水解核糖核酸生产5′-核苷酸的条件优化及初步鉴定 被引量：2

1

作者 王端好 王震 蒋丹丹 《粮食与油脂》 北大核心 2022年第10期102-105,共4页

以啤酒废酵母中提取的核糖核酸为原料,利用单因素试验和响应面优化试验优化了核酸酶P1催化水解核糖核酸的条件,并利用离子交换层析法对水解液中5′-核苷酸进行了初步分离鉴定。结果表明:最佳水解条件为核糖核酸质量浓度7.5 g/L、水解液... 以啤酒废酵母中提取的核糖核酸为原料,利用单因素试验和响应面优化试验优化了核酸酶P1催化水解核糖核酸的条件,并利用离子交换层析法对水解液中5′-核苷酸进行了初步分离鉴定。结果表明:最佳水解条件为核糖核酸质量浓度7.5 g/L、水解液初始pH 5、水解温度54℃、水解时间2.0 h。通过分离初步确定核糖核酸水解液中含有尿嘧啶核苷酸、鸟嘌呤核苷酸、胞嘧啶核苷酸和腺嘌呤核苷酸。 展开更多

关键词 核糖核酸 5′-核苷酸 核酸酶P1 水解 离子交换

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高效毛细管电泳法测定酱油中5′-单磷酸核苷酸 被引量：7

2

作者 李佳 李芸 +3 位作者 宋宝花 丁晓静 赵珊 王志 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第22期264-267,共4页

建立高效毛细管电泳同时分离测定酱油中两种核苷酸鸟嘌呤-5′-单磷酸(GMP)和次黄嘌呤-5′-单磷酸(IMP)的方法。电泳条件:以50μm×60.2cm(有效长度50cm)未涂敷石英毛细管为分离柱,30mmol/L硼砂+30mmol/L碳酸钠+60mmol/L羟丙基-β-... 建立高效毛细管电泳同时分离测定酱油中两种核苷酸鸟嘌呤-5′-单磷酸(GMP)和次黄嘌呤-5′-单磷酸(IMP)的方法。电泳条件:以50μm×60.2cm(有效长度50cm)未涂敷石英毛细管为分离柱,30mmol/L硼砂+30mmol/L碳酸钠+60mmol/L羟丙基-β-环糊精为分离缓冲溶液,50mmol/L醋酸溶液为样品介质,检测波长为254nm。GMP及IMP的校正峰面积与质量浓度在5～100mg/L范围内具有良好线性关系,线性相关系数分别为0.9998和0.9997,检出限均为2mg/L,定量限均为5mg/L。用该法测定了9种酱油,并与文献报道的高效液相色谱法的结果进行比较,结果满意。 展开更多

关键词 高效毛细管电泳 核苷酸 鸟嘌呤-5′-单磷酸 次黄嘌呤-5′-单磷酸 酱油

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嗜酸氧化亚铁硫杆菌的核糖-5-磷酸异构酶的同源建模研究 被引量：1

3

作者 陈锋菊 刘元东 +1 位作者 高健 孙远东 《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期93-98,共6页

采用同源建模技术和分子动力学模拟方法,构建了嗜酸氧化亚铁硫杆菌Acidithiobacillus ferrooxidans(A.f)的核糖-5-磷酸异构酶(rpiA)基因编码的蛋白质三维分子结构模型。将结构模型进行绑定位点搜索并与底物核糖-5-磷酸(R5P)进行柔性分... 采用同源建模技术和分子动力学模拟方法,构建了嗜酸氧化亚铁硫杆菌Acidithiobacillus ferrooxidans(A.f)的核糖-5-磷酸异构酶(rpiA)基因编码的蛋白质三维分子结构模型。将结构模型进行绑定位点搜索并与底物核糖-5-磷酸(R5P)进行柔性分子对接,结果显示,R5P被招募到A.ferrooxidans的RpiA的活性位点并随后被激活;残基Asp81,Thr31,Lys121,Ser30,Glu103,Asp84,Lys94,Asp118,Lys7,Gly97,Gly29,Gly95,Thr28和H2O对底物绑定或催化起重要作用,其中,Gly97,Gly29,Gly95和Thr28是新识别的残基,它们在其他生物体的RpiA中相当保守但未被发现。 展开更多

