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酶法测定1-磷酸葡萄糖的含量
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作者 陆婷婷 吕浩 +1 位作者 魏秀丽 应汉杰 《南京工业大学学报(自然科学版)》 CAS 2005年第6期78-80,共3页
建立反应液中1-磷酸葡萄糖(G-1-P)的测定方法.分别在样品中加入PGluM(EC5.4.2.2)、G6P-DH(ECl.1.1.49)和氧化型辅酶Ⅱ(β-NADP),通过测定还原型辅酶Ⅱ(β-NADPH)吸光值的变化(△A)来确定样品中G-1-P的含量.G-1-P在0~400 mg/L范围内与△... 建立反应液中1-磷酸葡萄糖(G-1-P)的测定方法.分别在样品中加入PGluM(EC5.4.2.2)、G6P-DH(ECl.1.1.49)和氧化型辅酶Ⅱ(β-NADP),通过测定还原型辅酶Ⅱ(β-NADPH)吸光值的变化(△A)来确定样品中G-1-P的含量.G-1-P在0~400 mg/L范围内与△A呈线性关系,r2=0.999 8,其平均回收率为100.88%(RSD=0.52%).该法快速、灵敏、准确. 展开更多
关键词 1-磷酸葡萄糖 葡萄糖磷酸变位酶 6-磷酸葡萄糖脱氢酶 酶法测定
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锦鲤N-乙酰氨基葡萄糖-1-磷酸转移酶α/β亚基(GNPTAB)的生物信息学分析及其组织分布和时序表达
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作者 温思怡 韩卓然 孙敬锋 《天津农学院学报》 CAS 2024年第5期52-58,共7页
论文旨在研究锦鲤(Cyprinus carpio var. koi)GNPTAB(alpha/beta subunits of N-acetylglucosamine-1-phosphotransferase)基因的分子生物学特征及对维氏气单胞菌感染的应答规律。对锦鲤GNPTAB基因CDS区进行生物信息学分析,利用实时荧... 论文旨在研究锦鲤(Cyprinus carpio var. koi)GNPTAB(alpha/beta subunits of N-acetylglucosamine-1-phosphotransferase)基因的分子生物学特征及对维氏气单胞菌感染的应答规律。对锦鲤GNPTAB基因CDS区进行生物信息学分析,利用实时荧光定量PCR技术研究GNPTAB基因的组织分布和维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)感染机体后的时序表达规律。结果显示,GNPTAB基因CDS区片段长度为3 747 bp,推测编码1 248个氨基酸,含有4个结构域。实时荧光定量PCR分析显示,GNPTAB基因在健康锦鲤各组织中均有表达,在肝脏表达量最高,其次是肌肉、肠道、脾脏、皮肤、中肾、头肾。维氏气单胞菌人工感染锦鲤6~72 h,GNPTAB基因在肠道组织主要呈现上调表达,在肝脏、头肾、脾脏、皮肤、肌肉组织中主要呈现下调表达。维氏气单胞菌感染锦鲤后,GNPTAB基因在这些组织中出现表达差异,推测GNPTAB参与了机体的病理生理过程或免疫应答反应。 展开更多
关键词 锦鲤 生物信息学分析 组织分布 时序表达 N-乙酰氨基葡萄糖-1-磷酸转移酶α/β亚基
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紫外诱变枯草芽孢杆菌选育葡萄糖-1-磷酸高产菌株 被引量:4
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作者 许向华 史军花 +1 位作者 赵国罡 郑鸿雁 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2011年第9期21-23,共3页
对出发菌株进行紫外诱变以获得葡萄糖-1-磷酸产量高且遗传稳定性好的枯草芽孢杆菌菌株。以葡萄糖-1-磷酸的发酵产量为考察指标,采用HPLC-MS检测方法,对出发菌株Bacillus sublitis XH-13进行三轮紫外诱变,并对获得的高产菌株连续传代6次... 对出发菌株进行紫外诱变以获得葡萄糖-1-磷酸产量高且遗传稳定性好的枯草芽孢杆菌菌株。以葡萄糖-1-磷酸的发酵产量为考察指标,采用HPLC-MS检测方法,对出发菌株Bacillus sublitis XH-13进行三轮紫外诱变,并对获得的高产菌株连续传代6次。结果表明,枯草芽孢杆菌突变菌株UV3-8的葡萄糖-1-磷酸产量最高,达到6.85 g/L,是出发菌株产量的1.54倍,且遗传稳定性好。菌株Bacillussubtilis XH-13_UV3-8的营养简单、葡萄糖-1-磷酸产量高且遗传稳定性好,具有产业化应用前景。 展开更多
关键词 紫外诱变 葡萄糖-1-磷酸 枯草芽孢杆菌
