嗜酸乳杆菌胞外蛋白调控MAPK和PI3K-AKT信号途径关键蛋白活化水平 被引量：3

1

作者 王泳 贾彦 +6 位作者 任效东 明珠 江岩 赵培 庞广昌 阎亚丽 陈庆森 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第3期155-163,共9页

探讨并揭示嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)CICC6005分泌的相关蛋白质促进肠道健康及分子机制具有重要研究价值。本实验在确定了L.acidophilus CICC6005分泌的胞外蛋白抑制HT-29结肠癌细胞增殖的基础上,进一步探讨67 ku和37 ku... 探讨并揭示嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)CICC6005分泌的相关蛋白质促进肠道健康及分子机制具有重要研究价值。本实验在确定了L.acidophilus CICC6005分泌的胞外蛋白抑制HT-29结肠癌细胞增殖的基础上,进一步探讨67 ku和37 ku的胞外蛋白通过何种途径发挥抑制结肠癌细胞增殖。研究以HT-29细胞作为靶细胞,用丝裂原激活的蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)和磷脂酰肌醇-3激酶-丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(phosphatidylinositol 3-kinase-protein kinase B,PI3K-AKT)信号通路为考察对象,以Western Blotting为手段,分析两个通路中关键的靶点蛋白p38、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)、胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)、磷酸化p38(phosphorylated p38,p-p38)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(phosphorylated c-Jun N-terminal kinase,p-JNK)、磷酸化的细胞外信号调节蛋白激酶(phosphorylated extracellular signal-regulated kinase,p-ERK)、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated AKT,p-AKT)、PI3K的表达水平,以探讨并阐述源于L.acidophilus CICC6005胞外蛋白调控结肠癌细胞增殖状况的分子机制。结果表明,不同质量浓度的67 ku和37 ku胞外蛋白分别作用HT-29细胞一定时间后,两种胞外蛋白均具有下调两个信号通路途径中p-ERK1/2、p-p38、p-AKT、PI3K蛋白的表达,且存在浓度依赖关系;但对p-JNK、ERK1/2、p38、JNK蛋白的表达没有影响。因此,源于L.acidophilus CICC6005分泌的37 ku和67 ku胞外蛋白表现出显著的抑制HT-29细胞增殖的功能,其机制可能与调控MAPK和PI3K-AKT两个信号通路中几个关键的靶点蛋白的活化水平相关。该研究结果提示,食用嗜酸乳杆菌其分泌的胞外蛋白质将达到维护肠道健康的目标。 展开更多

关键词 嗜酸乳杆菌CICC6005 胞外蛋白 HT-29结肠癌细胞 丝裂原活化蛋白激酶(MAPk) 磷脂酰肌醇-3激酶-丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(pi3k-AkT)

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PI3K/AKT/GSK-3β信号在脑缺血预处理中的作用及对海马细胞凋亡的影响 被引量：17

2

作者 张慧 姜咏梅 尹琳 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期408-412,428,共6页

目的研究脑缺血预处理(CIPC)中PI3K/AKT/GSK-3β信号通路调节变化及对海马细胞凋亡的影响。方法制作脑缺血、CIPC及LY294002干预模型。进行神经功能缺损评分;TTC染色计算脑梗死体积;TUNEL法检测海马细胞凋亡;Western blot检测p-PDK1、AK... 目的研究脑缺血预处理(CIPC)中PI3K/AKT/GSK-3β信号通路调节变化及对海马细胞凋亡的影响。方法制作脑缺血、CIPC及LY294002干预模型。进行神经功能缺损评分;TTC染色计算脑梗死体积;TUNEL法检测海马细胞凋亡;Western blot检测p-PDK1、AKT、p-AKT、GSK-3β、p-GSK-3β(ser9)、Mc-l1的蛋白表达,RT-PCR检测GSK-3β的转录。结果①与脑缺血组比较,CIPC组在神经功能缺损评分、脑梗死体积、细胞凋亡、GSK-3β蛋白表达及转录水平均降低(均P<0.05),但脑缺血组与LY294002组比较,上述各检测值差异均无统计学意义(均P>0.05);②与脑缺血组比较,CIPC组的p-PDK1、p-AKT、p-GSK-3β(ser9)、Mc-l1的蛋白表达均增高,LY294002组各蛋白表达较CIPC组均降低(均P<0.05),LY294002组与脑缺血组比较各蛋白表达差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论脑缺血预处理降低GSK-3β的转录和蛋白表达,增加p-PDK1、p-AKT、p-GSK-3β(ser9)、Mc-l1的表达,减少神经元凋亡。LY294002可抵消脑缺血预处理的保护作用。 展开更多