关键词 嗜酸氧化亚铁硫杆菌 核糖-5-磷酸异构酶 结构模型 分子对接 核糖-5-磷酸

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家蚕微孢子虫核糖-5-磷酸异构酶A基因的克隆及表达特征分析

4

作者 尚瑞沙 齐静茹 +3 位作者 陈红丽 张志林 张轶岭 沈中元 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期61-66,共6页

核糖-5-磷酸异构酶A(ribose 5-phosphate isomerase A,RpiA)是多种生物中普遍存在的一种高度保守的蛋白酶,在磷酸戊糖途径(PPP)中起着核心作用,参与原核生物与真核生物核糖-5-磷酸(R5P)与核酮糖-5-磷酸(Ru5P)之间的可逆异构化反应及植... 核糖-5-磷酸异构酶A(ribose 5-phosphate isomerase A,RpiA)是多种生物中普遍存在的一种高度保守的蛋白酶,在磷酸戊糖途径(PPP)中起着核心作用,参与原核生物与真核生物核糖-5-磷酸(R5P)与核酮糖-5-磷酸(Ru5P)之间的可逆异构化反应及植物二氧化碳固定的卡尔文循环。为探索RpiA在家蚕微孢子虫侵染家蚕后能量代谢与物质合成过程中所发挥的作用,通过PCR扩增得到NbRpiA基因的编码区。该开放阅读框全长345 bp,编码114个氨基酸,预测蛋白质的分子质量约为13.145 kD,等电点为7.72,未发现明显已知功能结构域。实时荧光定量PCR检测发现,NbRpiA基因在家蚕微孢子虫感染家蚕后7 d内均有表达:从感染后2 h起,NbRpiA基因的表达水平呈缓慢上升的趋势,第2天达到最高,随后表达水平逐渐降低,从第4天开始表达水平大幅降低,至第7天降至最低。初步推测NbRpiA可能在家蚕微孢子虫孢子发芽及增殖阶段发挥作用。研究结果为了解NbRpiA在家蚕微孢子虫能量代谢与物质合成中的作用提供了初步线索。 展开更多

关键词 家蚕微孢子虫 核糖-5-磷酸异构酶A 磷酸戊糖途径 核苷酸合成 实时荧光定量PCR

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通过核糖核苷酸还原酶M2逆转肝癌细胞对5-氟尿嘧啶耐药 被引量：3

5

作者 余赛红 郑晓亮 +3 位作者 蒲依依 颜冬梅 王孝举 于洁 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2021年第7期729-737,共9页

目的:探讨核糖核苷酸还原酶M2(RRM2)在肝癌细胞对5-氟尿嘧啶(5-FU)耐药中的作用,并开发潜在的策略来提高肝癌细胞对5-FU的敏感性。方法:利用Western blot检测5-FU耐药肝癌细胞(BEL/5-FU)与非耐药肝癌细胞(BEL7402)中RRM2蛋白的表达差异... 目的:探讨核糖核苷酸还原酶M2(RRM2)在肝癌细胞对5-氟尿嘧啶(5-FU)耐药中的作用,并开发潜在的策略来提高肝癌细胞对5-FU的敏感性。方法:利用Western blot检测5-FU耐药肝癌细胞(BEL/5-FU)与非耐药肝癌细胞(BEL7402)中RRM2蛋白的表达差异;通过用RNA干扰技术下调BEL/5-FU细胞中RRM2的表达或RRM2抑制剂3-AP(Triapine)抑制RRM2活性;CCK-8和集落形成实验用于检测细胞的增殖能力;使用高内涵细胞成像系统仪检测与分析细胞凋亡。结果:BEL/5-FU细胞中RRM2的表达量是BEL7402细胞的2.5倍。RNA干扰技术能够下调BEL/5-FU细胞中RRM2的表达,并使5-FU对BEL/5-FU细胞的半数抑制浓度(IC_(50))下降约50%,同时细胞集落形成能力也显著减弱。3-AP与5-FU联合处理BEL/5-FU细胞,使5-FU对BEL/5-FU细胞的IC_(50)下降约40%,细胞集落形成能力减弱,并促进5-FU导致的细胞凋亡。结论:RRM2与肝癌细胞对5-FU的耐药相关,本研究通过抑制RRM2的活性来逆转肝癌细胞对5-FU的耐药,为提高肝癌的5-FU化疗疗效提供新靶点和新思路。 展开更多

