三氯乙烯谷胱甘肽Ⅱ相代谢物的LC-MS/MS高灵敏检测及其在帕金森病模型小鼠研究的应用

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作者 李丹 闫凌 蔡宗苇 《环境化学》 北大核心 2025年第10期3560-3567,共8页

三氯乙烯(TCE)广泛用于工业清洗,作为环境污染物,其代谢产物已被证实具有肝肾毒性及神经毒性.本文建立和应用高灵敏度LC-MS/MS方法分析TCE与谷胱甘肽(GSH)结合的Ⅱ相代谢物S-(1,2-二氯乙烯基)-谷胱甘肽(DCVG)、S-(1,2-二氯乙烯基)-L-半... 三氯乙烯(TCE)广泛用于工业清洗,作为环境污染物,其代谢产物已被证实具有肝肾毒性及神经毒性.本文建立和应用高灵敏度LC-MS/MS方法分析TCE与谷胱甘肽(GSH)结合的Ⅱ相代谢物S-(1,2-二氯乙烯基)-谷胱甘肽(DCVG)、S-(1,2-二氯乙烯基)-L-半胱氨酸(DCVC)和N-乙酰基-S-(1,2-二氯乙烯基)-L-半胱氨酸(NAcDCVC),该方法展现出良好的线性关系(R>0.999)、较低的检出限(LOD)范围(0.0015—0.0039 nmol·L^(−1))和定量限(LOQ)范围(0.0051—0.0129 nmol·L^(−1)),优异的重复性(CV<9%)与准确性(回收率范围为86.95%—114.47%).方法成功应用在帕金森病(PD)小鼠模型的肝脏和肾脏样本分析并支持PD研究,结果显示:PD小鼠和正常小鼠模型的3个Ⅱ相代谢物在肝脏和肾脏样品中均有明显差异,提示了PD病理状态可能干扰了TCE的下游代谢. 展开更多

关键词 三氯乙烯 S-(1 2-二氯乙烯基)-谷胱甘肽 S-(1 2-二氯乙烯基)-L-半胱氨酸 N-乙酰基-S-(1 2-二 氯乙烯基)-L-半胱氨酸 帕金森病.

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消耗还原型谷胱甘肽抑制血管紧张素Ⅱ激活巨噬细胞c-Jun/ATF-2及NF-κB 被引量：4

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作者 娄宁 余学清 +1 位作者 祝胜郎 董秀清 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期1745-1749,共5页

目的 :探讨还原型谷胱甘肽 (GSH)在血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )激活巨噬细胞转录因子c -Jun/ATF - 2及NF -κB中的作用。方法 :用荧光分光光度法测定细胞内GSH含量 ;用丁基硫堇硫氧胺 (BSO)消耗细胞内GSH ;用免疫印迹法测定细胞c -Jun/ATF - ... 目的 :探讨还原型谷胱甘肽 (GSH)在血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )激活巨噬细胞转录因子c -Jun/ATF - 2及NF -κB中的作用。方法 :用荧光分光光度法测定细胞内GSH含量 ;用丁基硫堇硫氧胺 (BSO)消耗细胞内GSH ;用免疫印迹法测定细胞c -Jun/ATF - 2磷酸化表达及NF -κBp6 5表达 ;用凝胶滞留法测定细胞NF -κB活性 ;用细胞免疫组化观察细胞c -Jun/ATF - 2磷酸化表达的时间模式。结果 :AngⅡ (1μmol/L)刺激 30 - 6 0min可降低RAW2 6 4 7细胞内GSH ;而后GSH逐渐适应性恢复。同时 ,AngⅡ刺激 6 0min ,呈剂量依赖性降低RAW 2 6 4 7细胞内GSH。GSH特异性消耗剂BSO(0 5mmol/L)与RAW 2 6 4 7细胞共同孵育 18h ,即可完全消耗细胞内GSH。AngⅡ (1μmol/L)可诱导RAW 2 6 4 7巨噬细胞c -Jun/ATF - 2磷酸化表达 ;BSO预先完全消耗细胞内GSH ,AngⅡ (1μmol/L)不能诱导巨噬细胞c -Jun/ATF - 2磷酸化。同样 ,AngⅡ (1μmol/L)可激活RAW 2 6 4 7巨噬细胞NF -κB ;BSO预先完全消耗细胞内GSH ,AngⅡ (1μmol/L)不能激活巨噬细胞NF -κB。结论 :还原型谷胱甘肽可能参与调控巨噬细胞转录因子c-Jun/ATF - 2及NF 展开更多

关键词 谷胱甘肽 血管紧张素Ⅱ 激活转录因子-2 NF-ΚB 巨噬细胞

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5-马来酰亚胺-2-(间马来酰亚胺基苯基)苯并噁唑用于荧光光度法直接测定还原型谷胱甘肽的研究 被引量：1

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作者 梁淑彩 王红 +1 位作者 张治民 张华山 《分析科学学报》 CAS CSCD 2005年第5期486-490,共5页