关键词 脑缺血预处理 磷脂酰肌醇激酶-3/丝苏氨酸蛋白激酶通路 糖原合成酶激酶-3Β 髓细胞淋巴瘤-1 3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶-1

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乳康饮对裸鼠乳腺癌组织PI3K/Akt信号通路相关因子表达的影响 被引量：11

3

作者 李湘奇 王莹 +2 位作者 魏昌然 刘晓菲 李静蔚 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2019年第7期1543-1547,共5页

目的:观察中药乳康饮对移植瘤小鼠乳腺癌PI3K/AKT信号通路相关因子表达的影响,探讨其抑制乳腺癌的作用机制。方法:60只BALB/c裸鼠乳腺原位种植人乳腺癌细胞株MDA-MB-231,建立乳腺癌移植瘤自发性转移模型,随机分成6组,分别为模型对照组,5... 目的:观察中药乳康饮对移植瘤小鼠乳腺癌PI3K/AKT信号通路相关因子表达的影响,探讨其抑制乳腺癌的作用机制。方法:60只BALB/c裸鼠乳腺原位种植人乳腺癌细胞株MDA-MB-231,建立乳腺癌移植瘤自发性转移模型,随机分成6组,分别为模型对照组,5-FU对照组、疏肝理气组、化痰散瘀组、益气健脾组、乳康饮组,每组10只。分别给予生理盐水、5-FU、乳康饮及各拆方(疏肝理气、化痰散瘀、益气健脾)药物灌胃,灌胃液体量均为0.4 mL/(d·只),均1次/d,连续6周后将裸鼠处死,检测裸鼠第2、3对乳腺原位肿瘤PI3K、Akt、PTEN、SHIP蛋白水平及mRNA的表达。结果:乳康饮及各拆方组药物对PI3K、Akt mRNA的表达均起到抑制作用,对PTEN、SHIP mRNA表达有促进作用,与模型对照组比较差异有统计学意义(均P<0.05或P<0.01),而益气健脾组和乳康饮全方效果更具优势;裸鼠乳腺癌组织PI3K、Akt、PTEN、SHIP蛋白水平的表达的检测结果,乳康饮组及各拆方组对PI3K、Akt蛋白的表达均有不同程度的抑制作用,对抑癌因子PTEN、SHIP蛋白的表达有促进作用,各拆方组之间也存在统计学差异,乳康饮的作用明显优于各拆方组(P<0.05或0.01)。结论:乳康饮可能通过抑制PI3K、Akt的表达,促进PTEN、SHIP的表达,调控PI3K/AKT信号通路,对乳腺癌的发生发展起到抑制作用。 展开更多

关键词 乳腺癌 乳康饮 磷脂酰肌醇3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶B信号通路 PTEN SHIP

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基于PI3K/Akt通路研究利拉鲁肽对2型糖尿病骨质疏松大鼠的作用 被引量：9

4

作者 张莹 周艳红 +4 位作者 李江雁 赵建林 吴苏豫 熊承云 孙超 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期985-989,共5页

目的基于磷脂酰肌醇-3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(phosphateidylinositol-3 kinase/serine-threonine kinase,PI3K/Akt)通路研究利拉鲁肽对2型糖尿病性骨质疏松(type 2 diabetic osteoporosis,T2DOP)大鼠的影响。方法高脂高糖、腹腔注射30m... 目的基于磷脂酰肌醇-3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(phosphateidylinositol-3 kinase/serine-threonine kinase,PI3K/Akt)通路研究利拉鲁肽对2型糖尿病性骨质疏松(type 2 diabetic osteoporosis,T2DOP)大鼠的影响。方法高脂高糖、腹腔注射30mg/kg链脲佐菌素(STZ)并摘除卵巢建立T2DOP大鼠模型,将大鼠随机分为模型组、利拉鲁肽组、利拉鲁肽+LY294002组;正常饲养大鼠作为正常组,每组10只。大鼠体重,空腹血糖,股骨组织形态,血清中骨保护素(OPG)、细胞核因子KB受体活化因子配基(RANKL)水平,骨密度,股骨组织中磷酸化-PI3K(p-PI3K)、PI3K、磷酸化-Akt(p-Akt)、Akt蛋白水平进行比较。结果模型组大鼠体重、FBG,血清中RANKL水平升高(P<0.05),血清中OPG水平、股骨组织骨密度,p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白水平降低(P<0.05);而利拉鲁肽组大鼠体重、FBG,血清中RANKL水平降低(P<0.05),血清中OPG水平、股骨组织骨密度,pPI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白水平升高(P<0.05);利拉鲁肽添加PI3K抑制剂LY294002后逆转利拉鲁肽症状。结论利拉鲁肽激活PI3K/Akt通路实现对T2DOP大鼠骨质疏松的保护。 展开更多