关键词 肝细胞癌 核糖核苷酸还原酶M2 耐药 3-AP(Triapine) 5-氟尿嘧啶

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5-氨基咪唑-4-甲酰胺核糖核苷酸联合干扰素对K562细胞的影响

6

作者 王红娟 刘蕊 +1 位作者 张媛媛 葛繁梅 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1892-1898,共7页

目的:研究5-氨基咪唑-4-甲酰胺核糖核苷酸(AICAR)联合干扰素(IFN-ɑ-2b)对慢性粒细胞白血病K562细胞的增殖及凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:采用CCK-8法检测细胞增殖抑制情况;Wright-Giemsa方法染色,光学显微镜下观察细胞形... 目的:研究5-氨基咪唑-4-甲酰胺核糖核苷酸(AICAR)联合干扰素(IFN-ɑ-2b)对慢性粒细胞白血病K562细胞的增殖及凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:采用CCK-8法检测细胞增殖抑制情况;Wright-Giemsa方法染色,光学显微镜下观察细胞形态;FITC AnnexinV/PI双染法分析细胞凋亡率的变化;免疫细胞化学法检测野生型P53蛋白的阳性表达率。结果:不同浓度AICAR于不同作用时间24、48和72 h对K562细胞均有抑制作用,抑制程度呈时间、剂量依赖性(r=0.71,r=0.84)。AICAR与IFN-ɑ-2b联合应用后可以有效抑制K562细胞增殖,促进细胞凋亡,联合作用72 h时细胞的抑制率可达(45.26±2.54)%,联合作用48 h早期凋亡率达(33.72±0.23)%,与对照组及单用AICAR和单用IFN-ɑ-2b相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。AICAR与IFN-ɑ-2b联合作用促进野生型P53蛋白的表达。结论:AICAR和(或)IFN-ɑ-2b能抑制细胞增殖,促进K562细胞凋亡,2药联合具有协同抗瘤效应,其作用机制可能与促进野生型P53蛋白高表达有关。 展开更多

关键词 5-氨基咪唑-4-甲酰胺核糖核苷酸 干扰素 K562细胞株

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麦芽根中5′-磷酸二酯酶的制备及性质 被引量：7

7

作者 李德莹 邱蔚然 丁庆豹 《华东理工大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期376-379,共4页

从麦芽根中提取 5′-磷酸二酯酶 ,酶活可达 474U/ m L。将所得酶液用于水解酵母核糖核酸 ,得到 5′-CMP、UMP、GMP、AMP 4种单核苷酸。最佳反应条件为 :底物 RNA浓度为0 .0 1 g/ m L,每毫升底物的酶用量为 3 0 U,酶解温度 70°C,p H... 从麦芽根中提取 5′-磷酸二酯酶 ,酶活可达 474U/ m L。将所得酶液用于水解酵母核糖核酸 ,得到 5′-CMP、UMP、GMP、AMP 4种单核苷酸。最佳反应条件为 :底物 RNA浓度为0 .0 1 g/ m L,每毫升底物的酶用量为 3 0 U,酶解温度 70°C,p H7.0 ,时间 2 h,5′-核苷酸转化率达80 %。 展开更多