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响应面法优化Bacillus subtilis XH-13_UV3-8产葡萄糖-1-磷酸的发酵条件 被引量:4
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作者 史军花 许向华 +1 位作者 赵国罡 郑鸿雁 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期176-179,184,共5页
应用响应面法对Bacillus subtilis XH-13_UV3-8生产葡萄糖-1-磷酸的发酵条件进行了优化。首先采用Plackett-Burman设计法对12个相关影响因素的效应进行评价,筛选出了有显著正效应的酵母浸粉浓度和K2HPO4·3H2O浓度和有显著负效应的p... 应用响应面法对Bacillus subtilis XH-13_UV3-8生产葡萄糖-1-磷酸的发酵条件进行了优化。首先采用Plackett-Burman设计法对12个相关影响因素的效应进行评价,筛选出了有显著正效应的酵母浸粉浓度和K2HPO4·3H2O浓度和有显著负效应的pH等3个因素;接着用最陡爬坡路径逼近最大响应区域;最后通过Box-Behnken设计法,利用Design-Expert软件进行二次回归分析,得到主要因素的最佳条件为:酵母浸粉0.8%、K2HPO4·3H2O0.7%和pH6.6,在此优化培养条件下,发酵液中葡萄糖-1-磷酸浓度从6.85mg/mL提高到8.56mg/mL。 展开更多
关键词 响应面分析法 枯草芽孢杆菌 Plackett-Burman法 葡萄糖-1-磷酸 优化
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高产胞外葡萄糖-1-磷酸菌株的筛选及鉴定 被引量:2
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作者 许向华 史军花 +1 位作者 赵国罡 郑鸿雁 《中国酿造》 CAS 北大核心 2011年第4期102-105,共4页
采用平板初筛、摇瓶复筛结合TLC和HPLC-MS检测的方法,从有机物丰富的土壤中筛选到一株以麦芽糖为底物直接发酵高产胞外葡萄糖-1-磷酸的菌株;经形态学、生理生化特性及16S rDNA基因序列分析,鉴定该菌株为枯草芽孢杆菌。
关键词 葡萄糖-1-磷酸 筛选 鉴定
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重组Pyrococcus furiosus葡聚糖磷酸化酶催化淀粉合成葡萄糖-1-磷酸 被引量:3
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作者 张尧 吴绵斌 +1 位作者 杨立荣 林建平 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第2期417-422,共6页
将Pyrococcus furiosus来源的编码葡聚糖磷酸化酶的glg P基因进行稀有密码子优化,在E.coli中重组表达并催化淀粉合成G-1-P。在反应条件优化基础上,以不同的淀粉为底物,GPase均表现出较强的催化能力。在原料预处理、高浓度底物催化及补... 将Pyrococcus furiosus来源的编码葡聚糖磷酸化酶的glg P基因进行稀有密码子优化,在E.coli中重组表达并催化淀粉合成G-1-P。在反应条件优化基础上,以不同的淀粉为底物,GPase均表现出较强的催化能力。在原料预处理、高浓度底物催化及补料催化研究的基础上,以7.5%玉米淀粉为初始底物,反应16 h后补入2.5%玉米淀粉,继续反应32 h,G-1-P产量达250.34 mmol·L^(-1),底物转化率达65.1%,与相同浓度的可溶性淀粉相比,G-1-P产量及转化率(252.9mmol·L^(-1),65.9%)均相近,表明廉价易得的玉米淀粉可以代替可溶性淀粉为原料生产G-1-P,大幅降低G-1-P生产的原料成本。 展开更多
关键词 葡聚糖磷酸化酶 葡萄糖-1-磷酸 酶催化 淀粉
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C端非催化结构域对嗜热α-葡聚糖磷酸化酶TsGP酶学性质的影响
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作者 陈亚利 王倩 +4 位作者 刘涵 宗志友 满淑丽 孙媛霞 陈朋 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第22期131-140,共10页