关键词 磷脂酰肌醇-3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶通路 利拉鲁肽 2型糖尿病性骨质疏松 骨保护素 骨密度

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SH2B1通过活化PI3K/Akt通路促进胶质瘤细胞增殖 被引量：2

5

作者 刘岩 韩风伟 +2 位作者 闫丽娜 张琳娜 王淮兴(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期834-838,共5页

目的:探讨SH2B1对人脑胶质瘤U87细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:体外培养U87细胞,将细胞分为空白组、NC-siRNA(转染不具有干扰作用的siRNA)、SH2B1-siRNA组(转染SH2B1特异性siRNA),转染48 h后,分别通过q RT-PCR及We... 目的:探讨SH2B1对人脑胶质瘤U87细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:体外培养U87细胞,将细胞分为空白组、NC-siRNA(转染不具有干扰作用的siRNA)、SH2B1-siRNA组(转染SH2B1特异性siRNA),转染48 h后,分别通过q RT-PCR及Western blot检测3组细胞中SH2B1的表达,CCK8法及平板克隆形成试验检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot法检测增殖相关蛋白Ki67、PCNA和凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2及PI3K/Akt相关蛋白表达。结果:SH2B1-siRNA显著降低SH2B1的表达(P<0.05);与空白组、NC-siRNA组相比,SH2B1 siRNA组U87细胞转染后48 h、72 h后OD值、克隆形成数显著降低(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.05);与空白组、NC-siRNA组相比,SH2B1-siRNA组U87细胞Ki67、PCNA、Bcl-2表达显著降低、PI3K和AKT磷酸化显著降低(P<0.05),Bax蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论:SH2B1可能通过调控PI3K/Akt信号转导途径促进U87细胞增殖,抑制U87细胞凋亡。 展开更多

关键词 胶质瘤 SH2B1 增殖 凋亡 3-磷酸肌醇激酶(pi3k)/蛋白质丝氨酸苏氨酸蛋白激酶通路

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艾灸对压疮大鼠皮肤损伤修复及PI3K/Akt信号通路的影响 被引量：26

6

作者 韩超 尹洪娜 +5 位作者 杨稀瑞 范苗苗 李惠航 王明振 韩其琛 孙忠人 《中国全科医学》 CAS 北大核心 2020年第21期2682-2688,共7页

背景近年来研究发现,艾灸能够促进压疮(PU)愈合,但其作用机制尚未明确。磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(Akt)信号通路通过参与细胞增殖、分化和凋亡等多种生物过程,在皮肤损伤的愈合过程中发挥重要的调节作用。目的观... 背景近年来研究发现,艾灸能够促进压疮(PU)愈合,但其作用机制尚未明确。磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(Akt)信号通路通过参与细胞增殖、分化和凋亡等多种生物过程,在皮肤损伤的愈合过程中发挥重要的调节作用。目的观察艾灸对PU大鼠创面愈合及PI3K/Akt信号通路的影响,探讨艾灸在皮肤损伤与修复过程中的作用机制。方法2018年3月—2019年2月选取SPF级成年雌性SD大鼠30只,20只大鼠参照缺血-再灌注原理进行PU造模,造模后按1∶1比例随机分为艾灸组和模型组,另外10只为空白组不予造模。模型组给予碘伏清洁创面,1次/d,10 d为1个疗程;艾灸组采用艾灸在创面局部治疗,15 min/次,1次/d,10 d为1个疗程。干预1、3、5、7、10 d观察比较创面愈合率、创面病理损伤情况、磷酸化Akts473、磷酸化Bads136、磷酸化Caspase-9s196蛋白表达水平。结果干预3、5、7、10 d艾灸组创面愈合率均高于模型组(P<0.05)。HE染色显示,与模型组相比,艾灸组炎性细胞浸润较少,可见较多新生肉芽组织及血管。干预1、3、5、7、10 d模型组与艾灸组磷酸化Akts473蛋白表达水平高于空白组(P<0.01);干预1、3、5、7、10 d艾灸组磷酸化Akts473蛋白表达水平高于模型组(P<0.05)。干预1、3、5、7、10 d模型组与艾灸组磷酸化Bads136蛋白表达水平高于空白组(P<0.01);干预1、3、5、7、10 d艾灸组磷酸化Bads136蛋白表达水平高于模型组(P<0.01)。干预1、3、5、7、10 d模型组与艾灸组磷酸化Caspase-9s196蛋白表达水平高于空白组(P<0.01);干预1、3、5、7、10 d艾灸组磷酸化Caspase-9s196蛋白表达水平高于模型组(P<0.01)。结论艾灸能够促进PU大鼠创面皮肤愈合,其作用机制可能与激活PI3K/Akt信号通路,发挥抗凋亡作用有关。 展开更多

