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马鹿布氏杆菌25kDa外膜蛋白基因的克隆、序列分析及其表达研究被引量：3: 1; 作者乔军才学鹏 +3 位作者孟庆玲景志忠张艳贾桂珍《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期128-131,135,共5页; 目的克隆马鹿布氏杆菌ML分离株25kDa外膜蛋白(Omp25)基因,并在大肠杆菌中表达。方法运用RT-PCR技术从马鹿布氏杆菌分离株中扩增出Omp25基因,将其克隆入pMD18-T中进行核苷酸序列测定和遗传变异分析,并将目的基因亚克隆到大肠杆菌表达载体... 展开更多; 关键词马鹿布氏杆菌 25kda外膜蛋白基因克隆序列分析表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

贝氏柯克斯体27kDa外膜蛋白基因的克隆与表达被引量：2: 2; 作者魏文进崔红 +4 位作者陈唯军牛东升张雪颖陈梅玲温博海《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2003年第2期23-25,共3页; 目的　克隆和表达贝氏柯克斯体 (Coxiellaburnetii) 2 7kDa外膜蛋白基因 (com1 )。方法　采用PCR方法 ,从质粒pGEM -T/com1扩增出Com1基因片段 ,经鉴定后 ,将其克隆于原核表达载体 pQE30 ,构建成重组质粒 pQE30 /com1 ,IPTG诱导表达。... 展开更多; 关键词贝氏柯克斯体 27kda外膜蛋白基因克隆表达测序; 在线阅读下载PDF 职称材料

恙虫病东方体Gilliam株56kDa外膜蛋白基因的克隆与表达: 3; 作者陈唯军陈香蕊 +5 位作者张雪颖牛东升陈梅玲崔红魏文进温博海《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第4期279-283,共5页; 目的　表达恙虫病东方体 (Orientiatsutsugamushi)Gilliam株 5 6kDa外膜蛋白 ,探索其作为诊断抗原的可能性。方法　采用PCR方法 ,从Ot Gilliam株菌种基因组DNA中扩增出 5 6kDa外膜蛋白基因片段 ,将目的基因片段定向插入原核表达载体pQE3... 展开更多; 关键词恙虫病东方体 Gilliam株 56kda外膜蛋白基因克隆表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

幽门螺杆菌26kDa外膜蛋白的基因克隆: 4; 作者蒲丹姜政 +2 位作者黄爱龙陶小红王丕龙《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2002年第2期130-132,135,共4页; 目的:构建幽门螺杆菌外膜蛋白的基因重组载体,为的疫苗开发、快速诊断试剂盒的研究奠定基础。26kDaHp方法:用从染色体基因组扩增外膜蛋白的基因片段,将目的基因、载体同时经PCRHpDNA 26kDa26kDapET32a(+)Bam、HIHindⅢ双酶切、纯化;T4... 展开更多; 关键词幽门螺杆菌 26kda 基因重组载体外膜蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

布鲁菌OMP25基因重组山羊痘病毒的构建被引量：3: 5; 作者魏凤郭志儒 +1 位作者陈创夫乔军《动物医学进展》 CSCD 2008年第4期6-9,共4页; 将羊种布鲁菌外膜蛋白25(OMP25)基因插入到山羊痘病毒转移载体PGM-TK-I1L-GPT1启动子I1L的下游,构建重组山羊痘病毒转移载体。用脂质体转染法将重组转移载体与山羊痘病毒疫苗株G14-STV44-55共转染绵羊成纤维细胞,在细胞内同源重组。通... 展开更多; 关键词羊种布鲁菌外膜蛋白25基因重组山羊痘病毒; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名马鹿布氏杆菌25kDa外膜蛋白基因的克隆、序列分析及其表达研究被引量：3: 1; 作者乔军才学鹏孟庆玲景志忠张艳贾桂珍; 机构中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室塔里木农垦大学动物科技学院; 出处《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期128-131,135,共5页; 文摘目的克隆马鹿布氏杆菌ML分离株25kDa外膜蛋白(Omp25)基因,并在大肠杆菌中表达。