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HBc-HLA-A＊ 1101-β2m复合物单体及其四聚体的制备和鉴定
被引量：
1
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作者
郝友华
杨新星
+4 位作者
丁红晖
宋娜
朱帆
喻植群
杨东亮
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第4期352-354,356,共4页
目的制备HBc-HLA-A ＊ 1101-β2m复合物单体和四聚体,并对其特异性进行了鉴定。方法原核高效表达的HLA-A ＊ 1101-BSP和β2m蛋白,在抗原肽（乙型肝炎病毒的核心蛋白HBc88-96）的存在下,体外复性折叠成可溶性的HLA-A ＊ 1101抗原肽复合...
目的制备HBc-HLA-A ＊ 1101-β2m复合物单体和四聚体,并对其特异性进行了鉴定。方法原核高效表达的HLA-A ＊ 1101-BSP和β2m蛋白,在抗原肽（乙型肝炎病毒的核心蛋白HBc88-96）的存在下,体外复性折叠成可溶性的HLA-A ＊ 1101抗原肽复合物单体,经BirA酶作用并通过凝胶过滤层析法纯化复合物单体;然后将此复合物单体与藻红蛋白标记的链霉亲和素按一定比例耦合构建成四聚体;最后用流式细胞仪检测分析该四聚体结合特异性CTL的能力。结果Western blot和Dot-ELISA检测显示所制备的HLA-A ＊ 1101抗原肽复合物单体具有天然构象,且可被生物素化;流式细胞仪分析显示所制备的四聚体可与HLA-A11^＋供者的抗原特异性CTL结合。结论成功制备了具有完整构象的生物素化HLA-A ＊ 1101抗原肽复合物单体;此四聚体可以特异检测抗原特异性的细胞毒性T细胞。
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关键词
HLA-A＊
1101抗原肽复合物单体
四聚体
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职称材料
题名
HBc-HLA-A＊ 1101-β2m复合物单体及其四聚体的制备和鉴定
被引量：
1
1
作者
郝友华
杨新星
丁红晖
宋娜
朱帆
喻植群
杨东亮
机构
华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第4期352-354,356,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(批准号:30400412)
文摘
目的制备HBc-HLA-A ＊ 1101-β2m复合物单体和四聚体,并对其特异性进行了鉴定。方法原核高效表达的HLA-A ＊ 1101-BSP和β2m蛋白,在抗原肽（乙型肝炎病毒的核心蛋白HBc88-96）的存在下,体外复性折叠成可溶性的HLA-A ＊ 1101抗原肽复合物单体,经BirA酶作用并通过凝胶过滤层析法纯化复合物单体;然后将此复合物单体与藻红蛋白标记的链霉亲和素按一定比例耦合构建成四聚体;最后用流式细胞仪检测分析该四聚体结合特异性CTL的能力。结果Western blot和Dot-ELISA检测显示所制备的HLA-A ＊ 1101抗原肽复合物单体具有天然构象,且可被生物素化;流式细胞仪分析显示所制备的四聚体可与HLA-A11^＋供者的抗原特异性CTL结合。结论成功制备了具有完整构象的生物素化HLA-A ＊ 1101抗原肽复合物单体;此四聚体可以特异检测抗原特异性的细胞毒性T细胞。
关键词
HLA-A＊
1101抗原肽复合物单体
四聚体
Keywords
HLA-A ＊
1101
-HBc complex monomer
Tetramer
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
HBc-HLA-A＊ 1101-β2m复合物单体及其四聚体的制备和鉴定
郝友华
杨新星
丁红晖
宋娜
朱帆
喻植群
杨东亮
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
1
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