关键词 压力性溃疡 艾条灸 伤口愈合 细胞凋亡 磷酸肌醇3-激酶 蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶

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基于PI3K/AKT信号通路探讨四逆汤治疗术后认知障碍的机制 被引量：10

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作者 李义春 王惠 +2 位作者 王明龙 姚卫东 代婀娜 《世界中医药》 CAS 2021年第8期1274-1278,共5页

目的:探讨四逆汤作用于PI3K/AKT信号通路对术后认知障碍(POCD)的影响。方法:选取2018年2月至2019年6月山东中医药大学第二附属医院收治的手术麻醉患者92例作为研究对象,按照随机数字表法随机分为对照组和观察组,每组46例。对照组给予常... 目的:探讨四逆汤作用于PI3K/AKT信号通路对术后认知障碍(POCD)的影响。方法:选取2018年2月至2019年6月山东中医药大学第二附属医院收治的手术麻醉患者92例作为研究对象,按照随机数字表法随机分为对照组和观察组,每组46例。对照组给予常规围手术期治疗,观察组加用四逆汤口服。观察不同时期炎症介质、简易精神状态量表、PI3K/AKT信号通路、生命体征变化。结果:2组插入喉罩后即刻(T1)、手术后6 h(T2)、24 h(T3)、48 h(T4)较T0在PI3K、AKT均显著降低,Bcl、Bax较T0均显著升高(P<0.05),且观察组优于对照组(P<0.05)。对照组术后24 h、术后5 d白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)较治疗前均显著升高(P<0.05),观察组术后24 h IL-6、CRP、TNF-α较手术前均显著升高(P<0.05),术后5 d与术后24 h比较均显著下降(P<0.05),与手术前比较差异无统计学意义(P>0.05),术后24 h、术后5 d观察组优于对照组(P<0.05)。对照组手术后5 d计算力及注意力、延迟回忆、阅读及语言理解、总分较手术前均显著下降(P<0.05),而观察组手术后5 d较手术前差异无统计学意义(P>0.05)。观察组手术后5 d计算力及注意力、延迟回忆、阅读及语言理解、总分显著优于对照组(P<0.05)。2组T1在收缩压、舒张压上较T0、T2均显著下降(P<0.05),但2组T0、T1、T2组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:四逆汤可通过影响PI3K/AKT信号通路,抑制炎症反应,从而改善POCD,且安全性高。 展开更多

关键词 四逆汤 磷脂酰肌醇3激酶 丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶 信号通路 术后认知障碍 炎症介质 机制 安全性

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补阳还五汤对气虚血瘀型高血压脑出血恢复期患者血清PI3K/AKT信号通路的影响 被引量：27

8

作者 冉希 张天阳 +1 位作者 秦红霞 李长君 《世界中医药》 CAS 2019年第8期2053-2057,共5页

目的:探讨补阳还五汤对气虚血瘀型高血压脑出血恢复期患者血清磷脂酰肌醇-3激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(PI3K/AKT)信号通路的影响,并探讨其作用机制。方法:选取2017年1月至2018年1月三亚市中医院收治气虚血瘀型高血压脑出血恢复期患者12... 目的:探讨补阳还五汤对气虚血瘀型高血压脑出血恢复期患者血清磷脂酰肌醇-3激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(PI3K/AKT)信号通路的影响,并探讨其作用机制。方法:选取2017年1月至2018年1月三亚市中医院收治气虚血瘀型高血压脑出血恢复期患者128例作为研究对象,按照就诊顺序编号随机分为对照组和观察组,每组64例。对照组常规西药治疗,观察组加用补阳还五汤治疗,均治疗4周。观察2组治疗前、治疗后C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、同型半胱氨酸(Hcy)水平变化并比较;观察2组治疗前、治疗后在全血黏度高切、全血黏度低切、血浆黏度、血细胞比容变化并比较;观察治疗前、治疗后在PI3K、AKT、B细胞淋巴瘤基因-2(bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(bax)水平变化并比较;观察2组治疗前、治疗后在半身不遂、口眼歪斜、偏身麻木,气短乏力、心悸汗出评分变化并比较;治疗后进行安全性评价。结果:治疗前2组全血黏度高切、全血黏度低切、血浆黏度、血细胞比容比较,差异无统计学意义(P>0.05),治疗后2组以上指标较治疗前均显著下降,差异有统计学意义(P<0.05),治疗后观察组全血黏度高切、全血黏度低切、血浆黏度、血细胞比容显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前2组CRP、TNF-α、IL-6、Hcy比较,差异无统计学意义(P>0.05),治疗后2组以上指标较治疗前均显著下降,差异有统计学意义(P<0.05),治疗后观察组CRP、TNF-α、IL-6、Hcy均显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前2组PI3K、AKT、bcl-2、bax比较,差异无统计学意义(P>0.05),治疗后观察组PI3K、AKT、bcl-2、bax较治疗前均显著下降,差异有统计学意义(P<0.05),对照组治疗前后比较,差异无统计学意义(P>0.05),治疗后观察组以上指标均显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前2组半身不遂、口眼歪斜、偏身麻木,气短乏力、心悸汗出比较,差异无统计学意义(P>0.05),治疗后2组以上症状评分较治疗前显著下降,差异有统计学意义(P<0.05),治疗后观察组以上各指标均显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:补阳还五汤能下调PI3K/AKT信号通路,抑制炎性反应,从而抑制气虚血瘀型高血压脑出血恢复期患者神经凋亡,改善血液循环,提高疗效。 展开更多