方法运用RT-PCR技术从马鹿布氏杆菌分离株中扩增出Omp25基因,将其克隆入pMD18-T中进行核苷酸序列测定和遗传变异分析,并将目的基因亚克隆到大肠杆菌表达载体pET28a中诱导表达。结果该基因全长642bp,编码213个氨基酸;其中前23个氨基酸残基构成信号肽。在推导的氨基酸序列中,存在两个跨膜区,但没有潜在的N-联糖基化位点。与GenBank中已经登录的布氏杆菌其他11个分离株相比,马鹿布氏杆菌分离株Omp25基因变异较小,以散在的点突变为主,Omp25基因核苷酸和推导氨基酸序列的同源性分别为99.1%-99.4%和99.2%-99.5%之间。转化重组质粒pETOMP25的大肠杆菌BL21(DE3)在IPTG的诱导下,可表达出具有反应原性的目的蛋白,表达量占菌体蛋白的18.6%。结论马鹿布氏杆菌分离株与流产型布氏杆菌其它分离株Omp25基因同源性很高,可能是一个毒力较强的野毒株。; 关键词马鹿布氏杆菌 25kda外膜蛋白基因克隆序列分析表达; Keywords wapiti＇s Brucella abortus outer membrane protein 25 genes cloning sequence analysis expression; 分类号 R378.5 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名贝氏柯克斯体27kDa外膜蛋白基因的克隆与表达被引量：2: 2; 作者魏文进崔红陈唯军牛东升张雪颖陈梅玲温博海; 机构军事医学科学院微生物流行病研究所; 出处《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2003年第2期23-25,共3页; 文摘目的　克隆和表达贝氏柯克斯体 (Coxiellaburnetii) 2 7kDa外膜蛋白基因 (com1 )。方法　采用PCR方法 ,从质粒pGEM -T/com1扩增出Com1基因片段 ,经鉴定后 ,将其克隆于原核表达载体 pQE30 ,构建成重组质粒 pQE30 /com1 ,IPTG诱导表达。结果　 (1 )获得长约 760bp的PCR片段 ,序列分析结果与已知com1序列相同。 (2 )SDS -PAGE检测表达产物 ,在相对分子量 2 7kDa处有表达条带。经薄层扫描分析 ,目的蛋白条带占全菌体蛋白的 1 7 2 %。 (3)经分析 ,有较好的抗原性。 (4)表达菌体超声破碎后 ,目的蛋白主要存在于包涵体中。结论　贝氏柯克斯体com1基因在大肠杆菌中获得了高效表达。; 关键词贝氏柯克斯体 27kda外膜蛋白基因克隆表达测序; Keywords Coxiella burnetii Gene clone Sequencing Gene expression Gene Com1; 分类号 R376.4 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名恙虫病东方体Gilliam株56kDa外膜蛋白基因的克隆与表达: 3; 作者陈唯军陈香蕊张雪颖牛东升陈梅玲崔红魏文进温博海; 机构军事医学科学院五所; 出处《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第4期279-283,共5页; 文摘目的　表达恙虫病东方体 (Orientiatsutsugamushi)Gilliam株 5 6kDa外膜蛋白 ,探索其作为诊断抗原的可能性。方法　采用PCR方法 ,从Ot Gilliam株菌种基因组DNA中扩增出 5 6kDa外膜蛋白基因片段 ,将目的基因片段定向插入原核表达载体pQE30 ,再用重组质粒转化大肠杆菌 ,最后用IPTG诱导转化菌 ,SDS -PAGE和Western -blotting检测重组质粒目的基因的表达。结果　 (1)获得长约 15 0 0bp的Ot Gilliam株 5 6kDa外膜蛋白基因 ,SDS -PAGE检测表达产物 ,在相对分子量5 6× 10 4处有表达带 ;(2 )DNA测序证明重组质粒 pQE30 / 5 6中插入的基因片段的序列与已报告的Ot Gilliam株 5 6kDa外膜蛋白基因序列基本一致。 (3)诱导表达菌体经超声破碎后 ,显示目的蛋白主要以包涵体形式存在 ;(4 )免疫印迹显示该重组质粒转化的大肠杆菌有一相对分子量约为 5 6× 10 4的独特蛋白带 ,该蛋白约占细菌蛋白总量的 2 9 4 %。