生型P53蛋白的表达。结论:AICAR和(或)IFN-ɑ-2b能抑制细胞增殖,促进K562细胞凋亡,2药联合具有协同抗瘤效应,其作用机制可能与促进野生型P53蛋白高表达有关。 展开更多

关键词 5-氨基咪唑-4-甲酰胺核糖核苷酸 干扰素 K562细胞株

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高效毛细管电泳法测定酱油中5′-单磷酸核苷酸 被引量：7

4

作者 李佳 李芸 +3 位作者 宋宝花 丁晓静 赵珊 王志 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第22期264-267,共4页

建立高效毛细管电泳同时分离测定酱油中两种核苷酸鸟嘌呤-5′-单磷酸(GMP)和次黄嘌呤-5′-单磷酸(IMP)的方法。电泳条件:以50μm×60.2cm(有效长度50cm)未涂敷石英毛细管为分离柱,30mmol/L硼砂+30mmol/L碳酸钠+60mmol/L羟丙基-β-... 建立高效毛细管电泳同时分离测定酱油中两种核苷酸鸟嘌呤-5′-单磷酸(GMP)和次黄嘌呤-5′-单磷酸(IMP)的方法。电泳条件:以50μm×60.2cm(有效长度50cm)未涂敷石英毛细管为分离柱,30mmol/L硼砂+30mmol/L碳酸钠+60mmol/L羟丙基-β-环糊精为分离缓冲溶液,50mmol/L醋酸溶液为样品介质,检测波长为254nm。GMP及IMP的校正峰面积与质量浓度在5～100mg/L范围内具有良好线性关系,线性相关系数分别为0.9998和0.9997,检出限均为2mg/L,定量限均为5mg/L。用该法测定了9种酱油,并与文献报道的高效液相色谱法的结果进行比较,结果满意。 展开更多

关键词 高效毛细管电泳 核苷酸 鸟嘌呤-5′-单磷酸 次黄嘌呤-5′-单磷酸 酱油

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膳食5’-核苷酸对酒精性肝损伤大鼠肠道菌群的影响 被引量：8

5

作者 蔡夏夏 鲍雷 +5 位作者 王楠 徐美虹 李迪 武欣 张召锋 李勇 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第15期212-216,共5页

目的:研究膳食5’-核苷酸对酒精性肝损伤大鼠肠道菌群的影响,并进一步探讨可能的作用机制。方法:雄性Wistar大鼠随机分为对照组、酒精组、葡萄糖等热量对照组、普通饲料组、质量分数0.04%、0.16%5’-核苷酸干预组,连续饲养7周,测定大鼠... 目的:研究膳食5’-核苷酸对酒精性肝损伤大鼠肠道菌群的影响,并进一步探讨可能的作用机制。方法:雄性Wistar大鼠随机分为对照组、酒精组、葡萄糖等热量对照组、普通饲料组、质量分数0.04%、0.16%5’-核苷酸干预组,连续饲养7周,测定大鼠体质量、脏体比、血清乙醇体积分数、血清转氨酶活力、血脂水平及总蛋白含量等相关指标;平板培养大鼠粪便中的乳酸杆菌、双歧杆菌、大肠杆菌、肠球菌,计算大鼠粪便中各种细菌的菌落数。结果:膳食5’-核苷酸能够增加酒精引起的大鼠体质量降低,轻度抑制血清乙醇体积分数的升高,抑制酒精引起丙氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶活力和甘油三酯水平等升高(P<0.05),增加血清总蛋白、白蛋白及球蛋白含量(P<0.05);并能够增加肝体比,减少盲体比(P<0.05);膳食5’-核苷酸能够增加肠道乳酸杆菌数量,同时减少大肠杆菌及肠球菌的数量(P<0.05)。结论:膳食5’-核苷酸能够改善酒精引起的大鼠肝脏损伤,调节肠道菌群可能是其作用机制之一。 展开更多

关键词 5’-核苷酸 酒精性肝损伤 肠道菌群 丙氨酸氨基转移酶 酒精性脂肪性肝炎

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嘌呤核苷酸补偿对海洛因依赖大鼠脑组织中5-HT及5-HIAA含量的影响及其机制 被引量：1