关键词 补阳还五汤 气虚血瘀型 高血压脑出血恢复期 磷脂酰肌醇-3激酶 丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶 信号通路 炎性反应递质 血液流变学 疗效

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基于PI3K/Akt信号轴探究三石生新膏对大鼠压疮面愈合的影响 被引量：10

9

作者 高翔 洪利凯 +1 位作者 沈薇 龚竹韵 《中国药理学通报》 CSCD 北大核心 2021年第9期1299-1304,共6页

目的探究三石生新膏对大鼠压疮面愈合的影响及其作用机制。方法实验分为假手术组(Sham)、模型组(Model)、贝复新组(bFGF)、三石生新膏组(TM)、三石生新膏+PI3K阻断剂组(TM+LY294002)。利用局部组织缺血/再灌注损伤法制备压疮大鼠模型。... 目的探究三石生新膏对大鼠压疮面愈合的影响及其作用机制。方法实验分为假手术组(Sham)、模型组(Model)、贝复新组(bFGF)、三石生新膏组(TM)、三石生新膏+PI3K阻断剂组(TM+LY294002)。利用局部组织缺血/再灌注损伤法制备压疮大鼠模型。分别于d 3、7和14观察各组大鼠创面愈合率。于换药处理d 3进行创面病理学改变、血浆VEGF含量,创面皮肤组织VEGF以及PI3K/Akt信号相关蛋白表达检测。结果与Sham组相比,Model组创面愈合率降低(P<0.01),创面损伤严重。VEGF含量降低(P<0.01),VEGF、p-PI3K、p-Akt表达降低(P<0.01)。与Model组相比,TM组创面愈合率、VEGF含量增加(P<0.05或P<0.01),创面损伤明显改善,VEGF、p-PI3K、p-Akt表达升高(P<0.05或P<0.01)。与TM组相比,TM+LY294002组创面愈合率以及VEGF含量降低(P<0.01)、创面损伤加重,VEGF、p-PI3K、p-Akt表达降低(P<0.05或P<0.01)。结论三石生新膏可通过PI3K/Akt信号上调VEGF表达,促进大鼠压疮面愈合。 展开更多

关键词 压疮 三石生新膏 血管新生 磷酸肌醇3-激酶 蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶

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HBV感染免疫耐受期产妇与正常产妇脐带血浆细胞样树突状细胞中PI3K、mTOR、p70S6K、IFNα的表达情况分析

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作者 杨雯珺 霍燚 彭建平 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2020年第8期1727-1731,共5页

目的比较HBV感染免疫耐受期产妇脐带血与正常产妇脐带血浆细胞样树突状细胞(pDC)中PI3K、mTOR、p70S6K、IFNα表达的差异。方法选取湖南中医药大学第一附属医院产科住院部2017年10月-2020年1月HBV感染免疫耐受期产妇20例(乙型肝炎组)及... 目的比较HBV感染免疫耐受期产妇脐带血与正常产妇脐带血浆细胞样树突状细胞(pDC)中PI3K、mTOR、p70S6K、IFNα表达的差异。方法选取湖南中医药大学第一附属医院产科住院部2017年10月-2020年1月HBV感染免疫耐受期产妇20例(乙型肝炎组)及正常产妇10例(正常组)。分离培养脐带血pDC,在培养的第7天加入CpG-A,24 h后分别收集细胞及上清液,real-time PCR检测pDC PI3K、mTOR、p70S6K mRNA的表达,Western Blot技术检测pDC PI3K、mTOR、p70S6K蛋白表达,ELISA法检测pDC培养上清IFNα水平。计量资料采用两独立样本t检验。结果乙型肝炎组HBV感染免疫耐受期产妇脐带血pDC PI3K、mTOR、p70S6K mRNA表达水平显著低于正常产妇组(t值分别为-81.04、-63.07、-34.55,P值均<0.001);乙型肝炎组HBV感染免疫耐受期产妇脐带血pDC PI3K、mTOR、p70S6K蛋白表达水平亦显著低于正常产妇组(t值分别为-8.13、-7.75、-6.71,P值均<0.001);乙型肝炎组HBV感染免疫耐受期产妇脐带血pDC培养上清IFNα表达水平显著低于正常产妇组(t=-15.88,P<0.05)。结论HBV感染免疫耐受期产妇脐带血pDC的PI3K、mTOR、p70S6K mRNA和蛋白表达水平及IFNα水平减少,pDC功能受到抑制。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒 树突细胞 磷酸肌醇3-激酶 TOR丝氨酸-苏氨酸激酶 核糖体蛋白质S6激酶类 70-kDa

