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O型和Asia1型口蹄疫病毒感染RT-PCR鉴别诊断方法的建立被引量：8: 1; 作者涂亚斌周国辉 +4 位作者张亚科王志国张守红王海伟于力《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期561-564,568,共5页; 根据GenBank中O型和Asia1型口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)的vp3、vp1和2A基因序列,并与其它血清型FMDV的对应基因序列进行比较,设计用于扩增O型和Asia1型FMDV vp1基因的特异性引物,建立O型和Asia1型FMDV RT-PCR鉴别诊... 展开更多; 关键词 O型口蹄疫病毒 ASIA1型口蹄疫病毒 RT-PCR 鉴别诊断方法; 在线阅读下载PDF 职称材料

Asia1型口蹄疫病毒单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA方法的建立被引量：5: 2; 作者梁伟峰周国辉 +3 位作者刘文铭李超斯刘云于力《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期226-229,共4页; 为建立Asia1型口蹄疫(FMD)快速病原学诊断方法,本研究采用纯化的Asia1型口蹄疫病毒(FMDV)免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合并筛选到一株能够稳定分泌抗Asia l型FMDV单克隆抗体(MAb)2E10。经间接免疫荧光试验... 展开更多; 关键词 ASIA1型口蹄疫病毒单克隆抗体双抗体夹心ELISA; 在线阅读下载PDF 职称材料

亚洲1型口蹄疫病毒L蛋白缺失株的构建及其生物学定性被引量：1: 3; 作者薛美王海伟于力《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期259-262,共4页; 为确定口蹄疫病毒(FMDV)L蛋白缺失对其生物学特性的影响,本研究在已建立的Asia1型FMDV反向遗传操作平台基础上,利用融合PCR方法缺失L蛋白基因编码区,构建了缺失L蛋白的重组Asia1型FMDV(rFMDV-ΔL)。拯救病毒的一步生长曲线结果表明,rFM... 展开更多; 关键词 ASIA1型口蹄疫病毒 L蛋白缺失重组病毒拯救生物学定性; 在线阅读下载PDF 职称材料

胶体金免疫层析试纸条快速定量检测Asia 1型口蹄疫病毒含量方法的建立被引量：3: 4; 作者朱玉婵林密 +2 位作者孙燕燕孙继国蒋韬《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1302-1308,共7页; 采用胶体金为标记物制备了快速定量检测Asia 1型口蹄疫病毒(FMDV)免疫层析试纸条,拟合检测曲线,用金标分析仪进行定量检测。应用实验室与田间的样品检测证实其有较好的敏感性和特异性。对Asia 1型FM—DV抗原定量检测可以在15 min内完成... 展开更多; 关键词 ASIA 1型口蹄疫病毒胶体金免疫层析试纸条定量检测; 在线阅读下载PDF 职称材料

三株牛源亚洲1型口蹄疫病毒VP1基因的克隆与序列分析被引量：1: 5; 作者何继军尚佑军 +4 位作者陈涓马维民杨亚民吴润刘湘涛《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期99-102,共4页; 以3株国内分离的亚洲1型口蹄疫病毒(分别命名为F1、F2、F3)为研究目标,根据GenBank中注册的FMDVVP1基因的序列设计1对引物,采用RT-PCR方法成功地扩增出含有VP1全基因的片段,并测定了3个毒株VP1基因的序列。结果表明,3株亚洲1型FMDV毒株... 展开更多; 关键词亚洲1型口蹄疫病毒 VP1基因序列分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

Asia1型口蹄疫病毒VP1蛋白进化踪迹分析: 6; 作者牛银杰王靖飞《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期615-619,共5页; 为预测口蹄疫病毒（FMDV）VP1蛋白的重要功能残基,本研究利用进化踪迹及蛋白结构同源建模等方法对91株Asia 1型FMDV的VP1氨基酸序列进行分析,结果显示91个病毒株分属于B、C和D分支,2005年~2006年分离株处于另一个分支,命名为E分支。以1... 展开更多; 关键词 Asia 1型口蹄疫病毒 VP1蛋白踪迹进化分析同源建模; 在线阅读下载PDF 职称材料