以5-马来酰亚胺-2-(间马来酰亚胺基苯基)苯并噁唑(DMPB)为荧光试剂,建立了在一定量半胱氨酸(Cys)存在下荧光光度法直接测定还原型谷胱甘肽(GSH)的新方法.研究表明,DMPB荧光很弱,其结构中的两个马来酰亚胺基团都能与GSH或Cys发生反应,生... 以5-马来酰亚胺-2-(间马来酰亚胺基苯基)苯并噁唑(DMPB)为荧光试剂,建立了在一定量半胱氨酸(Cys)存在下荧光光度法直接测定还原型谷胱甘肽(GSH)的新方法.研究表明,DMPB荧光很弱,其结构中的两个马来酰亚胺基团都能与GSH或Cys发生反应,生成具有强荧光的产物.并且DMPB与GSH或Cys的生成物(分别称为DMPB-GSH和DMPB-Cys)的最大荧光波长会以不同的速率从λex/λem=302/372nm红移至λex/λem=310/430 nm,最终均在λex/λem=310/430 nm处稳定.在pH 7.0的Na2HPO4-KH2PO4缓冲溶液中和35℃下,DMPB与GSH或Cys反应15 min后,生成的DMPB-GSH的最大荧光波长为λex/λem=302/372 nm,且最大荧光强度可以稳定1h,而DMPB-Cys的最大荧光波长为λex/λem=310/430 nm,且荧光较弱.利用这一差别,我们选择在λex/λem=302/372 nm的荧光波长下测定GSH,完成了0.3倍(Cys:GSH,摩尔比)Cys存在下对GSH的直接测定,方法线性范围为4.0×10-8～9.6×10-7mol·L-1,检出限(S/N=3)为1.5×10-9mol·L-1.用该法测定了人全血中的GSH,结果令人满意. 展开更多

关键词 5-马来酰亚胺-2-(间马来酰亚胺基苯基) 苯并噁唑 谷胱甘肽 荧光光度法

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BDE-47的两种代谢产物对HepG2细胞中谷胱甘肽含量和P450酶活性的影响 被引量：2

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作者 尹灵灵 王流林 +4 位作者 钟玉芳 安静 吴明红 盛国英 傅家谟 《上海大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期587-591,共5页

从细胞毒性、氧化应激以及代谢酶活性等方面,研究2,2′,4,4'-四溴联苯醚(2,2′,4,4'-tetrabromodiphenylether,BDE-47)的两种代谢物5-羟基-四溴联苯醚(5-OH-BDE-47)和5-甲氧基-四溴联苯醚(5-MeO-BDE-47)对人体肝癌细胞HepG2的... 从细胞毒性、氧化应激以及代谢酶活性等方面,研究2,2′,4,4'-四溴联苯醚(2,2′,4,4'-tetrabromodiphenylether,BDE-47)的两种代谢物5-羟基-四溴联苯醚(5-OH-BDE-47)和5-甲氧基-四溴联苯醚(5-MeO-BDE-47)对人体肝癌细胞HepG2的细胞毒性效应.采用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法,检测5-OH-BDE-47和5-MeO-BDE-47染毒后HepG2细胞的生长情况,以及急性染毒后细胞内谷胱甘肽(GSH)含量及细胞内P450酶活性的变化.研究结果表明,5-OH-BDE-47和5-MeO-BDE-47均能抑制HepG2细胞生长,降低GSH活性,诱导EROD和PROD活性的增强. 展开更多

关键词 多溴联苯醚 2 2’ 4 4’-四溴联苯醚 肝癌细胞 谷胱甘肽 细胞色素

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石墨烯量子点荧光猝灭-恢复法测定Cu^(2+)与谷胱甘肽的含量 被引量：2

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作者 宋凤娟 艾永玲 +1 位作者 钟文英 王菁 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期87-92,共6页

通过在温和条件下氧化石墨粉的方法合成高分散性、高荧光强度的石墨烯量子点(GQDs),并运用此GQDs对Cu^(2+)和GSH具有荧光猝灭-恢复的效应,建立对这两种物质简便、快捷的检测方法。Cu^(2+)与GSH的浓度分别在1.0~10.0 mmol/L、0.1~1.0 mmo... 通过在温和条件下氧化石墨粉的方法合成高分散性、高荧光强度的石墨烯量子点(GQDs),并运用此GQDs对Cu^(2+)和GSH具有荧光猝灭-恢复的效应,建立对这两种物质简便、快捷的检测方法。Cu^(2+)与GSH的浓度分别在1.0~10.0 mmol/L、0.1~1.0 mmol/L范围内与GQDs的荧光强度呈良好线性关系,检测限分别为0.01和0.1 mmol/L。此外,在实际样品的检测中,加标法测得的回收率分别为93%~101%、96%~107%。该方法操作简便,测定准确,精密度高,且常见的金属离子及潜在共存物质对Cu^(2+)与GSH的检测均没有干扰。 展开更多

关键词 石墨烯量子点 CU2+ 谷胱甘肽 荧光猝灭-恢复 含量测定

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罗丹明6G衍生物-谷胱甘肽荧光探针测定水中Hg^(2+) 被引量：3

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作者 赵秋媛 杨剑华 +5 位作者 王蕊 张丽珠 杨敏 张艳丽 王红斌 谭伟 《理化检验（化学分册）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期385-390,共6页