关键词 制备 麦芽根 5′-磷酸二酯酶 5′-核苷酸 核糖核酸 热稳定性 pH稳定性 啤酒废料

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5′-磷酸二酯酶在啤酒废酵母中的应用 被引量：1

8

作者 马荣山 庄华丽 《中国酿造》 CAS 北大核心 2008年第9X期69-71,共3页

啤酒废酵母是啤酒生产过程中的重要副产物之一,同时啤酒废酵母中含有丰富的营养物质,蛋白质、核酸、氨基酸等物质含量高;而麦芽根又是啤酒酵母生产中的另一重要副产物,从中提取的5′-磷酸二酯酶能够有效提高酵母抽提物中5′-核苷酸的含... 啤酒废酵母是啤酒生产过程中的重要副产物之一,同时啤酒废酵母中含有丰富的营养物质,蛋白质、核酸、氨基酸等物质含量高;而麦芽根又是啤酒酵母生产中的另一重要副产物,从中提取的5′-磷酸二酯酶能够有效提高酵母抽提物中5′-核苷酸的含量,对啤酒废酵母的综合利用,将会产生巨大的经济效益和社会效益。 展开更多

关键词 啤酒废酵母 5′-磷酸二酯酶 5′-核苷酸

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5'-磷酸二酯酶的应用与研究进展 被引量：4

9

作者 邵帅 田延军 +1 位作者 赵祥颖 刘建军 《中国酿造》 CAS 北大核心 2010年第5期26-30,共5页

5'-磷酸二酯酶是一种能将单链DNA和RNA水解为5′-核苷酸的磷酸二酯酶,是酶法生产5′-核苷酸的主要工业用酶。文中对5'-磷酸二酯酶的来源、制备方法、应用及研究进展进行了综述。

关键词 5'-磷酸二酯酶 5'-核苷酸 脱氧核糖核酸 核糖核酸

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5′核苷酸酶的自动化测定及临床价值探讨 被引量：5

10

作者 吴倩 曾祝伦 帅春海 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2003年第3期375-376,378,共3页

关键词 5′核苷酸酶 自动化测定 5′-核糖核苷酸磷酸水解酶 血清 肝胆疾病

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香菇煮菇水5′-磷酸二酯酶酶解增鲜技术 被引量：3

11

作者 李顺峰 刘丽娜 +3 位作者 王安建 田广瑞 许方方 魏书信 《河南农业科学》 北大核心 2021年第2期167-172,共6页

为高效利用香菇煮菇水中的呈鲜物质,采用5′-磷酸二酯酶对香菇煮菇水进行单因素试验和正交试验酶解工艺优化,并对酶解后5′-核苷酸质量浓度和等效鲜味含量(EUC)进行评价。结果表明,5′-磷酸二酯酶酶解香菇煮菇水提高5′-核苷酸质量浓度... 为高效利用香菇煮菇水中的呈鲜物质,采用5′-磷酸二酯酶对香菇煮菇水进行单因素试验和正交试验酶解工艺优化,并对酶解后5′-核苷酸质量浓度和等效鲜味含量(EUC)进行评价。结果表明,5′-磷酸二酯酶酶解香菇煮菇水提高5′-核苷酸质量浓度的最佳工艺条件为酶解pH值5.0、酶解温度50℃、加酶量0.3%、酶解时间2 h,在此条件下5′-核苷酸质量浓度3.80 g/L。酶解可显著提高香菇煮菇水中5′-AMP和5′-GMP含量,EUC值从酶解前的273.71 g/L显著升高至436.27 g/L,酶解后EUC值约为酶解前的1.59倍。这一结果表明,对香菇煮菇水进行适当酶解,可以显著增强其鲜味。 展开更多