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黄芩苷通过下调miR-221缓解脂多糖诱导的心肌细胞损伤及其机制研究

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作者 靳宜静 李堪董 +1 位作者 詹智晖 王勇 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第7期1688-1694,共7页

目的:探究微小RNA-221(miR-221)对脂多糖(LPS)诱导的大鼠心肌细胞炎症和纤维化的影响及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/丝苏氨酸蛋白激酶(AKT)信号通路的调控作用。方法:将体外培养的大鼠心肌H9C2细胞分为对照组(不做干预)、LPS组(10µg/ml... 目的:探究微小RNA-221(miR-221)对脂多糖(LPS)诱导的大鼠心肌细胞炎症和纤维化的影响及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/丝苏氨酸蛋白激酶(AKT)信号通路的调控作用。方法:将体外培养的大鼠心肌H9C2细胞分为对照组(不做干预)、LPS组(10µg/ml LPS)、实验组(10µg/ml LPS+10、20、40、80µmol/L黄芩苷)、mimics NC组(10µg/ml LPS+转染mimics NC)、miR-221 mimics组(10µg/ml LPS+转染miR-221 mimics)、inhibitor NC组(10µg/ml LPS+转染inhibitor NC)、miR-221 inhibi‐tor组(10µg/ml LPS+转染miR-221 inhibitor)、10+miR-221 mimics组(10µg/ml LPS+10µmol/L黄芩苷+转染miR-221 mimics)、10+miR-221 inhibitor组(10µg/ml LPS+10µmol/L黄芩苷+转染miR-221 inhibitor),干预24 h。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、ELISA、CCK-8、5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(EdU)和Transwell小室法测定miR-221表达水平、炎症因子水平、细胞活力、细胞增殖与迁移能力,Western blot测定上皮-间质转化(EMT)相关蛋白[E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、纤连蛋白(FN)]和PI3K/AKT通路相关蛋白水平。结果:实验组中的10µmol/L黄芩苷组中黄芩苷提高了LPS诱导的细胞活力(P<0.05),因此选择LPS+10组进行后续实验。miR-221 mimics组中miR-221水平高于mimics NC组(P<0.05),在miR-221 inhibitor组中miR-221水平低于inhibitor NC组(P<0.05),证明miR-221 mimics组和miR-221 inhibitor组转染成功。与对照组比较,LPS组细胞增殖率、E-cadherin蛋白表达水平显著下降(P<0.05),miR-221表达水平、细胞迁移数、IL-6和TNF-α水平及p-PI3K、p-AKT、N-cadherin、FN和Vimentin蛋白表达水平显著升高(P<0.05);LPS+10组较LPS组显著扭转了上述指标的变化(P<0.05);10+miR-221 mimics组较LPS+10组miR-221 mimics削弱了黄芩苷在LPS诱导细胞中的上述作用(P<0.05),而10+miR-221 inhibitor组中的miR-221 inhibitor增强了黄芩苷在LPS诱导细胞中的上述作用(P<0.05)。结论:黄芩苷通过下调miR-221表达抑制心肌细胞H9C2的迁移、炎症并促进其增殖,其作用机制可能与抑制PI3K/AKT信号转导相关。 展开更多

关键词 微小RNA-221 心力衰竭 磷脂酰肌醇3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶信号通路 炎症因子 纤维化

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盐酸小檗碱对宫颈癌HeLa细胞外泌体的影响及其机制 被引量：7

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作者 王景 葛静 +3 位作者 王旭 房桂英 代丽丽 刘晶 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期779-785,I0005,共8页