为获得异源表达水平与酶学性质良好的α-葡聚糖磷酸化酶并考察结构域对酶的影响,研究通过数据库挖掘和序列分析,获得了来源于超级嗜热古菌Thermococcus sp.EP1的新型α-葡聚糖磷酸化酶TsGP。利用AlphaFold2预测三维结构确定TsGP的C端为... 为获得异源表达水平与酶学性质良好的α-葡聚糖磷酸化酶并考察结构域对酶的影响,研究通过数据库挖掘和序列分析,获得了来源于超级嗜热古菌Thermococcus sp.EP1的新型α-葡聚糖磷酸化酶TsGP。利用AlphaFold2预测三维结构确定TsGP的C端为非催化结构域后,构建了C端截短的突变体ΔTsGP。在E.coli BL21(DE3)中对TsGP与ΔTsGP进行异源重组表达,并对其酶学性质进行了表征。结果表明,ΔTsGP在大肠杆菌中的表达水平较TsGP提高了3.76倍。在最适反应温度为70℃时,ΔTsGP的比酶活为23.87 U/mg,较TsGP提高1.3倍。在50~65℃的工业酶催化条件下,ΔTsGP的热稳定性与TsGP相当,且酶活力更高。此外,ΔTsGP与TsGP具有相同的底物特异性,最小底物为麦芽三糖,且随着底物链长的增加,比酶活逐渐提升。以麦芽七糖为底物,ΔTsGP的kcat值为37.09 s^(−1),比TsGP提高了1.21倍,但底物亲和力(K_(m)=3.30 mmol/L)降低了2.77倍。研究通过结构分析与非催化结构域截短策略成功提高了TsGP在大肠杆菌中的表达水平和工业酶催化条件下的比酶活。这为αGP酶蛋白的高效表达与应用提供了借鉴,并为进一步通过工程改造优化其性能奠定了基础。 展开更多
关键词 嗜热 α-葡聚糖磷酸化酶 葡萄糖-1-磷酸 非催化结构域 蛋白截短 酶学性质
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微生物磷酸葡萄糖变位酶的研究进展 被引量:2
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作者 刘连 《安徽农业科学》 CAS 2013年第7期2821-2822,2825,共3页
从磷酸葡萄糖变位酶对碳代谢和细菌细胞形态的影响、细菌致病性、在细菌高效产氢中的作用、细菌脂多糖生物合成中的作用和维持酵母细胞内Ca2+平衡的作用等方面,介绍了微生物磷酸葡萄糖变位酶的研究进展。
关键词 磷酸葡萄糖变位酶 葡萄糖-1-磷酸 葡萄糖-6-磷酸
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原位检测组织非特异碱性磷酸酶活性的二维相关分析校正
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作者 任重远 Saida Mebarek +1 位作者 RenéBuchet 吴玉清 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2020年第S01期69-70,共2页
在以人成骨肉瘤细胞株(Saos-2)为模型,利用α-D-葡萄糖-1-磷酸(α-G-1-P)为生理底物,原位检测组织非特异性碱性磷酸酶(TNAP)活力时,红外(IR)光谱峰位选取不准确和谱带严重重叠无法分辨/分离等都将给酶活力的测试结果带来偏差。二维相关... 在以人成骨肉瘤细胞株(Saos-2)为模型,利用α-D-葡萄糖-1-磷酸(α-G-1-P)为生理底物,原位检测组织非特异性碱性磷酸酶(TNAP)活力时,红外(IR)光谱峰位选取不准确和谱带严重重叠无法分辨/分离等都将给酶活力的测试结果带来偏差。二维相关分析与IR光谱的结合使用将在一定程度上改进上述问题,将在文中具体阐述。 展开更多
关键词 人成骨肉瘤细胞 TNAP α-D-葡萄糖-1-磷酸 IR光谱 二维相关分析
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紫外线对枯草芽孢杆菌生产菌株的诱变与筛选 被引量:1
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作者 马加强 吴明 +1 位作者 马礼鹏 刘博 《安徽农业科学》 CAS 2016年第17期18-20,72,共4页
枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)是一种革兰氏阳性菌,具有种类多、分泌蛋白能力强、安全性好等优点,是一种重要工业酶和工业制剂的菌种,被广泛应用于医药、食品、农业、饲料、造纸和纺织等多种领域。为了进一步提高枯草芽孢杆菌的发酵... 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)是一种革兰氏阳性菌,具有种类多、分泌蛋白能力强、安全性好等优点,是一种重要工业酶和工业制剂的菌种,被广泛应用于医药、食品、农业、饲料、造纸和纺织等多种领域。为了进一步提高枯草芽孢杆菌的发酵能力,采用紫外线照射的方法诱导筛选高产菌株。对通过紫外线诱导提高枯草芽孢杆菌产淀粉酶、蛋白酶、α-乙酰乳酸脱羧酶(α-acetolactate decarboxylase,简称α-ALDC)、3-羟基丁酮(Acetoin)和葡萄糖-1-磷酸(Glucose-1-phosphate,简称G-1-P)能力的条件进行了比较。 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 紫外线诱导 酶制剂 3-羟基丁酮 葡萄糖-1-磷酸
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