6

作者 李鸿梅 何海涛 +2 位作者 李昆 刘剑凯 洪敏 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1024-1028,I0011,共6页

目的:研究嘌呤核苷酸补偿对海洛因依赖大鼠的戒断症状及脑组织中5-羟色胺(5-HT)及5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量的影响及其作用机制。方法:剂量递增腹腔注射海洛因,建立海洛因依赖大鼠模型,110只正常雄性Wistar大鼠随机分为对照组(C)、海洛... 目的:研究嘌呤核苷酸补偿对海洛因依赖大鼠的戒断症状及脑组织中5-羟色胺(5-HT)及5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量的影响及其作用机制。方法:剂量递增腹腔注射海洛因,建立海洛因依赖大鼠模型,110只正常雄性Wistar大鼠随机分为对照组(C)、海洛因组(H)、海洛因补偿AMP+GMP组(HAG)、海洛因补偿AMP组(HA)、海洛因补偿GMP组(HG),每组22只。应用荧光分光光度法测定大鼠脑组织中5-HT和5-HIAA的含量,ELISA法测定大鼠脑组织中色氨酸羟化酶(TPH)的含量,免疫组化法检测脑组织中TPH蛋白的表达,每组中有8只鼠于第10天第1次给药后4h观察戒断症状,每组中有4只鼠用于免疫组化。结果:与H组比较,HAG、HA及HG组大鼠的咀嚼、齿颤及睑下垂次数均明显减少(P<0.05)。与C组比较,H组大鼠脑组织中5-HT和5-HIAA含量显著下降(P<0.05);与H组比较,HAG、HA和HG组大鼠脑组织中5-HT和5-HIAA含量均有所升高(P<0.05)。与C组比较,H组大鼠脑组织中TPH含量显著下降(P<0.05);与H组比较,HAG、HA和HG组大鼠脑组织中TPH含量均有所升高(P<0.05)。与C组比较,H组大鼠脑组织中THP表达的阳性细胞计数明显减少(P<0.05);与H组比较,HAG、HA及HG组大鼠脑组织中THP表达的阳性细胞计数有所升高(P<0.05)。结论:嘌呤核苷酸补偿能够减轻海洛因依赖大鼠的戒断症状,并能增加大鼠脑组织中5-HT和TPH的含量。 展开更多

关键词 嘌呤核苷酸 海洛因 5-羟色胺 5-羟吲哚乙酸 色氨酸羟化酶

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香菇中5'-核苷酸的高效液相色谱-质谱分析 被引量：25

7

作者 邹耀洪 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第1期196-198,共3页

采用高效液相色谱/质谱法,对香菇中5'-核苷酸进行了分析。在ODS柱上,以含0.05%磷酸的水-甲醇(90/10,V/V)为流动相进行了分离。以HPLC与LC/MS联合定性香菇中5'-核苷酸为5'-肌苷酸,5'-鸟苷酸,5'-尿苷酸和5'-腺苷... 采用高效液相色谱/质谱法,对香菇中5'-核苷酸进行了分析。在ODS柱上,以含0.05%磷酸的水-甲醇(90/10,V/V)为流动相进行了分离。以HPLC与LC/MS联合定性香菇中5'-核苷酸为5'-肌苷酸,5'-鸟苷酸,5'-尿苷酸和5'-腺苷酸。采用外标法定量,它们的标准加入回收率分别为100.4%、99.0%、97.8%、和97.2%,相对标准偏差分别为2.07%、2.18%、1.91%和2.76%,检出限分别为2.5、2.1、3.2、和3.5μg/ml。该方法准确可靠,简便易行。 展开更多

关键词 高效液相色谱-质谱 5’-核苷酸 香菇

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5′-核苷酸酶和HRP酶共固定修饰电极快速检测鸡肉中肌苷酸含量 被引量：1

8

作者 干宁 王鲁雁 +2 位作者 李天华 陈晓东 徐伟民 《传感技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期27-31,共5页