目的:观察盐酸小檗碱对宫颈癌HeLa细胞释放外泌体的干预作用,探讨其对癌细胞增殖和转移能力的影响。方法:将HeLa细胞分为对照组和低、中、高剂量盐酸小檗碱组,分别采用0、10、20和40 mg·L-1盐酸小檗碱干预HeLa细胞24 h,高速离心提... 目的:观察盐酸小檗碱对宫颈癌HeLa细胞释放外泌体的干预作用,探讨其对癌细胞增殖和转移能力的影响。方法:将HeLa细胞分为对照组和低、中、高剂量盐酸小檗碱组,分别采用0、10、20和40 mg·L-1盐酸小檗碱干预HeLa细胞24 h,高速离心提取外泌体,Western blotting法检测外泌体标志物CD81和CD63及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(Akt)信号通路相关蛋白表达水平,MTT比色法检测细胞体外生长抑制率,划痕实验检测细胞迁移率,Transwell小室实验检测穿膜细胞数。结果:与对照组比较,低、中和高剂量盐酸小檗碱组细胞外泌体中外泌体标志物CD81和CD63蛋白表达水平明显降低(P<0.05),细胞生长抑制率明显升高(P<0.05),细胞迁移率和穿膜细胞数明显降低(P<0.05),细胞中PI3K、Akt和磷酸化Akt(p-Akt)蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。与低剂量盐酸小檗碱组比较,中和高剂量盐酸小檗碱组细胞外泌体中CD81和CD63蛋白表达水平明显降低(P<0.05),细胞生长抑制率明显升高(P<0.05),细胞迁移率和穿膜细胞数明显降低(P<0.05),细胞中PI3K、Akt和p-Akt蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。与中剂量盐酸小檗碱组比较,高剂量盐酸小檗碱组细胞外泌体中CD81和CD63蛋白表达水平明显降低(P<0.05),细胞生长抑制率明显升高(P<0.05),细胞迁移率和穿膜细胞数明显降低(P<0.05),细胞中PI3K、Akt和p-Akt蛋白表达水平明显降低(P<0.05),具有浓度依赖性。结论:盐酸小檗碱能够抑制宫颈癌细胞外泌体分泌和癌细胞增殖,降低癌细胞的侵袭和转移能力,其作用机制可能与下调PI3K/Akt信号通路相关蛋白表达有关。 展开更多

关键词 盐酸小檗碱 外泌体 宫颈肿瘤 磷脂酰肌醇3-激酶 蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶 信号通路

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鞘内注射LY294002缓解大鼠骨癌痛 被引量：3

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作者 金迪 杨建平 +1 位作者 胡计嬅 王丽娜 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期118-121,共4页

目的：观察鞘内注射（ intrathecal injection,i. t.）磷脂酰肌醇3-激酶（ PI3K）抑制剂LY294002对骨癌痛大鼠疼痛行为学、脊髓背角磷酸化Akt （ p-Akt ）表达的影响。方法♀SD大鼠40只,体质量180～200 g,随机分为5组（n=8）：假手术组... 目的：观察鞘内注射（ intrathecal injection,i. t.）磷脂酰肌醇3-激酶（ PI3K）抑制剂LY294002对骨癌痛大鼠疼痛行为学、脊髓背角磷酸化Akt （ p-Akt ）表达的影响。方法♀SD大鼠40只,体质量180～200 g,随机分为5组（n=8）：假手术组（Ⅰ组）、假手术＋LY294002组（Ⅱ组）、骨癌痛组（Ⅲ组）、骨癌痛＋二甲基亚砜（ DMSO ）组（ IV 组）、骨癌痛＋LY294002（V 组）,于大鼠左侧胫骨干骺端骨髓腔内注射Walker256乳腺癌细胞构建胫骨癌痛模型。术后d 7～9鞘内连续注射浓度为2．5 g·L＾-1的LY29400210μL 或10μL 的5%DMSO。观测术前及术后d 7给药后每小时机械痛阈（至8 h）。术后d 9处死大鼠,取各组大鼠的L4～6脊髓组织进行免疫组化染色,检测脊髓背角PI3K 活化标志p-Akt 的表达。结果骨癌痛组大鼠（Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组）机械痛阈（MWT）明显低于假手术组（Ⅰ组）（P 〈0．01）,V 组在给药后2～4h 痛阈明显升高（P 〈0．05）,3 h 达到峰值（P 〈0．01）。与Ⅰ组比较,Ⅲ、Ⅳ组脊髓背角p-Akt 阳性细胞数明显增加,p-Akt 表达增多（ P 〈0．01）。与Ⅲ、Ⅳ组比较,Ⅴ组鞘内注射 LY294002后能明显降低脊髓背角p-Akt 的表达（P 〈0．05）。结论 PI3K/ Akt 通路可能参与大鼠骨癌痛的发生。 展开更多

