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烟草品种Xanthi NN碱性β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆与生物信息学分析被引量：8: 1; 作者王转梅陈崇顺 +4 位作者王轶曹伟杰邹爱兰马文晔张娟《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2009年第1期28-30,31,共4页; 烟草碱性β-1,3-葡聚糖酶具有较强的抗真菌病害等作用。本研究根据烟草Samsun与抗真菌作用有关的碱性β-1,3-葡聚糖酶基因序列设计引物,以烟草(Nicotiana tabacum)品种Xanthi NN基因组DNA为模板,进行PCR扩增,后将扩增产物与pUC57-T载体... 展开更多; 关键词烟草基因组碱性β—1 3-葡聚糖酶基因克隆生物信息学; 在线阅读下载PDF 职称材料

花生β-1,3-葡聚糖酶基因启动子的克隆及功能分析被引量：10: 2; 作者王合春陈新利 +3 位作者隋炯明毕英娜王晶珊乔利仙《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期864-870,共7页; 植物β-1,3-葡聚糖酶属于一种重要的植物病程相关蛋白(PR蛋白),容易受到激发子的诱导而积累。用1.5 mmol/L水杨酸(SA)对花生品种花育20号幼苗进行诱导处理0.5、12、24、36、48和72 h后,提取RNA进行荧光定量检测β-1,3-葡聚糖酶基因(Ah-G... 展开更多; 关键词花生 β-1 3-葡聚糖酶基因(Ah-Glu) 诱导型启动子染色体步移表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

葡萄β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆、序列分析及表达被引量：3: 3; 作者王西成吴伟民 +4 位作者巫建华赵密珍王壮伟钱亚明解振强《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第4期899-905,共7页; 为验证葡萄β-1,3-葡聚糖酶基因在葡萄抗病防御机制中的作用,本研究以金星无核葡萄叶片为试验材料,采用RT-PCR技术克隆得到1个长度为1 244 bp的葡萄β-1,3-葡聚糖酶基因。采用生物信息学方法对其开放读码框和理化性质进行分析,结果显示... 展开更多; 关键词葡萄霜霉病 β-1 3-葡聚糖酶基因基因克隆基因表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

产酶溶杆菌OH11菌株β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆与表达被引量：3: 4; 作者朱慧王云霞 +1 位作者胡白石刘凤权《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2008年第2期136-141,共6页; 利用PCR方法从OH11菌株中克隆到β-1,3-葡聚糖酶基因,通过同源性比较发现其推测产物与产酶溶杆菌C3菌株和N4-7菌株的β-1,3-葡聚糖酶有90%以上的同源性。该基因经NdeⅠ、XhoⅡ或HindⅢ酶切后连接到含T7启动子的高表达载体pET21a(+)和载... 展开更多; 关键词产酶溶杆菌OH11菌株 β-1 3-葡聚糖酶基因克隆表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

小麦根腐离蠕孢菌诱导小麦β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆及其表达被引量：4: 5; 作者崔素萍左豫虎董琳《黑龙江八一农垦大学学报》 2009年第4期5-8,共4页; 为了明确小麦受小麦根腐离蠕孢侵染后β-1,3-葡聚糖酶基因的表达情况,采用RT-PCR方法在受小麦根腐离蠕孢菌侵染后的小麦叶片中扩增β-1,3-葡聚糖酶基因,然后对侵染后的小麦叶片总RNA进行Northern斑点杂交。结果表明,克隆到了β-1,3-葡... 展开更多; 关键词小麦根腐离蠕孢 β-1 3-葡聚糖酶基因克隆; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名烟草品种Xanthi NN碱性β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆与生物信息学分析被引量：8: 1; 作者王转梅陈崇顺王轶曹伟杰邹爱兰马文晔张娟; 机构南京师范大学生命科学学院/江苏省生物多样性与生物技术重点实验室; 出处《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2009年第1期28-30,31,共4页; 基金国家自然科学基金(编号:30371010); 文摘烟草碱性β-1,3-葡聚糖酶具有较强的抗真菌病害等作用。