关键词 香菇煮菇水 5′-磷酸二酯酶 5′-核苷酸 呈鲜氨基酸 等效鲜味含量 增鲜 酶解

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麦芽根中5′—磷酸二脂酶的提取及制备 被引量：1

12

作者 段作营 刘军昌 +1 位作者 于瑞嵩 毛忠贵 《中国调味品》 CAS 北大核心 2003年第2期36-39,共4页

主要研究了麦芽根中 5′—磷酸二酯酶的提取方法。采用细度 4 0目的原料 ,通过正交试验确定最佳提取工艺为 :加水 6倍 ,pH5 0 ,在 4℃条件下浸提 2 0h后 5′—磷酸二酯酶活力达到 16 0u mL。不同浸提液种类、浓度、添加无机盐皆对酶活... 主要研究了麦芽根中 5′—磷酸二酯酶的提取方法。采用细度 4 0目的原料 ,通过正交试验确定最佳提取工艺为 :加水 6倍 ,pH5 0 ,在 4℃条件下浸提 2 0h后 5′—磷酸二酯酶活力达到 16 0u mL。不同浸提液种类、浓度、添加无机盐皆对酶活有影响 ,加入纤维素酶、果胶酶、viscozyme对麦芽根破壁具有协同作用。酶液经超滤浓缩可制备得率较高的粗酶粉。 展开更多

关键词 麦芽根 5’-磷酸二脂酶 提取 制备 超滤浓缩 调味品 呈味核苷酸

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核苷酸磷酸基团保护的研究

13

作者 金龙飞 《中国调味品》 CAS 北大核心 2003年第1期15-16,共2页

将谷氨酸钠、5′ -磷酸鸟苷按 1:1混合后 ,添加柠檬酸 ,然后用硬脂酸包覆 ,能够有效地保护核苷酸 5′ -位上的磷酸基团。其中 ,(5′ -磷酸鸟苷 +谷氨酸钠 ) :柠檬酸 :硬脂酸 =30 3:9 1:6 0 6时 ,5′ -磷酸鸟苷的残存率可达 93%。

关键词 核苷酸 5′-磷酸鸟苷 柠檬酸 调味品 脂肪酸包覆 稳定 鲜度 保护效果

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寄生原虫嘌呤磷酸核糖转移酶研究进展

14

作者 余志会 方肆云 +5 位作者 孙铭飞 戚南山 刘文俊 李娟 胡俊菁 廖申权 《广东农业科学》 CAS 2023年第8期163-172,共10页

寄生原虫是一类单细胞寄生性原虫,包括利什曼原虫(Leishmania spp.)、锥虫(Trypanosoma spp.)、疟原虫(Plasmodium spp.)、刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)、隐孢子虫(Cryptosporidium spp.)和艾美耳球虫(Eimeria spp.)等,可引起严重危... 寄生原虫是一类单细胞寄生性原虫,包括利什曼原虫(Leishmania spp.)、锥虫(Trypanosoma spp.)、疟原虫(Plasmodium spp.)、刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)、隐孢子虫(Cryptosporidium spp.)和艾美耳球虫(Eimeria spp.)等,可引起严重危害人类与动物健康以及对养殖业造成巨大经济损失的原虫病。寄生虫入侵宿主后的发育和繁殖需要大量的嘌呤核苷酸,相应的嘌呤碱基在嘌呤磷酸核糖转移酶的催化下生成对应的嘌呤核苷酸。嘌呤磷酸核糖转移酶是一类参与嘌呤核苷酸补救合成的重要代谢酶,广泛存在于寄生原虫中。寄生原虫的嘌呤磷酸核糖转移酶主要包括腺嘌呤磷酸核糖转移酶和次黄嘌呤-鸟嘌呤-黄嘌呤磷酸核糖转移酶,两者在寄生原虫中分别催化腺嘌呤核苷酸、次黄嘌呤核苷酸、鸟嘌呤核苷酸和黄嘌呤核苷酸合成,从而参与寄生原虫的多个生化代谢过程,不仅为寄生原虫核酸生物合成等提供前体物质,还为虫体提供通用能量载体。由于寄生原虫的嘌呤补救途径明显区别于宿主的从头合成途径,且嘌呤磷酸核糖转移酶是寄生原虫嘌呤补救途径的关键酶,因而近年来寄生原虫嘌呤磷酸核糖转移酶成为抗原虫药物候选靶标的研究热点,以寄生原虫嘌呤磷酸核糖转移酶为潜在靶标,特异性筛选、设计抑制剂,并开发抗寄生原虫药物取得重要进展。以利什曼原虫、锥虫、疟原虫和弓形虫的嘌呤磷酸核糖转移酶为重点,综述寄生原虫嘌呤磷酸核糖转移酶的基本特征、生物学功能、抑制剂筛选与应用的研究进展,以期为抗寄生原虫药物靶标研究与新型抑制剂筛选提供参考。 展开更多

