目的观察微小RNA-145(miR-145)对糖尿病神经病理性痛大鼠痛阈的影响,并探讨其可能机制。方法取正常大鼠12只作为对照组(N组),糖尿病神经痛模型制备成功的SD大鼠36只,随机分为三组:糖尿病神经痛组(D组)、糖尿病神经痛-空载组(DN组)和糖...目的观察微小RNA-145(miR-145)对糖尿病神经病理性痛大鼠痛阈的影响,并探讨其可能机制。方法取正常大鼠12只作为对照组(N组),糖尿病神经痛模型制备成功的SD大鼠36只,随机分为三组:糖尿病神经痛组(D组)、糖尿病神经痛-空载组(DN组)和糖尿病神经痛-miR-145过表达组(agomiR-145组),每组12只。N组和D组大鼠鞘内分别注射等剂量生理盐水10μl,DN组大鼠鞘内注射阴性对照病毒(10μl,1×106TU/ml),agomiR-145组大鼠鞘内注射agomiR-145(10μl,1×106TU/ml)。于鞘内注药前1 d和注药后1、3、7、14 d测定四组大鼠机械缩足痛阈(MWT)和热缩足反射潜伏期(TWL)。然后采用RT-PCR法检测大鼠背根神经节(DRG)中miR-145mRNA相对表达量,免疫荧光检测大鼠背根神经节Nav1.8阳性细胞荧光相对强度。荧光素酶报告实验验证miR-145的靶基因。结果注药前1 d D组、DN组和agomiR-145组MWT明显低于、TWL明显短于N组(P<0.05);注药后3、7、14 d agomiR-145组MWT明显高于D组和DN组(P<0.05);注药后7、14 d agomiR-145组大鼠TWL明显长于D组和DN组(P<0.05)。D组和DN组DRG中miR-145 mRNA相对表达量明显低于N组和agomiR-145组,电压门控钠离子通道1.8(Nav1.8)阳性细胞明显多于N组和agomiR-145组(P<0.05)。荧光素酶报告实验验证miR-145作用于Nav 1.8 3'-非翻译区并调控Nav1.8的表达。结论 miR-145通过下调背根神经节Nav 1.8表达缓解糖尿病大鼠机械痛敏和热痛敏。展开更多
文摘目的观察微小RNA-145(miR-145)对糖尿病神经病理性痛大鼠痛阈的影响,并探讨其可能机制。方法取正常大鼠12只作为对照组(N组),糖尿病神经痛模型制备成功的SD大鼠36只,随机分为三组:糖尿病神经痛组(D组)、糖尿病神经痛-空载组(DN组)和糖尿病神经痛-miR-145过表达组(agomiR-145组),每组12只。N组和D组大鼠鞘内分别注射等剂量生理盐水10μl,DN组大鼠鞘内注射阴性对照病毒(10μl,1×106TU/ml),agomiR-145组大鼠鞘内注射agomiR-145(10μl,1×106TU/ml)。于鞘内注药前1 d和注药后1、3、7、14 d测定四组大鼠机械缩足痛阈(MWT)和热缩足反射潜伏期(TWL)。然后采用RT-PCR法检测大鼠背根神经节(DRG)中miR-145mRNA相对表达量,免疫荧光检测大鼠背根神经节Nav1.8阳性细胞荧光相对强度。荧光素酶报告实验验证miR-145的靶基因。结果注药前1 d D组、DN组和agomiR-145组MWT明显低于、TWL明显短于N组(P<0.05);注药后3、7、14 d agomiR-145组MWT明显高于D组和DN组(P<0.05);注药后7、14 d agomiR-145组大鼠TWL明显长于D组和DN组(P<0.05)。D组和DN组DRG中miR-145 mRNA相对表达量明显低于N组和agomiR-145组,电压门控钠离子通道1.8(Nav1.8)阳性细胞明显多于N组和agomiR-145组(P<0.05)。荧光素酶报告实验验证miR-145作用于Nav 1.8 3'-非翻译区并调控Nav1.8的表达。结论 miR-145通过下调背根神经节Nav 1.8表达缓解糖尿病大鼠机械痛敏和热痛敏。