在罗丹明6G衍生物(Rh6G2)中引入谷胱甘肽(GSH),制备了一种荧光探针Rh6G2-GSH,并基于其与Hg^(2+)识别时可发生荧光强度及吸光度的变化,分别采用荧光分光光度法和紫外-可见分光光度法测定水中Hg^(2+)的含量。在由体积比为1∶1的4-羟乙基... 在罗丹明6G衍生物(Rh6G2)中引入谷胱甘肽(GSH),制备了一种荧光探针Rh6G2-GSH,并基于其与Hg^(2+)识别时可发生荧光强度及吸光度的变化,分别采用荧光分光光度法和紫外-可见分光光度法测定水中Hg^(2+)的含量。在由体积比为1∶1的4-羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)溶液和甲醇混合而成的缓冲溶液(pH 7)中加入Rh6G2和GSH,通过自组装反应合成荧光探针Rh6G2-GSH,将其加入到水样中,分别在优化的两种方法的仪器工作条件下测定。结果显示:荧光探针可在较宽的酸度范围内(pH 7~12)识别Hg^(2+),且受常见金属阳离子干扰小;两种方法制作的标准曲线的线性范围分别为2.5×10-5~2.5×10-4 mol·L-1和5.0×10-5~2.5×10-4 mol·L-1,检出限分别为1.39×10-9 mol·L-1和4.07×10-7 mol·L-1;对实际样品进行3个浓度水平的加标回收试验,两种方法所得的回收率分别为95.1%~120%和94.8%~100%,测定值的相对标准偏差(n=5)分别为0.46%~2.4%和0.15%~3.4%。采用四极杆-飞行时间质谱仪对荧光检测机理进行探究,发现Rh6G2-GSH在与Hg^(2+)进行不可逆的结合后,会进一步发生水解,生成一种荧光强度更高的有机酸。 展开更多

关键词 罗丹明6G衍生物 谷胱甘肽 荧光探针 荧光分光光度法 紫外-可见分光光度法 Hg^(2+) 水

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氧化型谷胱甘肽-二茂铁的合成及其电化学性质研究 被引量：1

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作者 叶武龙 彭勇 +3 位作者 李学强 向进 刘晓芳 刘又年 《无机化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1820-1824,共5页

采用液相合成法,以二茂铁甲酸、氧化型谷胱甘肽(GSSG)为原料,苯并三唑-1-四甲基六氟磷酸酯(HBTU)及1-羟基苯并三唑(HOBt)为缩合剂,合成了具有电活性的目标化合物氧化型谷胱甘肽-二茂铁(Fc-GSSG-Fc),其收率为46%,并对其进行了表征。目标... 采用液相合成法,以二茂铁甲酸、氧化型谷胱甘肽(GSSG)为原料,苯并三唑-1-四甲基六氟磷酸酯(HBTU)及1-羟基苯并三唑(HOBt)为缩合剂,合成了具有电活性的目标化合物氧化型谷胱甘肽-二茂铁(Fc-GSSG-Fc),其收率为46%,并对其进行了表征。目标化合物Fc-GSSG-Fc的循环伏安扫描结果表明,在0～0.8V范围内出现了一对可逆的氧化还原峰,氧化峰和还原峰电位分别为0.459和0.391V;峰电位之差ΔEp为68mV,峰电流密度之比Ipa/Ipc为1.02,扩散系数D0=1.175×10-8cm2·s-1。利用电化学方法研究了Fc-GSSG-Fc与Zn(Ⅱ)之间的配位特性。实验结果表明,Fc-GSSG-Fc与Zn(Ⅱ)形成了1:1的配合物。 展开更多

关键词 氧化型谷胱甘肽-二茂铁 Zn2+ 电化学

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基于碳纳米管负载的电催化剂高效检测还原型谷胱甘肽 被引量：2

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作者 熊乐艳 张楠 +2 位作者 李雪妮 郭赞如 郑龙珍 《无机化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1942-1950,共9页

通过两步法合成了10-甲基吩噻嗪／2-羟丙基-β-环糊精主客体化合物修饰的多壁碳纳米管复合材料MPT—HPlB—CD／MWNT，并用FT-IR、UV-Vis、荧光光谱、拉曼光谱、TEM等对其组成进行表征。通过CV曲线、i-t曲线对谷胱甘肽（GSH）的催化性能... 通过两步法合成了10-甲基吩噻嗪／2-羟丙基-β-环糊精主客体化合物修饰的多壁碳纳米管复合材料MPT—HPlB—CD／MWNT，并用FT-IR、UV-Vis、荧光光谱、拉曼光谱、TEM等对其组成进行表征。通过CV曲线、i-t曲线对谷胱甘肽（GSH）的催化性能以及对催化剂阻抗的研究，证明了MWNT可以提高导电能力，提高对GSH的催化活性。此外，还研究了pH值、温度、扫速等对催化剂催化活性的影响．表明该复合材料可用于GSH的电化学检测，并具有良好的稳定性、重现性以及很高的灵敏度。最优检测浓度范围为5×10-7 -4．95×10 -5 mol·L-1．检测限为3．96×10-8 mol·L-1（S／N=3）。 展开更多

关键词 谷胱甘肽 2-羟丙基1β-环糊精 10-甲基吩噻嗪 多壁碳纳米管 电化学检测

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GenX通过System Xc^(-)-Gpx4-Fsp1铁死亡轴诱导耳蜗毛细胞损伤

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作者 梁正薇 洪慧慧 袁伟 《陆军军医大学学报》 北大核心 2025年第21期2652-2662,共11页