利用气相沉积方法在玻碳电极表面得到二氧化钛凝胶膜,并在电极表面同时固定5′-核苷酸酶(5′-NT)和辣根过氧化物酶(HRP),构建了一种新型快速测定肌苷酸(IMP)含量的安培传感电极(5′-NT-HRP/GCE)。在溶解氧存在的条件下,IMP被凝胶膜中的5... 利用气相沉积方法在玻碳电极表面得到二氧化钛凝胶膜,并在电极表面同时固定5′-核苷酸酶(5′-NT)和辣根过氧化物酶(HRP),构建了一种新型快速测定肌苷酸(IMP)含量的安培传感电极(5′-NT-HRP/GCE)。在溶解氧存在的条件下,IMP被凝胶膜中的5′-NT催化氧化,通过产物H2O2在电位-150mV下被HRP酶催化还原的电化学响应对IMP进行测定。在邻苯二酚存在下,该传感器对IMP表现出快速的响应(响应时间小于10s)。该电极对IMP的测定具有较宽的线性范围(1×10-6-2×10-4mol/L)和较低的检测限(0.5×10-6mol/L)。该电极对IMP的测定具有很高的准确度和良好的重现性。除抗坏血酸以外,与IMP共存的其它物质对其测定没有干扰。结果表明,该电极显示出很好的重现性和稳定性,能用于鸡肉中IMP的在线检测。 展开更多

关键词 酶修饰电极 5′-核苷酸酶 辣根过氧化物酶 肌苷酸

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九州虫草5′-核苷酸的毛细管区带电泳分析 被引量：1

9

作者 张海英 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第18期5342-5343,5349,共3页

用超声波对九州虫草4个样品进行预处理,添加较高浓度的标准溶液,采用毛细管电泳法检测电泳图谱中各峰峰高、峰面积的变化,测定了各样品中的5′-核苷酸组分及含量。结果表明,在九州虫草的各部分中均可检测到高含量的鸟苷酸,其中以菌丝体... 用超声波对九州虫草4个样品进行预处理,添加较高浓度的标准溶液,采用毛细管电泳法检测电泳图谱中各峰峰高、峰面积的变化,测定了各样品中的5′-核苷酸组分及含量。结果表明,在九州虫草的各部分中均可检测到高含量的鸟苷酸,其中以菌丝体的含量最高(0.90 mg/g),其他核苷酸只在菌丝体中检测到,分别为5-′UMP 0.46 mg/g,5-′GMP 0.90 mg/g,5-I′MP 0.98 mg/g,5-′XMP 1.19 mg/g。该方法快速简便,重现性好,能有效地测定样品中核苷酸类成分。 展开更多

关键词 5′-核苷酸 九州虫草 毛细管区带电泳

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5′-核苷酸的合成方法比较 被引量：4

10

作者 戚娜 朱利民 《生物技术通报》 CAS CSCD 2006年第C00期242-245,250,共5页

5′-核苷酸在农业、食品和医药行业有着广泛的用途。比较了目前5′-核苷酸的工业和实验室合成方法,包括化学合成法,微生物发酵法,酶解法和酶催化法。

关键词 5’-核苷酸 化学合成 微生物发酵 酶解 酶催化

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不锈钢微滤膜在5′-核苷酸生产过程中的应用 被引量：1

11

作者 陈琦 吕浩 张业勇 《化学与生物工程》 CAS 2009年第3期53-57,共5页

采用不锈钢微滤膜,对酶解RNA制备5′-核苷酸中杂蛋白的分离工艺进行了研究。考察了压力、温度对膜渗透通量、杂蛋白截留率以及透过液中杂蛋白含量等的影响,确定最佳工艺操作条件为:压力3.8 kg.cm-2、温度20℃,此时杂蛋白截留率达到66.7... 采用不锈钢微滤膜,对酶解RNA制备5′-核苷酸中杂蛋白的分离工艺进行了研究。考察了压力、温度对膜渗透通量、杂蛋白截留率以及透过液中杂蛋白含量等的影响,确定最佳工艺操作条件为:压力3.8 kg.cm-2、温度20℃,此时杂蛋白截留率达到66.7%、膜透过液中杂蛋白含量约为0.1 mg.mL-1。研究表明,滤饼层模型能较好地解释不锈钢膜的膜污染问题,通过考察膜渗透通量的恢复率,确定了最佳膜清洗方案,整个清洗过程只需要110 min,操作简捷,膜渗透通量能完全恢复。 展开更多