关键词 骨肿瘤 疼痛 1-磷脂酰肌醇3-激酶 蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶 小胶质细胞 脊髓 信号通路

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转录组测序揭示不同生长速度番鸭胸肌组织的基因表达差异 被引量：1

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作者 张思雨 朱炜健 +4 位作者 季从亮 郭利金 郑茗 徐海平 聂庆华 《广东农业科学》 CAS 2020年第10期132-139,共8页

【目的】利用转录组测序技术分析不同生长速度番鸭的基因表达差异,挖掘影响番鸭生长性能的基因与信号通路,为阐明生长性能差异的遗传机制提供理论基础。【方法】选取不同生长速度两尾样番鸭的胸肌组织进行转录组测序,采用无参考基因组... 【目的】利用转录组测序技术分析不同生长速度番鸭的基因表达差异,挖掘影响番鸭生长性能的基因与信号通路,为阐明生长性能差异的遗传机制提供理论基础。【方法】选取不同生长速度两尾样番鸭的胸肌组织进行转录组测序,采用无参考基因组的分析手段对测序结果进行分析,获得差异表达基因(Differentially expressed genes,DEGs)。利用Blast2 GO软件对DEGs进行功能富集分析,利用KAAS网站进行DEGs的通路富集分析。【结果】转录组测序分析结果显示,快速生长型番鸭与缓慢生长型番鸭相比共有186个显著DEGs,其中49个表达量上调,137个表达量下调。这些DEGs主要富集在磷脂酰肌醇三激酶-丝氨酸/苏氨酸激酶(PI3K-AKT)信号通路、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路和腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)信号通路。【结论】PI3K-AKT、MAPK、AMPK这3条信号通路是控制番鸭机体生长发育的重要调节信号通路。 展开更多

关键词 番鸭 转录组 生长性状 磷脂酰肌醇三激酶-丝氨酸/苏氨酸激酶(pi3k-AkT) 丝裂原活化蛋白激酶(MAPk) 腺苷酸激活蛋白激酶(AMPk)

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甲状旁腺激素对大鼠脊髓损伤后骨质疏松的作用和机制 被引量：5

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作者 肖振平 龙慧 +2 位作者 邹聪 蒋李平 何云武 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期98-104,共7页

目的探究甲状旁腺激素(parathyroid hormone, PTH)对脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)后大鼠骨质疏松的影响及其作用机制。方法 SD大鼠随机性分为假手术组(Sham)、SCI模型组(SCI)、SCI+甲状旁腺激素组(SCI+PTH)、SCI+PTH+转染miR-146... 目的探究甲状旁腺激素(parathyroid hormone, PTH)对脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)后大鼠骨质疏松的影响及其作用机制。方法 SD大鼠随机性分为假手术组(Sham)、SCI模型组(SCI)、SCI+甲状旁腺激素组(SCI+PTH)、SCI+PTH+转染miR-146a无关片段组(SCI+PTH+NC)以及SCI+PTH+转染miR-146抑制剂组(SCI+PTH+miR-146a inhibitor组)。分别每3 d一次尾静脉注射给予大鼠60μg·kg^(-1)PTH(SCI+PTH组)、60μg·kg^(-1)PTH和20 pm miR-146a NC(SCI+PTH+NC组)或60μg·kg^(-1)PTH和20 pm miR-146a inhibitor(SCI+PTH+miR-146a inhibitor组),连续8周。Sham组和SCI组大鼠同法给予等量的生理盐水。BBB评分法记录术后大鼠行为运动评分;试剂盒检测大鼠血清血钙(Ca)和碱性磷酸酶(ALP)含量;骨密度扫描仪测定股骨和胫骨的骨密度;HE染色观察大鼠脊髓形态变化;qRT-PCR检测miR-146a表达;Western blot检测p-PI3K、p-Akt蛋白表达。结果与Sham组相比,SCI组大鼠BBB评分降低(P<0.05或P<0.01)、血清Ca、股骨和胫骨骨密度含量以及miR-146a、p-PI3K、p-Akt表达均降低,ALP升高(P<0.01)。与SCI组相比,SCI+PTH组大鼠BBB评分升高(P<0.05或P<0.01)、血清Ca、股骨和胫骨骨密度含量以及miR-146 a、p-PI3K、p-Akt蛋白表达均增加,ALP降低(P<0.01)。与SCI+PTH组相比,SCI+PTH+miR-146a inhibitor组大鼠上述指标均显著被抑制。结论 PTH对SCI骨质疏松症具有一定的治疗作用,其机制可能通过调控miR-146a/PI3K/Akt信号实现。 展开更多

关键词 脊髓损伤 骨质疏松 甲状旁腺激素 MIR-146A 磷酸肌醇3-激酶 蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶

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