关键词 寄生原虫 腺嘌呤磷酸核糖转移酶 次黄嘌呤-鸟嘌呤-黄嘌呤磷酸核糖转移酶 嘌呤核苷酸 药物靶标 抑制剂

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毛细管电泳法测定苷肽胶囊中3种核苷酸 被引量：5

15

作者 李芸 丁晓静 +2 位作者 杨媛媛 赵珊 王志 《理化检验（化学分册）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1279-1281,1285,共4页

提出了毛细管电泳法同时分离测定苷肽胶囊中3种核苷酸腺嘌呤-5′-单磷酸、胞嘧啶-5′-单磷酸和鸟嘌呤-5′-单磷酸含量的方法。以15 mmol.L-1硼砂+35 mmol.L-1碳酸钠+60 mmol.L-1羟丙基-β-环糊精混合溶液为电解质溶液,运行电压30 kV,于2... 提出了毛细管电泳法同时分离测定苷肽胶囊中3种核苷酸腺嘌呤-5′-单磷酸、胞嘧啶-5′-单磷酸和鸟嘌呤-5′-单磷酸含量的方法。以15 mmol.L-1硼砂+35 mmol.L-1碳酸钠+60 mmol.L-1羟丙基-β-环糊精混合溶液为电解质溶液,运行电压30 kV,于254 nm波长处进行紫外检测。3种核苷酸的线性范围依次为5.0～80.0,8.0～80.0,8.0～80.0 mg.L-1,检出限(3S/N)依次为2.0,3.0,3.0 mg.L-1。采用该方法对苷肽胶囊样品中3种核苷酸的含量分别进行了测定,所得加标回收率在92.1%～102.7%之间,相对标准偏差(n=5)均小于等于5.0%。 展开更多

关键词 毛细管电泳法 核苷酸 腺嘌呤-5′-单磷酸 胞嘧啶-5′-单磷酸 鸟嘌呤-5′-单磷酸

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甘草素通过调控miR-216b-5p对肺腺癌细胞增殖凋亡及化疗敏感性的作用研究 被引量：11

16

作者 陈钰龙 王华启 张莉蓉 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1559-1564,共6页