口蹄疫病毒VP1蛋白病毒样颗粒表达系统的构建被引量：3: 7; 作者窦小龙任晓冰 +3 位作者魏婕苗书魁冉多良马文戈《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第3期11-14,共4页; 为制备Asia 1型口蹄疫病毒（FMDV）双层结构病毒样颗粒，选择牛病毒性腹泻病毒（BVDV）流行株BVDV JZ05-1核心蛋白p14的第169～270位氨基酸和 FMDV Asia 1/JS/CHA/05结构蛋白 VP1的第1～211位氨基酸，两者之间设计柔性肽连接，人工合成 ... 展开更多; 关键词 ASIA1型口蹄疫病毒病毒样颗粒融合蛋白枯草芽胞杆菌; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名O型和Asia1型口蹄疫病毒感染RT-PCR鉴别诊断方法的建立被引量：8: 1; 作者涂亚斌周国辉张亚科王志国张守红王海伟于力; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期561-564,568,共5页; 文摘根据GenBank中O型和Asia1型口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)的vp3、vp1和2A基因序列,并与其它血清型FMDV的对应基因序列进行比较,设计用于扩增O型和Asia1型FMDV vp1基因的特异性引物,建立O型和Asia1型FMDV RT-PCR鉴别诊断方法。本方法首先用通用型引物进行RT-PCR,确定是否为FMDV感染,然后用特异性引物鉴别O型或Asia1型FMDV的感染。用vp1基因序列分析进行符合性试验,验证了该方法所具有的特异性和敏感性。本方法可用于O型和Asia1型FMD的快速诊断及流行病学调查。; 关键词 O型口蹄疫病毒 ASIA1型口蹄疫病毒 RT-PCR 鉴别诊断方法; Keywords O serotype FMDV Asial serotype FMDV RT-PCR differential diagnostic method; 分类号 S852.659 [农业科学—基础兽医学] S854.44 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Asia1型口蹄疫病毒单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA方法的建立被引量：5: 2; 作者梁伟峰周国辉刘文铭李超斯刘云于力; 机构东北农业大学动物医学学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/牛羊病创新团队; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期226-229,共4页; 基金国家自然科学基金青年项目(31101801); 文摘为建立Asia1型口蹄疫(FMD)快速病原学诊断方法,本研究采用纯化的Asia1型口蹄疫病毒(FMDV)免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合并筛选到一株能够稳定分泌抗Asia l型FMDV单克隆抗体(MAb)2E10。经间接免疫荧光试验特异性鉴定,2E10为FMDV型特异型MAb。其抗体亚类为Ig G1/资,杂交瘤细胞上清和腹水抗体效价分别为1颐256和1颐104,相对亲和力常数为2.5 mol/L。在此基础上,以本实验室前期制备的MAb 2D8为包被抗体,以HRP标记的MAb 2E10为检测抗体建立了检测Asia1型FMDV抗原的双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)方法。该方法针对FMDV细胞毒的最低检出量为103TCID50,对O型FMDV、A型FMDV、牛肠道病毒、牛呼肠孤病毒及牛传染性鼻气管炎病毒检测结果均为阴性。本研究建立的Asia1型FMDV DAS-ELISA方法为Asia1型FMD病原学诊断试剂盒的研发奠定了基础。; 关键词 ASIA1型口蹄疫病毒单克隆抗体双抗体夹心ELISA; Keywords serotype Asial Foot-and-mouth disease virus monoclonal antibody double-antibody sandwich ELISA; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名亚洲1型口蹄疫病毒L蛋白缺失株的构建及其生物学定性被引量：1: 3; 作者薛美王海伟于力; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/大动物病研究室; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期259-262,共4页; 基金黑龙江省科技攻关重大项目专题(GA06B202); 文摘为确定口蹄疫病毒(FMDV)L蛋白缺失对其生物学特性的影响,本研究在已建立的Asia1型FMDV反向遗传操作平台基础上,利用融合PCR方法缺失L蛋白基因编码区,构建了缺失L蛋白的重组Asia1型FMDV(rFMDV-ΔL)。