关键词 微滤膜 5′-核苷酸 污染 再生

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家蚕微孢子虫核糖-5-磷酸异构酶A基因的克隆及表达特征分析

12

作者 尚瑞沙 齐静茹 +3 位作者 陈红丽 张志林 张轶岭 沈中元 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期61-66,共6页

核糖-5-磷酸异构酶A(ribose 5-phosphate isomerase A,RpiA)是多种生物中普遍存在的一种高度保守的蛋白酶,在磷酸戊糖途径(PPP)中起着核心作用,参与原核生物与真核生物核糖-5-磷酸(R5P)与核酮糖-5-磷酸(Ru5P)之间的可逆异构化反应及植... 核糖-5-磷酸异构酶A(ribose 5-phosphate isomerase A,RpiA)是多种生物中普遍存在的一种高度保守的蛋白酶,在磷酸戊糖途径(PPP)中起着核心作用,参与原核生物与真核生物核糖-5-磷酸(R5P)与核酮糖-5-磷酸(Ru5P)之间的可逆异构化反应及植物二氧化碳固定的卡尔文循环。为探索RpiA在家蚕微孢子虫侵染家蚕后能量代谢与物质合成过程中所发挥的作用,通过PCR扩增得到NbRpiA基因的编码区。该开放阅读框全长345 bp,编码114个氨基酸,预测蛋白质的分子质量约为13.145 kD,等电点为7.72,未发现明显已知功能结构域。实时荧光定量PCR检测发现,NbRpiA基因在家蚕微孢子虫感染家蚕后7 d内均有表达:从感染后2 h起,NbRpiA基因的表达水平呈缓慢上升的趋势,第2天达到最高,随后表达水平逐渐降低,从第4天开始表达水平大幅降低,至第7天降至最低。初步推测NbRpiA可能在家蚕微孢子虫孢子发芽及增殖阶段发挥作用。研究结果为了解NbRpiA在家蚕微孢子虫能量代谢与物质合成中的作用提供了初步线索。 展开更多

关键词 家蚕微孢子虫 核糖-5-磷酸异构酶A 磷酸戊糖途径 核苷酸合成 实时荧光定量PCR

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麦芽根中5′-磷酸二酯酶的制备及性质 被引量：7

13

作者 李德莹 邱蔚然 丁庆豹 《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期376-379,共4页

从麦芽根中提取 5′-磷酸二酯酶 ,酶活可达 474U/ m L。将所得酶液用于水解酵母核糖核酸 ,得到 5′-CMP、UMP、GMP、AMP 4种单核苷酸。最佳反应条件为 :底物 RNA浓度为0 .0 1 g/ m L,每毫升底物的酶用量为 3 0 U,酶解温度 70°C,p H... 从麦芽根中提取 5′-磷酸二酯酶 ,酶活可达 474U/ m L。将所得酶液用于水解酵母核糖核酸 ,得到 5′-CMP、UMP、GMP、AMP 4种单核苷酸。最佳反应条件为 :底物 RNA浓度为0 .0 1 g/ m L,每毫升底物的酶用量为 3 0 U,酶解温度 70°C,p H7.0 ,时间 2 h,5′-核苷酸转化率达80 %。 展开更多

关键词 制备 麦芽根 5′-磷酸二酯酶 5′-核苷酸 核糖核酸 热稳定性 pH稳定性 啤酒废料

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5′核苷酸酶的自动化测定及临床价值探讨 被引量：5

14

作者 吴倩 曾祝伦 帅春海 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2003年第3期375-376,378,共3页

关键词 5′核苷酸酶 自动化测定 5′-核糖核苷酸磷酸水解酶 血清 肝胆疾病

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分体式中空纤维酶膜反应器制备5’—核苷酸的研究 被引量：4

