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肺炎链球菌3型荚膜多糖细胞工厂的构建
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作者 程剑 成国森 +1 位作者 孔天爱 王阳 《食品与发酵工业》 2025年第17期1-10,共10页
3型荚膜多糖(type 3 capsular polysaccharide,Type 3 CPS)作为肺炎链球菌重要的毒力因子,在疫苗开发、多糖材料等方面具有重要价值。该文旨在构建合成Type 3 CPS的谷氨酸棒杆菌和大肠杆菌细胞工厂,并探索其发酵合成方法。首先对Type 3 ... 3型荚膜多糖(type 3 capsular polysaccharide,Type 3 CPS)作为肺炎链球菌重要的毒力因子,在疫苗开发、多糖材料等方面具有重要价值。该文旨在构建合成Type 3 CPS的谷氨酸棒杆菌和大肠杆菌细胞工厂,并探索其发酵合成方法。首先对Type 3 CPS的基因簇、合酶结构和糖链结构进行分析,在此基础上过表达Type 3 CPS合酶Cps3B和Type 3 CPS单糖前体的合成途径相关酶,并分析辅助膜蛋白CpsC对Type 3 CPS合成的影响。谷氨酸棒杆菌细胞工厂的合成水平达到69 mg/L,随后构建大肠杆菌细胞工厂合成水平达到79 mg/L。为进一步提高Type 3 CPS合成,引入Type 3 CPS的辅助膜蛋白CpsC,Type 3 CPS合成水平提高至105 mg/L。最后通过结构模拟和分子动力学模拟,发现辅助蛋白CpsC通过与Type 3 CPS合酶Cps3B形成氢键作用参与Type 3 CPS糖链合成与跨膜转运过程。研究实现Type 3 CPS细胞工厂的构建和优化,为Type 3 CPS的发酵合成奠定了初步基础。 展开更多
关键词 肺炎链球菌 3型荚膜多糖 CpsC 发酵合成 分子动力学
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3型肺炎球菌荚膜多糖结合疫苗的研制 被引量:7
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作者 张涛 孟欣 +3 位作者 朱涛 刘正 张立平 郝杰清 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1361-1365,共5页
目的:研制3型肺炎球菌荚膜多糖-CRM197结合疫苗。方法:将3型肺炎球菌的荚膜多糖与蛋白CRM197通过化学方法偶联结合,制备成多糖蛋白结合疫苗并使用该疫苗免疫幼小鼠。结果:经过实验条件的考察,发现在85℃,0.2mol/L乙酸水解处理多糖1 h,... 目的:研制3型肺炎球菌荚膜多糖-CRM197结合疫苗。方法:将3型肺炎球菌的荚膜多糖与蛋白CRM197通过化学方法偶联结合,制备成多糖蛋白结合疫苗并使用该疫苗免疫幼小鼠。结果:经过实验条件的考察,发现在85℃,0.2mol/L乙酸水解处理多糖1 h,活化度为10.0,投料比为20∶10时制得的疫苗,在小鼠体内产生了高滴度的抗体。结论:该实验条件下制备的结合疫苗保留了完好的抗原性,以本工艺条件制备3型肺炎球菌荚膜多糖蛋白结合疫苗是可行的。 展开更多
关键词 3肺炎球菌荚膜多糖 结合疫苗 铝佐剂 免疫原性
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