目的探讨铁死亡在2,3,3,3-四氟-2-(七氟丙氧基)丙酸铵[ammonium 2,3,3,3-tetrafluoro-2-(heptafluoropropoxy)-propanoate,GenX]暴露诱导耳蜗毛细胞损伤中的作用与机制。方法体外培养HEI-OC1细胞,分为对照组、GenX组、铁死亡抑制剂(ferr... 目的探讨铁死亡在2,3,3,3-四氟-2-(七氟丙氧基)丙酸铵[ammonium 2,3,3,3-tetrafluoro-2-(heptafluoropropoxy)-propanoate,GenX]暴露诱导耳蜗毛细胞损伤中的作用与机制。方法体外培养HEI-OC1细胞,分为对照组、GenX组、铁死亡抑制剂(ferrostatin-1,Fer-1)组、GenX+Fer-1组,CCK-8检测GenX对耳蜗毛细胞的毒性作用,CCK-8检测GenX+Fer-1共处理后观察有无铁死亡的发生,Western blot和qRT-PCR检测铁死亡标志物、耳蜗分化功能指标、耳血迷路屏障标志物和听力相关铁死亡通路蛋白和基因的表达,使用FerroOrange、Bodipy(C11)、线粒体膜电位荧光探针(mitochondrial membrane potential assay kit,JC-1)和ATP探针分别检测Fe^(2+)蓄积、脂质过氧化水平、线粒体膜损伤和ATP情况。结果200μmol/L GenX暴露12 h后显著降低HEI-OC1细胞活力(P<0.01)。GenX暴露12 h后引起磷脂氢过氧化物谷胱甘肽过氧化物酶(phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase,Gpx4)、溶质载体家族7成员11和铁死亡抑制蛋白1(ferroptosis suppressor protein 1,Fsp1)蛋白表达下调(P<0.05),酰基辅酶A合成酶长链家族成员4蛋白表达上调(P<0.01),耳蜗毛细胞分化功能基因和耳血迷路屏障基因表达降低(P<0.05),同时伴随Fe^(2+)蓄积、脂质过氧化水平升高和线粒体膜损伤及降低ATP生成(P<0.001)。GenX+Fer-1组可显著恢复细胞活力(P<0.05),逆转铁死亡蛋白的表达(P<0.05),并改善部分耳蜗分化功能基因和耳血迷路屏障基因的表达(P<0.05)。同时GenX+Fer-1组可减少Fe^(2+)蓄积、降低脂质过氧化水平、抑制线粒体膜损伤和升高ATP水平(P<0.001)。结论GenX通过诱导铁代谢紊乱、脂质过氧化蓄积,并依赖System Xc^(-)-Gpx4-Fsp1铁死亡轴途径损伤耳蜗毛细胞的分化和屏障功能。 展开更多

关键词 铁死亡 2 3 3 3-四氟-2-(七氟丙氧基)丙酸铵 磷脂氢过氧化物谷胱甘肽过氧化物酶 铁死亡抑制蛋白1 耳蜗毛细胞

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衍生化法测定水果中还原型谷胱甘肽(GSH)和总巯基含量 被引量：5

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作者 朴玉莲 沈丽 +1 位作者 韩玲 崔胜云 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第20期60-64,共5页

用衍生化试剂5，5-二硫硝基苯甲酸（DTNB）对巯基化合物的衍生化反应和邻苯二甲醛（OPA）与GSH的荧光衍生化反应，分别采用UV—vis分光光度法和荧光光度法测定了猕猴桃、大枣、酸浆中总巯基含量和GSH的含量。被测样品中GSH和总巯基相对... 用衍生化试剂5，5-二硫硝基苯甲酸（DTNB）对巯基化合物的衍生化反应和邻苯二甲醛（OPA）与GSH的荧光衍生化反应，分别采用UV—vis分光光度法和荧光光度法测定了猕猴桃、大枣、酸浆中总巯基含量和GSH的含量。被测样品中GSH和总巯基相对含量分布有较大的差异，其中猕猴桃和大枣中含有相对较高的GSH浓度分布，分别达0．7092、0．8374mol／g，酸浆中含有较高的总巯基含量分布，达1．4173mol／g。本测定方法的回收率达95．38％-101．9％，满足测定准确度的要求，总巯基含量和GSH含量测定最低检测限分别为9．6×10^-7,2．69×10^-7mol／L。 展开更多

关键词 谷胱甘肽 巯基化合物 衍生化 5 5-二硫双-2-硝基苯甲酸 邻苯二甲醛

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N-苯基-2-萘胺对青菜生长及AsA-GSH循环影响研究 被引量：3

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作者 薛延丰 冯慧芳 +1 位作者 石志琦 严少华 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2013年第2期191-196,共6页

