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迭代饱和突变提高卤醇脱卤酶HheA_(AM)催化制备6-氰基-3,5-二羟基己酸叔丁酯的酶活
被引量：
2
1
作者
王露
徐刚
+1 位作者
杨立荣
吴坚平
《高校化学工程学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2018年第5期1127-1133,共7页
(3R,5R)-6-氰基-3,5-二羟基己酸叔丁酯(A7)是合成降血脂药物阿托伐他汀钙的关键手性中间体,利用卤醇脱卤酶催化(3R,5S)-6-氯-3,5-二羟基己酸叔丁酯(D3)的脱卤氰化反应制备A7是很有潜力的合成方法。现有研究存在的主要问题是卤醇脱卤酶...
(3R,5R)-6-氰基-3,5-二羟基己酸叔丁酯(A7)是合成降血脂药物阿托伐他汀钙的关键手性中间体,利用卤醇脱卤酶催化(3R,5S)-6-氯-3,5-二羟基己酸叔丁酯(D3)的脱卤氰化反应制备A7是很有潜力的合成方法。现有研究存在的主要问题是卤醇脱卤酶种类少,对底物D3的催化活性很低,且鲜见有关脱卤酶分子改造提高其对D3催化活性的报道。本研究利用基因挖掘技术获得了一个对D3表现出较高催化活力的卤醇脱卤酶HheA_(AM) (来源于Agromycesmediolanus sp.),运用定向进化和半理性设计方法确定了4个影响酶活的关键位点(84、88、136、144位),然后使用迭代饱和突变(ISM)策略对这4个位点进行组合突变,突变株M4-HheA_(AM)(84S-88L-136T-144C)的比酶活为0.89U·mg-1,是野生型HheA_(AM)(Wt-HheA_(AM))的13倍,对D3的催化活性得到了显著的提高。
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关键词
卤醇脱卤酶
脱卤氰化反应
酶活
迭代饱和突变
(3R
5
R)
-
6
-
氰基
-
3
5
-
二
羟基
己酸叔丁酯
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职称材料
焦糖化与美拉德反应中DDMP、HMF及糠醛的生成研究
被引量：
29
2
作者
王丹
况丹妮
+3 位作者
刘若阳
张志军
侯天宇
李河
《食品工业科技》
CAS
北大核心
2022年第12期100-107,共8页
食品热加工中广泛存在的美拉德反应除赋予食品色香味外,还会生成有害或有异味物质,2,3-二氢-3,5-二羟基-6-甲基-4(H)-吡喃-4-酮(DDMP)、5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethylfurfural,HMF)及糠醛就是其中重要的产物。本文分别建立了3种焦糖化和...
食品热加工中广泛存在的美拉德反应除赋予食品色香味外,还会生成有害或有异味物质,2,3-二氢-3,5-二羟基-6-甲基-4(H)-吡喃-4-酮(DDMP)、5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethylfurfural,HMF)及糠醛就是其中重要的产物。本文分别建立了3种焦糖化和3种美拉德反应体系,研究DDMP、HMF和糠醛的生成规律。结果表明,HMF和糠醛分别容易在果糖和木糖焦糖化体系中生成,在美拉德反应体系中,赖氨酸的参与抑制了HMF和糠醛生成,促进了DDMP的生成。结合中间产物和终末产物的表征,单糖的结构差异是影响三种化合物生成的主要因素,赖氨酸会竞争性抑制单糖降解的焦糖化途径,从而抑制HMF和糠醛的生成。本文可对食品热加工业中DDMP、HMF和糠醛的生成、控制及定向合成提供指导。
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关键词
2
3
-
二
氢
-
3
5-二羟基-6
-
甲基
-
4(H)
-
吡喃
-
4
-
酮
5
-
羟甲基糠醛
糠醛
焦糖化反应
美拉德反应
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职称材料
题名
迭代饱和突变提高卤醇脱卤酶HheA_(AM)催化制备6-氰基-3,5-二羟基己酸叔丁酯的酶活
被引量：
2
1
作者
王露
徐刚
杨立荣
吴坚平
机构
浙江大学化学工程与生物工程学院
出处
《高校化学工程学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2018年第5期1127-1133,共7页
