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GenX通过System Xc^(-)-Gpx4-Fsp1铁死亡轴诱导耳蜗毛细胞损伤
1
作者
梁正薇
洪慧慧
袁伟
《陆军军医大学学报》
2025年第21期2652-2662,共11页
目的探讨铁死亡在2,3,3,3-四氟-2-(七氟丙氧基)丙酸铵[ammonium 2,3,3,3-tetrafluoro-2-(heptafluoropropoxy)-propanoate,GenX]暴露诱导耳蜗毛细胞损伤中的作用与机制。方法体外培养HEI-OC1细胞,分为对照组、GenX组、铁死亡抑制剂(ferr...
目的探讨铁死亡在2,3,3,3-四氟-2-(七氟丙氧基)丙酸铵[ammonium 2,3,3,3-tetrafluoro-2-(heptafluoropropoxy)-propanoate,GenX]暴露诱导耳蜗毛细胞损伤中的作用与机制。方法体外培养HEI-OC1细胞,分为对照组、GenX组、铁死亡抑制剂(ferrostatin-1,Fer-1)组、GenX+Fer-1组,CCK-8检测GenX对耳蜗毛细胞的毒性作用,CCK-8检测GenX+Fer-1共处理后观察有无铁死亡的发生,Western blot和qRT-PCR检测铁死亡标志物、耳蜗分化功能指标、耳血迷路屏障标志物和听力相关铁死亡通路蛋白和基因的表达,使用FerroOrange、Bodipy(C11)、线粒体膜电位荧光探针(mitochondrial membrane potential assay kit,JC-1)和ATP探针分别检测Fe^(2+)蓄积、脂质过氧化水平、线粒体膜损伤和ATP情况。结果200μmol/L GenX暴露12 h后显著降低HEI-OC1细胞活力(P<0.01)。GenX暴露12 h后引起磷脂氢过氧化物谷胱甘肽过氧化物酶(phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase,Gpx4)、溶质载体家族7成员11和铁死亡抑制蛋白1(ferroptosis suppressor protein 1,Fsp1)蛋白表达下调(P<0.05),酰基辅酶A合成酶长链家族成员4蛋白表达上调(P<0.01),耳蜗毛细胞分化功能基因和耳血迷路屏障基因表达降低(P<0.05),同时伴随Fe^(2+)蓄积、脂质过氧化水平升高和线粒体膜损伤及降低ATP生成(P<0.001)。GenX+Fer-1组可显著恢复细胞活力(P<0.05),逆转铁死亡蛋白的表达(P<0.05),并改善部分耳蜗分化功能基因和耳血迷路屏障基因的表达(P<0.05)。同时GenX+Fer-1组可减少Fe^(2+)蓄积、降低脂质过氧化水平、抑制线粒体膜损伤和升高ATP水平(P<0.001)。结论GenX通过诱导铁代谢紊乱、脂质过氧化蓄积,并依赖System Xc^(-)-Gpx4-Fsp1铁死亡轴途径损伤耳蜗毛细胞的分化和屏障功能。
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关键词
铁死亡
2
3
3
3
-
四氟
-
2
-
(
七
氟
丙
氧基
)
丙酸
铵
磷脂氢过氧化物谷胱甘肽过氧化物酶
铁死亡抑制蛋白1
耳蜗毛细胞
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题名
GenX通过System Xc^(-)-Gpx4-Fsp1铁死亡轴诱导耳蜗毛细胞损伤
1
作者
梁正薇
洪慧慧
袁伟
机构
西南医科大学附属医院耳鼻咽喉头颈外科
出处
《陆军军医大学学报》
2025年第21期2652-2662,共11页
基金
国家自然基金面上项目(81873702)
国家耳鼻咽喉疾病临床医学研究中心开放课题(2024KF008)
+1 种基金
重庆市科技局重点项目(CSTB2023TIAD-KPX0059)
重庆市卫健委重大课题(2022DBXM006)。
文摘
目的探讨铁死亡在2,3,3,3-四氟-2-(七氟丙氧基)丙酸铵[ammonium 2,3,3,3-tetrafluoro-2-(heptafluoropropoxy)-propanoate,GenX]暴露诱导耳蜗毛细胞损伤中的作用与机制。方法体外培养HEI-OC1细胞,分为对照组、GenX组、铁死亡抑制剂(ferrostatin-1,Fer-1)组、GenX+Fer-1组,CCK-8检测GenX对耳蜗毛细胞的毒性作用,CCK-8检测GenX+Fer-1共处理后观察有无铁死亡的发生,Western blot和qRT-PCR检测铁死亡标志物、耳蜗分化功能指标、耳血迷路屏障标志物和听力相关铁死亡通路蛋白和基因的表达,使用FerroOrange、Bodipy(C11)、线粒体膜电位荧光探针(mitochondrial membrane potential assay kit,JC-1)和ATP探针分别检测Fe^(2+)蓄积、脂质过氧化水平、线粒体膜损伤和ATP情况。结果200μmol/L GenX暴露12 h后显著降低HEI-OC1细胞活力(P<0.01)。GenX暴露12 h后引起磷脂氢过氧化物谷胱甘肽过氧化物酶(phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase,Gpx4)、溶质载体家族7成员11和铁死亡抑制蛋白1(ferroptosis suppressor protein 1,Fsp1)蛋白表达下调(P<0.05),酰基辅酶A合成酶长链家族成员4蛋白表达上调(P<0.01),耳蜗毛细胞分化功能基因和耳血迷路屏障基因表达降低(P<0.05),同时伴随Fe^(2+)蓄积、脂质过氧化水平升高和线粒体膜损伤及降低ATP生成(P<0.001)。GenX+Fer-1组可显著恢复细胞活力(P<0.05),逆转铁死亡蛋白的表达(P<0.05),并改善部分耳蜗分化功能基因和耳血迷路屏障基因的表达(P<0.05)。同时GenX+Fer-1组可减少Fe^(2+)蓄积、降低脂质过氧化水平、抑制线粒体膜损伤和升高ATP水平(P<0.001)。结论GenX通过诱导铁代谢紊乱、脂质过氧化蓄积,并依赖System Xc^(-)-Gpx4-Fsp1铁死亡轴途径损伤耳蜗毛细胞的分化和屏障功能。
关键词
铁死亡
2
3
3
3
-
四氟
-
2
-
(
七
氟
丙
氧基
)
丙酸
铵
磷脂氢过氧化物谷胱甘肽过氧化物酶
铁死亡抑制蛋白1
耳蜗毛细胞
Keywords
ferroptosis
ammonium
2
,
3
,
3
,
3
-
tetrafluoro
-
2
-
(heptafluoropropoxy)
-
propanoate
phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase
ferroptosis suppressor protein 1
cochlear hair cells
分类号
R334.16 [医药卫生]
R363.21 [医药卫生—人体生理学]
R994.6 [医药卫生—基础医学]
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被引量
操作
1
GenX通过System Xc^(-)-Gpx4-Fsp1铁死亡轴诱导耳蜗毛细胞损伤
梁正薇
洪慧慧
袁伟
《陆军军医大学学报》
2025
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