本研究根据烟草Samsun与抗真菌作用有关的碱性β-1,3-葡聚糖酶基因序列设计引物,以烟草(Nicotiana tabacum)品种Xanthi NN基因组DNA为模板,进行PCR扩增,后将扩增产物与pUC57-T载体重组,再以该重组体转化大肠杆菌DH5α,在对阳性克隆进行鉴定后测序,并对其编码酶蛋白进行了一级、二级、三级结构及蛋白质同源性比较等生物信息学分析。研究结果表明,该基因全长1 868 bp,包含2个外显子和1个内含子;除终止密码子外,共编码359个氨基酸(GenBank登录号:EU867448)。该酶分子量为28.4 kDa,pI为9.72,是一个碱性蛋白;具有多个螺旋、转角、延伸链和无规卷曲等二级结构,其中α-螺旋占35.65%,β-转角占5.57%,延伸链占19.22%,无规卷曲占39.55%;三级结构同源建模预测显示,它与香蕉(Musa supientum)β-1,3-葡聚糖酶(PDB number 2cygA)具有60%的一致性;推测该酶蛋白与颠茄(Atropa belladonna)、马铃薯(Solanum tuberosum)等茄科植物的β-1,3-葡聚糖酶编码序列同源性分别达到89%和81%。本研究结果为进一步开展烟草抗真菌的β-1,3-葡聚糖酶的基因工程研究奠定了重要基础。; 关键词烟草基因组碱性β—1 3-葡聚糖酶基因克隆生物信息学; 分类号 S572.03 [农业科学—烟草工业]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名花生β-1,3-葡聚糖酶基因启动子的克隆及功能分析被引量：10: 2; 作者王合春陈新利隋炯明毕英娜王晶珊乔利仙; 机构青岛农业大学生命科学学院/山东省高校植物生物技术重点实验室威海恩特花木有限公司; 出处《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期864-870,共7页; 基金国家自然科学基金(31101178) 山东省中青年科学家奖励基金(BS2009NY028) +1 种基金山东省自然基金(ZR2012CM014) 山东省自然基金青年基金(ZR2011CQ026); 文摘植物β-1,3-葡聚糖酶属于一种重要的植物病程相关蛋白(PR蛋白),容易受到激发子的诱导而积累。用1.5 mmol/L水杨酸(SA)对花生品种花育20号幼苗进行诱导处理0.5、12、24、36、48和72 h后,提取RNA进行荧光定量检测β-1,3-葡聚糖酶基因(Ah-Glu)的表达量。结果表明,经诱导24 h后β-1,3-葡聚糖酶基因的表达量达到最高,是未经SA诱导的1.8倍。根据前期已克隆的花生β-1,3-葡聚糖酶基因序列(GenBank JQ801335),在其5'端设计3个嵌套的特异性引物扩增其上游启动子序列。以花育20号基因组DNA为模板,利用TAIL-PCR方法,扩增得到973 bp的花生β-1,3-葡聚糖酶基因启动子片段,在NCBI网站注册序列号为GenBank KC290400,并命名为Ah-Glu-Pro。PLACE和PlantCARE在线预测分析表明,Ah-Glu-Pro序列中含有TATA-box和CAAT-box等核心元件,还含有病原菌及水杨酸响应的顺式调控元件。根据Ah-Glu-Pro序列设计上下游引物,采用普通PCR法从花育20号扩增得到931 bp的启动子序列,命名为Ah-Glu-P。将Ah-Glu-P取代pCAMBIA1301质粒中的CaMV35S启动子,构建植物表达载体pCAMBIA1301-Ah-Glu-P。通过农杆菌介导法将pCAMBIA1301-Ah-Glu-P转化洋葱表皮细胞,经5 mmol/L SA诱导处理48 h后进行GUS染色。结果表明:经SA诱导后的洋葱表皮细胞GUS组织化学染色显示为蓝色,未经SA诱导的洋葱表皮细胞GUS组织化学染色未显示蓝色,说明Ah-Glu-P是一个可被诱导的启动子,可能含有对SA响应的顺式调控元件。; 关键词花生 β-1 3-葡聚糖酶基因(Ah-Glu) 诱导型启动子染色体步移表达载体; Keywords Peanut β-1,3-glucanase gene （Ah-Glu） inducible promoter genome walking expression vector; 分类号 S565.2 [农业科学—作物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名葡萄β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆、序列分析及表达被引量：3: 3; 作者王西成吴伟民巫建华赵密珍王壮伟钱亚明解振强; 机构江苏省农业科学院园艺研究所江苏省高效园艺作物遗传改良重点实验室江苏现代园艺工程技术中心; 出处《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第4期899-905,共7页; 基金江苏省农业科技自主创新基金项目[CX(12)2013]; 文摘为验证葡萄β-1,3-葡聚糖酶基因在葡萄抗病防御机制中的作用,本研究以金星无核葡萄叶片为试验材料,采用RT-PCR技术克隆得到1个长度为1 244 bp的葡萄β-1,3-葡聚糖酶基因。采用生物信息学方法对其开放读码框和理化性质进行分析,结果显示,该基因包含1个长度为1 083 bp的完整开放阅读框,编码的蛋白质含360个氨基酸,分子量为89 440,理论等电点为4.83。