15

作者 杨大令 吴迪 +1 位作者 张守海 蹇锡高 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期167-169,共3页

以高性能杂萘联苯聚醚砜酮(PPESK)中空纤维超滤膜为基础设计了分体式酶膜反应器(REMR),研究了REMR催化酵母RNA水解生产5’-核苷酸的工艺条件,分析了酶解反应不完全的原因,考察了RNA浓度、酶浓度、pH、反应温度对酶解率的影响。结果表明:... 以高性能杂萘联苯聚醚砜酮(PPESK)中空纤维超滤膜为基础设计了分体式酶膜反应器(REMR),研究了REMR催化酵母RNA水解生产5’-核苷酸的工艺条件,分析了酶解反应不完全的原因,考察了RNA浓度、酶浓度、pH、反应温度对酶解率的影响。结果表明:当RNA浓度为2%(w/v),核酸酶P1浓度为100mg/L,pH为5.2,体系温度为65℃时,反应5h酶解率可达85%;对于已污染的膜,热碱反洗、NaClO反洗可分别使纯水通量恢复至新膜的82%和67%。 展开更多

关键词 5’-核苷酸 核酸酶P1 分体式中空纤维酶膜反应器 膜污染

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5′-磷酸二酯酶在啤酒废酵母中的应用 被引量：1

16

作者 马荣山 庄华丽 《中国酿造》 CAS 北大核心 2008年第9X期69-71,共3页

啤酒废酵母是啤酒生产过程中的重要副产物之一,同时啤酒废酵母中含有丰富的营养物质,蛋白质、核酸、氨基酸等物质含量高;而麦芽根又是啤酒酵母生产中的另一重要副产物,从中提取的5′-磷酸二酯酶能够有效提高酵母抽提物中5′-核苷酸的含... 啤酒废酵母是啤酒生产过程中的重要副产物之一,同时啤酒废酵母中含有丰富的营养物质,蛋白质、核酸、氨基酸等物质含量高;而麦芽根又是啤酒酵母生产中的另一重要副产物,从中提取的5′-磷酸二酯酶能够有效提高酵母抽提物中5′-核苷酸的含量,对啤酒废酵母的综合利用,将会产生巨大的经济效益和社会效益。 展开更多

关键词 啤酒废酵母 5′-磷酸二酯酶 5′-核苷酸

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5'-磷酸二酯酶的应用与研究进展 被引量：4

17

作者 邵帅 田延军 +1 位作者 赵祥颖 刘建军 《中国酿造》 CAS 北大核心 2010年第5期26-30,共5页

5'-磷酸二酯酶是一种能将单链DNA和RNA水解为5′-核苷酸的磷酸二酯酶,是酶法生产5′-核苷酸的主要工业用酶。文中对5'-磷酸二酯酶的来源、制备方法、应用及研究进展进行了综述。

关键词 5'-磷酸二酯酶 5'-核苷酸 脱氧核糖核酸 核糖核酸

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香菇煮菇水5′-磷酸二酯酶酶解增鲜技术 被引量：4

18

作者 李顺峰 刘丽娜 +3 位作者 王安建 田广瑞 许方方 魏书信 《河南农业科学》 北大核心 2021年第2期167-172,共6页

为高效利用香菇煮菇水中的呈鲜物质,采用5′-磷酸二酯酶对香菇煮菇水进行单因素试验和正交试验酶解工艺优化,并对酶解后5′-核苷酸质量浓度和等效鲜味含量(EUC)进行评价。结果表明,5′-磷酸二酯酶酶解香菇煮菇水提高5′-核苷酸质量浓度... 为高效利用香菇煮菇水中的呈鲜物质,采用5′-磷酸二酯酶对香菇煮菇水进行单因素试验和正交试验酶解工艺优化,并对酶解后5′-核苷酸质量浓度和等效鲜味含量(EUC)进行评价。结果表明,5′-磷酸二酯酶酶解香菇煮菇水提高5′-核苷酸质量浓度的最佳工艺条件为酶解pH值5.0、酶解温度50℃、加酶量0.3%、酶解时间2 h,在此条件下5′-核苷酸质量浓度3.80 g/L。酶解可显著提高香菇煮菇水中5′-AMP和5′-GMP含量,EUC值从酶解前的273.71 g/L显著升高至436.27 g/L,酶解后EUC值约为酶解前的1.59倍。这一结果表明,对香菇煮菇水进行适当酶解,可以显著增强其鲜味。 展开更多