以青菜为材料,研究使用不同浓度N-苯基-2-萘胺处理后对青菜生长及其体内AsA-GSH循环的影响。结果表明,使用不同浓度N-苯基-2-萘胺对青菜的株高及生物量产生不同的影响,其中以0.50 mg/L的处理效果最好,当浓度大于0.50 mg/L时,株高和生物... 以青菜为材料,研究使用不同浓度N-苯基-2-萘胺处理后对青菜生长及其体内AsA-GSH循环的影响。结果表明,使用不同浓度N-苯基-2-萘胺对青菜的株高及生物量产生不同的影响,其中以0.50 mg/L的处理效果最好,当浓度大于0.50 mg/L时,株高和生物量均随着N-苯基-2-萘胺使用浓度的增加而降低;处理后还原型抗坏血酸(AsA)、脱氢抗坏血酸(DHA)、总量Vc和AsA/DHA比值的变化趋势相似,0.50 mg/L处理下,AsA、DHA、总量Vc、AsA/DHA比值与对照相比均显著增加,当浓度大于0.50 mg/L时,AsA、DHA、总量Vc、AsA/DHA比值与对照相比均显著降低;在AsA循环中的抗坏血酸过氧化物酶(APX)、脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)和单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)活性变化趋势相似,均随着处理浓度增加呈现出先增加后降低的趋势,其中以0.50 mg/L处理下酶活性最高,而抗坏血酸氧化酶(AAO)活性则随着处理浓度的增加而逐渐降低,以0.25 mg/L处理效果最好;在还原型谷胱甘肽(GSH)循环中,当处理浓度小于2.50 mg/L时,氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量随着处理浓度的增加与对照相比稍有下降,但差异不显著,GSH含量与谷胱甘肽还原酶(GR)活性变化趋势相似,随着处理浓度增加呈现出先增加而后逐渐降低,其中以0.50 mg/L处理下效果最好。说明合理利用水葫芦中化感物质,有助于植株的生长,同时增加了体内AsA-GSH代谢循环,提高了青菜的抗氧化防御能力。 展开更多

关键词 N-苯基-2-萘胺 青菜 抗坏血酸 谷胱甘肽 水葫芦

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人MD-2/GST融合蛋白在大肠杆菌的表达 被引量：3

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作者 徐发良 顾长国 +1 位作者 胡承香 李磊 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期206-208,共3页

构建人髓样分化蛋白 2 (humanmyeloiddifferentiatonprotein 2 ,hMD 2 )与谷胱甘肽巯基转移酶 ( glutathione S transferase,GST)的融合蛋白(hMD 2 /GST)表达载体PGEX 4T 1/hMD 2 ,在大肠杆菌中融合表达hMD 2 /GST。以真核表达载体PEF B... 构建人髓样分化蛋白 2 (humanmyeloiddifferentiatonprotein 2 ,hMD 2 )与谷胱甘肽巯基转移酶 ( glutathione S transferase,GST)的融合蛋白(hMD 2 /GST)表达载体PGEX 4T 1/hMD 2 ,在大肠杆菌中融合表达hMD 2 /GST。以真核表达载体PEF BOS/hMD 2为模板 ,用PCR法在MD 2编码序列上下游引入酶切位点和终止密码子 ;将hMD 2编码序列克隆入原核表达载体PGEX 4T 1的相应酶切位点 ;用PCR和酶切筛选、鉴定重组质粒PGEX 4T 1/hMD 2 ,并对插入基因片断测序 ;重组质粒PGEX 4T 1/hMD 2转化大肠杆菌 ,经IPTG诱导后用SDS PAGE分析表达产物。结果PCR、酶切鉴定和序列测定证实MD 2编码序列正向插入原核表达载体PGEX 4T 1的相应酶切位点 ,片断与PCR扩增产物大小相同、序列无误、阅读框架正确 ;SDS PAGE证实hMD 2 /GST在大肠杆菌中表达 ,表达量约占菌体总蛋白的 3 0 %。说明成功构建了PGEX 4T 1/hMD 2载体 ,hMD 2 /GST融合蛋白在大肠杆菌中得到初步表达 ,为MD 展开更多

关键词 重组融合蛋白类 谷胱甘肽巯基转移酶 人髓样分化蛋白-2 遗传载体

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游泳训练及联合补充线粒体营养素α-硫辛酸对wistar2型糖尿病大鼠血脂代谢及脂质过氧化水平的影响 被引量：7

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作者 江红轲 季波 《山东体育学院学报》 CSSCI 北大核心 2011年第5期49-54,共6页

目的:观察2型糖尿病(T2DM)模型大鼠,经8周游泳训练后,血脂代谢、血清氧化应激、血糖(FBG)、胰岛素敏感性(ISI)及肝脏组织二相酶活性变化,检测联合作用方式(游泳训练及联合补充α硫辛酸)对wistarT2DM大鼠血脂代谢及脂质过氧化水平的影响... 目的:观察2型糖尿病(T2DM)模型大鼠,经8周游泳训练后,血脂代谢、血清氧化应激、血糖(FBG)、胰岛素敏感性(ISI)及肝脏组织二相酶活性变化,检测联合作用方式(游泳训练及联合补充α硫辛酸)对wistarT2DM大鼠血脂代谢及脂质过氧化水平的影响,并探讨其内在影响机制。方法:实验材料wistar大鼠60只,造模完成后随机分成4组,对照组(CON);α硫辛酸(LA);游泳运动组(SEX);α硫辛酸+游泳运动组(LA+SEX),每组15只。进行游泳训练共计8周,观察各组大鼠血脂代谢水平、FBG、ISI及肝脏组织二相酶活性变化。结果:经联合作用方式可极显著性降低wistar大鼠血清总胆固醇和甘油三酯水平,降低LDL-C含量和FFA水平,提高HDL-C;在降低FBG,提高ISI作用上存在叠加效应(P<0.01),对胰岛素水平无显著性影响;在改善血清氧化应激水平作用上(降低ROS和提高SOD),存在增强作用(P<0.01);对肝脏组织二相酶的影响,在对谷胱甘肽-S-转移酶(GST)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)存在增强作用,对醌氧化还原酶1(NQO-1)则无此作用。结论:联合作用方式可以有效降低血清及肝脏脂质过氧化水平,纠正血脂代谢异常,提高ISI。其保护作用可能是通过降低机体氧化应激水平,维持机体血脂正常代谢水平,减少氧化应激而实现。提示,联合作用方式可以为治疗T2DM提供新思路。 展开更多