系统进化分析结果显示,β-1,3-葡聚糖酶基因所编码的氨基酸序列与桃、豌豆和水稻的同源性分别为62.1%、60.8%和33.1%。定量PCR分析结果显示,在霜霉病菌侵染后的72 h内均可诱导该基因的表达,且表达量均高于对照,表明β-1,3-葡聚糖酶基因在葡萄应答霜霉病菌侵染过程中可能发挥一定作用。; 关键词葡萄霜霉病 β-1 3-葡聚糖酶基因基因克隆基因表达; Keywords grapevine downy mildew beta-1 3-glucanase gene gene cloning gene expression; 分类号 S663.1 [农业科学—果树学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名产酶溶杆菌OH11菌株β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆与表达被引量：3: 4; 作者朱慧王云霞胡白石刘凤权; 机构南京农业大学植物保护学院农业部病虫监测与治理重点开放实验室; 出处《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2008年第2期136-141,共6页; 基金国家"863"计划项目(2006AA10A211) 重大基础研究前期研究专项(2005CCA02800); 文摘利用PCR方法从OH11菌株中克隆到β-1,3-葡聚糖酶基因,通过同源性比较发现其推测产物与产酶溶杆菌C3菌株和N4-7菌株的β-1,3-葡聚糖酶有90%以上的同源性。该基因经NdeⅠ、XhoⅡ或HindⅢ酶切后连接到含T7启动子的高表达载体pET21a(+)和载体pET30a(+)上构建重组质粒,并分别转化宿主菌BL21(AI)和BL21(DE3)产生表达菌株。表达菌株BLGluA和BLGluC经IPTG诱导后分别产生相对分子量约为29 000(GluA蛋白)和44 000(GluC蛋白)的蛋白。酶活性和抑菌活性测定结果表明,GluA蛋白和GluC蛋白能将海带多糖水解,在海带多糖培养基上产生透明的水解圈,并对立枯丝核菌菌丝的生长有抑制作用,具有一定的生物防治作用。; 关键词产酶溶杆菌OH11菌株 β-1 3-葡聚糖酶基因克隆表达; Keywords Lysobacter enzymogenes strain OH11 β-1,3-glucanase gene cloning expression; 分类号 Q785 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名小麦根腐离蠕孢菌诱导小麦β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆及其表达被引量：4: 5; 作者崔素萍左豫虎董琳; 机构黑龙江八一农垦大学; 出处《黑龙江八一农垦大学学报》 2009年第4期5-8,共4页; 基金黑龙江省普通高等学校青年学术骨干支持计划项目(1152G025); 文摘为了明确小麦受小麦根腐离蠕孢侵染后β-1,3-葡聚糖酶基因的表达情况,采用RT-PCR方法在受小麦根腐离蠕孢菌侵染后的小麦叶片中扩增β-1,3-葡聚糖酶基因,然后对侵染后的小麦叶片总RNA进行Northern斑点杂交。结果表明,克隆到了β-1,3-葡聚糖酶基因,该基因在小麦被侵染12 h时开始表达,在48 h后未见表达。对照中未见表达。可推断出此β-1,3-葡聚糖酶基因是被小麦根腐离蠕孢菌(Bipolaris sorokinianum)侵染后诱导表达的。; 关键词小麦根腐离蠕孢 β-1 3-葡聚糖酶基因克隆; Keywords wheat root rot β-1 3-glucanase gene clone; 分类号 S435.121.42 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	烟草品种Xanthi NN碱性β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆与生物信息学分析	王转梅陈崇顺王轶曹伟杰邹爱兰马文晔张娟	《江苏农业科学》 CSCD 北大核心	2009	8	在线阅读下载PDF 职称材料
2	花生β-1,3-葡聚糖酶基因启动子的克隆及功能分析	王合春陈新利隋炯明毕英娜王晶珊乔利仙	《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心	2013	10	在线阅读下载PDF 职称材料
3	葡萄β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆、序列分析及表达	王西成吴伟民巫建华赵密珍王壮伟钱亚明解振强	《江苏农业学报》 CSCD 北大核心	2015	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	产酶溶杆菌OH11菌株β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆与表达	朱慧王云霞胡白石刘凤权	《江苏农业学报》 CSCD 北大核心	2008	3	在线阅读下载PDF 职称材料
5	小麦根腐离蠕孢菌诱导小麦β-1,3-葡聚糖酶基因的克隆及其表达	崔素萍左豫虎董琳	《黑龙江八一农垦大学学报》	2009	4	在线阅读下载PDF 职称材料