关键词 香菇煮菇水 5′-磷酸二酯酶 5′-核苷酸 呈鲜氨基酸 等效鲜味含量 增鲜 酶解

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30种酱油中基本成分和呈味核苷酸的高效液相色谱法分析研究 被引量：11

19

作者 林耀盛 刘学铭 +4 位作者 于丰玺 陈智毅 杨春英 杨荣玲 赵晓丽 《中国调味品》 CAS 北大核心 2012年第10期69-73,共5页

通过对不同等级的市售酱油的pH值、NaCl含量、吸光度、氨基态氮、总氮、铵盐、总酸度等几项理化指标的检测,并采用反向高效液相色谱法测定酱油中呈味核苷酸含量,结合其主要成份对市售酱油中呈味核苷酸含量及其与产品质量档次进行相关性... 通过对不同等级的市售酱油的pH值、NaCl含量、吸光度、氨基态氮、总氮、铵盐、总酸度等几项理化指标的检测,并采用反向高效液相色谱法测定酱油中呈味核苷酸含量,结合其主要成份对市售酱油中呈味核苷酸含量及其与产品质量档次进行相关性分析。方法:酱油样品用甲醇/水(75/25,v/v)沉淀30min,提取液用C18固相萃取小柱去杂,定容后过0.22μm滤膜后进行液相色谱分析。色谱条件:色谱柱Zorbax SB-Aq C18(4.6×250mm,5micron);流动相为磷酸二氢钾(0.01mol/L,pH为4.5),流速1.0mL/min,柱温30℃,检测波长254nm。结果:高效液相色谱法测定呈味核苷酸加标回收率98.5%～102.5%,相对标准偏差小于1.05%,该法最低检出限量10μg。结论:本法适用于酱油中5′-肌苷酸一钠和5′-鸟苷酸二钠的测定,检测速度快,结果准确,尤其适用于批量样品分析。 展开更多

关键词 高效液相色谱法 成分 呈味核苷酸 5′-肌苷酸二钠盐 5′-鸟苷酸二钠盐

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毛细管电泳法测定苷肽胶囊中3种核苷酸 被引量：5

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作者 李芸 丁晓静 +2 位作者 杨媛媛 赵珊 王志 《理化检验（化学分册）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1279-1281,1285,共4页

提出了毛细管电泳法同时分离测定苷肽胶囊中3种核苷酸腺嘌呤-5′-单磷酸、胞嘧啶-5′-单磷酸和鸟嘌呤-5′-单磷酸含量的方法。以15 mmol.L-1硼砂+35 mmol.L-1碳酸钠+60 mmol.L-1羟丙基-β-环糊精混合溶液为电解质溶液,运行电压30 kV,于2... 提出了毛细管电泳法同时分离测定苷肽胶囊中3种核苷酸腺嘌呤-5′-单磷酸、胞嘧啶-5′-单磷酸和鸟嘌呤-5′-单磷酸含量的方法。以15 mmol.L-1硼砂+35 mmol.L-1碳酸钠+60 mmol.L-1羟丙基-β-环糊精混合溶液为电解质溶液,运行电压30 kV,于254 nm波长处进行紫外检测。3种核苷酸的线性范围依次为5.0～80.0,8.0～80.0,8.0～80.0 mg.L-1,检出限(3S/N)依次为2.0,3.0,3.0 mg.L-1。采用该方法对苷肽胶囊样品中3种核苷酸的含量分别进行了测定,所得加标回收率在92.1%～102.7%之间,相对标准偏差(n=5)均小于等于5.0%。 展开更多

关键词 毛细管电泳法 核苷酸 腺嘌呤-5′-单磷酸 胞嘧啶-5′-单磷酸 鸟嘌呤-5′-单磷酸

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