关键词 2型糖尿病 游泳训练 Α-硫辛酸 血脂代谢 胰岛素敏感性 醌氧化还原酶1 谷胱甘肽过氧化物酶 谷胱甘肽-S-转移酶

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5-aza-2'-deoxycitydine影响胃癌细胞MGC803对奥沙利铂敏感性及其机制 被引量：2

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作者 张晔 曲秀娟 +5 位作者 刘云鹏 荆薇 杨向红 侯科佐 滕月娥 张敬东 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期519-522,共4页

目的:探讨DNA甲基化抑制剂5-aza-2′-deoxycitydine(5-aza-dC)影响胃癌细胞MGC803对奥沙利铂(Oxaliplatin,OXA)的化疗敏感性,及其与Ⅱ相代谢解毒酶GSTP1表达的相关性。方法:5-aza-dC处理MGC803,RT-PCR和Western-Blot方法检测GSTP1基因m... 目的:探讨DNA甲基化抑制剂5-aza-2′-deoxycitydine(5-aza-dC)影响胃癌细胞MGC803对奥沙利铂(Oxaliplatin,OXA)的化疗敏感性,及其与Ⅱ相代谢解毒酶GSTP1表达的相关性。方法:5-aza-dC处理MGC803,RT-PCR和Western-Blot方法检测GSTP1基因mRNA和蛋白表达。MSP法分析GSTP1基因启动子区甲基化状态。MTT法检测药物敏感性。结果:5-aza-dC诱导GSTP1基因启动子去甲基化,上调GSTP1mRNA和蛋白表达,降低了MGC803细胞对OXA的敏感性,24h IC50值分别为对照组(13.15±1.7)μg/L、1μM 5-aza-dC处理组(24.54±2.1)μg/L、5μM 5-aza-dC处理组(30.81±1.3)μg/L及10μM 5-aza-dC处理组(51.72±1.6)μg/L,P值<0.01,差异有统计学意义。结论:5-3za-dC降低胃癌细胞对奥沙利铂的敏感性,其机制与增强GSTP1表达有关。 展开更多

关键词 胃癌 DNA甲基化 5-氮杂-2'-脱氧胞苷 谷胱甘肽转硫酶 奥沙利铂

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8-羟基喹啉酮对HepG2细胞氧化性DNA损伤的诱导作用(英文) 被引量：3

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作者 林勃 姜丽平 +1 位作者 耿成燕 仲来福 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期138-144,共7页

目的评估8-羟基喹啉酮(CuQ)对HepG2细胞的DNA损伤作用并阐明其可能的作用机制。方法 CuQ 0～4μmol.L-1处理HepG2细胞不同时间后,通过单细胞凝胶电泳实验检测细胞DNA损伤;分光光度法测定过氧化氢酶活性;苯二醛法测定细胞内谷胱甘肽(GSH... 目的评估8-羟基喹啉酮(CuQ)对HepG2细胞的DNA损伤作用并阐明其可能的作用机制。方法 CuQ 0～4μmol.L-1处理HepG2细胞不同时间后,通过单细胞凝胶电泳实验检测细胞DNA损伤;分光光度法测定过氧化氢酶活性;苯二醛法测定细胞内谷胱甘肽(GSH)水平;硫代巴比妥酸反应物(TBARS)法检测细胞内脂质过氧化水平;Western印迹法检测NF-κB p65的变化;免疫组化方法检测细胞内8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的表达水平。结果 HepG2细胞与CuQ 0.5～4μmol.L-1作用1 h后,DNA的迁移距离明显增加(P<0.05),提示CuQ可引起DNA链断裂。CuQ能够造成细胞内GSH水平以及过氧化氢酶活性的降低。随着CuQ剂量的增加及染毒时间的延长,NF-κB由细胞浆逐渐转移至细胞核。CuQ还可以引起细胞内TBARS水平增高及8-OHdG表达水平的增强。采用GSH合成特异抑制剂DL-甲硫氨酸磺酰亚胺(BSO)预处理细胞,可明显增强CuQ对HepG2细胞DNA的损伤(P<0.05)。结论 CuQ可造成HepG2细胞氧化性DNA损伤,其作用机制与氧化应激及NF-κB p65在细胞核蓄积增高有关。 展开更多

关键词 8-羟基喹啉酮 氧化应激 谷胱甘肽 细胞 HepG2

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低温弱光胁迫下外源ASA与CaCl_2对菊花叶片AsA-GSH循环的影响 被引量：9

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作者 杨庆贺 郑成淑 《山东农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2018年第3期495-499,共5页