拯救病毒的一步生长曲线结果表明,rFMDV-ΔL与亲本病毒相比在BHK-21细胞中的复制水平下降10倍,乳鼠毒力试验表明rFMDV-ΔL的毒力比亲本毒株下降6倍。另外,rFMDV-ΔL在BHK-21细胞上产生病变的速度明显变慢,形成蚀斑的时间延长,致乳鼠死亡所需时间也比亲本毒株明显延长。本研究是关于亚洲1型FMDVL蛋白结构与功能研究的首次报道,为亚洲1型FMDVL蛋白结构与功能的研究奠定了基础。; 关键词 ASIA1型口蹄疫病毒 L蛋白缺失重组病毒拯救生物学定性; Keywords foot-and-mouth disease virus serotype Asia1 deletion of leader （L） proteinase rescue recombinant virus biological characterization; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名胶体金免疫层析试纸条快速定量检测Asia 1型口蹄疫病毒含量方法的建立被引量：3: 4; 作者朱玉婵林密孙燕燕孙继国蒋韬; 机构河北农业大学动物医学院中国农业科学院兰州兽医研究所; 出处《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期1302-1308,共7页; 基金甘肃省农业科技成果转化资金计划(1305NCNA143); 文摘采用胶体金为标记物制备了快速定量检测Asia 1型口蹄疫病毒(FMDV)免疫层析试纸条,拟合检测曲线,用金标分析仪进行定量检测。应用实验室与田间的样品检测证实其有较好的敏感性和特异性。对Asia 1型FM—DV抗原定量检测可以在15 min内完成,灵敏度为0.78μg·mL^(-1),线性范围在0.78~7.84μg·mL^(-1);变异系数在0.2%~5%;回收率在91%~102%,证明定量检测、准确度高。结果表明,本研究建立的定量检测Asia 1型口蹄疫病毒的胶体金免疫层析方法能简便、廉价、快速、灵敏、特异、准确地定量检测样品中的Asia 1型口蹄疫病毒。; 关键词 ASIA 1型口蹄疫病毒胶体金免疫层析试纸条定量检测; Keywords Asia 1 type Foot-and-mouth disease virus colloidal gold immuno-chromatographic test strips quantitative testing; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名三株牛源亚洲1型口蹄疫病毒VP1基因的克隆与序列分析被引量：1: 5; 作者何继军尚佑军陈涓马维民杨亚民吴润刘湘涛; 机构甘肃农业大学动物医学院中国农业科学院兰州兽医研究所国家家畜疫病病原生物学重点实验室国家口蹄疫参考实验室; 出处《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期99-102,共4页; 基金 “十一五”国家科技支撑计划“禽流感等重大动物疫病综合防控技术研究”(2006BAD06A17); 文摘以3株国内分离的亚洲1型口蹄疫病毒(分别命名为F1、F2、F3)为研究目标,根据GenBank中注册的FMDVVP1基因的序列设计1对引物,采用RT-PCR方法成功地扩增出含有VP1全基因的片段,并测定了3个毒株VP1基因的序列。结果表明,3株亚洲1型FMDV毒株VP1基因长度均为633 bp,编码211个氨基酸。3株毒株彼此之间的核苷酸序列同源性在82.8%～99.1%之间,推导氨基酸序列同源性在89.1%～99.1%之间。从系统发生树看,F1株与我国香港2005年牛毒株序列同源性99.5%,属同一遗传谱系,F2株、F3株与2005年引起河北省万全县、北京市延庆县、甘肃静宁县疫情的毒株分属同一个基因群。; 关键词亚洲1型口蹄疫病毒 VP1基因序列分析; Keywords Foot-and-mouth disease virus VP1 gene Sequence analysis; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学] S855.3 [农业科学—临床兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Asia1型口蹄疫病毒VP1蛋白进化踪迹分析: 6; 作者牛银杰王靖飞; 机构中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期615-619,共5页; 基金国家科技重大专项(2012XX10004214) 中国农业科学院基本科研业务费(0302012010); 文摘为预测口蹄疫病毒（FMDV）VP1蛋白的重要功能残基,本研究利用进化踪迹及蛋白结构同源建模等方法对91株Asia 1型FMDV的VP1氨基酸序列进行分析,结果显示91个病毒株分属于B、C和D分支,2005年~2006年分离株处于另一个分支,命名为E分支。