结论　Ot Gilliam株5 6kDa外膜蛋白基因在大肠杆菌中获得了高效表达 ,表达的重组蛋白具有免疫反应性 ,与Ot Gilliam株感染的小鼠血清在免疫印迹中呈阳性反应。; 关键词恙虫病东方体 Gilliam株 56kda外膜蛋白基因克隆表达; Keywords Orientia tsutsugamushi Gilliam PCR 56kda protein gene clone and expression Western-blotting; 分类号 R513.2 [医药卫生—内科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名幽门螺杆菌26kDa外膜蛋白的基因克隆: 4; 作者蒲丹姜政黄爱龙陶小红王丕龙; 机构重庆医科大学临床学院消化内科重庆医科大学病毒性肝炎研究所; 出处《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2002年第2期130-132,135,共4页; 文摘目的:构建幽门螺杆菌外膜蛋白的基因重组载体,为的疫苗开发、快速诊断试剂盒的研究奠定基础。26kDaHp方法:用从染色体基因组扩增外膜蛋白的基因片段,将目的基因、载体同时经PCRHpDNA 26kDa26kDapET32a(+)Bam、HIHindⅢ双酶切、纯化;T4连接酶连接;转染大肠菌以及筛选含插入片段的重组载体。Top10结果:经酶切、测序分析插入的基因片段为表达外膜蛋白基因,有发生变异,以及氨基酸残基改变。与文献相比:有高度的同源性。Hp26kDa1.1%bp1.51%结论:外膜蛋白的基因克隆、重组载体的构建将有可能为一种有效蛋白质疫苗的制备打下基础。; 关键词幽门螺杆菌 26kda 基因重组载体外膜蛋白; Keywords Helicobacter pylori 26kda Gene Recombinant vector Outer membrane protein; 分类号 R378.2 [医药卫生—病原生物学] R392－33 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名布鲁菌OMP25基因重组山羊痘病毒的构建被引量：3: 5; 作者魏凤郭志儒陈创夫乔军; 机构石河子大学动物科技学院; 出处《动物医学进展》 CSCD 2008年第4期6-9,共4页; 基金新疆生产建设兵团博士基金(30560109); 文摘将羊种布鲁菌外膜蛋白25(OMP25)基因插入到山羊痘病毒转移载体PGM-TK-I1L-GPT1启动子I1L的下游,构建重组山羊痘病毒转移载体。用脂质体转染法将重组转移载体与山羊痘病毒疫苗株G14-STV44-55共转染绵羊成纤维细胞,在细胞内同源重组。通过霉酚酸药物筛选、纯化,经PCR鉴定获得了重组山羊痘病毒。; 关键词羊种布鲁菌外膜蛋白25基因重组山羊痘病毒; Keywords B. rnelitensis outside membrance protein 25 gene recombinant Goatpoxvirus; 分类号 Q784 [生物学—分子生物学] S852.614 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	马鹿布氏杆菌25kDa外膜蛋白基因的克隆、序列分析及其表达研究	乔军才学鹏孟庆玲景志忠张艳贾桂珍	《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心	2007	3	在线阅读下载PDF 职称材料
2	贝氏柯克斯体27kDa外膜蛋白基因的克隆与表达	魏文进崔红陈唯军牛东升张雪颖陈梅玲温博海	《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心	2003	2	在线阅读下载PDF 职称材料
3	恙虫病东方体Gilliam株56kDa外膜蛋白基因的克隆与表达	陈唯军陈香蕊张雪颖牛东升陈梅玲崔红魏文进温博海	《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心	2004	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	幽门螺杆菌26kDa外膜蛋白的基因克隆	蒲丹姜政黄爱龙陶小红王丕龙	《重庆医科大学学报》 CAS CSCD	2002	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	布鲁菌OMP25基因重组山羊痘病毒的构建	魏凤郭志儒陈创夫乔军	《动物医学进展》 CSCD	2008	3	在线阅读下载PDF 职称材料