以切花菊品种‘神马’为材料,研究了低温弱光胁迫下乙酰水杨酸(ASA)和CaCl_2处理对菊花叶片抗坏血酸-谷胱甘肽循环中防御系统酶活性和抗氧化物质含量的影响,探讨了ASA和CaCl_2缓解菊花对低温弱光胁迫效应的可能的生理机制。结果表明:低... 以切花菊品种‘神马’为材料,研究了低温弱光胁迫下乙酰水杨酸(ASA)和CaCl_2处理对菊花叶片抗坏血酸-谷胱甘肽循环中防御系统酶活性和抗氧化物质含量的影响,探讨了ASA和CaCl_2缓解菊花对低温弱光胁迫效应的可能的生理机制。结果表明:低温弱光胁迫下,菊花叶片超氧化物歧化酶(SOD)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)、谷胱甘肽还原酶(GR)、单脱氢抗坏血酸还原酶(MDAR)和脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)的活性均呈不同程度先上升后下降趋势,但与对照相比,外源ASA、CaCl_2和ASA+CaCl_2处理显著提高了菊花叶片SOD、APX、GR、MDAR和DHAR活性,其中以ASA+CaCl_2处理的效果最为显著。低温弱光胁迫下,菊花叶片还原型抗坏血酸(As A)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量减少,氧化型抗坏血酸(DAs A)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量增加,但与对照相比,外源ASA、CaCl_2和ASA+CaCl_2处理显著减小了As A和GSH含量的下降幅度以及DHA和GSSG含量的上升幅度,并减少了菊花叶片H2O2的含量。表明低温弱光胁迫下,外源ASA和CaCl_2处理可通过提高As A-GSH循环系统的代谢活动,减轻了活性氧对菊花幼苗的伤害,从而提高了菊花对低温弱光的耐性,而且ASA与CaCl_2复配处理优于ASA或CaCl_2单独处理。 展开更多

关键词 菊花 低温弱光 ASA CACL2 抗坏血酸-谷胱甘肽循环

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由Nrf2/GPX4调控铁死亡探讨从“瘀”论治激素性骨质疏松症

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作者 樊佳煊 张维 +1 位作者 崔瑞 曹林忠 《中国骨质疏松杂志》 北大核心 2025年第1期49-54,共6页

核转录因子-相关因子2(Nrf2)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)作为胞内关键的抗氧化应激途径,保护多种骨形成相关细胞免受铁死亡的损害,是激素性骨质疏松症(glucocorticoid-induced osteoporosis,GIOP)发病的潜在机制。GIOP因瘀致痹的病机与... 核转录因子-相关因子2(Nrf2)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)作为胞内关键的抗氧化应激途径,保护多种骨形成相关细胞免受铁死亡的损害,是激素性骨质疏松症(glucocorticoid-induced osteoporosis,GIOP)发病的潜在机制。GIOP因瘀致痹的病机与该系统密切相关,从“瘀”论治的效应可通过该通路轴向调控的微观信息来表达;同时中医治疗GIOP时重视“瘀证”的辨证论治,且临床通常以活血化瘀类、益气活血类中药多见。因此,基于Nrf2/GPX4调控铁死亡探讨从“瘀”论治GIOP的科学性,以“瘀证”为理论指导明确活血化瘀类中药参与Nrf2/GPX4通路调控BMSCs、ECs、OB铁死亡来治疗GIOP,以期为从“瘀”论治GIOP提供科学理论依据,为深入理解GIOP病理生理及临床防治提供新的视角。 展开更多

关键词 激素性骨质疏松症 核转录因子-相关因子2 谷胱甘肽过氧化物酶4 铁死亡 瘀证 活血化瘀法 中医中药

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丹酚酸B基于Nrf2-Gpx4通路介导的铁死亡途径改善单侧输尿管梗阻大鼠肾脏间质纤维化 被引量：8

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作者 孙源博 宋嫣然 +2 位作者 王诗琪 孙丽欣 李桂芹 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期1018-1024,共7页

目的基于核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)-谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,Gpx4)通路介导的铁死亡途径,探究丹酚酸B对单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)大鼠... 目的基于核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)-谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,Gpx4)通路介导的铁死亡途径,探究丹酚酸B对单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)大鼠肾脏间质纤维化(renal interstitial fibrosis,RIF)的改善作用。方法采用随机数字表法将40只大鼠分为假手术组、模型组、丹酚酸B组、丹酚酸B+Nrf2抑制剂组,每组10只。除假手术组外,其余各组建立UUO模型,假手术组除不结扎、剪断输尿管外,其余操作相同。丹酚酸B组灌胃100 mg·kg^(-1)·d^(-1)丹酚酸B,丹酚酸B+Nrf2抑制剂组在丹酚酸B组基础上腹腔注射Nrf2抑制剂ML38530 mg·kg^(-1)·d^(-1),假手术组、模型组灌胃等体积无菌生理盐水,连续9 d。HE染色和Masson染色检测肾组织形态和纤维化情况;试剂盒检测肾脏组织中Fe^(2+)、丙二醛(maleicdialdehyde,MDA)含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹检测肾脏组织中Ⅰ型胶原(Collagen-Ⅰ,CoL-Ⅰ)、Ⅲ型胶原(Collagen-Ⅲ,CoL-Ⅲ)、Nrf2、Gpx4的mRNA和蛋白水平。结果与假手术组相比,模型组肾脏组织中Fe^(2+)、MDA含量,CoL-Ⅰ、CoL-Ⅲ的mRNA和蛋白水平升高(P<0.05),血清中SOD活性降低(P<0.05),肾脏组织中Nrf2、Gpx4的mRNA和蛋白水平降低(P<0.05);与模型组相比,丹酚酸B组肾脏组织中Fe^(2+)、MDA含量,CoL-Ⅰ、CoL-Ⅲ的mRNA和蛋白水平降低(P<0.05),血清中SOD活性,肾脏组织中Nrf2、Gpx4的mRNA和蛋白水平升高(P<0.05);与丹酚酸B组相比,丹酚酸B+Nrf2抑制剂组肾脏组织中Fe^(2+)、MDA含量,CoL-Ⅰ、CoL-Ⅲ的mRNA和蛋白水平升高(P<0.05),血清中SOD活性,肾脏组织中Nrf2、Gpx4的mRNA和蛋白水平降低(P<0.05)。结论丹酚酸B能够激活Nrf2-Gpx4通路进而抑制铁死亡实现对UUO大鼠RIF的缓解。 展开更多

