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题名小单孢菌3',4'-双脱羟基酶基因功能的研究
被引量：3
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作者
张国华
洪文荣
饶以群
樊伟明
朱宝泉
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机构
福州大学生物科学与工程学院
浙江震元制药有限公司
上海医药工业研究院
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出处
《中国药科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第1期88-91,共4页
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基金
国家自然科学基金资助项目(No.31070093
No.30801449)
+1 种基金
国家"重大新药创制"科技重大专项资助项目(No.2009ZX09301-007)
福建省教育厅科研基金资助项目(No.2007F5070)~~
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文摘
根据文献查阅、同源比对及进化树分析,推测绛红色小单孢菌中gntI和伊纽小单孢菌sisI为3',4'-双脱羟基酶基因。通过克隆得到gntI和sisI,随后将其构建到pET30a表达载体,并在E.coli BL21实现异源表达。利用生物信息学对该蛋白亲水性图谱、空间结构及活性域进行分析、预测。基于同源建模得到三级结构,推测其二级结构以α-螺旋为主,肽段40～60,100～120处可能为该酶活性中心。此研究为该酶进一步功能研究和应用奠定了基础。
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关键词
小单孢菌
3'
4'-双脱羟基酶基因
生物信息学
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Keywords
Micromonospora
3′
4′-double dehydroxylase
bioinformatics
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分类号
Q753
[生物学—分子生物学]
Q784
[生物学—分子生物学]
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题名genP基因在依纽小单孢菌中表达的分析
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作者
万云凤
洪文荣
石贤爱
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机构
福州大学生物科学与工程学院
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出处
《石河子大学学报（自然科学版）》
CAS
2016年第5期-,共7页
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基金
国家自然科学基金项目(31070093)
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文摘
庆大霉素生物合成过程中的genP基因和西索米星生物合成过程中的sisI基因属同工异源酶基因,均能催化绛红糖胺3′,4′-双脱羟基反应。本研究借助组合生物合成,探索绛红小单孢菌中的genP基因能否在依纽小单孢菌中表达。首先构建genP基因替换sisI基因的同源重组质粒pKPI4,并经接合转移将其导入依纽小单孢菌TS388中,最后再通过影印筛选及PCR鉴定获得genP基因替换sisI基因的工程菌PTI886。将野生型菌株TS388、sisI基因缺失突变株TI1102(TS388△sisI)及工程菌PTI886在同等条件下进行发酵,提取其代谢产物并经薄层层析及质谱分析。结果表明,突变株TI1102不能合成西索米星,而工程菌PTI886仍能继续合成西索米星,且代谢产物组分与野生型菌株TS388相比无明显变化,说明genP基因能在依纽小单孢菌中表达。本研究揭示了同工异源酶基因异源表达的可行性,可为今后不同微生物异源基因组合的研究提供借鉴。
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关键词
组合生物合成
genP基因
sisⅠ基因
异源表达
3'
4'-双脱羟基
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Keywords
combinatorial biosynthesis
genP
sisⅠ
heterologous expression
3',4'-double dehydroxylation
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分类号
Q933
[生物学—微生物学]
Q786
[生物学—分子生物学]
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