目的探讨甘草素通过调控微小核糖核酸-216b-5p(miR-216b-5p)对肺腺癌细胞增殖凋亡及化疗敏感性的作用。方法取人肺腺癌H1299细胞进行细胞培养,随机分为对照组及甘草素10、20、40、60、80 mg·L^(-1)组。检测药物半数抑制浓度(IC50)... 目的探讨甘草素通过调控微小核糖核酸-216b-5p(miR-216b-5p)对肺腺癌细胞增殖凋亡及化疗敏感性的作用。方法取人肺腺癌H1299细胞进行细胞培养,随机分为对照组及甘草素10、20、40、60、80 mg·L^(-1)组。检测药物半数抑制浓度(IC50)值、细胞增殖活性、细胞凋亡率及miR-216b-5p、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)mRNA和蛋白相对表达量。结果与对照组比较,甘草素各浓度组IC50值降低,细胞增殖活性、细胞凋亡率升高,miR-216b-5p mRNA相对表达量升高,Bcl-2 mRNA相对表达量及p-mTOR、Bcl-2蛋白相对表达量降低(P<0.05);随着甘草素浓度增加,IC50值逐渐下降,细胞增殖活性、细胞凋亡率逐渐上升,miR-216b-5p mRNA相对表达量逐渐上升,Bcl-2 mRNA相对表达量及p-mTOR、Bcl-2蛋白相对表达量逐渐下降(P<0.05)。结论甘草素可抑制肺腺癌细胞增殖,促进细胞凋亡,提升化疗敏感性,作用机制可能与上调miR-216b-5p表达、抑制mTOR信号通路有关。 展开更多

关键词 肺腺癌 细胞 增殖 凋亡 化疗敏感性 甘草素 微小核糖核苷酸-216b-5p

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双孢蘑菇中核苷酸的测定及酶解条件的研究 被引量：4

17

作者 王小红 张卫明 +2 位作者 钱骅 赵伯涛 黄晓德 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期171-174,共4页

建立了利用高效液相色谱法(HPLC)分离测定双孢蘑菇核酸提取液中的四种核苷酸(胞苷酸、尿苷酸、鸟苷酸、腺苷酸)的方法。采用紫外检测器,波长为260nm;色谱柱为EclipseXDB-C18,柱温为25℃,流动相为:超纯水:甲醇:冰乙酸:四丁基氢氧化铵(TBA... 建立了利用高效液相色谱法(HPLC)分离测定双孢蘑菇核酸提取液中的四种核苷酸(胞苷酸、尿苷酸、鸟苷酸、腺苷酸)的方法。采用紫外检测器,波长为260nm;色谱柱为EclipseXDB-C18,柱温为25℃,流动相为:超纯水:甲醇:冰乙酸:四丁基氢氧化铵(TBAOH,10%)=894·5:100:5:0·5;流速为1·0mL/min;四种核苷酸标准曲线相关系数r均达到0·999。利用5′-磷酸二酯酶酶解双孢蘑菇中提取制得的核酸制品,为获得酶解的最适工艺条件,通过单因素实验,在底物浓度为2mg/mL的条件下,对其酶解条件:时间、温度、pH和酶底比进行了初步研究,研究结果表明酶解的最适工艺条件:时间为3h、温度为40℃、pH为5·8、酶底比为1300U/g核酸,在该条件下核酸酶解率为68·1%。 展开更多

关键词 高效液相色谱 核苷酸 双孢蘑菇 5′-磷酸二酯酶

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酵母抽提物中呈味核苷酸含量偏低的原因探讨(Ⅱ) 啤酒酵母自溶过程核酸的降解规律研究 被引量：1

18

作者 陈洁 王璋 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第2期103-106,共4页

本论文通过详细测定酵母自溶过程中蛋白质、核酸以及各种核苷酸在产物中的变化量,研究pH、外加5’-磷酸二酯酶(麦芽根核酸酶)、外加蛋白酶等对酵母自溶的影响,从而探讨外加5’-磷酸二酯酶不能显著提高酵母自溶产物中呈味核苷酸含量的原... 本论文通过详细测定酵母自溶过程中蛋白质、核酸以及各种核苷酸在产物中的变化量,研究pH、外加5’-磷酸二酯酶(麦芽根核酸酶)、外加蛋白酶等对酵母自溶的影响,从而探讨外加5’-磷酸二酯酶不能显著提高酵母自溶产物中呈味核苷酸含量的原因。研究结果显示:在自溶过程直接添加麦芽根核酸酶只能略提高酵母抽提物中呈味核苷酸的含量,但提高程度不明显;在pH8自溶的产物中5’-核苷酸和3’-核苷酸的量均显著低于在pH5自溶的产物中的量。酵母在pH8～8.5条件下自溶时,外加蛋白酶可以显著提高酵母自溶物产物中可溶性固形物含量、可溶性蛋白质和核苷酸的含量,显著降低核酸含量,产物中的5'-核苷酸含量显著比3'-核苷酸含量高。上述结果说明了酵母在外加麦芽根核酸酶条件下自溶时,核酸未能迅速降解并生成大量的呈味核苷酸的原因之一是由于酵母细胞壁的存在阻碍了细胞器中核酸的溶出,致使外加的5'-磷酸二酯酶不能很好与核酸底物接触,从而不能有效提高呈味核苷酸的产量。 展开更多