关键词 肾脏间质纤维化 单侧输尿管梗阻 丹酚酸B 核因子E2相关因子2-谷胱甘肽过氧化物酶4通路

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运动预适应促进GSH/Bcl-2合成及相互作用抑制阿霉素心脏损伤 被引量：1

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作者 王传志 张双双 +2 位作者 郝月蓉 罗立杰 原阳 《体育科学》 CSSCI 北大核心 2023年第1期60-73,共14页

目的:基于代谢组学分析,探究GSH与B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)相互作用在一次性运动预适应(exercise preconditioning,EP)抑制阿霉素(doxorubicin,DOX)治疗癌症产生心肌毒性中的作用机制。方法:40只19周龄雌性SD大鼠随机分... 目的:基于代谢组学分析,探究GSH与B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)相互作用在一次性运动预适应(exercise preconditioning,EP)抑制阿霉素(doxorubicin,DOX)治疗癌症产生心肌毒性中的作用机制。方法:40只19周龄雌性SD大鼠随机分为对照(control,C)组、DOX组、EP组、EP+DOX组,每组10只。DOX组注射DOX,EP组大鼠进行1次大强度间歇运动,EP+DOX组于EP后24 h注射DOX。通过心脏超声检测大鼠心功能;通过化学荧光免疫分析法检测心肌损伤标志物表达水平;通过组织学染色、透射电镜观察和分析大鼠心肌组织病理变化;通过Western Blot检测心肌凋亡及促存活基因相关蛋白表达;通过代谢组学分析探究心肌代谢物和代谢通路变化;通过免疫共沉淀法检测Bcl-2与GSH转运蛋白2-酮戊二酸载体(2-oxoglutarate carrier,OGC)的结合活性;通过免疫荧光双标法分析GSH与Bcl-2共定位水平。结果:DOX组大鼠心肌线粒体肿胀、外膜破裂、体积增大、线粒体嵴排列紊乱甚至断裂,线粒体基质内出现云絮状结构。与C组相比,DOX组大鼠心功能显著更低;心肌损伤指标血清c Tn I、LDH、丙二醛含量显著更高;心肌细胞损伤、纤维化、炎症症状明显;心肌细胞抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平显著更低,Bad、Bax、Caspase3等凋亡蛋白表达显著更高;YAP磷酸化水平显著更高;GSH、NAD+代谢水平显著更低;Bcl-2与OGC结合程度显著更低;Bcl-2与GSH共定位水平显著更低。与DOX组相比,EP+DOX组上述指标均呈不同程度改善。结论:经典形式的EP通过促进GSH/Bcl-2相互作用,可以减轻DOX治疗引起的心肌细胞凋亡及氧化应激损伤,抑制炎症及纤维化,改善心功能。 展开更多

关键词 运动预适应 阿霉素 心脏毒性 B细胞淋巴瘤-2 谷胱甘肽

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AsA-GSH循环对水稻突变体耐汞性的作用 被引量：6

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作者 曾斌 王飞娟 +1 位作者 朱诚 孙宗修 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期823-830,共8页

以水稻中花11及其汞耐性突变体的溶液培养,研究了在0.4mmolL-1Hg2+胁迫下汞耐性突变体的活性氧代谢及抗坏血酸-谷胱甘肽(AsA-GSH)循环的变化。结果表明,Hg2+胁迫下,突变体叶片中的H2O2含量、O-2产生速率和MDA含量、GSSG含量、DHA含量显... 以水稻中花11及其汞耐性突变体的溶液培养,研究了在0.4mmolL-1Hg2+胁迫下汞耐性突变体的活性氧代谢及抗坏血酸-谷胱甘肽(AsA-GSH)循环的变化。结果表明,Hg2+胁迫下,突变体叶片中的H2O2含量、O-2产生速率和MDA含量、GSSG含量、DHA含量显著低于野生型;突变体叶片中GSH/GSSG和AsA/DHA的比值均高于野生型,同时突变体根和茎中的Hg2+含量明显高于野生型。说明汞耐性突变体体内AsA-GSH循环在Hg2+胁迫下仍能保持较高的运转效率和清除活性氧的能力,在其耐汞性中起重要作用。 展开更多

关键词 HG^2+ 水稻 突变体 活性氧 抗坏血酸-谷胱甘肽循环

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