以10分区分析进化树,共34个组特异残基,其中140S、141S、146L、148A、149L、150A、151R、152R、153V、155N和156R分布于G-H环区域,预测它们与抗原性和受体结合特性有关;B、C、D和E 4个分支的组内特异残基分别为24S、153G、196H;59H、141P、146M、150S、169N;50I、135A和99N、127S、140S、151R,这些残基为各分支的分子标识;组特异残基35V、80L、93S、127A分布于VP1和其他结构蛋白的作用界面,可能对病毒的装配具有重要作用。本研究结果为FMDV的VP1功能研究提供了参考数据。; 关键词 Asia 1型口蹄疫病毒 VP1蛋白踪迹进化分析同源建模; Keywords Asia 1 serotype foot-and-mouth disease virus VP1 protein evolutionary trace analysis homology modeling; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名口蹄疫病毒VP1蛋白病毒样颗粒表达系统的构建被引量：3: 7; 作者窦小龙任晓冰魏婕苗书魁冉多良马文戈; 机构新疆农业大学动物医学学院新疆畜牧科学院兽医研究所; 出处《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2014年第3期11-14,共4页; 基金国家自然科学基金项目(31060346) 公益性行业(农业)科研专项(201103008); 文摘为制备Asia 1型口蹄疫病毒（FMDV）双层结构病毒样颗粒，选择牛病毒性腹泻病毒（BVDV）流行株BVDV JZ05-1核心蛋白p14的第169～270位氨基酸和 FMDV Asia 1/JS/CHA/05结构蛋白 VP1的第1～211位氨基酸，两者之间设计柔性肽连接，人工合成 p14-柔性肽-VP1融合蛋白编码序列，全基因长990 bp。合成基因与枯草芽胞杆菌表达载体 p7257-P43连接，构建成表达质粒 p7257-P43-P14-VP1。转化枯草芽胞杆菌 WB800，经筛选、鉴定，获得表达 p14-VP1融合蛋白的枯草芽胞杆菌。该重组表达菌在含有40μg/mL氯霉素的 LB中培养后，菌体超声破碎可检测到目的蛋白。Western blot 结果显示，该蛋白能特异性识别Asia 1型FMDV抗体，具有良好的反应原性。电镜观察显示，融合蛋白组装为直径约50 nm大小的病毒样颗粒（VLP）。; 关键词 ASIA1型口蹄疫病毒病毒样颗粒融合蛋白枯草芽胞杆菌; Keywords FMDV type Asia 1 virus-like particle fusion protein Bacillus subtilis; 分类号 Q789 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	O型和Asia1型口蹄疫病毒感染RT-PCR鉴别诊断方法的建立	涂亚斌周国辉张亚科王志国张守红王海伟于力	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2007	8	在线阅读下载PDF 职称材料
2	Asia1型口蹄疫病毒单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA方法的建立	梁伟峰周国辉刘文铭李超斯刘云于力	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2016	5	在线阅读下载PDF 职称材料
3	亚洲1型口蹄疫病毒L蛋白缺失株的构建及其生物学定性	薛美王海伟于力	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2010	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	胶体金免疫层析试纸条快速定量检测Asia 1型口蹄疫病毒含量方法的建立	朱玉婵林密孙燕燕孙继国蒋韬	《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2014	3	在线阅读下载PDF 职称材料
5	三株牛源亚洲1型口蹄疫病毒VP1基因的克隆与序列分析	何继军尚佑军陈涓马维民杨亚民吴润刘湘涛	《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心	2009	1	在线阅读下载PDF 职称材料
6	Asia1型口蹄疫病毒VP1蛋白进化踪迹分析	牛银杰王靖飞	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2014	0	在线阅读下载PDF 职称材料
7	口蹄疫病毒VP1蛋白病毒样颗粒表达系统的构建	窦小龙任晓冰魏婕苗书魁冉多良马文戈	《动物医学进展》 CSCD 北大核心	2014	3	在线阅读下载PDF 职称材料