关键词 酵母抽提物 自溶 呈味核苷酸含量 PH 5’-磷酸二酯酶

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烟酰胺腺嘌呤二核苷酸在昼夜节律紊乱中的研究进展 被引量：2

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作者 刘帅 彭良玉 +2 位作者 许继岩 夏天娇 顾小萍 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期178-182,共5页

昼夜节律紊乱在衰老、神经退行性病变、糖尿病和肿瘤的发生过程中起着重要的作用。烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD^(+))的表达及合成NAD^(+)相关的关键酶具有明显的昼夜节律,昼夜节律受到NAD^(+)的调控,NAD^(+)表达减少可导致昼夜节律明显紊... 昼夜节律紊乱在衰老、神经退行性病变、糖尿病和肿瘤的发生过程中起着重要的作用。烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD^(+))的表达及合成NAD^(+)相关的关键酶具有明显的昼夜节律,昼夜节律受到NAD^(+)的调控,NAD^(+)表达减少可导致昼夜节律明显紊乱。补充NAD^(+)的前体物质或者促进NAD^(+)生成在缓解昼夜节律紊乱的同时可以明显缓解衰老、神经退行性病变、糖尿病和肿瘤的发生。 展开更多

关键词 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶 昼夜节律

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miR-322-5p通过NOX4调控细胞凋亡抑制大鼠神经管畸形发生 被引量：2

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作者 黄琬淇 刘玉思 +1 位作者 顾卉 袁正伟 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期582-587,共6页

目的探讨miR-322-5p调控烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)的表达及改善细胞凋亡对大鼠神经管闭合的作用。方法采用全反式维甲酸(ATRA)诱导大鼠神经管畸形(NTDs)模型。通过实时定量PCR检测miR-322-5p在ARTA诱导的大鼠胚胎脊髓中的... 目的探讨miR-322-5p调控烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)的表达及改善细胞凋亡对大鼠神经管闭合的作用。方法采用全反式维甲酸(ATRA)诱导大鼠神经管畸形(NTDs)模型。通过实时定量PCR检测miR-322-5p在ARTA诱导的大鼠胚胎脊髓中的表达情况;通过Western blotting检测NOX4及凋亡蛋白的表达情况;采用免疫组织化学技术和组织免疫荧光技术观察NOX4在胚胎神经管中的定位和表达情况;通过对C17.2神经干细胞转染miRNA-空白对照(miR-NC)、mimic-322-5p及NOX4高表达质粒,明确NOX4和miR-322-5p之间的调控作用,采用实时定量PCR检测转染后miR-322-5p的表达,并通过Western blotting检测转染后细胞NOX4以及凋亡蛋白的表达情况。结果在ATRA诱导的大鼠NTDs模型中,NOX4表达上调,miR-322-5p表达下调。在C17.2神经干细胞中,转染miR-322-5p抑制了NOX4的表达,也抑制了凋亡蛋白的表达。结论miR-322-5p可抑制NOX4的表达,并抑制大鼠NTDs的发生。 展开更多

关键词 神经管缺陷 miR-322-5p 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4 细胞凋亡

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