基金
国家自然科学基金(21076187)
国家"973"计划资助项目(2011CB710800)
文摘
(3R,5R)-6-氰基-3,5-二羟基己酸叔丁酯(A7)是合成降血脂药物阿托伐他汀钙的关键手性中间体,利用卤醇脱卤酶催化(3R,5S)-6-氯-3,5-二羟基己酸叔丁酯(D3)的脱卤氰化反应制备A7是很有潜力的合成方法。现有研究存在的主要问题是卤醇脱卤酶种类少,对底物D3的催化活性很低,且鲜见有关脱卤酶分子改造提高其对D3催化活性的报道。本研究利用基因挖掘技术获得了一个对D3表现出较高催化活力的卤醇脱卤酶HheA_(AM) (来源于Agromycesmediolanus sp.),运用定向进化和半理性设计方法确定了4个影响酶活的关键位点(84、88、136、144位),然后使用迭代饱和突变(ISM)策略对这4个位点进行组合突变,突变株M4-HheA_(AM)(84S-88L-136T-144C)的比酶活为0.89U·mg-1,是野生型HheA_(AM)(Wt-HheA_(AM))的13倍,对D3的催化活性得到了显著的提高。
关键词
卤醇脱卤酶
脱卤氰化反应
酶活
迭代饱和突变
(3R
5
R)
-
6
-
氰基
-
3
5
-
二
羟基
己酸叔丁酯
Keywords
halohydrin dehalogenase
dehalo
-
cyanogenation
enzyme activity
iterative saturation mutagenesis
tert
-
butyl （3R,
5
R）
-
6
-
cyano
-
3,
5
-
dihydroxyhexanoate
分类号
TQ465.92 [化学工程—制药化工]
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职称材料
题名
焦糖化与美拉德反应中DDMP、HMF及糠醛的生成研究
被引量：
29
2
作者
王丹
况丹妮
刘若阳
张志军
侯天宇
李河
机构
中北大学化学工程与技术学院
出处
《食品工业科技》
CAS
北大核心
2022年第12期100-107,共8页
基金
国家自然科学基金(32001817)
山西省高校科技创新计划(2020L0298)
晋中市重点研发计划(农业)(Y212006)。
文摘
食品热加工中广泛存在的美拉德反应除赋予食品色香味外,还会生成有害或有异味物质,2,3-二氢-3,5-二羟基-6-甲基-4(H)-吡喃-4-酮(DDMP)、5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethylfurfural,HMF)及糠醛就是其中重要的产物。本文分别建立了3种焦糖化和3种美拉德反应体系,研究DDMP、HMF和糠醛的生成规律。结果表明,HMF和糠醛分别容易在果糖和木糖焦糖化体系中生成,在美拉德反应体系中,赖氨酸的参与抑制了HMF和糠醛生成,促进了DDMP的生成。结合中间产物和终末产物的表征,单糖的结构差异是影响三种化合物生成的主要因素,赖氨酸会竞争性抑制单糖降解的焦糖化途径,从而抑制HMF和糠醛的生成。本文可对食品热加工业中DDMP、HMF和糠醛的生成、控制及定向合成提供指导。
关键词
2
3
-
二
氢
-
3
5-二羟基-6
-
甲基
-
4(H)
-
吡喃
-
4
-
酮
5
-
羟甲基糠醛
糠醛
焦糖化反应
美拉德反应
Keywords
2
3
-
dihydro
-
3
5
-
dihydroxy
-
6
-
methyl
-
4(H)
-
pyran
-
4
-
one
5
-
hydroxymethylfurfural
furfural
caramelization
Maillard reaction
分类号
TS241 [轻工技术与工程—制糖工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
迭代饱和突变提高卤醇脱卤酶HheA_(AM)催化制备6-氰基-3,5-二羟基己酸叔丁酯的酶活
王露
徐刚
杨立荣
吴坚平
《高校化学工程学报》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2018
2
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
焦糖化与美拉德反应中DDMP、HMF及糠醛的生成研究
王丹
况丹妮
刘若阳
张志军
侯天宇
李河
《食品工业科技》
CAS
北大核心
2022
29
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